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辐射对RANKL诱导RAW264.7细胞向破骨细胞分化中CBFα1表达水平的影响
1
作者 杨冰 周慧 +7 位作者 仲蕾蕾 杨福军 张晓东 刘征 赵吉 樊飞跃 韩英 孙元明 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2011年第2期109-112,共4页
为了研究辐射对于破骨细胞中Notch通路的影响,进一步了解辐射诱发骨损伤的机理,本研究采用核因子κB受体活化因子配体(Receptor activator of nuclear Factor-B Ligand,RANKL)诱导RAW264.7细胞系生成的破骨细胞,经2 Gy 137Csγ射线照射... 为了研究辐射对于破骨细胞中Notch通路的影响,进一步了解辐射诱发骨损伤的机理,本研究采用核因子κB受体活化因子配体(Receptor activator of nuclear Factor-B Ligand,RANKL)诱导RAW264.7细胞系生成的破骨细胞,经2 Gy 137Csγ射线照射后应用实时定量聚合酶链反应(Real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR)方法,检测其Notch通路重要靶位启动子C结合因子α1(C Promoter-Binding Factorα1,CBFα1)表达的变化情况。实验结果表明,在2 Gy 137Csγ射线照射后,CBFα1在RANKL作用下生成的破骨细胞中表达明显增高。辐射诱发的Notch通路中CBFα1表达增高,可能是由于辐射增强了Notch通路对破骨细胞分化的促进作用,增加了破骨细胞的数量,增强了其活性,从而导致骨损伤、骨质疏松、甚至骨折的发病率增高。 展开更多
关键词 核因子ΚB受体活化因子配体 CBFα1 辐射 raw246.7
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香根草精油微胶囊的制备及其体外抗炎作用 被引量：8
2
作者 王一彤 赵新玲 +1 位作者 姚佳彤 公衍玲 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1447-1453,共7页
以明胶和壳聚糖为壁层材料,以香根草精油为囊芯,采用复凝聚法制备香根草精油微胶囊。通过单因素和正交实验筛选微胶囊最佳制备工艺,采用SEM、粒度仪、Zeta电位仪和FTIR对样品进行了表征。测定微胶囊于pH 1.5和7.4时香根草精油的释放率,... 以明胶和壳聚糖为壁层材料,以香根草精油为囊芯,采用复凝聚法制备香根草精油微胶囊。通过单因素和正交实验筛选微胶囊最佳制备工艺,采用SEM、粒度仪、Zeta电位仪和FTIR对样品进行了表征。测定微胶囊于pH 1.5和7.4时香根草精油的释放率,观察微胶囊对小鼠RAW 264.7细胞的体外抗炎作用。结果表明,香根草精油用量0.3 g,壁材用量1.0 g(其中明胶与壳聚糖的质量比为30∶2)时,封装率可达90.96%;制备的微胶囊表面呈球形,微胶囊粒径为2.303μm,电位–33.8 mV,具有良好的稳定性,封装效果好;该微胶囊于pH 7.4下释放度较佳,72 h内累积释放达87.49%;细胞实验表明,该微胶囊(质量浓度为60、90、120 mg/L)安全无毒,能有效抑制RAW 264.7细胞白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌。香根草精油微胶囊处方工艺简单,质量稳定,抗炎活性良好。 展开更多
关键词 香根草精油 微胶囊 正交实验 raw 246.7细胞 炎症因子 医药与日化原料
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miR-183-5p通过线粒体凋亡途径影响肺炎支原体诱导的RAW246.7细胞凋亡的机制研究 被引量：2
3
作者 曾令文 蔡林再(指导) +2 位作者 陈贤胜 牟晓莉 陈德武 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1248-1251,共4页
目的:探讨miR-183-5p对肺炎支原体(MP)诱导的RAW246.7细胞凋亡的影响及机制。方法:将巨噬细胞RAW246.7随机分为Control组、Model组、Anti-miR-NC+model组和Anti-miR-183-5p+model组;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-183-5p表达水平;CC... 目的:探讨miR-183-5p对肺炎支原体(MP)诱导的RAW246.7细胞凋亡的影响及机制。方法:将巨噬细胞RAW246.7随机分为Control组、Model组、Anti-miR-NC+model组和Anti-miR-183-5p+model组;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-183-5p表达水平;CCK-8检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测TNF-α、IL-6水平;Western blot法检测蛋白表达。结果:与Control组比较,Model组RAW246.7细胞中miR-183-5p表达水平升高,细胞活性降低,细胞凋亡率升高,炎症因子TNF-α和IL-6的水平升高,Bax、caspase-9、caspase-3表达水平升高,Bcl-2、p-PI3K、p-Akt表达水平降低(P<0.05)。与AntimiR-NC+model组比较,Anti-miR-183-5p+model组RAW246.7细胞中miR-183-5p表达水平降低,细胞活性升高,细胞凋亡率降低,炎症因子TNF-α和IL-6的水平降低,Bax、caspase-9、caspase-3表达水平降低,Bcl-2、p-PI3K、p-Akt表达水平升高(P<0.05)。结论:抑制miR-183-5p可抑制MP诱导的RAW246.7细胞凋亡和炎症因子表达,其可能与PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 miR-183-5p 肺炎支原体 raw246.7细胞 凋亡
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紫甘蓝总花色苷提取物抑制脂多糖诱导RAW264.7细胞的炎症反应 被引量：3
4
作者 谭兵 庞琪期 +4 位作者 钱波 王程强 曾榛 周燕园 宋家乐 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2018年第11期8-14,共7页
探讨紫甘蓝总花色苷提取物对脂多糖(LPS,1μg/mL)诱导RAW264.7细胞炎症反应的影响。以不同质量浓度(1μg/mL、10μg/mL、50μg/mL)的紫甘蓝总花色苷提取物处理RAW264.7细胞后,试剂盒法分别检测一氧化氮(NO)和前列腺素E2(PGE_2)的分泌水... 探讨紫甘蓝总花色苷提取物对脂多糖(LPS,1μg/mL)诱导RAW264.7细胞炎症反应的影响。以不同质量浓度(1μg/mL、10μg/mL、50μg/mL)的紫甘蓝总花色苷提取物处理RAW264.7细胞后,试剂盒法分别检测一氧化氮(NO)和前列腺素E2(PGE_2)的分泌水平。酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6和IL-8分泌水平。实时定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)、TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的m RNA表达水平。结果显示,紫甘蓝总花色苷提取物能有效下调iNOS与COX-2的m RNA表达,抑制NO和PGE_2的释放。特别地,高浓度的紫甘蓝总花色苷提取物(50μg/mL)能显著地抑制LPS所诱发的iNOS(65.80%)与COX-2(48.28%)的m RNA表达,降低NO(58.81%)和PGE_2(46.26%)的释放水平。同时,紫甘蓝总花色苷提取物还能显著下调TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的m RNA表达水平,并抑制TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的分泌。结果表明,紫甘蓝总花色苷提取物具有较强的抗炎活性,能够抑制LPS诱导的RAW264.7细胞所发生的炎症反应。 展开更多
关键词 紫甘蓝花色苷 raw246.7细胞 炎症反应 细胞因子
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可溶性青梅果胶的表征及其对脂多糖诱导的RAW246.7巨噬细胞炎症的抑制作用 被引量：1
5
作者 侯佳丽 朱珍珠 +2 位作者 谢旻浩 杨倩 刘琴 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第19期401-409,共9页
本研究从青梅果汁中提取可溶性果胶(WSP),通过高效液相色谱(HPLC)、高效凝胶色谱(HPGFC)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、扫描电镜(SEM)及X-射线衍射(XRD)等对其组成和结构进行了表征,并用酶联免疫法(ELISA)对脂多糖(LPS)诱导的RAW246.7... 本研究从青梅果汁中提取可溶性果胶(WSP),通过高效液相色谱(HPLC)、高效凝胶色谱(HPGFC)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、扫描电镜(SEM)及X-射线衍射(XRD)等对其组成和结构进行了表征,并用酶联免疫法(ELISA)对脂多糖(LPS)诱导的RAW246.7细胞的抗炎活性进行评价。结果表明,WSP的酯化度为18.89%,属于低酯果胶,其半乳糖醛酸(GalA)含量为69.72%,主要中性多糖是半乳糖(Gal)(18.36%),重均分子量(Mw)为353.73 kDa,属于非晶型结构。WSP可显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)(P<0.05)、干扰素-γ(IFN-γ)(P<0.05)、白介素6(IL-6)(P<0.001)的释放量,增加白介素10(IL-10)(P<0.01)的分泌,起到抗炎作用。为了探究其抗炎机理,通过实时荧光定量聚合酶链式反应法(Realtime qPCR)和蛋白印迹法(Western blot)研究了WSP对Janus激酶/信号转导和转录激活因子信号通路(JAK/STAT信号通路)的影响。与LPS模型组相比,WSP显著上调了与炎症密切相关的JAK1(P<0.01),JAK2(P<0.05),JAK3(P<0.001)和STAT1(P<0.001),STAT2(P<0.001)和STAT3(P<0.05)的m RNA表达量,且使JAK1和STAT3的磷酸化水平显著降低(P<0.05),该结果表明WSP可通过干预JAK/STAT信号通路,抑制与炎症信号相关的JAK和STAT家族的磷酸化水平来缓解LPS诱导的RAW264.7细胞炎症。本研究可为评价青梅果的健康促进作用和提高青梅果加工附加值提供参考。 展开更多
关键词 青梅 可溶性果胶 raw246.7细胞 抗炎 JAK/STAT通路
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山姜素促进过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)与甲基转移酶结合 被引量：4
6
作者 胡柯 刘理静 +4 位作者 钱红 周婷 李玉娴 俞家贤 谭碧峰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1610-1614,共5页
目的通过筛选小鼠RAW246.7巨噬细胞过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)激活后的核定位结合特异性甲基转移酶,初步验证山姜素可通过激活PPAR引起表观遗传修饰效应。方法 RAW246.7细胞按照不同处理分为对照组、(100、200、500、1000)μg/m... 目的通过筛选小鼠RAW246.7巨噬细胞过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)激活后的核定位结合特异性甲基转移酶,初步验证山姜素可通过激活PPAR引起表观遗传修饰效应。方法 RAW246.7细胞按照不同处理分为对照组、(100、200、500、1000)μg/mL山姜素处理组、1000μg/mL山姜素联合0.1 mmol/mL GW9662处理组。孵育完成后,首先在String生物信息数据库检索与PPAR作用的甲基转移酶类,再利用免疫共沉淀技术筛选与RAW246.7核内PPAR作用的特异甲基转移酶,荧光定量PCR法验证山姜素对上述甲基转移酶合成的作用。结果免疫共沉淀结果显示山姜素呈剂量依赖性促进胞核内甲基转移酶Zeste基因增强子同源物2(EZH2)、DNA甲基转移酶3α(DNMT3α)以及胸腺嘧啶DNA糖基化酶(TDG)与PPAR结合,与String数据库预测的互相作用蛋白情况基本吻合,且GW9662组中无甲基转移酶与PPAR作用;荧光定量PCR显示仅1000μg/mL高剂量山姜素可促进TDG mRNA合成,而对DNMT3A以及EZH2 mRNA含量无显著影响。结论 PPAR激动剂山姜素可易化相关甲基转移酶与PPAR结合或诱导酶合成,提示山姜素具有潜在的甲基化修饰效应。 展开更多
关键词 山姜素 鼠巨噬细胞 过氧化物酶体增殖物激活受体 甲基转移酶
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蔓越莓提取物对脂多糖诱导RAW246.7细胞炎症反应的抑制作用 被引量：3
7
作者 高纳影 赵艳敏 +2 位作者 刘岱琳 孙华庚 高晓霞 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2018年第16期1-7,共7页
研究蔓越莓提取物对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导RAW246.7细胞炎症反应的抑制作用及其作用机制。筛选LPS浓度建立细胞炎症模型;采用噻唑蓝[3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide,MTT]法测定蔓越莓... 研究蔓越莓提取物对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导RAW246.7细胞炎症反应的抑制作用及其作用机制。筛选LPS浓度建立细胞炎症模型;采用噻唑蓝[3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide,MTT]法测定蔓越莓提取物对RAW246.7细胞活力的影响;利用4,6-联脒-2-苯基吲哚(4′,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色法观察蔓越莓提取物对细胞核形态的影响;采用荧光分析法测定一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)的活力;酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒测定IL-1、IL-6、TNF-α细胞因子的水平;蛋白质印迹法(Western-Blot)法检测Nrf2/NF-κB通路相关蛋白的水平。实验结果显示5μg/m L的LPS建立炎症模型,LPS与细胞共培养24 h时炎症水平达到最高,蔓越莓提取物在5μg/m L^400μg/m L范围内对RAW246.7细胞无显著性毒性作用,细胞核形态完整,无明显损伤;与模型组比较,蔓越莓提取物在无毒性浓度范围内显著降低LPS诱导RAW246.7细胞炎症反应的NOS活力和IL-1、IL-6、TNF-α水平,且呈现出剂量依赖关系。Western-Blot实验结果显示蔓越莓提取物量效依赖性地降低Keap1、IKKα/β、NF-κBp65蛋白表达的水平,而上调了Nrf2、HO-1的蛋白表达水平。结果证明蔓越莓提取物能够有效地抑制LPS诱导的炎症反应,其作用机制可能与经典的抗氧化通路Keap1/Nrf2/HO-1和炎症通路NF-κBp65蛋白表达有关。 展开更多
关键词 蔓越莓提取物 脂多糖 raw246.7细胞 炎症
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HSV Us3蛋白激酶对巨噬细胞生物学活性和凋亡的影响研究
8
作者 吴建奇 柴若楠 +1 位作者 木村吉延 刘北星 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第3期48-51,共4页
为探讨单纯疱疹病毒Us3基因及其编码产物对LPS活化的巨噬细胞生物学活性和凋亡的影响,小鼠巨噬细胞系RAW246.7细胞瞬时转染pcDNA3.1(+)-Us3重组质粒并体外培养。利用免疫荧光技术检测转染率,ELISA方法检测培养上清中TNF-α分泌水平,Anne... 为探讨单纯疱疹病毒Us3基因及其编码产物对LPS活化的巨噬细胞生物学活性和凋亡的影响,小鼠巨噬细胞系RAW246.7细胞瞬时转染pcDNA3.1(+)-Us3重组质粒并体外培养。利用免疫荧光技术检测转染率,ELISA方法检测培养上清中TNF-α分泌水平,Annexin-V染色评价转染细胞凋亡情况。结果发现,pcDNA3.1(+)-Us3重组质粒可成功转染至RAW246.7细胞,转染率为10.3%。与空质粒转染组相比,pcDNA3.1(+)-Us3转染细胞培养上清中TNF-α分泌水平明显升高,但凋亡细胞数量略有下降,证实Us3基因及其编码蛋白在调控巨噬细胞细胞因子分泌活性及其活化细胞凋亡方面发挥一定作用。 展开更多
关键词 Us3蛋白激酶基因 raw246.7细胞 TNF-Α 凋亡
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IL-1β参与调控BCG感染RAW264.7细胞凋亡的研究 被引量：1
9
作者 蔡卫卫 马臣杰 +2 位作者 曾瑾 吴晓玲 邓光存 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第4期386-393,共8页
目的白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)属多肽类生长因子,主要由单核细胞和巨噬细胞分泌。IL-1β可参与细胞分化、增殖等多种细胞的生命活动,并参与调控细胞凋亡过程。本研究旨在探讨IL-1β参与卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin,B... 目的白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)属多肽类生长因子,主要由单核细胞和巨噬细胞分泌。IL-1β可参与细胞分化、增殖等多种细胞的生命活动,并参与调控细胞凋亡过程。本研究旨在探讨IL-1β参与卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin,BCG)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7凋亡作用及其机制。方法设计并合成IL-1β的小干扰RNA(si-IL-1β),转染小鼠巨噬细胞RAW264.7后并用BCG感染,采用MTT法检测RAW264.7细胞存活率,ELISA法检测细胞培养液上清中IL-1β的分泌水平,DCF法检测细胞内ROS水平,AnnexinV-FITC/碘化丙啶(propidine iodide,PI)双荧光染色法结合流式细胞仪检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR和Western blot法检测凋亡相关因子Caspase3、Bad、Bax以及Mcl-1蛋白及其基因(mRNA)的表达。结果 BCG感染巨噬细胞24 h后,IL-1β表达水平极显著上调,并且呈时间梯度依赖性(P<0.01);同时,与对照相比,BCG感染后巨噬细胞存活率下降,约为33%,而凋亡率显著上调到58.56%(P<0.01),并且凋亡关键调控因子Caspase3、Bad、Bax的mRNA及蛋白表达水平显著上调(P<0.01),而抑凋亡蛋白Mcl-1的表达水平显著下调(P<0.01),细胞内ROS富集(P<0.05),而si-IL-1β处理可显著逆转由BCG诱发的细胞凋亡、ROS含量富集及凋亡相关蛋白表达水平上调等。结论 BCG可诱导细胞内IL-1β的表达;IL-1β通过上调促凋亡蛋白Bad、Bax表达,下调抑凋亡蛋白Mcl-1表达,上调细胞内ROS的表达并参与调控BCG诱导的巨噬细胞RAW264.7细胞凋亡。这为阐明IL-1β在BCG诱导的细胞凋亡中的作用奠定了分子基础。 展开更多
关键词 IL-1Β raw264.7细胞 BCG 细胞凋亡
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