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2例Omenn综合症患儿临床、免疫学特征及基因突变分析 被引量:4
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作者 王媛 吴俊峰 +1 位作者 戴荣欣 赵晓东 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期668-671,676,共5页
目的 Omenn综合征是由于RAG1或RAG2基因突变导致的,本研究是为了寻找RAG基因的新发突变,提高临床工作者对本病的了解,以减少漏诊与延迟诊断。方法对2012年在重庆医科大学附属儿童医院收治的2例疑似严重联合免疫缺陷(severe combined imm... 目的 Omenn综合征是由于RAG1或RAG2基因突变导致的,本研究是为了寻找RAG基因的新发突变,提高临床工作者对本病的了解,以减少漏诊与延迟诊断。方法对2012年在重庆医科大学附属儿童医院收治的2例疑似严重联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency,SCID)的患儿及患儿父母收集血标本进行RAG1/RAG2基因PCR扩增、PCR产物的双向序列测定、TCR Vβ亚家族克隆谱型分析、TREC含量检测。结果 2例患儿均有Omenn综合症典型临床表现和T+B-NK+免疫学表型,均为RAG1基因复合杂合性突变,其中例1的1个基因突变(3073insA,G1025L)被确认为新发突变,其余3个基因突变(1180 C>T,A394T;1806T>G;C602T;1949A>G,A650S)均被报道过。患儿的大多数TCR Vβ亚家族表现为单克隆或寡克隆峰,患儿TREC含量明显低于正常人TREC含量。结论例1患儿的1个RAG1基因突变(3073insA,G1025L)被确认为新发突变,从而扩展了RAG1基因突变谱。部分Omenn综合症患儿存在漏诊与延迟诊断,因此提高临床工作者对本病的认识对于早期诊断至关重要。Omenn综合症主要治疗方式为干细胞移植,早期诊断并且迅速干细胞移植可能可以降低死亡率。 展开更多
关键词 Omenn综合征 严重联合免疫缺陷 rag1 rag2 免疫学特点 基因突变分析
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利用CRISPR/Cas9技术构建RAG1基因敲除免疫缺陷猪模型的研究
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作者 王清未 李振阳 +1 位作者 张效生 张林林 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第9期1-7,114,115,共9页
为了利用显微注射一步法构建RAG1基因敲除的免疫缺陷猪模型,试验利用CRISPR/Cas9技术针对猪的RAG1基因设计并筛选出高效的sgRNA,与体外转录的Cas9 mRNA按照4∶6比例混合后显微注射到猪体外受精的受精卵中,随后将基因编辑的受精卵移植到... 为了利用显微注射一步法构建RAG1基因敲除的免疫缺陷猪模型,试验利用CRISPR/Cas9技术针对猪的RAG1基因设计并筛选出高效的sgRNA,与体外转录的Cas9 mRNA按照4∶6比例混合后显微注射到猪体外受精的受精卵中,随后将基因编辑的受精卵移植到受体母猪输卵管内;仔猪出生后采集耳缘皮肤组织提取基因组进行PCR扩增、T7核酸内切酶Ⅰ酶切鉴定,以及利用Sanger法测序鉴定编辑后基因型;监测基因敲除的免疫缺陷仔猪在普通环境的生存周期;对死亡的仔猪进行剖检,采集胸腺和脾脏等免疫器官进行组织学分析。结果表明:通过在猪成纤维细胞系水平上进行RAG1基因敲除效率的筛选,筛选出针对猪RAG1基因第2外显子高效敲除的sgRNA序列,通过对猪受精卵胞质显微注射sgRNA和Cas9 mRNA混合物,获得2头RAG1基因敲除免疫缺陷仔猪,经鉴定发现RAG1基因的第2外显子碱基序列中有1 bp插入,造成移码突变,破坏了RAG1基因功能,致使仔猪免疫系统缺陷。出生的2头免疫缺陷仔猪在普通饲养环境的存活时间分别为19 d和33 d。RAG1基因敲除的免疫缺陷仔猪胸腺缺失,脾脏发育不良,无法在正常饲养环境中长时间存活。脾脏结构紊乱,出现炎症细胞浸润等免疫系统异常。说明通过CRISPR/Cas9技术进行显微注射可获得RAG1基因敲除的免疫缺陷猪模型。 展开更多
关键词 免疫缺陷动物 CRISPR/Cas9 rag1 sgRNA
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应用生物信息学分析大米过敏原RAG1的B细胞表位 被引量:5
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作者 李燕芳 何颖 邹泽红 《安徽农业科学》 CAS 2012年第6期3243-3244,3250,共3页
[目的]预测大米主要过敏原RAG1的二级结构及B细胞表位。[方法]从Expasy蛋白质数据库中获得编码大米过敏原RAG1的氨基酸序列并以此氨基酸序列为基础,通过DNAStar Protean软件,采用Gamier-Robson方案、Chou-Fasman方案和Karplus-Schulz方... [目的]预测大米主要过敏原RAG1的二级结构及B细胞表位。[方法]从Expasy蛋白质数据库中获得编码大米过敏原RAG1的氨基酸序列并以此氨基酸序列为基础,通过DNAStar Protean软件,采用Gamier-Robson方案、Chou-Fasman方案和Karplus-Schulz方案预测RAG1的二级结构,用Kyte-Doolittle亲水性方案、Emini表面可及性方案J、ameson-Wolf抗原性指数方案综合预测RAG1的B细胞表位。[结果]对大米过敏原RAG1的二级结构和B细胞表位预测的结果表明,第33~441、19~129、155~163区段可能是B细胞的优势表位。[结论]该研究综合应用多方法多参数预测大米过敏原RAG1潜在的B细胞优势表位,为RAG1 B细胞表位的进一步鉴定及其抗原性改造、表位疫苗设计等研究提供了理论依据。 展开更多
关键词 大米过敏原 rag1 二级结构 B细胞表位
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RAG1基因新发现变异位点的结构分析及致病性预测
4
作者 刘永祥 段雨薇 +5 位作者 翁治委 张淑婷 李学荣 彭新良 周瑞鸿 周少虎 《中华生殖与避孕杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期295-301,共7页
目的探索胚胎植入前单基因遗传学检测(preimplantation genetic testing for monogenic,PGT-M)周期前与重症联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency,SCID)相关的重组激活基因1(recombination activating gene 1,RAG1)基因结构... 目的探索胚胎植入前单基因遗传学检测(preimplantation genetic testing for monogenic,PGT-M)周期前与重症联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency,SCID)相关的重组激活基因1(recombination activating gene 1,RAG1)基因结构和功能,并对其新发现变异位点进行致病性预测。方法针对2016年8月于中山大学附属第一医院生殖医学中心就诊的先证者的外显子报告及其父母外周血染色体核型及Sanger测序数据,利用PROVEAN、PolyPhen-2和Mutation Taster致病性预测软件对RAG1基因变异位点的基因结构、蛋白保守结构域进行分析,并对突变与野生型RAG1蛋白的结构进行三维结构重建,实现致病性的预测。结果双方均为RAG1基因突变携带者,突变位点位于11号染色体上,女方为c.946T>G(p.C316G)杂合错义突变,男方为c.11941196del(p.L399del)杂合整码突变。两个突变位点对应的氨基酸在人、黑猩猩、猪、牛、大鼠、小鼠6个物种中高度保守。二级三级结构重建显示,c.946T>G(p.C316G)突变导致对应的RING型锌指结构丧失结合锌离子的能力,c.11941196del(p.L399del)突变引起的第399位亮氨酸缺失导致氢键减少1条。结论推测RAG1两个新发现变异位点为可致病性突变,扩大了RAG1基因的突变谱,具有重要的研究价值。 展开更多
关键词 重组激活基因1 新发变异位点 生物信息学 致病性预测
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Generation of inactivated IL2RG and RAG1 monkeys with severe combined immunodeficiency using base editing
5
作者 Xiao Zheng Chunhui Huang +15 位作者 Yingqi Lin Bofeng Han Yizhi Chen Caijuan Li Jiawei Li Yongyan Ding Xichen Song Wei Wang Weien Liang Jianhao Wu Jiaxi Wu Jiale Gao Chengxi Wei Xudong Zhang Zhuchi Tu Sen Yan 《Signal Transduction and Targeted Therapy》 SCIE CSCD 2023年第10期4825-4837,共13页
Severe combined immunodeficiency(SCiD)encompasses a range of inherited disorders that lead to a profound deterioration of the immune system.Among the pivotal genes associated with SCID,RAG1 and IL2RG play crucial role... Severe combined immunodeficiency(SCiD)encompasses a range of inherited disorders that lead to a profound deterioration of the immune system.Among the pivotal genes associated with SCID,RAG1 and IL2RG play crucial roles.IL2RG is essential for the development,differentiation,and functioning of T,B,and NK cells,while RAG1 critically contributes to adaptive immunity by facilitating V(D)J recombination during the maturation of lymphocytes.Animal models carrying mutations in these genes exhibit notable deficiencies in their immune systems. 展开更多
关键词 IMMUNODEFICIENCY IMMUNITY rag1
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太平洋鳕RAG1和IgM基因荧光定量PCR方法的建立及初步应用 被引量:2
6
作者 李幸 温施慧 +2 位作者 毛明光 姜志强 蒋洁兰 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期475-484,共10页
为研究太平洋鳕发育早期特异免疫系统形成的机制,通过RAG1和Ig M基因的转录水平衡量特异免疫系统的发育特点。根据Gen Bank中RAG1和Ig M的序列信息,分别设计1对特异引物,从太平洋鳕头肾中扩增得到RAG1和Ig M的基因片段。将所获基因片段... 为研究太平洋鳕发育早期特异免疫系统形成的机制,通过RAG1和Ig M基因的转录水平衡量特异免疫系统的发育特点。根据Gen Bank中RAG1和Ig M的序列信息,分别设计1对特异引物,从太平洋鳕头肾中扩增得到RAG1和Ig M的基因片段。将所获基因片段分别插入到克隆载体p MD18-T中,从而构建太平洋鳕RAG1和Ig M基因的质粒标准品。建立并优化太平洋鳕RAG1和Ig M基因绝对荧光定量PCR方法。为进一步验证该方法的可靠性,分别利用绝对定量和相对定量检验目的基因在太平洋鳕早期发育过程不同组织内的表达差异。以优化后的绝对荧光定量PCR方法检测不同发育时期太平洋鳕RAG1和Ig M的表达情况。结果显示,RAG1的回归方程为y=-3.266x+33.77,回归系数R2=0.996;Ig M的回归方程为y=-3.119x+27.61,回归系数R2=0.998。绝对定量和相对定量结果在基因转录趋势上显现出一致性,即RAG1基因在胸腺和头肾中表达,且在胸腺中的表达量显著高于头肾中的表达量,在肝脏和脾脏中无表达;Ig M基因在胸腺、头肾、肝脏和脾脏中均有表达,其中脾脏中表达量最高,其次是头肾。RAG1基因在太平洋鳕发育早期的表达水平很低,到61日龄(days posthatching,dph)至95 dph表达量显著提高;Ig M基因在早期表达水平同样很低,到33 dph至61 dph才有明显表达,在95 dph时表达量显著提高。研究表明,本实验方法可靠,特异性较强,可成功对目标基因转录水平进行检测。 展开更多
关键词 太平洋鳕 rag1 IGM 绝对荧光定量PCR
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Bioinformatics Analysis on B cell Epitopes of Rice Allergen RAG1 被引量:1
7
作者 李燕芳 何颖 邹泽红 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2012年第2期304-306,共3页
[Objective] To predict the secondary structure and B cell epitopes of the rice major allergen RAG1. [Method] The amino acid sequence of rice allergen RAG1 was acquired from Expasy protein database. The secondary struc... [Objective] To predict the secondary structure and B cell epitopes of the rice major allergen RAG1. [Method] The amino acid sequence of rice allergen RAG1 was acquired from Expasy protein database. The secondary structure of RAG1 was predicted by DNAStar Protean software with Gamier-Robson program, Chou-Fasman program and Karplus-Schulz program; the B cell epitopes of RAG1 was predicted with the Kyte Doolittle hydrophilic program, Emini surface accessibility program and Jameson-Wolf antigenic index program. [Result] The predictions on secondary structure and B cell epitopes showed that the regions of 33-44, 119-129, 155-163 were the dominant B cell epitopes. [Conclusion] This study predicted the potential dominant B cell epitopes in rice allergen RAG1 by comprehensive use of multi-methods and multi-parameters, and provided a theoretical basis for further researches on identification, antigen modification and epitope vaccine design of RAG1 B cell epitopes. 展开更多
关键词 Rice allergen rag1 Secondary structure B cell epitopes
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Chapaev转座子与Transib转座子与RAG1基因起源与进化的关系 被引量:1
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作者 张化浩 熊敏 张小谷 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2016年第1期97-104,共8页
重组激活蛋白基因(recombination activating gene,RAG)是脊椎动物内特有的一类基因,在脊椎动物T细胞受体和免疫血球素基因的重排与重组过程中扮演着关键角色.基于V(D)J重组和DNA转座子重组机制的相似性,研究人员提出了"RAG转座子&... 重组激活蛋白基因(recombination activating gene,RAG)是脊椎动物内特有的一类基因,在脊椎动物T细胞受体和免疫血球素基因的重排与重组过程中扮演着关键角色.基于V(D)J重组和DNA转座子重组机制的相似性,研究人员提出了"RAG转座子"模型.本文通过序列比对,发现RAG1与Chapaev转座子整条序列(包括N端及C端)都有一定的相似性.基于它们的N端及C端分别构建系统发生树,结果显示RAG1的N末端可能起源于与Chapaev转座子关系更近的转座子,而RAG1的C末端可能起源于与Transib转座子关系更近的转座子.故此,本文提出了两种RAG1基因可能的起源模型,以期为RAG1基因的起源与进化研究提供一定参考. 展开更多
关键词 rag1 Chapaev Transib 起源和进化
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Dock2基因敲除小鼠在肠道细菌感染中的先天性和适应性免疫缺陷的研究(英文)
9
作者 陈亚运 谢璐 +3 位作者 谢园 朱鹃花 刘仰斌 刘志平 《赣南医学院学报》 2018年第11期1067-1073,1096,共8页
目的:Dock2是细胞分裂贡献者(Dock)家族的成员之一,能够调节免疫细胞的激活和迁移。我们最近的研究表明,Dock2能保护小鼠免受柠檬酸杆菌(Citrobacter rodentium)感染,并且Dock2调节先天免疫细胞如巨噬细胞和中性粒细胞在感染早期的迁移... 目的:Dock2是细胞分裂贡献者(Dock)家族的成员之一,能够调节免疫细胞的激活和迁移。我们最近的研究表明,Dock2能保护小鼠免受柠檬酸杆菌(Citrobacter rodentium)感染,并且Dock2调节先天免疫细胞如巨噬细胞和中性粒细胞在感染早期的迁移。然而,Dock2如何调节宿主在C. rodentium感染过程中的适应性免疫反应仍然是未知的。方法:用C. rodentium感染WT、Rag1-/-和Dock2-/-小鼠14天和21天,比较生存率、体重、CFU、组织重量、结肠长度、组织学病变。结果:Dock2-/-小鼠在C. rodentium感染后比WT和Rag1-/-小鼠有更低的存活率和更多的体重损失。尽管Dock2-/-小鼠在第21天与Rag1-/-小鼠有相似的粪便CFU,在感染后第14天和第21天,Dock2-/-小鼠比Rag1-/-小鼠具有更高的组织重量、较短的结肠长度和更严重的组织学损伤。结论:结果表明,Dock2-/-小鼠在整个C. rodentium感染中比Rag1-/-小鼠产生更严重的结肠炎,并且可能在肠道细菌感染中在先天性和适应性免疫方面都有缺陷。 展开更多
关键词 Dock2 rag1 柠檬酸杆菌 结肠炎
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Physiological significance of Rag1 in retinal ganglion cell death
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作者 Takuma Hayashi Toshinori Murata 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2015年第2期192-194,共3页
Although the transcription factor, nudear factor-κB (NF-κB) is known to regulate cell death and survival, its precise role in cell death within the central nervous system (CNS) remains unknown. We previously rep... Although the transcription factor, nudear factor-κB (NF-κB) is known to regulate cell death and survival, its precise role in cell death within the central nervous system (CNS) remains unknown. We previously reported that mice with a homozygous deficiency for NF-κBp50 spon- taneously developed optic neuropathy. We examined the expression and activation of pro-apoptotic factor(s) that mediate optic neuropathy in p50-/- mice. Recombination activating gene 1 (Ragl) is known to regulate the recombination of immunoglobulin V(D)J. 展开更多
关键词 RGCS Physiological significance of rag1 in retinal ganglion cell death CELL
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两例Omenn综合征的基因诊断及发病机制研究 被引量:8
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作者 许永彬 陈玉冰 +1 位作者 陈慧珊 曾华松 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期38-43,共6页
目的探讨2例Omenn综合征患儿的临床特征和基因突变类型。方法对2例疑似严重联合免疫缺陷(severecombinedimmunodeficiency,SCID)的患儿及其家族成员的RAGl及RAG2基因进行PCR扩增、测序,对其T细胞受体基因TCRⅧ亚家族克隆谱型进行分... 目的探讨2例Omenn综合征患儿的临床特征和基因突变类型。方法对2例疑似严重联合免疫缺陷(severecombinedimmunodeficiency,SCID)的患儿及其家族成员的RAGl及RAG2基因进行PCR扩增、测序,对其T细胞受体基因TCRⅧ亚家族克隆谱型进行分析。结果两例患儿均有反复感染病史、红皮病皮疹和脱发秃顶等典型的Omenn综合征的临床表现。例1免疫学表型为T—B-NK+,例2免疫学表型T十B-NK十、IgE和嗜酸性细胞升高。2例患儿均携带RAGl基因的复合杂合突变。例1基因突变位点为c.1328G〉A(P.R443K);e.2486—2490delGGAAA(p.R829fsX869),二者均为新突变。例2的突变位点为c.1209C〉T(P.R403w)、C.2892delT(P.ASN964LYSfs*14),其中e.2892delT(P.ASN964LYSfs*14)为新突变。两例患儿的父母均为突变携带者。在100名正常儿童中未发现相同的突变。两例患儿的绝大多数TCRVp亚家族基因扫描图呈现单克隆或寡克隆峰,TCR邯多态性严重受阻。植物凝集素刺激淋巴细胞增殖极度低下。结论新发现并确认了3种能够引起Omenn综合征的突变。Omenn综合征患儿发病时间早,病情复杂且进展迅速,早期诊断并迅速干预可以降低死亡率。 展开更多
关键词 Omenn综合征 TCR VΒ亚家族 rag1/rag2基因突变 联合免疫缺陷
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基于RAG1基因的中国近海13种石首鱼科鱼类系统进化关系 被引量:8
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作者 马春艳 马凌波 +2 位作者 倪勇 沈盎绿 张永 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期9-16,共8页
为探讨中国近海石首鱼类的系统进化关系,通过PCR扩增和序列测定,获得了石首鱼类9属13个种类的RAG1基因序列。对序列变异进行分析,基于Kimura双参数法计算属间和种间的遗传距离,并结合GenBank中的同源序列,以攀鲈为外群构建分子系统进化... 为探讨中国近海石首鱼类的系统进化关系,通过PCR扩增和序列测定,获得了石首鱼类9属13个种类的RAG1基因序列。对序列变异进行分析,基于Kimura双参数法计算属间和种间的遗传距离,并结合GenBank中的同源序列,以攀鲈为外群构建分子系统进化树。将所得的分子数据与形态学分类进行比较,推论如下:(1)中国近海石首鱼类分为两个类群。(2)叫姑鱼亚科与石首鱼亚科以极高的置信度(90%)聚类,并处于系统进化树的基部,支持了形态学上二者是原始种类的分类观点。(3)分子系统树显示黄姑鱼属比银姑鱼属更为原始,但二者在形态分类上归为一个亚科的观点有待进一步商榷。(4)支持尖头黄鳍牙与银牙置于同一牙亚科的不同属的观点。(5)支持了形态学上黄鱼亚科分化最晚的结论。 展开更多
关键词 石首鱼科 rag1基因 系统进化
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hKDR^(+/+)人源化及Rag1^(-/-)基因缺陷新型双靶点遗传修饰荷瘤小鼠模型的建立 被引量:2
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作者 刘甦苏 吴勇 +5 位作者 曹愿 赵皓阳 翟世杰 孙晓炜 李琳丽 范昌发 《实验动物与比较医学》 CAS 2023年第2期103-111,共9页
目的通过增强血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)人源化小鼠(hKDR^(+/+))接纳不同来源的小鼠肿瘤细胞系的潜力,建立能支持多种肿瘤细胞系成瘤的、可评价针对VEGFR靶点药物的新型荷瘤小鼠模型。... 目的通过增强血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)人源化小鼠(hKDR^(+/+))接纳不同来源的小鼠肿瘤细胞系的潜力,建立能支持多种肿瘤细胞系成瘤的、可评价针对VEGFR靶点药物的新型荷瘤小鼠模型。方法首先建立基于hKDR^(+/+)人源化小鼠模型评价针对VEGFR靶点抗体体内活性的方法,同时采用CRISPR/Cas9技术构建重组激活基因1(recombination activating gene 1,Rag1)敲除的C57BL/6N小鼠(命名为Rag1^(-/-)小鼠)。然后将Rag1^(-/-)小鼠与hKDR^(+/+)小鼠交配,筛选获得双基因纯合、双靶点基因修饰的hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)小鼠。最后在hKDR^(+/+)、Rag1^(-/-)、hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)和C57BL/6N小鼠上测试不同小鼠品系来源肿瘤细胞系的体内肿瘤生长差异。结果针对VEGFR靶点设计的抗体在hKDR^(+/+)小鼠体内表现出明显的抗肿瘤活性,与PBS组相比,肿瘤体积明显减小(P<0.01),肿瘤质量明显减轻(P<0.05)。Rag1^(-/-)小鼠、hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)小鼠的外周血B细胞和T细胞数量均明显减少(P<0.05,P<0.001)。C57BL/6小鼠来源的MC38细胞接种7 d后,在hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)、Rag1^(-/-)、C57BL/6N和hKDR^(+/+)四组小鼠体内均可见肿瘤生长。BALB/c小鼠来源的CT26细胞接种10 d后,仅在hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)和Rag1^(-/-)小鼠体内见到肿瘤生长,在C57BL/6N及hKDR^(+/+)小鼠中均未见肿瘤生长;接种后3周,hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)小鼠的成瘤体积明显大于Rag1^(-/-)小鼠(P<0.01)。结论获得了Rag1基因敲除小鼠,并进一步筛选获得新型hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)双靶点基因修饰小鼠模型;Rag1基因缺失时,不同品系小鼠来源的肿瘤细胞系更易成瘤。这提示可以通过降低hKDR^(+/+)人源化小鼠的免疫反应能力,增强或扩大该模型小鼠接纳肿瘤细胞系的范围,构建多种可用于评价VEGFR靶点药物的荷瘤小鼠模型。 展开更多
关键词 hKDR^(+/+)人源化小鼠 rag1^(-/-)基因敲除小鼠 VEGFR靶点 抗体 肿瘤
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重组活化因子1基因突变所致不同临床表型严重联合免疫缺陷病3例分析 被引量:6
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作者 贺建新 王荃 +6 位作者 朱光华 赵宇红 肖婧 刘秀云 徐保平 申昆玲 江载芳 《中国实用儿科杂志》 CSCD 北大核心 2014年第10期750-753,共4页
目的总结分析重组活化因子(RAG)1基因突变所致严重联合免疫缺陷病(SCID)的不同临床及免疫特点。方法 2012年9月至2013年4月首都医科大学附属北京儿童医院收治的3例SCID患儿,经RAG1基因突变分析获得明确诊断,经HLA配型方法除外母体T淋巴... 目的总结分析重组活化因子(RAG)1基因突变所致严重联合免疫缺陷病(SCID)的不同临床及免疫特点。方法 2012年9月至2013年4月首都医科大学附属北京儿童医院收治的3例SCID患儿,经RAG1基因突变分析获得明确诊断,经HLA配型方法除外母体T淋巴细胞经胎盘输注,经细胞遗传学方法判断淋巴细胞增殖功能。结果病例1表型为经典SCID,病例2表型为Omenn综合征,病例3为伴反复自身免疫性溶血性贫血的非典型SCID。RAG1基因突变分析结果,病例1复合杂合位点1:1870 C>T,Arg624Cys;位点2:2005 G>A,Glu669Lys。位点1为已报道突变,位点2为新发现的错义突变。病例2复合杂合位点1:994 C>T,Arg332X;位点2:1439 G>A,Ser480Asn。均为新发现突变。病例3纯合2095 C>T,R699W,为已报道突变。前两例患儿均于自动出院后不久夭折,后者仍处于反复住院治疗自身免疫性溶血性贫血过程中。结论 RAG1突变所致SCID临床表现有差异,经典SCID和Omenn综合征预后严重,需移植治疗。 展开更多
关键词 重组活化因子1基因 严重联合免疫缺陷病 Omenn综合征 自身免疫性溶血性贫血
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RAG1基因突变致严重联合免疫缺陷一例并文献复习
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作者 王静 杨男 《国际儿科学杂志》 2024年第5期352-355,共4页
目的分析RAG1基因突变致严重联合免疫缺陷患儿的临床特点, 以期在临床工作中早期识别以反复呼吸道感染起病的严重联合免疫缺陷患儿, 并早期采取有效治疗措施。方法回顾分析2021年2月于中国医科大学附属盛京医院住院的一例RAG1基因突变... 目的分析RAG1基因突变致严重联合免疫缺陷患儿的临床特点, 以期在临床工作中早期识别以反复呼吸道感染起病的严重联合免疫缺陷患儿, 并早期采取有效治疗措施。方法回顾分析2021年2月于中国医科大学附属盛京医院住院的一例RAG1基因突变致严重联合免疫缺陷患儿的临床资料及基因检测结果, 并对相关文献进行复习。结果患儿, 男, 7月龄, 因反复感染住院治疗。实验室检查提示外周血总T细胞绝对计数369/μl、总B细胞绝对计数33/μl, 全外显子组测序提示患儿存在RAG1基因c.1528(exon2)G>T及c.2785(exon2)c.2786(exon2)insATAG位点突变。文献复习共检索出符合条件的文献26篇, 共报道病例60例, 男童35例, 女童25例, 平均年龄约为4.5月龄;36例表现为反复呼吸道感染, 其次为消化道感染26例, 其他临床表现包括泌尿系感染、中枢神经系统感染、骨质破坏、念珠菌感染、肝脏肿大等;22例存在家族史;21例完成造血干细胞移植, 其中15例存活。结论 RAG1基因突变致严重联合免疫缺陷的患儿易出现严重感染, 甚至危及生命, 应结合临床特征、免疫学检查及基因检测, 早发现、早治疗, 以改善患儿预后。 展开更多
关键词 儿童 严重联合免疫缺陷 rag1基因 反复呼吸道感染
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南海常见7种石斑鱼的DNA条码构建与亲缘关系分析 被引量:2
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作者 郭昱嵩 王中铎 +1 位作者 贾菠 刘楚吾 《现代农业科学》 2009年第5期201-202,205,共3页
利用特异性聚合酶链式反应(PCR)技术扩增获取了南海海域常见的7种石斑鱼———鲑点石斑鱼(Epinephelus fario)、青石斑鱼(E.awoara)、黑边石斑鱼(E.fasciatus)、赤点石斑鱼(E.akaara)、七带石斑鱼(E.septemfasciatus)、斜带石斑鱼(E.coi... 利用特异性聚合酶链式反应(PCR)技术扩增获取了南海海域常见的7种石斑鱼———鲑点石斑鱼(Epinephelus fario)、青石斑鱼(E.awoara)、黑边石斑鱼(E.fasciatus)、赤点石斑鱼(E.akaara)、七带石斑鱼(E.septemfasciatus)、斜带石斑鱼(E.coioides)、棕点石斑鱼(E.fuscoguttatus)———线粒体DNA COI基因及核DNA的RAG1基因部分序列。测定序列的比较分析结果显示:①该研究获取的COI基因部分序列能将7个物种分别开来,可以作为DNA条码;②线粒体DNA COI基因及核DNA的RAG1基因部分序列分别构建的系统发生树较为一致,结果都支持7种石斑鱼分为3支:青石斑鱼和斜带石斑鱼为第1支;鲑点石斑鱼、黑边石斑鱼、赤点石斑鱼和棕点石斑鱼为第2支;七带石斑鱼为第3支。研究表明,COI基因部分序列不但可以作为物种辨识的良好DNA条码,而且在石斑鱼属内的种间系统发生关系分析方面也具有一定的适用性。 展开更多
关键词 DNA条码 石斑鱼属 COI基因 rag1基因 系统发生关系
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成人B细胞性急性淋巴细胞白血病RAG1表达特点及临床意义 被引量:3
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作者 韩旗 顾岩 +3 位作者 高雨乔 李建勇 陈宝安 葛峥 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期735-740,共6页
目的:探讨成人B细胞性急性淋巴细胞白血病(B-ALL)中RAG1基因的表达特点及其临床意义。方法:应用实时定量PCR方法检测104例初发、22例复发成人B-ALL患者和30例正常对照者RAG1基因的表达,分析基因表达特点及其与临床和实验室参数之间的关... 目的:探讨成人B细胞性急性淋巴细胞白血病(B-ALL)中RAG1基因的表达特点及其临床意义。方法:应用实时定量PCR方法检测104例初发、22例复发成人B-ALL患者和30例正常对照者RAG1基因的表达,分析基因表达特点及其与临床和实验室参数之间的关系。结果:初发、复发成人B-ALL患者RAG1基因表达水平均高于正常对照者(3.94 vs 1.23)(P<0.001);(5.86 vs1.23)(P<0.01)。6例初发与复发患者成对标本分析显示,RAG1表达水平在疾病复发时显著高于初发(13.65 vs2.31)(P<0.01)。IKZF1基因外显子3-6缺失的异构体Ikaros isoform 6(Ik6)阳性患者RAG1基因表达水平显著高于Ik6阴性患者(5.30 vs2.11)(P<0.05)。RAG1高表达组LDH水平大于1 000 U/L患者的比例显著高于低表达组(42.2%vs20.5%)(P<0.05)。结论:RAG1基因表达上调在成人B-ALL发生发展中尤其在复发过程中可能起重要作用,其上调与IKZF1基因缺失相关。监测RAG1表达水平的变化可能为临床预测成人B-ALL患者疾病进展提供帮助。 展开更多
关键词 rag1基因 成人B细胞性急性淋巴细胞白血病 Ik6临床意义
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红笛鲷重组激活基因rag1原核表达条件的优化及纯化 被引量:3
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作者 张雪利 鲁义善 +2 位作者 谢吉国 简纪常 吴灶和 《广东海洋大学学报》 CAS 2012年第1期11-16,共6页
克隆编码红笛鲷(Lutjanus sanguineus)RAG1蛋白(recombination activating protein1)活性核心区的基因序列,并与pET-28a(+)载体连接,构建原核表达载体pET-28a-RAG1,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,利用IPTG进行诱导表达。为提高融合蛋... 克隆编码红笛鲷(Lutjanus sanguineus)RAG1蛋白(recombination activating protein1)活性核心区的基因序列,并与pET-28a(+)载体连接,构建原核表达载体pET-28a-RAG1,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,利用IPTG进行诱导表达。为提高融合蛋白的表达效率,运用传统的实验方法对诱导条件进行优化。SDS-PAGE分析表明,在37℃条件下,利用0.1 mmol/L IPTG诱导8 h后,RAG1重组融合蛋白的表达量最大,相对分子质量与预测值相符,该蛋白主要以包涵体形式高效表达,利用His Trap HP亲和柱使其得到进一步纯化;Western blot分析显示,该融合蛋白可与鼠抗His-tag单克隆抗体发生特异性结合,说明表达蛋白为目的蛋白。 展开更多
关键词 红笛鲷 rag1基因 原核表达 表达条件 优化 纯化 WESTERN BLOT分析
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B细胞阴性严重联合免疫缺陷患儿1例的临床表型及RAG1基因变异分析
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作者 黄娟 郭晓峰 吉炜 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2023年第2期238-241,共4页
目的报道1例以暴发性心肌炎为临床表现的B细胞阴性严重联合免疫缺陷(B-SCID)患儿,并对其进行基因变异分析。方法选取2021年1月31日就诊于福建省妇幼保健院的B-SCID患儿1例为研究对象。对患儿及其父母进行全外显子组测序,并通过Sanger测... 目的报道1例以暴发性心肌炎为临床表现的B细胞阴性严重联合免疫缺陷(B-SCID)患儿,并对其进行基因变异分析。方法选取2021年1月31日就诊于福建省妇幼保健院的B-SCID患儿1例为研究对象。对患儿及其父母进行全外显子组测序,并通过Sanger测序对候选变异进行家系验证。结果患儿为女性,2个月11天,出生后反复发生皮肤及肺部感染,此次因合并暴发性心肌炎入院,实验室检查提示IgG降低,外周血T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞严重缺乏。全外显子组测序结果提示患儿存在RAG1基因c.C3007T(p.Q1003X)纯合无义变异,患儿父母均为携带者,该变异既往未见报道,根据ACMG相关标准判断为疑似致病。结论确诊了1例RAG1基因变异相关的B-SCID,丰富了RAG1基因的变异谱,同时为患儿家庭的遗传咨询提供了线索。 展开更多
关键词 严重联合免疫缺陷症 B细胞阴性 rag1基因 基因变异
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应用DNA条形码鉴定生物源性补片的种属1例
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作者 臧钰 陈维红 +4 位作者 王振骁 旦增国杰 邓悦 孙宏钰 乌日嘎 《中国法医学杂志》 CSCD 2023年第6期722-724,共3页
1案例资料1.1简要案情生物源性补片(简称生物补片),是生物来源(自体、同种异体、或异种来源)用于修复机体组织损伤的新型生物医学材料。相较于人工合成补片,其生物相容性佳,安全有效,是最理想的软组织修复和替代材料[1]。其中的异种来... 1案例资料1.1简要案情生物源性补片(简称生物补片),是生物来源(自体、同种异体、或异种来源)用于修复机体组织损伤的新型生物医学材料。相较于人工合成补片,其生物相容性佳,安全有效,是最理想的软组织修复和替代材料[1]。其中的异种来源生物补片,是将动物源性组织进行交联固定、多方位去抗原、灭菌、修饰等处理,保留作为支架的细胞间质,增添用于诱导再生的细胞因子等,植入生物体后可实现再生性修复的优质材料。此类材料由于不受来源限制、使用便捷,已实现商业化生产并有多种产品广泛应用于临床,如脑膜、胸膜、颅骨等的修复、食道癌切除后修补、妇科或男科手术的修复,以及隆胸等整形美容项目。 展开更多
关键词 种属鉴定 DNA条形码 COI基因 CYTB基因 rag1基因
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