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应用巢式聚合酶链反应和测序检测肺炎支原体23S rRNA中点突变 被引量：22
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作者 辛德莉 糜祖煌 +6 位作者 韩旭 秦玲 李靖 刘禧杰 马少杰 侯安存 李贵 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期522-525,共4页
目的建立快速检测肺炎支原体（Mycoplasrna pneumoniae，MP）耐药性的实验方法并应用于临床以了解MP耐药现状。方法应用巢式PCR直接检测咽拭子标本MP-23S rRNA基因并对扩增产物进行电泳检测或DNA测序分析；通过MP培养及体外药物敏感性... 目的建立快速检测肺炎支原体（Mycoplasrna pneumoniae，MP）耐药性的实验方法并应用于临床以了解MP耐药现状。方法应用巢式PCR直接检测咽拭子标本MP-23S rRNA基因并对扩增产物进行电泳检测或DNA测序分析；通过MP培养及体外药物敏感性试验测定临床分离株的红霉素最小抑菌浓度，以验证23S rRNA基因检测结果的可靠性。结果200例临床标本经MP-IgM抗体、咽拭子MP种特异性16S rRNA基因巢式PCR扩增和MP分离培养测定证实为MP64例。应用巢式PCR技术扩增MP-23S rRNA基因，并对扩增产物进行测序，将基因序列与基因库中MP标准株基因序列进行比较，与标准株序列相同的共计26例，其余38例存在23S rRNA点突变：35例在2063位点发生了A到G的点突变，1例在2063位点有A到C的点突变，2例在2064位点有A到G的点突变；耐药率为59．4％。MP耐药基因检测方法灵敏度达10^2ccu／ml，MP培养及药物敏感性试验证实23S rRNA基因检测结果可靠。结论建立的MP耐药基因检测方法能直接检测临床标本中的MP耐药基因。59％的受检标本23S rRNA基因发生点突变。 展开更多
关键词 支原体 肺炎 抗药性 rna 核糖体 23S 聚合酶链反应
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