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小麦花药蛋白质组双向电泳技术体系的优化 被引量:42
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作者 陈蕊红 张改生 +2 位作者 刘卫 叶景秀 牛娜 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期404-409,共6页
以小麦单核期花药为材料,比较了两种不同蛋白质提取方法TCA/丙酮法和酚提取法及不同的蛋白质裂解液组成对双向电泳的影响,并在蛋白质上样量和SDS-PAGE胶浓度等方面也进行了探索与优化。结果表明,采用TCA/丙酮提取法比用酚提取法提取的... 以小麦单核期花药为材料,比较了两种不同蛋白质提取方法TCA/丙酮法和酚提取法及不同的蛋白质裂解液组成对双向电泳的影响,并在蛋白质上样量和SDS-PAGE胶浓度等方面也进行了探索与优化。结果表明,采用TCA/丙酮提取法比用酚提取法提取的蛋白质所得的2-DE胶图谱上蛋白质点数增加,图谱背景也比较清晰;样品溶解于含有硫脲和TBP的蛋白质裂解液Ⅱ中,可显著提高蛋白质的溶解性,在2-DE图谱上可分辨出554个蛋白质点,比用蛋白质裂解液Ⅰ提取的蛋白多39个点。以TCA-丙酮法提取小麦花药组织中的蛋白,用蛋白质裂解液Ⅱ[7mol/L尿素、2mol/L硫脲、4%CHAPS、2%TBP、65mmol/L DTT、0.2%载体两性电解质(其中0.1%pH 3-10,0.1%pH4-6)]溶解蛋白,以pH4-7线性17cm的IPG胶条进行双向凝胶电泳,在上样量为800μg,13%SDS-PAGE胶浓度下,蛋白质得到了更好的分离,2-DE图谱上可分辨出631个蛋白点,图谱质量最佳。优化后的双向电泳技术体系,适合于小麦花药全蛋白质的双向电泳分析。 展开更多
关键词 小麦 花药蛋白 蛋白质提取方法 蛋白质裂解液 双向电泳技术
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适于双向电泳分析的苹果叶片蛋白质提取方法 被引量:14
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作者 曾广娟 李春敏 +2 位作者 张新忠 滕云龙 董文轩 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期484-488,共5页
为了探索适用于双向电泳(2-DE)分析的苹果叶片蛋白质提取方法,比较了三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法、二硫苏糖醇(DTT)/丙酮法、Tris-HCl提取法和改良的Tris-HCl提取法等4种蛋白质提取方法。以7cm、pH3-10的线性固相pH梯度(immobilize... 为了探索适用于双向电泳(2-DE)分析的苹果叶片蛋白质提取方法,比较了三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法、二硫苏糖醇(DTT)/丙酮法、Tris-HCl提取法和改良的Tris-HCl提取法等4种蛋白质提取方法。以7cm、pH3-10的线性固相pH梯度(immobilized pH gradient,IPG)胶条作为第一向电泳,以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)(12.5%的分离胶)作为第二向电泳,对提取物进行2-DE分离,采用银染显色。结果表明,上述4种方法在2-DE图谱上分别得到140,215,181和616个蛋白质点。其中以改良的Tris-HCl提取法得到的蛋白质点数最多,且背景清晰、图谱上没有明显的横纵条纹。为了进一步验证改良的Tris-HCl提取法的有效性,用18cm、pH3-10的线性IPG胶条和12.5%的分离胶对提取的苹果叶片蛋白质进行2-DE分离,考马斯亮蓝R-250染色,共检测到455个蛋白质点,其相对分子质量主要分布在14000-66000范围内,图谱背景清晰,再次证明应用该方法制备的样品适用于双向电泳分析,可用于苹果叶片的蛋白质组学分析。 展开更多
关键词 双向电泳 蛋白质提取方法 苹果叶片 蛋白质组学分析
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响应面法优化脱脂米糠蛋白提取工艺 被引量:12
3
作者 张慧娟 张晖 +1 位作者 王立 郭晓娜 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期26-29,共4页
以脱脂米糠为原料,利用响应面法研究了碱性蛋白酶的酶解温度、酶解时间、pH以及酶加量对脱脂米糠蛋白提取率的影响。结果表明回归模型能很好地反映各因素水平与响应值之间的关系,同时得出最佳的提取条件为:温度60℃,时间2.14 h,pH 9.48... 以脱脂米糠为原料,利用响应面法研究了碱性蛋白酶的酶解温度、酶解时间、pH以及酶加量对脱脂米糠蛋白提取率的影响。结果表明回归模型能很好地反映各因素水平与响应值之间的关系,同时得出最佳的提取条件为:温度60℃,时间2.14 h,pH 9.48,酶加量250 U/g。此时理论蛋白提取率为81%,实际测定蛋白提取率为79.84%,蛋白制品纯度为65.32%。 展开更多
关键词 脱脂米糠 酶处理 蛋白提取 响应面法
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菜籽蛋白提取工艺的优化 被引量:12
4
作者 戴宇翔 钱志娟 +2 位作者 曾晓雄 王乃富 李春阳 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期304-306,共3页
以脱脂菜籽粕为原料,利用碱液提取菜籽粕中的蛋白质,采用Plackett Burman实验设计筛选出对蛋白提取具有显著影响的因子:pH(p=0.0348)、温度(p=0.0383)和提取次数(p=0.0090);采用响应曲面法优化,得到最佳工艺条件为:pH11、温度52℃和提取... 以脱脂菜籽粕为原料,利用碱液提取菜籽粕中的蛋白质,采用Plackett Burman实验设计筛选出对蛋白提取具有显著影响的因子:pH(p=0.0348)、温度(p=0.0383)和提取次数(p=0.0090);采用响应曲面法优化,得到最佳工艺条件为:pH11、温度52℃和提取2次,同时建立了碱提蛋白的二次多项数学模型,对菜籽蛋白提取具有很好的预测作用。 展开更多
关键词 菜籽粕 蛋白提取 Plackett Burman实验设计 响应曲面法
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传统发酵永川毛霉型豆豉蛋白质提取方法比较与降解规律研究 被引量:8
5
作者 索化夷 骞宇 阚建全 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第23期180-183,共4页
比较TCA/丙酮沉淀法、酚提取法、Tris-HCl法、匀浆法4种方法对样本进行蛋白质提取的效果,研究毛霉豆豉在不同发酵阶段蛋白质的降解过程。结果表明:TCA/丙酮沉淀法适用于基于SDS-PAGE电泳的豆豉蛋白质提取。毛霉型豆豉大分子蛋白在前发... 比较TCA/丙酮沉淀法、酚提取法、Tris-HCl法、匀浆法4种方法对样本进行蛋白质提取的效果,研究毛霉豆豉在不同发酵阶段蛋白质的降解过程。结果表明:TCA/丙酮沉淀法适用于基于SDS-PAGE电泳的豆豉蛋白质提取。毛霉型豆豉大分子蛋白在前发酵过程中经蒸煮和毛霉分泌的蛋白酶作用后快速降解成小分子蛋白,其中蒸煮对大分子的蛋白影响最大。 展开更多
关键词 永川豆豉 蛋白质提取 方法 降解
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榛蘑蛋白提取工艺的优化研究 被引量:3
6
作者 张倩 张文博 +4 位作者 陈滢竹 姜旭 汤璐 王刚 李艳丽 《中国调味品》 CAS 北大核心 2023年第5期118-124,共7页
蛋白质是一种保证机体健康的营养物质,具有多种功效。以榛蘑粉末为原料,榛蘑蛋白提取率为指标,采用碱提和超声分步提取榛蘑蛋白,利用响应面法优化榛蘑蛋白提取工艺,等电点法和盐析法相结合沉淀榛蘑蛋白。结果表明,液料比47∶1、碱提pH 1... 蛋白质是一种保证机体健康的营养物质,具有多种功效。以榛蘑粉末为原料,榛蘑蛋白提取率为指标,采用碱提和超声分步提取榛蘑蛋白,利用响应面法优化榛蘑蛋白提取工艺,等电点法和盐析法相结合沉淀榛蘑蛋白。结果表明,液料比47∶1、碱提pH 10.0、碱提时间1.55 h、碱提温度80℃、超声功率200 W、超声pH 9.0、超声温度30℃的条件下,榛蘑蛋白的提取率为(76.59±0.23)%。榛蘑蛋白质沉淀的方法为先进行等电点沉淀(pI=3.7),然后用90%的饱和硫酸铵进行盐析。试验表明碱提和超声分步提取的方法与传统碱提法相比,可有效提高蛋白提取率。等电点法结合盐析法可提高蛋白得率。该试验结果为榛蘑蛋白的开发利用奠定了基础。 展开更多
关键词 榛蘑 蛋白提取 响应面法 等电点法 盐析法
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响应面法优化苦荞麸皮粉蛋白质提取工艺 被引量:5
7
作者 吴兰兰 吴伟菁 +1 位作者 王立博 李建华 《中国食物与营养》 2022年第3期39-44,共6页
目的:分析苦荞麸皮粉中蛋白含量及其蛋白组成。方法:采用碱法提取-等电点沉淀分离蛋白。在单因素试验基础上,选取料液比(w/v)、pH、时间等3个影响因素,采用响应面法(Box-Behnken中心组合)优化苦荞麸皮粉蛋白提取工艺。结果:料液比、pH... 目的:分析苦荞麸皮粉中蛋白含量及其蛋白组成。方法:采用碱法提取-等电点沉淀分离蛋白。在单因素试验基础上,选取料液比(w/v)、pH、时间等3个影响因素,采用响应面法(Box-Behnken中心组合)优化苦荞麸皮粉蛋白提取工艺。结果:料液比、pH、时间对麸皮蛋白提率有显著影响,影响顺序为料液比>pH>时间。响应面优化得到最佳提取条件为pH 10.5、料液比1∶35、时间3 h 40 min,此条件下苦荞麸皮蛋白提取率为(97.31±4.64)%。结论:本研究为有效开发利用苦荞麸皮粉的蛋白提供科学依据。 展开更多
关键词 苦荞麸皮粉 蛋白提取 PH 料液比 时间 响应面法
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土壤宏蛋白质组学蛋白质提取方法及其应用 被引量:5
8
作者 王小丽 GONZALEZ PEREZ Pablo +1 位作者 叶俊 黄丹枫 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期691-696,共6页
土壤宏蛋白质组学在揭示土壤微生物功能、代谢与环境相互作用方面具有广阔的应用前景,但由于土壤样品的特殊性,土壤蛋白质提取步骤是限制土壤宏蛋白质组学大规模应用的瓶颈之一.本文从样品制备、提取方法、影响因素等方面综述了土壤蛋... 土壤宏蛋白质组学在揭示土壤微生物功能、代谢与环境相互作用方面具有广阔的应用前景,但由于土壤样品的特殊性,土壤蛋白质提取步骤是限制土壤宏蛋白质组学大规模应用的瓶颈之一.本文从样品制备、提取方法、影响因素等方面综述了土壤蛋白提取方面的研究进展.一般来说,根据实验目的、蛋白种类及后续研究方法设计相应的分组成收集策略才能取得较好的提取效果.土壤总蛋白、胞内蛋白与胞外蛋白分别有不同的提取方法.总蛋白提取一般采用直接提取法;胞外蛋白不需要裂解;胞内蛋白提取方法有直接提取法和间接提取法等.裂解、浓缩、去除腐殖质的方法以及提取液、pH值的选择等也会影响提取效果.此外,简单介绍了土壤宏蛋白质组学的应用,并对今后的研究工作提出展望. 展开更多
关键词 土壤微生物 宏蛋白质组学 蛋白质提取方法 应用
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文冠果枝条韧皮部蛋白质双向电泳体系的建立 被引量:4
9
作者 刘昭军 张胜 +2 位作者 赵忠 张博勇 宗建伟 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2012年第3期55-61,共7页
以文冠果当年生硬枝韧皮部为材料,通过TCA/丙酮法提取总蛋白,研究了不同的蛋白质裂解液组成对双向电泳的影响,并在胶条选择、蛋白质上样量和等电聚焦时间等方面进行了优化。结果表明,TCA/丙酮提取法适用于提取文冠果韧皮部组织总蛋白,... 以文冠果当年生硬枝韧皮部为材料,通过TCA/丙酮法提取总蛋白,研究了不同的蛋白质裂解液组成对双向电泳的影响,并在胶条选择、蛋白质上样量和等电聚焦时间等方面进行了优化。结果表明,TCA/丙酮提取法适用于提取文冠果韧皮部组织总蛋白,得到的图谱背景低,蛋白质点清晰;样品溶解于含有尿素和硫脲的蛋白质裂解液Ⅱ中,可显著地提高蛋白质的溶解性,获得的总蛋白溶液浓度远大于裂解液Ⅰ提取的总蛋白溶液浓度。在适宜的时间范围用超声波破碎仪处理蛋白质粉溶液有助于大幅度提高裂解液中蛋白质的浓度。等电聚焦条件宜根据样品特性选择,80 000Vh能够使得文冠果韧皮部蛋白质双向凝胶碱性端的横条纹大大减少。 展开更多
关键词 文冠果 韧皮部 蛋白质提取方法 蛋白质裂解液 双向电泳技术
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元宝枫籽油饼粕蛋白的提取工艺研究
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作者 宋艳丽 王晓洁 +1 位作者 鲍诚 卞菲菲 《鲁东大学学报(自然科学版)》 2023年第3期258-263,共6页
本研究采用不同方法从元宝枫籽油饼粕中提取蛋白并脱盐,以蛋白提取率、纯度和脱盐率为指标,选择最佳蛋白质提取工艺。不同的蛋白质提取方法中,采用Osborne法、盐析法、碱溶酸沉法、酸沉碱溶法的粕蛋白提取率和纯度分别为63.95%和73.12%... 本研究采用不同方法从元宝枫籽油饼粕中提取蛋白并脱盐,以蛋白提取率、纯度和脱盐率为指标,选择最佳蛋白质提取工艺。不同的蛋白质提取方法中,采用Osborne法、盐析法、碱溶酸沉法、酸沉碱溶法的粕蛋白提取率和纯度分别为63.95%和73.12%、29.91%和87.74%、28.78%和84.52%、20.96%和54.59%,其中Osborne法的提取效果最好。提纯后,采用透析法对Osborne法提取的蛋白溶液进行脱盐研究,结果显示,粕蛋白溶液在4℃下透析3 h,脱盐率为38.8%,蛋白纯度为61.78%,脱盐效果和蛋白纯度综合最优。 展开更多
关键词 蛋白提取 碱溶法 Osborne法 盐析法 脱盐
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适用于双向电泳的杨树叶片蛋白质提取方法的研究 被引量:4
11
作者 严冬 刘殿昆 +4 位作者 司冬晶 郑密 赵曦阳 曲冠证 李莹 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期469-475,共7页
为了获得分离效果好、清晰度高的杨树叶片蛋白质双向电泳图像,本研究以小黑杨、毛果杨和84K杨叶片为材料,采用三氯乙酸—丙酮沉淀法、Tris-饱和酚法和Tris-三氯乙酸法提取杨树叶片总蛋白质,分别采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和双向凝胶电泳对... 为了获得分离效果好、清晰度高的杨树叶片蛋白质双向电泳图像,本研究以小黑杨、毛果杨和84K杨叶片为材料,采用三氯乙酸—丙酮沉淀法、Tris-饱和酚法和Tris-三氯乙酸法提取杨树叶片总蛋白质,分别采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和双向凝胶电泳对蛋白质进行分离,应用Image Master 2D Platinum 6.0软件对这3种蛋白质提取方法得到的双向电泳凝胶进行分析。结果表明:Tris-三氯乙酸法最适用于双向电泳的杨树叶片蛋白质的提取。利用Tris-三氯乙酸法提取蛋白质得到的鲜样中总蛋白质平均含量为949.46μg·g-1,得到的蛋白质点平均数量为567个,所得到的双向电泳凝胶图谱分离效果好、清晰度高。 展开更多
关键词 杨树叶片 Tris-三氯乙酸法 蛋白质提取 双向凝胶电泳
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响应面法优化微波辅助提取蛤蟆草蛋白工艺研究 被引量:4
12
作者 李西腾 皮林林 +2 位作者 张佳佳 李帅 曹献鑫 《食品工业》 CAS 北大核心 2019年第1期52-55,共4页
以蛤蟆草为原料,以蛋白提取量为指标,采用微波辅助提取蛤蟆草中蛋白。分别研究了液料比、微波功率、微波提取时间、乙醇体积分数对蛋白提取量的影响,通过响应面试验优化了提取工艺。结果表明,蛤蟆草蛋白提取的较佳工艺条件是:液料比50︰... 以蛤蟆草为原料,以蛋白提取量为指标,采用微波辅助提取蛤蟆草中蛋白。分别研究了液料比、微波功率、微波提取时间、乙醇体积分数对蛋白提取量的影响,通过响应面试验优化了提取工艺。结果表明,蛤蟆草蛋白提取的较佳工艺条件是:液料比50︰1 mL/g,微波功率460 W,微波提取时间3 min,乙醇体积分数60%。在该条件下,蛤蟆草蛋白的提取量为1.86 mg/g。 展开更多
关键词 蛤蟆草 蛋白提取 微波辅助 响应面法
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银耳芽孢总蛋白提取方法的建立 被引量:4
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作者 刘洋 朱涵予 +2 位作者 许丹云 张丽姣 马爱民 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第9期35-39,共5页
采用超声波与高压均质破碎细胞,通过显微观察细胞破碎效果、Bradford法测定蛋白含量并进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,比较了三羟甲基氨基甲烷(tris(hydroxymethyl)methyl?aminomethane,Tris)-饱和酚法、三氯乙酸(trichloro... 采用超声波与高压均质破碎细胞,通过显微观察细胞破碎效果、Bradford法测定蛋白含量并进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,比较了三羟甲基氨基甲烷(tris(hydroxymethyl)methyl?aminomethane,Tris)-饱和酚法、三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)-丙酮沉淀法及Tris-饱和酚结合TCA-丙酮沉淀法提取银耳芽孢总蛋白的效果。结果表明:高压均质的细胞破碎效果优于超声波,3种方法所得到的银耳芽孢总蛋白质量浓度分别为2.33、1.26、1.02 mg/m L,且Tris-饱和酚法经传统考马斯亮蓝染色法染色所得电泳条带亮度及清晰度均优于其他两种方法。因此,Tris-饱和酚法是进行银耳芽孢总蛋白提取的一种有效方法。 展开更多
关键词 银耳 芽孢 蛋白提取方法
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旋转中心设计优化土党参蛋白质提取工艺 被引量:3
14
作者 陈致印 罗莹 +2 位作者 刘广军 李魏巍 谭显胜 《上海农业学报》 CSCD 2017年第5期93-98,共6页
在单因素试验的基础上,选取pH、时间、液料比作为考察因素,利用Design-Expert 8.05b软件进行Box-Behnken旋转中心组合优化设计,响应面分析,确定微波提取土党参中蛋白质的最佳工艺参数为:提取时间6.41 min,pH 7.77,液料比26.1:1(mL/g),... 在单因素试验的基础上,选取pH、时间、液料比作为考察因素,利用Design-Expert 8.05b软件进行Box-Behnken旋转中心组合优化设计,响应面分析,确定微波提取土党参中蛋白质的最佳工艺参数为:提取时间6.41 min,pH 7.77,液料比26.1:1(mL/g),预测土党参中蛋白质提取率达到10.62%。试验证实该方法具有提取率高、耗能少的特点。 展开更多
关键词 土党参 蛋白质提取 BOX-BEHNKEN设计 响应面法
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甜菜双向电泳体系条件的优化 被引量:2
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作者 张辉 白晨 +7 位作者 王华忠 张惠忠 李晓东 付增娟 赵尚敏 鄂圆圆 张自强 王良 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期112-116,共5页
为了获得甜菜叶片双向电泳中蛋白质最佳提取方法,建立甜菜叶片蛋白质双向电泳最佳的双向电泳体系。以甜菜叶片为材料,通过比较分析,研究甜菜叶片总蛋白提取方法、IPG胶条pH值及其对应上样量等因素对甜菜叶片蛋白质双向电泳结果的影响。... 为了获得甜菜叶片双向电泳中蛋白质最佳提取方法,建立甜菜叶片蛋白质双向电泳最佳的双向电泳体系。以甜菜叶片为材料,通过比较分析,研究甜菜叶片总蛋白提取方法、IPG胶条pH值及其对应上样量等因素对甜菜叶片蛋白质双向电泳结果的影响。结果表明:酚提取法、TCA/丙酮提取法和可溶性蛋白提取法3种蛋白提取方法中TCA/丙酮法提取效果较好,pH值4~7与pH值5~8的双向蛋白电泳比较发现:pH值4~7胶条蛋白点清晰且在图谱上的蛋白点分布均匀,无蛋白点集中现象,更适合甜菜叶片的蛋白质组分析。采用7 cm线性固相IPG胶条进行双向电泳,150μg上样量蛋白点明显增多,双向电泳效果更好,pH值4~7的17 cm胶条300μg上样量胶点更多更清晰,试验结果为甜菜蛋白质组学的研究提供了最佳的试验方法。 展开更多
关键词 甜菜 蛋白质提取方法 双向电泳 体系优化
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叶用莴苣叶片总蛋白质双向电泳影响因素的研究 被引量:2
16
作者 陈曙红 韩莹琰 +1 位作者 范双喜 李洋 《北京农学院学报》 2012年第2期14-16,共3页
以叶用莴苣叶片为试材,研究17cm固相pH梯度胶条(pH 4~7)体系下双向电泳不同的提取方法、上样体积、定量方法等影响因素,力求确定其理想的双向电泳条件。结果表明,酚-甲醇/醋酸铵沉淀法对蛋白质提取更彻底,效果更好。对于蛋白质定量的试... 以叶用莴苣叶片为试材,研究17cm固相pH梯度胶条(pH 4~7)体系下双向电泳不同的提取方法、上样体积、定量方法等影响因素,力求确定其理想的双向电泳条件。结果表明,酚-甲醇/醋酸铵沉淀法对蛋白质提取更彻底,效果更好。对于蛋白质定量的试验,相比于常规的Bradford方法,利用无干扰蛋白质定量试剂盒具有更好的准确性。考虑叶片总蛋白质中大量Rubisco的存在,应相对增加上样量,采用考马斯亮蓝染色时取800μg到1 100μg蛋白质进行双向电泳比较合理。 展开更多
关键词 叶用莴苣 叶片 蛋白质提取方法 双向电泳技术
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蛋白分离方式对鱼肉蛋白质组成和功能特性的影响
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作者 石柳 周俊鹏 +2 位作者 章蔚 杨宏 汪兰 《现代农业装备》 2019年第5期64-71,共8页
为了研究2种不同蛋白分离方式对蛋白质组成和功能特性的影响,以白鲢背部肌肉、漂洗鱼糜蛋白和ISP分离蛋白为研究对象,研究其氨基酸组成、蛋白质模式、粒径分布、Zeta电位、保水性、乳化性和表面疏水性的差异。结果表明,与白鲢背部肌肉相... 为了研究2种不同蛋白分离方式对蛋白质组成和功能特性的影响,以白鲢背部肌肉、漂洗鱼糜蛋白和ISP分离蛋白为研究对象,研究其氨基酸组成、蛋白质模式、粒径分布、Zeta电位、保水性、乳化性和表面疏水性的差异。结果表明,与白鲢背部肌肉相比,ISP分离蛋白的总氨基酸含量没有损失,而漂洗鱼糜蛋白的总氨基酸含量减少;SDS-PAGE凝胶电泳表明,与背部肌肉的蛋白质组成相比,漂洗方式会使鱼肉的40kDa原肌球蛋白(TM)、50kDa肌钙蛋白(TN)和25kDa肌球蛋白轻链(MLC)消失,而ISP蛋白分离法没有造成明显的组分损失。在蛋白质的功能特性方面,ISP提取蛋白的粒径分布范围较漂洗鱼糜蛋白广,而Zeta电位二者间没有显著性差异(p>0.05);漂洗鱼糜蛋白其持水性显著高于ISP提取蛋白(p<0.05);ISP提取蛋白乳化活性指数(EAI)显著低于漂洗鱼糜蛋白,但其乳化稳定指数(ESI)显著高于漂洗鱼糜蛋白(p<0.05);ISP提取蛋白的表面疏水性(S0-ANS)显著高于漂洗鱼糜蛋白(p<0.05)。综合分析可知,蛋白分离方式会显著影响鱼肉蛋白质的组成,且ISP蛋白分离方式一定程度上改善了鱼肉蛋白的功能特性。 展开更多
关键词 蛋白分离方式 等电沉淀法 漂洗法 蛋白质组成 功能特性
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成纤维细胞激活蛋白在小鼠心脏组织中时程表达变化及内肽酶活性测定
18
作者 廉虹 刘维静 聂宇 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2020年第3期3408-3411,共4页
目的了解小鼠出生后成纤维细胞激活蛋白(Fap)蛋白在心脏组织中的表达情况以及对其内肽酶活性进行测定。方法将1天、4天、7天、14天、21天、2月龄C57小鼠心肌组织进行取材,提取RNA和蛋白质,通过qPCR和Western blot方法检测Fap表达;分别通... 目的了解小鼠出生后成纤维细胞激活蛋白(Fap)蛋白在心脏组织中的表达情况以及对其内肽酶活性进行测定。方法将1天、4天、7天、14天、21天、2月龄C57小鼠心肌组织进行取材,提取RNA和蛋白质,通过qPCR和Western blot方法检测Fap表达;分别通过RIPA裂解法、PBS研磨法和膜蛋白提取试剂盒提取小鼠心脏组织蛋白,测定Fap蛋白内肽酶活性曲线。结果生理情况下Fap在出生后的发育过程中蛋白表达逐渐升高,离乳后到成年期达到稳定状态;通过三种提取蛋白方法得到的酶活力曲线,确定三种蛋白提取方法对Fap蛋白内肽酶活性的测定无明显差异。结论在小鼠出生后Fap蛋白在心肌组织中表达量不断升高并在离乳后保持稳定;Fap内肽酶活性不受蛋白提取方法的影响,提示Fap的内肽酶活性中心很稳定。 展开更多
关键词 成纤维细胞激活蛋白 蛋白提取方法 内肽酶活性
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热稳定脱脂米糠蛋白质碳水化合物酶-蛋白酶分步提取法酶的筛选和条件优化
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作者 廖世鹏 唐善虎 +5 位作者 刘鲁蜀 张荣 杨蓉生 龙虎 周相吉 N Hettiarachchy 《畜禽业》 2007年第1期4-6,共3页
热稳定脱脂米糠(HDRB)中蛋白质已严重变性,采用常规方法很难提取其中蛋白质。本研究其目的在于评价不同碳水化合物酶和蛋白质水解酶组合在HDRB蛋白质提取的作用,以及利用响应曲面方法优化蛋白质提取组合条件。结果发现使用果胶酶P-Ⅱ处... 热稳定脱脂米糠(HDRB)中蛋白质已严重变性,采用常规方法很难提取其中蛋白质。本研究其目的在于评价不同碳水化合物酶和蛋白质水解酶组合在HDRB蛋白质提取的作用,以及利用响应曲面方法优化蛋白质提取组合条件。结果发现使用果胶酶P-Ⅱ处理HDRB,继后对其残渣进行蛋白酶P处理,蛋白质提取率可达到80%。采用中心成分回归设计进一步对果胶酶P-Ⅱ、蛋白酶P、水糠比、温度、pH、提取时间进行RSM优化,最大蛋白质提取率可达到89%。本研究为合理利用米糠蛋白及利用米糠蛋白制备功能性短肽提供了可靠的方法。 展开更多
关键词 米糠 蛋白质 提取率 酶法
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中肋骨条藻蛋白质双向电泳样品制备方法的比较
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作者 王秀秀 陈纪新 黄邦钦 《海洋学研究》 北大核心 2012年第4期72-77,共6页
比较了裂解液法和直接三氯乙酸(TCA)-丙酮沉淀法对中肋骨条藻Skeletonema costatum蛋白双向电泳的提取效果并优化了提取条件,结果表明:裂解液-TCA-丙酮沉淀法在去除胞内干扰物质方面,较裂解液-超滤管法和裂解液-试剂盒法的效果都好。裂... 比较了裂解液法和直接三氯乙酸(TCA)-丙酮沉淀法对中肋骨条藻Skeletonema costatum蛋白双向电泳的提取效果并优化了提取条件,结果表明:裂解液-TCA-丙酮沉淀法在去除胞内干扰物质方面,较裂解液-超滤管法和裂解液-试剂盒法的效果都好。裂解液-TCA-丙酮沉淀法和直接TCA-丙酮沉淀法都能取得背景干净、蛋白点清晰的双向电泳图谱,但后者的双向电泳图谱聚焦更完全,在进一步优化条件后(即蛋白沉淀12h并增加超声波洗涤过程),可作为提取中肋骨条藻蛋白的最适方法。 展开更多
关键词 中肋骨条藻 蛋白质组学 双向电泳 蛋白提取方法
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