目的比较食管癌放射抵抗细胞株与其亲本细胞microRNA表达谱的差异。方法应用Agilent human miRNA芯片检测人食管癌耐放射细胞株KYSE-150R与其亲本细胞KYSE-150的表达谱。GeneSpringGX10．0．2数据分析挑选差异表达基因。应用软件对筛选...目的比较食管癌放射抵抗细胞株与其亲本细胞microRNA表达谱的差异。方法应用Agilent human miRNA芯片检测人食管癌耐放射细胞株KYSE-150R与其亲本细胞KYSE-150的表达谱。GeneSpringGX10．0．2数据分析挑选差异表达基因。应用软件对筛选出的显著差异表达miRNA的潜在靶基因进行预测并验证。结果与亲本细胞相比，KYSE．150R中上调超过2倍的miRNA有10个，为hsa-miR-1539、hsa—miR-1237、hsa—miR-92b等；表达下调超过2倍的有miRNA有25个，为hsa—miR-185、hsa—miR-18b、hsa—miR-17等。软件预测发现其中18个miRNA有潜在的靶基因，10个miRNAs的靶基因多达200个。显著差异表达的miRNA（如hsa．1et-Ta、hsa—miR-185、hsa-miR-141、hsa—miR-92b、hsa—miR-22和hsa-miR-301a）与放射抵抗密切相关。结论筛选出的miRNAs可能通过调控其靶基因而参与食管癌放射抵抗，为临床上放射抵抗的逆转提供全新的靶标和策略。展开更多
目的探讨星形胶质细胞上调基因1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1,又称MTDH)对头颈部鳞状细胞癌(简称头颈鳞癌)放疗抵抗的影响。方法 Western blotting检测放射线照射后头颈鳞癌细胞MTDH蛋白表达的改变。通过脂质体转染的MTDH c DNA和...目的探讨星形胶质细胞上调基因1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1,又称MTDH)对头颈部鳞状细胞癌(简称头颈鳞癌)放疗抵抗的影响。方法 Western blotting检测放射线照射后头颈鳞癌细胞MTDH蛋白表达的改变。通过脂质体转染的MTDH c DNA和慢病毒介导的MTDH shRNA,分别在不同头颈鳞癌细胞中过表达和抑制MTDH,平板集落形成实验检测头颈鳞癌细胞放疗抵抗能力的改变,细胞免疫荧光染色检测DNA双链损伤指标γH2AX的表达。结果 MTDH在头颈鳞癌细胞中的表达随着放射性照射剂量的增加和时间的延长逐渐升高。在CNE-2细胞中过表达MTDH,其体外集落形成能力增强;相反,在Tu686细胞中抑制MTDH的表达,其体外集落形成能力减弱。同时,细胞免疫荧光显示Tu686细胞在MTDH抑制后,其DNA双链损伤指标γH2AX的表达增加,表明DNA双链损伤修复过程受阻。结论 MTDH能促进头颈鳞癌细胞放疗抵抗的形成,与其对DNA双链损伤修复的调控作用相关。展开更多
文摘目的比较食管癌放射抵抗细胞株与其亲本细胞microRNA表达谱的差异。方法应用Agilent human miRNA芯片检测人食管癌耐放射细胞株KYSE-150R与其亲本细胞KYSE-150的表达谱。GeneSpringGX10．0．2数据分析挑选差异表达基因。应用软件对筛选出的显著差异表达miRNA的潜在靶基因进行预测并验证。结果与亲本细胞相比，KYSE．150R中上调超过2倍的miRNA有10个，为hsa-miR-1539、hsa—miR-1237、hsa—miR-92b等；表达下调超过2倍的有miRNA有25个，为hsa—miR-185、hsa—miR-18b、hsa—miR-17等。软件预测发现其中18个miRNA有潜在的靶基因，10个miRNAs的靶基因多达200个。显著差异表达的miRNA（如hsa．1et-Ta、hsa—miR-185、hsa-miR-141、hsa—miR-92b、hsa—miR-22和hsa-miR-301a）与放射抵抗密切相关。结论筛选出的miRNAs可能通过调控其靶基因而参与食管癌放射抵抗，为临床上放射抵抗的逆转提供全新的靶标和策略。
文摘目的探讨星形胶质细胞上调基因1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1,又称MTDH)对头颈部鳞状细胞癌(简称头颈鳞癌)放疗抵抗的影响。方法 Western blotting检测放射线照射后头颈鳞癌细胞MTDH蛋白表达的改变。通过脂质体转染的MTDH c DNA和慢病毒介导的MTDH shRNA,分别在不同头颈鳞癌细胞中过表达和抑制MTDH,平板集落形成实验检测头颈鳞癌细胞放疗抵抗能力的改变,细胞免疫荧光染色检测DNA双链损伤指标γH2AX的表达。结果 MTDH在头颈鳞癌细胞中的表达随着放射性照射剂量的增加和时间的延长逐渐升高。在CNE-2细胞中过表达MTDH,其体外集落形成能力增强;相反,在Tu686细胞中抑制MTDH的表达,其体外集落形成能力减弱。同时,细胞免疫荧光显示Tu686细胞在MTDH抑制后,其DNA双链损伤指标γH2AX的表达增加,表明DNA双链损伤修复过程受阻。结论 MTDH能促进头颈鳞癌细胞放疗抵抗的形成,与其对DNA双链损伤修复的调控作用相关。
