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Denatured proteins show new vitality:Green synthesis of germanium oxide hollow microspheres with versatile functions by denaturing proteins around bubbles
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作者 Yanfang Zhao Xin Liang +3 位作者 Daoyuan Chen Xuhui Bian Wanjian Liu Lei Han 《Aggregate》 2023年第1期238-249,共12页
The hollow structure has long attracted great attention because of its excellent properties.However,this special structure is usually synthesized through some complex approaches.Herein,we discovered that denatured bov... The hollow structure has long attracted great attention because of its excellent properties.However,this special structure is usually synthesized through some complex approaches.Herein,we discovered that denatured bovine serum albumin(BSA)can trigger unusual biomineralization for the simple,green and shape-controllable synthesis of germanium oxide(GeOx)hollow microsphere(HMS).At high temperature(60℃),BSA was denatured,and a compact BSA layer was formed around the H2 bubbles.The denatured BSA layer was stable and suitable for anchoring and growing GeOx.By simply changing the BSA concentration and temperature,various morphologies of GeOx could be obtained.Due to the denatured protein skeletons and microenvironment-regulated collapse,GeOx HMS showed great potential for intelligently responsive pesticide delivery in the insect gut,showing superiority over traditional delivery systems,which early release pesticides in the mouth and stomach.Inspired by its large specific surface area,excellent biocompatibility,modifiable functional groups,and high electrocatalytic activity,GeOx HMS was also applied to versatile sensors for H_(2)O_(2) assays at physiological pH and rapid coronavirus COVID-19 detection.This work not only provides some evidence for understanding proteins in depth but also paves a new avenue for the biomineralization-inspired synthesis of hollow structures with versatile functions. 展开更多
关键词 BIOMINERALIZATION COVID-19 denatured protein electrochemical sensor hollow microsphere intelligent pesticide delivery
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An AND-Gate DNA Nanodevice for Dual Protein-Mediated,Tumor-Specific Imaging
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作者 Zetan Fan Fangzhi Yu +1 位作者 Mingming Yu Lele Li 《Chinese Journal of Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2023年第12期1437-1442,共6页
Sensitive and specific imaging of tumor-associated biomarkers offers an effective way for cancer diagnosis.However,most of the reported imaging probes are limited to the targeting of a single biomarker,which may impai... Sensitive and specific imaging of tumor-associated biomarkers offers an effective way for cancer diagnosis.However,most of the reported imaging probes are limited to the targeting of a single biomarker,which may impair imaging precision.Here,we report an aptamer-based,AND-gate DNA nanodevice that relies on the sequential processing of two tumor-associated proteins to produce a specific fluorescent signal for precise tumor imaging.The DNA nanodevice integrates an AS1411 aptamer to bind cell surface nucleolin for tumor targeting and a DNA sensor to respond to intracellular apurinic/apyrimidinic endonuclease 1 for activatable imaging.We evaluated the performance of the system in both living cells and a tumor-bearing mouse model,and demonstrated its capability in tumor cell-specific imaging.We anticipate that this strategy will accelerate the design of multivariate protein-stimulated probes for tumor diagnosis. 展开更多
关键词 APTAMER DNA nanodevice protein sensor BIOIMAGING
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纤维状蛋白质基智能材料研究进展
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作者 吕生华 曹兴中 +3 位作者 刘相 刘雷鹏 危得全 魏艳敏 《陕西科技大学学报》 北大核心 2023年第3期7-19,共13页
纤维状蛋白质作为构成生命体的物质基础,不仅具有生物相容性和可降解性好的特点,而且对外界环境的刺激具有响应性及可调控性好等功能.因此,纤维状蛋白质在智能材料的研究及应用方面具有很大的发展潜力.目前,有关纤维状蛋白质的研究与应... 纤维状蛋白质作为构成生命体的物质基础,不仅具有生物相容性和可降解性好的特点,而且对外界环境的刺激具有响应性及可调控性好等功能.因此,纤维状蛋白质在智能材料的研究及应用方面具有很大的发展潜力.目前,有关纤维状蛋白质的研究与应用,已经引起了人们的广泛关注.本文主要综述了近些年丝素蛋白、角蛋白、胶原和弹性蛋白等常见纤维状蛋白质在智能材料方面的应用现状及进展情况;介绍及分析了利用纤维状蛋白质设计具有pH值响应性、温敏性、光敏性、湿敏性及构象变化响应的智能材料的方法和存在问题;讨论了其在智能水凝胶材料、智能生物传感器材料、智能3D打印油墨及智能柔性可穿戴材料等方面的应用优势.这对今后设计具有特异结构、生物相容性、多功能性、刺激响应性等新型智能蛋白质材料具有重要的指导意义. 展开更多
关键词 纤维状蛋白质 智能材料 水凝胶 传感器 柔性材料
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A cancer cell turn-on protein-CuSMn nanoparticle as the sensor of breast cancer cell and CH_3O-PEG-phosphatide 被引量:1
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作者 Huan Yang Hongjuan Liang +1 位作者 Yuwen Xie Qiuyun Chen 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2018年第10期1528-1532,共5页
Cancer activated protein-inorganic nanoparticles can be cancer targeting turn-on imaging and therapy agents. Although various techniques were successfully employed for development of hybrid proteininorganic nanopartic... Cancer activated protein-inorganic nanoparticles can be cancer targeting turn-on imaging and therapy agents. Although various techniques were successfully employed for development of hybrid proteininorganic nanoparticles, cancer cell activated protein-inorganic nanoparticles have been challengeable.Herein, a cancer cell responsive nanoparticle(PDAMn-CuS@BSA-FA, NPs) was constructed and characterized. It is found that the quenching interaction of dyes(PDA) and central metal in NPs can be adjusted by CH_3O-PEG-phosphatide or the cancer cells, hence, NPs showed turn-on fluorescence emission with the titration of CH_3O-PEG-phosphatide. In particular, breast cancer cells lysis can switch on the green emission greatly, while normal cells show less effect. Breast cancer cells turn-on fluorescence imaging and mitochondria targeting imaging demonstrate that the NPs can sense breast cancer cells and enter mitochondria. Therefore, NPs can be both breast cancer targeting nanosensor. 展开更多
关键词 Activable sensor protein-inorganic nanoparticle Cancer CH3O-PEG-phosphatide ATTENUATOR
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蛋白质即时检测新技术 被引量:1
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作者 康秀芝 陈悦 +3 位作者 田宇琳 刘梦竹 孙晶 郎明非 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第1期233-241,共9页
蛋白质是细胞各类代谢和调控等生命功能的执行者,也是致病因子、药物等对机体作用的重要靶分子。研究蛋白质表达是理解生命现象、疾病进程和药物作用的基础。临床上常规检测方法需要大型仪器支持,但随着医学事业的发展,即时检测(POCT,... 蛋白质是细胞各类代谢和调控等生命功能的执行者,也是致病因子、药物等对机体作用的重要靶分子。研究蛋白质表达是理解生命现象、疾病进程和药物作用的基础。临床上常规检测方法需要大型仪器支持,但随着医学事业的发展,即时检测(POCT,也称现场检测、床旁检测)成为重要的发展趋势。POCT可以改善患者和医生之间的互动方式,建立一种积极的医疗模式。除诊断、治疗疾病外,对从事应急工作的人员来说,POCT在现场和远程检测方面都有优势,因此研发既准确灵敏又简便快捷的蛋白质即时检测方法至关重要。 展开更多
关键词 即时检测 蛋白质检测 微流控 电化学传感器 可穿戴设备 纳米材料 智能设备
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Bioelectronic protein nanowire sensors for ammonia detection 被引量:2
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作者 Alexander F.Smith Xiaomeng Liu +5 位作者 Trevor L.Woodard Tianda Fu Todd Emrick Juan M.Jiménez Derek R.Lovley Jun Yao 《Nano Research》 SCIE EI CAS CSCD 2020年第5期1479-1484,共6页
Electronic sensors based on biomaterials can lead to novel green technologies that are low cost,renewable,and eco-friendly.Here we demonstrate bioelectronic ammonia sensors made from protein nanowires harvested from t... Electronic sensors based on biomaterials can lead to novel green technologies that are low cost,renewable,and eco-friendly.Here we demonstrate bioelectronic ammonia sensors made from protein nanowires harvested from the microorganism Geobacter sulfurreducens.The nanowire sensor responds to a broad range of ammonia concentrations(10 to 10^6 ppb),which covers the range relevant for industrial,environmental,and biomedical applications.The sensor also demonstrates high selectivity to ammonia compared to moisture and other common gases found in human breath.These results provide a proof-of-concept demonstration for developing protein nanowire based gas sensors for applications in industry,agriculture,environmental monitoring,and healthcare. 展开更多
关键词 NANOWIRE protein nanowire biomaterial BIOELECTRONICS BIOsensor ammonia sensor
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微流路中利用DNA选择性固定蛋白质(英文) 被引量:2
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作者 郭素 薛面起 +2 位作者 钱民协 曹廷炳 赵新生 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1827-1830,共4页
报道了一种可控的通过DNA复合物在微流路中杂交固定蛋白质的方法.微流路系统中的玻璃基底上固定寡聚核苷酸,其中的层流提供了不同的DNA-蛋白质复合物.DNA的特异性识别可以将蛋白通过表面寻址固定在基底上.并且在体系中引入了全内反射荧... 报道了一种可控的通过DNA复合物在微流路中杂交固定蛋白质的方法.微流路系统中的玻璃基底上固定寡聚核苷酸,其中的层流提供了不同的DNA-蛋白质复合物.DNA的特异性识别可以将蛋白通过表面寻址固定在基底上.并且在体系中引入了全内反射荧光技术来追踪整个过程.此方法的特异性和灵敏度均较高,且蛋白质的固定和去除可重复.实验结果显示,同时检测特异性和非特异性的识别,可以有效提高生物检测的准确性.这项技术可以提高具有微流路结构的生物传感器装置的检测质量. 展开更多
关键词 微流路 蛋白质传感器 DNA引导的固定 全内反射荧光
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蛋白类食品新鲜度的检测方法 被引量:2
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作者 刘兴海 李月童 +1 位作者 邱诗波 刘玲红 《湖南包装》 2021年第2期5-8,12,共5页
食品安全的重要性不言而喻,食品新鲜度受到人们的广泛关注,因而研究食品新鲜度的检测方法对保障食品安全有着重要意义。与色谱、光谱和质谱等检测手段相比,传感检测技术具有准确、简便、快捷和成本低等优势,成为食品新鲜度检测的发展趋... 食品安全的重要性不言而喻,食品新鲜度受到人们的广泛关注,因而研究食品新鲜度的检测方法对保障食品安全有着重要意义。与色谱、光谱和质谱等检测手段相比,传感检测技术具有准确、简便、快捷和成本低等优势,成为食品新鲜度检测的发展趋势。高蛋白质类食物在腐败变质过程中会产生生物胺、挥发性盐基总氮(Total Volatile Basic Nitrogen,TVB-N)、氨气等挥发物和微生物代谢产物,新型传感技术通过检测这些物质的含量实现对食品新鲜度的检测。文章分析介绍了现有的3类传感检测技术(比率荧光型传感技术、生物胺比色传感技术和智能氨气传感器技术)的原理、特点及应用等。 展开更多
关键词 食品安全 蛋白类食品 新鲜度检测 传感检测
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Label-free Fluorescent Sensor for Probing Heparin-Protein Interaction Based on Supramolecular Assemblies
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作者 Lan Jia Lingyun Xu +2 位作者 Zhaohui Wang Jianping Xu Jian Ji 《Chinese Journal of Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2014年第1期85-90,共6页
In this paper a label-free fluorescent sensor for probing the interaction between heparin and protein was reported.Heparin,the bioactive polyanions,formed supramolecular assemblies with cationic surfactant cetyltrimet... In this paper a label-free fluorescent sensor for probing the interaction between heparin and protein was reported.Heparin,the bioactive polyanions,formed supramolecular assemblies with cationic surfactant cetyltrimethyl ammonium bromide (CTAB).The environment-dependent dye pyrene,encapsulated in hydrophobic interiors of the supramolecular assemblies worked as the fluorescence probe.Once the heparin-binding protein was added,competing interactions of protein with heparin would weaken the interaction between CTAB and heparin.As a result,the noncovalently sequestered pyrene would be released upon disassembly and the fluorescence of the released pyrene was subsequently decreased.The binding events were exemplified by protamine and Tat peptide,these processes were also verified by DLS and TEM.Such a strategy is appealing as organic synthesis was traded off against supramolecular assembly.This label-free fluorescent system is simple,selective,convenient,and can serve as a good complement to other existing methods,also this method has the potential for preprimary drug screening. 展开更多
关键词 supramolecular assemblies fluorescent sensor HEPARIN protein INTERACTION
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Study on an electrochemical biosensor for thrombin recognition based on aptamers and nano particles
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作者 ZHENG Jing LIN Li +4 位作者 CHENG GuiFang WANG AnBao TAN XueLian HE PinGang FANG YuZhi 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 2007年第3期351-357,共7页
This paper presents a high specific, sensitive electrochemical biosensor for recognition of protein such as thrombin based on aptamers and nano particles. Two different aptamers were chosen to construct a sandwich man... This paper presents a high specific, sensitive electrochemical biosensor for recognition of protein such as thrombin based on aptamers and nano particles. Two different aptamers were chosen to construct a sandwich manner for detecting thrombin. Aptamer I was immobilized on nano magnetic particle for capturing thrombin, and aptamer II labled with nano gold was used for detection. The electrical current generated from gold after the formation of the complex of magnetic particle, thrombin and nano gold, and then an electrochemical cell designed by ourselves was used for separating, gathering, and electrochemical detecting. Through magnetic separation, high specific and sensitive detection of the target protein, thrombin, was achieved. Linear response was observed over the range 5.6×10-12―1.12×10-9 mol/L, with a detection limit of 1.42×10-12 mol/L. The presence of other protein as BSA did not affect the detection, which indicates that high selective recognition of thrombin can be achieved in complex biological samples such as human plasma. 展开更多
关键词 aptamers NANO PARTICLES protein ELECTROCHEMICAL sensor
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基于水溶性共轭聚合物分子刷的肿瘤标志物快速检测 被引量:1
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作者 刘兴奋 华笑笑 +3 位作者 黄艳琴 冯晓苗 范曲立 黄维 《化学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期895-901,共7页
以水溶性聚对苯撑乙炔分子刷(PPEB)为传感材料,荧光素标记的多肽为识别探针,设计了一种可实现肿瘤标志物快速、灵敏检测的蛋白质传感器。PPEB的刷状结构带有大量正电荷,与带负电荷的多肽形成静电复合物,使能量供体(PPEB)与受体(荧光素)... 以水溶性聚对苯撑乙炔分子刷(PPEB)为传感材料,荧光素标记的多肽为识别探针,设计了一种可实现肿瘤标志物快速、灵敏检测的蛋白质传感器。PPEB的刷状结构带有大量正电荷,与带负电荷的多肽形成静电复合物,使能量供体(PPEB)与受体(荧光素)之间的距离较近,发生高效荧光共振能量转移(FRET)。当多肽探针被前列腺特异性抗原(PSA)识别并切割为更小的寡肽片段时,由于肽段所带电荷量和等电点的变化,其与PPEB之间的静电作用减弱,能量供体和受体之间的距离增大,FRET效率降低。该传感器对PSA的检测可在40min内完成,具有良好的特异性和灵敏度。 展开更多
关键词 共轭聚合物 蛋白质传感器 肿瘤标志物 荧光共振能量转移 前列腺特异性抗原
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AMPK细胞能量感受器研究进展 被引量:12
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作者 孙维琦 王路红 李环 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2017年第2期213-216,共4页
腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)作为体内能量感受器能感知能量改变情况.阐述了AMPK在外周组织、肝脏组织、骨骼肌和脂肪组织中的能量代谢调节及在下丘脑中枢中的神经调节等相关作用机制.
关键词 腺苷酸活化蛋白激酶 能量感受器 能量代谢
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金属有机骨架复合材料电化学生物传感器检测心肌损伤标志物应用进展
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作者 吴春艳 穆文迪 潘洪志 《国际生物医学工程杂志》 CAS 2024年第2期180-187,共8页
心脑血管疾病是全球死亡率较高的疾病之一,严重影响人类健康。临床上常通过检测心肌损伤标志物的异常数值反映心肌损伤的严重程度,并作为心肌损伤(异常)的筛查、诊断以及预后的参考指标。介绍了金属有机骨架(MOFs)材料及其复合材料的分... 心脑血管疾病是全球死亡率较高的疾病之一,严重影响人类健康。临床上常通过检测心肌损伤标志物的异常数值反映心肌损伤的严重程度,并作为心肌损伤(异常)的筛查、诊断以及预后的参考指标。介绍了金属有机骨架(MOFs)材料及其复合材料的分类,并综述了基于MOFs复合材料的电化学蛋白质传感器、电化学免疫传感器和电化学适配体传感器在检测心肌损伤标志物方面的研究进展。 展开更多
关键词 金属有机骨架材料 心肌损伤标志物 电化学蛋白质传感器 电化学免疫传感器 电化学适配体传感器
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基于常压室温等离子体诱变和高通量筛选选育L-色氨酸高产菌株
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作者 叶慧敏 杜军 +4 位作者 唐玉景 袁鑫 张铮 李璐 冀颐之 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期3201-3215,共15页
L-色氨酸是人体中不可或缺的必需氨基酸,由于其广泛的应用和国内外巨大的需求,L-色氨酸已成为备受关注的研究和产业发展方向。尽管非理性诱变育种策略是一种开发工业菌株的有效手段,但是如何筛选具有理想表型的菌株依然是一个重大挑战... L-色氨酸是人体中不可或缺的必需氨基酸,由于其广泛的应用和国内外巨大的需求,L-色氨酸已成为备受关注的研究和产业发展方向。尽管非理性诱变育种策略是一种开发工业菌株的有效手段,但是如何筛选具有理想表型的菌株依然是一个重大挑战。为了提高筛选L-色氨酸高产菌株的效率与准确性,本研究通过常压室温等离子体诱变构建随机突变文库,并结合深孔板高通量筛选,基于能够特异性响应L-色氨酸的拟荧光蛋白传感器从随机突变文库中成功筛选出一株L-色氨酸高产菌株,其产量在摇瓶中达到1.99 g/L,较出发菌株提高了41.77%。还通过基因组与转录组的比较组学分析,进一步对菌株的高产机理进行了解析。本研究基于常压室温等离子体诱变和高通量筛选策略,成功筛选出L-色氨酸高产菌株,为后续进一步选育和开发相关优质的L-色氨酸生产菌株资源提供了坚实的研究基础。 展开更多
关键词 拟荧光蛋白传感器 常压室温等离子体诱变 高通量筛选 L-色氨酸
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吸收胞外电子的电活性微生物 被引量:5
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作者 靖宪月 陈姗姗 周顺桂 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期19-27,共9页
可吸收胞外电子的电活性微生物(Electroactive microorganisms,EAMs)可利用胞外固态载体的电子将二氧化碳或其他氧化态物质还原成胞外有机物、还原态无机物或自身生命活动所需的有机物。该类EAMs的出现拓宽了人们对微生物多样性的认识,... 可吸收胞外电子的电活性微生物(Electroactive microorganisms,EAMs)可利用胞外固态载体的电子将二氧化碳或其他氧化态物质还原成胞外有机物、还原态无机物或自身生命活动所需的有机物。该类EAMs的出现拓宽了人们对微生物多样性的认识,在生物质能合成、污染物治理与化学物质检测等方面具有重要的应用价值。本文介绍了代表性的可吸收胞外电子EAMs的物质转化与电能转化率等基本特性,重点阐述该类EAMs基于膜蛋白的直接吸收电子机制,及基于电子穿梭体的间接吸收电子机制,提出了其在微生物电合成系统与微生物传感器中的应用前景,并从EAMs机理研究、生物膜微观机制及工程应用的角度展望其今后的研究方向。 展开更多
关键词 电活性微生物 吸收电子机制 膜结合蛋白 电子穿梭体 电合成系统 微生物传感器
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AMPK在缺血性脑卒中中的研究进展 被引量:5
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作者 刘伟 唐蓉 +1 位作者 张晶玉 王迎斌 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2020年第12期1422-1426,共5页
AMP激活的蛋白激酶(AMPK)是一种进化保守的丝氨酸/苏氨酸激酶,在调节全身细胞能量代谢的稳态中起着至关重要的作用。在正常生理情况下,AMPK能够促进大脑发育和调节神经元极化。在缺血性脑卒中中,AMPK的上调可以减弱氧化应激,抑制神经炎... AMP激活的蛋白激酶(AMPK)是一种进化保守的丝氨酸/苏氨酸激酶,在调节全身细胞能量代谢的稳态中起着至关重要的作用。在正常生理情况下,AMPK能够促进大脑发育和调节神经元极化。在缺血性脑卒中中,AMPK的上调可以减弱氧化应激,抑制神经炎症,调节神经元自噬和凋亡,改善线粒体功能,抑制谷氨酸兴奋性毒性和促进新生血管形成等。AMPK在缺血性脑卒中的治疗中具有促进功能恢复的作用,主要形式包括药物治疗、物理疗法和受体靶向治疗。但靶向AMPK的应用在临床中的证据和机制依然不是很充足,有待进一步研究。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 AMP激活的蛋白激酶 能量传感器 靶点 综述
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蛋白质印迹羧化多壁碳纳米管/CaAlg水凝胶膜及其修饰的电化学传感器
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作者 高欣悦 郭智龙 +5 位作者 董鹏 谢慧珂 张世潮 江坚盛 赵孔银 侯彦辉 《高分子材料科学与工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第12期111-117,共7页
文中以牛血清白蛋白(BSA)为模板、海藻酸钠(NaAlg)为功能单体,掺杂羧化多壁碳纳米管,经CaCl2溶液交联制备了BSA分子印迹羧化多壁碳纳米管/海藻酸钙(CMWCNTs/CaAlg)复合水凝胶膜(MIP),同时不用模板制备了非印迹膜(NIP),研究了CMWCNTs含... 文中以牛血清白蛋白(BSA)为模板、海藻酸钠(NaAlg)为功能单体,掺杂羧化多壁碳纳米管,经CaCl2溶液交联制备了BSA分子印迹羧化多壁碳纳米管/海藻酸钙(CMWCNTs/CaAlg)复合水凝胶膜(MIP),同时不用模板制备了非印迹膜(NIP),研究了CMWCNTs含量对膜力学性能的影响;膜厚度、洗脱液pH值对BSA吸附性能的影响。研究了MIP膜的吸附选择性。结果表明,当CMWCNTs的质量为NaAlg的2%时,水凝胶膜同时具备良好的抗溶胀性能和力学性能。膜厚度控制在0.2mm,洗脱液pH值为7.4时,MIP膜对BSA的吸附量最大,为35.04mg/g。将MIP膜负载于裸碳电极表面,循环伏安法和差分脉冲伏安法测试表明,MIP膜修饰电极对BSA表现出较高的选择识别性。 展开更多
关键词 蛋白质分子印迹 海藻酸钙水凝胶 羧化多壁碳纳米管 电化学传感器
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基于银-丝蛋白-银结构的柚子型三芯光纤痕量水传感器
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作者 谢永鹏 刘硕 +1 位作者 赵霖晚 俎群 《红外与激光工程》 EI CSCD 北大核心 2023年第8期208-218,共11页
有机溶剂中的水杂质强烈影响化学反应的进程。然而,目前检测痕量水的方法仍存在操作复杂、实验试剂毒性高、检测灵敏度低、无法实时监测等不足。为了克服这些缺点,提出了一种在可见光波长范围内银和丝蛋白结合的D型光纤传感器。该传感... 有机溶剂中的水杂质强烈影响化学反应的进程。然而,目前检测痕量水的方法仍存在操作复杂、实验试剂毒性高、检测灵敏度低、无法实时监测等不足。为了克服这些缺点,提出了一种在可见光波长范围内银和丝蛋白结合的D型光纤传感器。该传感器利用金属银和丝蛋白作为主要材料,利用二者出色的传感特性,设计了一种可见光波长的光纤传感器,用于高灵敏度有机化合物中的痕量水检测。研究结果总结如下:首先,提出了在可见光波长范围内银和丝蛋白结合的三明治结构,银被用作外部夹层来诱导表面等离子体共振效应。通过理论分析,观察到所提出的D型光纤传感器表面的双层银结构与单层银结构相比,可以诱导强光局部化。在接下来的尺寸选择过程中,对丝蛋白初始厚度、空气孔大小、银光栅的高度、数量、间距和下层银厚度进行了优化,得到了最佳传感结构,对有机物中痕量水的检测灵敏度高达1.39 nm/ppt (1 ppt=10-12),与同类型的痕量水传感器相比具有较大的优势。另外,拟合线的R^(2)大于0.999,达到了预期的效果。 展开更多
关键词 双层金属银膜 丝蛋白 痕量水传感器 表面等离子体共振
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构建多巴胺传感器检测多巴胺受体激动剂和拮抗剂
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作者 李严严 王晓彤 +2 位作者 韩奇文 陈乃宏 苑玉和 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期679-687,共9页
帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种黑质致密部多巴胺能神经元缺失或死亡的中枢神经系统退行性疾病。临床上,左旋多巴是治疗PD最有效也最常用的药物。然而,长期服用左旋多巴易出现运动并发症以及因外周多巴胺累积导致的其他不良反... 帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种黑质致密部多巴胺能神经元缺失或死亡的中枢神经系统退行性疾病。临床上,左旋多巴是治疗PD最有效也最常用的药物。然而,长期服用左旋多巴易出现运动并发症以及因外周多巴胺累积导致的其他不良反应,成为PD治疗亟待解决的问题。多巴胺受体激动剂与多巴胺功能相似,能直接刺激突触后多巴胺受体,尽可能延缓左旋多巴的使用,减少长期服用左旋多巴引起的并发症。因此,筛选有效的多巴胺受体激动剂成为研究和治疗PD的关键问题。为建立快速、稳定、可靠的多巴胺受体激动剂筛选方法,本研究将人2型多巴胺受体(dopamine receptor 2,DRD2)基因与环状绿色荧光报告基因(circular permuted EGFP,cpEGFP)融合构建重组基因,用慢病毒载体包装,该载体置换基因编码的G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPCR)激活传感器的胞内3环(the third intracellular loop,ICL3)内部跨膜结构域,在不改变GPCR活性的基础上,通过多巴胺受体激动剂与GPCR相互作用介导的构象变化调节GPCR融合的cpEGFP荧光。病毒载体感染HEK293T细胞,通过嘌呤霉素筛选后,获得高表达DRD2的细胞株,并用多巴胺受体激动剂作为阳性药(包括多巴胺、甲磺酸溴隐亭、卡麦角林、普拉克索)摸索最佳筛选和检测条件,建立稳定的多巴胺受体激动剂筛选模型。结果显示,本研究建立的多巴胺受体激动剂筛选模型能够检测到多梯度细胞接种密度下的药物活性,而且在多巴胺、甲磺酸溴隐亭、卡麦角林和普拉克索浓度很低(最低约0.1μmol·L^(-1))的情况下也能检测到阳性信号。经多次实验显示,本研究构建的模型最佳筛选条件:细胞接种数为7×10^(4)个,多巴胺受体激动剂阳性药的有效浓度为1~100μmol·L^(-1)均有较好的检测效果。此外,本研究先加入10μmol·L^(-1)多巴胺受体拮抗剂(包括盐酸氯普噻吨、多潘立酮� 展开更多
关键词 帕金森病 G蛋白偶联受体 多巴胺传感器 多巴胺受体激动剂 多巴胺受体拮抗剂 药物筛选
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Structure-Function Analysis of Arabidopsis thaliana Histidine Kinase AHK5 Bound to Its Cognate Phosphotransfer Protein AHP1 被引量:2
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作者 Johannes Bauer Kerstin Reiss +3 位作者 Manikandan Veerabagu Michael Heunemann Klaus Harter Thilo Stehle 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2013年第3期959-970,共12页
The multi-step phosphorelay (MSP) system defines a key signal transduction pathway in plants and many eukaryotes. In this system, external stimuli first lead to the activation of a histidine kinase, followed by tran... The multi-step phosphorelay (MSP) system defines a key signal transduction pathway in plants and many eukaryotes. In this system, external stimuli first lead to the activation of a histidine kinase, followed by transfer of a phosphoryl group from the receiver domain of the kinase (HKRD) to downstream, cytosolic phosphotransfer proteins (HPs). In order to establish the determinants of specificity for this signaling relay system, we have solved the first crystal structure of a plant HKRD, AHK5RD, in complex with one of its cognate HPs, AHP1. AHP1 binds AHK5RD via a prominent hydrogen bond docking ridge and a hydrophobic patch. These features are conserved among all AHP proteins, but differ significantly from other structurally characterized prokaryotic and eukaryotic HPs. Surface plasmon resonance experiments show that AHK5RD binds to AHP1-3 with similar, micromolar affinity, consistent with the transient nature of this signaling complex. Our correlation of structural and functional data provide the first insight, at the atomic level as well as with quantitative affinity data, into the molecular recognition events governing the MSP in plants. 展开更多
关键词 multi-step phosphorelay phosphotransfer protein plant signaling sensor histidine kinase two-component system.
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