缺氧诱导因子1α介导的信号通路在血管紧张素Ⅱ诱导肾间质纤维化中的作用 被引量：7

1

作者 唐琳 郭青 +2 位作者 张翠翠 刘章锁 张晓雪 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期194-197,共4页

目的探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）介导的信号通路在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导肾间质纤维化（RIF）中的作用。方法体外培养肾小管上皮细胞，以不同浓度（10^-9～10^-6mol／L）的AngⅡ分别处理24h、48h时，用实时荧光定量PCR和Wester... 目的探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）介导的信号通路在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导肾间质纤维化（RIF）中的作用。方法体外培养肾小管上皮细胞，以不同浓度（10^-9～10^-6mol／L）的AngⅡ分别处理24h、48h时，用实时荧光定量PCR和Western印迹法分别检测肾小管上皮细胞中HIF-1α、脯氨酸羟化酶2（PHD2）及基质金属蛋白酶1组织抑制剂（TIMP-1）mRNA和蛋白的表达变化情况。结果随AngⅡ刺激浓度的增加，HIF。letmRNA的表达水平也增加，呈浓度依赖性。当AngⅡ浓度在10^-7mol／L，并且干预时间为24h时，HIF-1αmRNA的表达水平增加了166％。实时荧光定量PCR和Western印迹分析显示，相对于空白对照组，在AngⅡ干预的肾小管上皮细胞中HIF-1α、TIMP-1的mRNA和蛋白表达水平均升高（P〈0．05），而PHD2的mRNA和蛋白表达水平均下降（P〈0．05）。结论AngⅡ可能通过下调PHD2的表达而减少肾小管上皮细胞中HIF-1α的降解，从而上调HIF-1α及TIMP-1的表达，参与RIF。 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ 纤维化 缺氧诱导因子1α亚基 肾小管上皮细胞 脯氨酸羟化酶2 基质金属蛋白酶1组织抑制剂

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烟碱对急性心肌梗死大鼠心室重构的作用及机制 被引量：1

2

作者 周单 侯丽芳 胡双双 《解剖学杂志》 CAS 2023年第1期29-33,共5页

目的 :探究烟碱对急性心肌梗死(AMI)大鼠心室重构的作用及可能机制。方法 :大鼠随机分为假手术组、模型组和烟碱组,分别检测3组大鼠血流动力学指标和左心室指数;H-E染色和Masson染色观察大鼠心肌组织形态和心肌纤维化情况;用免疫印迹和R... 目的 :探究烟碱对急性心肌梗死(AMI)大鼠心室重构的作用及可能机制。方法 :大鼠随机分为假手术组、模型组和烟碱组,分别检测3组大鼠血流动力学指标和左心室指数;H-E染色和Masson染色观察大鼠心肌组织形态和心肌纤维化情况;用免疫印迹和RT-PCR检测大鼠心肌组织中脯氨酰羟化酶2(PHD2)和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的蛋白及mRNA的表达。结果 :与假手术组相比,模型组大鼠左心室收缩压(LVSP)和左心室内压力的最大上升和下降速率(±dp/dtmax)值明显降低,左心室舒张末期压(LVEDP)值显著升高;烟碱组LVSP和±dp/dtmax值显著升高,LVEDP值明显降低。模型组大鼠心质量/体质量(HW/BW)、(左心室+室间隔)质量/体质量[(LV+S)/BW]和(左心室+室间隔)质量/心质量[(LV+S)/HW]均明显高于假手术组;与模型组大鼠相比较,烟碱组大鼠HW/BW、(LV+S)/BW和(LV+S)/HW均显著降低。模型组大鼠PHD2蛋白和mRNA表达量显著低于假手术组,HIF-1α蛋白和mRNA表达量明显高于假手术组;与模型组相比,烟碱组大鼠PHD2蛋白和mRNA表达明显升高,HIF-1α蛋白和mRNA表达明显降低。结论 :烟碱能缓解并改善急性心肌梗死大鼠的心室重构,增加心肌细胞中PHD2的表达,同时对HIF-1α的表达进行有效的抑制。 展开更多

关键词 烟碱 急性心肌梗死 心室重构 脯氨酰羟化酶2 缺氧诱导因子1Α 大鼠

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Siah2负调控脯氨酰羟化酶3表达在大鼠低氧性肺动脉高压中的意义 被引量：2

3

作者 潘坤 戴爱国 +3 位作者 张泽明 陈云荣 尹文斌 杜宇 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第23期5805-5807,共3页

目的探讨Siah2及低氧诱导因子(HIF)脯氨酰羟化酶(PHD)3的表达变化趋势在大鼠低氧性肺动脉高压(HPH)中的作用和意义。方法 40只成年雄性SD大鼠随机划分常氧正常组和低氧3 d、7 d、14 d和21 d组,每组8只,常压低氧制作HPH大鼠模型。RT-PCR... 目的探讨Siah2及低氧诱导因子(HIF)脯氨酰羟化酶(PHD)3的表达变化趋势在大鼠低氧性肺动脉高压(HPH)中的作用和意义。方法 40只成年雄性SD大鼠随机划分常氧正常组和低氧3 d、7 d、14 d和21 d组,每组8只,常压低氧制作HPH大鼠模型。RT-PCR检测Siah2和PHD3 mRNA表达变化,Western印迹检测上述两指标的蛋白质表达,并分析其表达变化与大鼠HPH的关系。结果常氧正常组Siah2 mRNA表达水平较低,低氧7 d后显著增高(P<0.05),低氧14 d达高峰;常氧正常组及低氧3 d组Siah2蛋白表达亦较低,低氧7 d后显著增高(P<0.05),低氧14 d达高峰。常氧正常组PHD3 mRNA和蛋白质表达均不明显,低氧3 d mRNA明显增高(P<0.05),同时随低氧时间延长其mRNA表达逐渐升高并保持在高水平;PHD3蛋白质低氧3 d明显增高(P<0.05),低氧7 d保持高水平,低氧14 d和21 d下降。相关分析表明,肺小动脉壁Siah2蛋白质表达水平与Siah2 mRNA呈正相关(r=0.87,P<0.01),与PHD3蛋白表达水平呈负相关(r=-0.44,P<0.05)。结论 Siah2与PHD3均在大鼠HPH的发病机制中发挥作用。Siah2可能从蛋白水平下调PHD3的表达水平,导致HPH的发生发展。 展开更多

关键词 脯氨酰羟化酶3 Siah2 低氧性肺动脉高压

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脯氨酸羟化酶2对脂肪间充质干细胞旁分泌介导的心肌保护的影响 被引量：2

4

作者 王微 王伟 +6 位作者 彭玉兰 刘莉 周永巧 陈彩宇 于长青 何多芬 曾春雨 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期265-271,共7页

目的观察RNA干扰脂肪间充质干细胞脯氨酸羟化酶2(PHD2)对其旁分泌介导的心肌保护作用的影响及其机制。方法慢病毒包装PHD2干扰载体转染第三代人脂肪间充质干细胞(ADSC)。H2O2(100μmol/L)刺激新生大鼠心肌细胞(NRVM)6h,建立体外氧化损... 目的观察RNA干扰脂肪间充质干细胞脯氨酸羟化酶2(PHD2)对其旁分泌介导的心肌保护作用的影响及其机制。方法慢病毒包装PHD2干扰载体转染第三代人脂肪间充质干细胞(ADSC)。H2O2(100μmol/L)刺激新生大鼠心肌细胞(NRVM)6h,建立体外氧化损伤模型。ADSC条件培养液(CM)预处理NRVM,TUNEL染色和免疫印迹法检测caspase-3蛋白表达,观察H2O2诱导的心肌细胞凋亡。ELISA方法检测ADSC-CM的促存活细胞因子:血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)和肝细胞生长因子(HGF)。结果 PHD2干扰-ADSC-CM较空载体-ADSC-CM预处理明显减少NRVM的凋亡,TUNEL阳性率降低30.3%,caspase-3蛋白表达降低24.8%。PHD2干扰后ADSC-CM中IGF-1明显增加。IGF-1中和抗体干预后PHD2干扰-ADSC-CM的抗心肌细胞凋亡作用明显受抑制。结论 PHD2干扰增强了ADSC旁分泌介导的心肌保护作用,其机制可能为增加ADSC促存活细胞因子IGF-1的分泌。 展开更多

关键词 脂肪间充质干细胞 脯氨酸羟化酶Ⅱ 心肌细胞 过氧化氢 细胞凋亡 胰岛素样生长因子1

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PHD2/HIF-1α介导β-AR调控大鼠心梗后心力套竭 被引量：6

5

作者 张本凯 王政 +1 位作者 朱峰 汪和贵 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期239-242,共4页

目的观察PHD2、HIF-1α在心肌梗死后心衰时表达量的变化,探讨β肾上腺受体(β-AR)调控PHD2/HIF-1α通路对心肌梗死后心衰发生影响。方法采用冠状动脉左前降支结扎法制备大鼠急性心梗模型,实验分为3组:假手术组、模型组、普蔡洛尔组。记... 目的观察PHD2、HIF-1α在心肌梗死后心衰时表达量的变化,探讨β肾上腺受体(β-AR)调控PHD2/HIF-1α通路对心肌梗死后心衰发生影响。方法采用冠状动脉左前降支结扎法制备大鼠急性心梗模型,实验分为3组:假手术组、模型组、普蔡洛尔组。记录冠脉结扎前后心电图变化,12周后利用心脏超声检测心功能变化,PCR和Western Blot检测PHD2、HIF-1α的mRNA及蛋白表达的变化。结果结扎冠脉后心电图示ST段显著抬高。结扎12周后心脏射血分数(Ejection fraction,EF)从假手术组的(79.45±2.86)%下降到模型组的(61.10±2.78)%(P<0.05),普蔡洛尔组则高于模型组为(67.33±2.66)%(P<0.05)。PHD2的mRNA及蛋白表达在模型组显著下降(P<O.05),而普蔡洛尔组较模型组明显上升(P<O.05)。HIF-1α的mRNA及蛋白表达在模型组显著上升(P<0.05),而普蔡洛尔组较模型组明显下降(P<0.05)。结论PHD2/HIF-1α通路在大鼠心梗后心衰的发生过程中可能具有重要作用;而心肌梗死后B-肾上腺系统激活,可能通过对PHD2/HIF-1α通路的调节进而促进心衰的发生。 展开更多

关键词 β肾上腺受体(β-AR) 脯氨酰瓮化酶2(PHD2) 缺氧诱导因子1α(HIF-1α) 心机梗死 心力衰竭 冠状动脉 心电图 射血分数(EF)

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红景天苷对类风湿关节炎小鼠缺氧及炎性反应的作用机制

6

作者 张文广 李琴 星媛 《陕西中医》 CAS 2024年第3期323-327,共5页

目的:缺氧是类风湿关节炎(RA)发展的重要因素,本研究旨在探究红景天苷改善RA模型小鼠缺氧和缓解炎症反应的效果和潜在机制。方法:C57BL/6小鼠被用于构建胶原蛋白诱导的关节炎(CIA)模型小鼠,并随机分为空白组、模型组、对照组、实验组。H... 目的:缺氧是类风湿关节炎(RA)发展的重要因素,本研究旨在探究红景天苷改善RA模型小鼠缺氧和缓解炎症反应的效果和潜在机制。方法:C57BL/6小鼠被用于构建胶原蛋白诱导的关节炎(CIA)模型小鼠,并随机分为空白组、模型组、对照组、实验组。HE染色用于评价滑膜组织病理改变。采用实时荧光定量聚合酶链式反应、酶联免疫吸附测定,探究红景天苷对炎症反应、氧化应激以及脯氨酰羟化酶结构域蛋白2(PHD2)/蛋白磷酸酶2A(PP2A)/促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)信号的调节。结果:与空白组相比,模型组、对照组、实验组滑膜组织存在显著的炎性浸润和缺氧反应。与模型组相比,实验组的HE染色结果表明红景天苷能明显抑制滑膜组织增殖和炎症细胞浸润(P<0.01)。ELISA结果表明红景天苷可以抑制促炎因子中肿瘤坏死因子、白介素-6的表达(P<0.01)。RT-qPCR结果显示红景天苷能够抑制缺氧诱导因子-1α并上调核因子E2相关因子2水平(P<0.01),抑制PHD2/PP2A/MAPK信号通路的激活(P<0.01)。结论:红景天苷能抑制CIA小鼠炎性反应和缺氧损伤,缓解RA的潜在机制与抑制PHD2/PP2A/MAPK信号通路激活相关。 展开更多

关键词 红景天苷 类风湿性关节炎 缺氧 脯氨酰羟化酶结构域蛋白2 炎症 胶原蛋白诱导的关节炎 蛋白磷酸酶2A

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脯氨酰羟化酶2抑制剂cpd17对小鼠成骨前体细胞的影响

7

作者 杜忠秋 戚晓阳 +4 位作者 杨平 于江林 陈一心 张林坚 邱旭升 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第2期238-244,共7页

背景:脯氨酰羟化酶2抑制剂能够调节骨代谢,改善卵巢切除大鼠骨质疏松。cpd17是中国药科大学最新研发的一款小分子口服脯氨酰羟化酶2抑制剂,用于治疗肾性贫血疗效肯定,不良反应小,但是对骨形成和骨吸收的作用还不清楚。目的:探讨脯氨酰... 背景:脯氨酰羟化酶2抑制剂能够调节骨代谢,改善卵巢切除大鼠骨质疏松。cpd17是中国药科大学最新研发的一款小分子口服脯氨酰羟化酶2抑制剂,用于治疗肾性贫血疗效肯定,不良反应小,但是对骨形成和骨吸收的作用还不清楚。目的:探讨脯氨酰羟化酶2抑制剂cpd17对成骨前体细胞的影响。方法:采用cpd17处理C57BL/6小鼠成骨前体细胞,检测碱性磷酸酶活性和细胞外基质矿化程度,检测成骨、破骨相关标志物以及脯氨酰羟化酶2、低氧诱导因子1α的表达水平。使用低氧诱导因子1α通路抑制剂LW6抑制低氧诱导因子1α通路后,再次检测碱性磷酸酶活性和细胞外基质矿化程度,以及成骨和破骨分化相关标志物以及脯氨酰羟化酶2、低氧诱导因子1α的表达水平。结果与结论:cpd17能显著增强碱性磷酸酶活性和基质矿化程度,上调成骨分化相关标志物的表达,下调破骨分化相关标志物的表达,并上调低氧诱导因子1α表达,下调脯氨酰羟化酶2的表达。而LW6能明显减弱cpd17的作用。结果表明,脯氨酰羟化酶2抑制剂cpd17可通过激活低氧诱导因子1α信号通路促进成骨分化和抑制破骨分化。 展开更多

关键词 脯氨酰羟化酶2抑制剂 cpd17 低氧诱导因子 成骨前体细胞 成骨分化 骨质疏松

携带EGLN1不同SNPs基因型对汉族人群适应青藏高原低氧环境的作用研究 被引量：5

8

作者 李小薇 肖军 +4 位作者 范秀 刘娟 樊凤艳 雷慧芬 李翠莹 《中国输血杂志》 CAS 2019年第8期756-761,共6页

目的了解脯氨酸羟化酶2(EGLN1)基因突变位点在世居青藏高原内外的藏族和汉族中的差异及其与后者进入青藏高原后血液指标改变的相关性。方法随机挑选健康志愿者100名,BMI正常,无吸烟史,其中世居青藏高原藏族50名,男女各25名,年龄18—55(3... 目的了解脯氨酸羟化酶2(EGLN1)基因突变位点在世居青藏高原内外的藏族和汉族中的差异及其与后者进入青藏高原后血液指标改变的相关性。方法随机挑选健康志愿者100名,BMI正常,无吸烟史,其中世居青藏高原藏族50名,男女各25名,年龄18—55(33.9±8.3)岁,四川成都汉族50名,男性26名,女性24名,年龄13—45(33.6±9.2)岁。应用血液基因组DNA提取试剂盒参照试剂盒操作说明书提取100μL/人(份)DNA,共100份,应用聚合酶链式反应(PCR)结合测序技术进行EGLN1基因2个单核苷酸多态位点(SNPs)rs12097901, rs2790859检测。再随机挑选50名四川成都汉族男性健康志愿者作为高原低氧习服组,年龄19—23(20.9±1.0)岁,提取100μl/人(份)DNA,共50份,检测其进入高原前后的血常规,选择青藏高原前后Hb差值≥35 g/L、红细胞计数(RBC)差值≥1×1012/L和红细胞比容(Hct)差值≥0.1的20名作为低氧习服观察组,其余凡小于3项指标差值中任1项者共30名作为低氧习服对照组,分析汉族人群中携带不同SNPs基因型者的血红蛋白浓度(Hb)差异,并比较2组人群携带EGLN1基因单体型的差异。结果本组世居青藏高原内外的藏族和汉族人群比较,EGLN1基因rs12097901位点G、rs2790859位点C等位基因频率分别为85.0%(85/100)vs 46.0%(46/100)、20.0%(10/100)vs 49.0%(49/100)(P<0.01);单体型分析:C-C、G-T比例分别为11.74%(11.74/100)vs 46.81%(46.81/100)、76.74%(76.74/100)vs 41.81%(41.81/100)(P<0.01)。进入青藏高原前后汉族人群低氧习服观察组与低氧习服对照组EGLN1基因G-C单体型比例为0(0/40)vs 9.60%(5.75/60)(P<0.05)。结论 EGLN1基因rs12097901(C>G)和rs2790859(T>C)位点突变与世居青藏高原藏族适应高原低氧环境存在紧密相关性。汉族人进入高原后,携带EGLN1基因rs12097901和rs2790859位点G-C单体型,可避免自身红细胞过度增生导致高原红细胞增多症,利于青藏高原低氧习服。 展开更多

关键词 脯氨酸羟化酶2基因 单核苷酸多态性 高原低氧适应 汉族 藏族 血液学指标 青藏高原

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砭贴预处理对急性低压低氧环境大鼠血清PHD2/HIF-1α水平和脑组织损伤的影响 被引量：4

9

作者 李晓雅 吴春花 +3 位作者 闫颖洁 王登辉 王梦杰 侯中伟 《中国针灸》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1278-1284,共7页

目的:观察砭贴预处理对急性低压低氧脑损伤模型大鼠血清脯氨酸羟化酶2(PHD2)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)含量的影响,探究砭贴预防高原脑损伤的可能作用机制。方法:将45只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、砭贴组、药物组、砭贴抑制剂... 目的:观察砭贴预处理对急性低压低氧脑损伤模型大鼠血清脯氨酸羟化酶2(PHD2)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)含量的影响,探究砭贴预防高原脑损伤的可能作用机制。方法:将45只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、砭贴组、药物组、砭贴抑制剂组,每组9只。砭贴组和砭贴抑制剂组大鼠予砭贴预处理,穴取“太渊”“内关”和“人迎”,每次2 h,每日1次;药物组大鼠每日按280 mg/kg剂量灌胃大株红景天胶囊药液,均干预14 d。砭贴抑制剂组于造模前24 h按40 mg/kg剂量腹腔注射PHD抑制剂二甲基乙二酰氨基乙酸(DMOG)。干预结束后,除空白组外,其余4组大鼠均采用氧舱模拟高原环境建立急性低压低氧脑损伤模型。检测各组大鼠动脉血血气分析指标[血氧饱和度(SaO_(2))、乳酸(Lac)、血钠(Na^(+))、血钾(K^(+))水平]和脑组织含水量;HE染色法观察大鼠脑皮质组织形态学;ELISA法检测血清PHD2、HIF-1α和血管内皮生长因子(VEGF)含量;Western blot法检测脑组织VEGF蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测脑组织VEGFmRNA表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠SaO_(2)和Na^(+)水平降低(P<0.05),Lac、K^(+)水平及脑组织含水量升高(P<0.05)。与模型组比较,砭贴组和药物组SaO_(2)水平升高(P<0.05),Lac、K^(+)水平及脑组织含水量降低(P<0.05);砭贴组Na+水平升高(P<0.05)。与砭贴组比较,砭贴抑制剂组SaO_(2)水平降低(P<0.05),Lac水平及脑组织含水量升高(P<0.05)。模型组大鼠脑皮质组织细胞疏松紊乱,皮质血管扩张,细胞明显肿胀;砭贴组和药物组缺氧损伤表现较轻,砭贴抑制剂组缺氧损伤较砭贴组明显。与空白组比较,模型组大鼠血清PHD2含量降低、HIF-1α含量升高(P<0.05),血清VEGF含量及脑组织VEGF蛋白和m RNA表达增加(P<0.05);与模型组比较,砭贴组和药物组血清PHD2含量升高、HIF-1α含量降低(P<0.05),血清VEGF含量及脑组织VEGF蛋白和mRNA表达降低(P<0.05);与 展开更多

关键词 高原脑损伤 砭贴 急性低压低氧 脑组织损伤 脯氨酸羟化酶2 低氧诱导因子1Α 血管内皮生长因子

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Egl-9家族缺氧诱导因子1的研究进展及与肺癌的关系

10

作者 白巧会 艾丽 +1 位作者 蒋绒 李永霞 《中国医药科学》 2023年第23期52-55,146,共5页

氧敏感因子Egl-9家族缺氧诱导因子1(EGLN1)为哺乳动物体内重要的氧传感器,通过编码脯氨酰羟化酶结构域(PHD)中的PHD2,羟基化缺氧诱导因子-1α(HIF-1α),促进HIF-1α蛋白酶体的降解,从而影响机体的红细胞生成、糖酵解、铁代谢等。EGLN1... 氧敏感因子Egl-9家族缺氧诱导因子1(EGLN1)为哺乳动物体内重要的氧传感器,通过编码脯氨酰羟化酶结构域(PHD)中的PHD2,羟基化缺氧诱导因子-1α(HIF-1α),促进HIF-1α蛋白酶体的降解,从而影响机体的红细胞生成、糖酵解、铁代谢等。EGLN1与红细胞增多症、心脏疾病、脑代谢疾病等多种疾病相关,也可通过抑制肿瘤血管生成、与抑癌基因相互作用等影响肿瘤的发生与发展,但其在不同癌症中具有不同的作用。肺癌作为最常见和恶性程度最高的肿瘤,与EGLN1的关系也越来越受到人们的关注,但其具体机制尚不完全清楚。本文系统阐述EGLN1的结构及作用机制、在肿瘤中的表达及意义以及与肺癌的关系,旨在对EGLN1基因的研究进展及与肺癌的关系进行进一步探讨,从而为肺癌的靶向治疗提供新的思路。 展开更多

关键词 Egl-9家族缺氧诱导因子1 缺氧诱导因子-1Α 脯氨酰羟化酶结构域2 肺癌

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脯氨酸羟化酶-2对肝细胞肝癌生物学行为的影响及其机制 被引量：1

11

作者 李震 王世豪 +2 位作者 姚弘虞 庞春 李捷 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期251-254,共4页

目的观察脯氨酸羟化酶-2(PHD-2)对肝细胞肝癌(HCC)生物学行为的影响并探讨机制。方法应用2006年1月至2010年12月郑州大学第一附属医院HCC患者组织建立Hep3B肝癌细胞株,建立HCC裸鼠(购自北京维通利华实验动物技术有限公司)移植瘤模型,PH... 目的观察脯氨酸羟化酶-2(PHD-2)对肝细胞肝癌(HCC)生物学行为的影响并探讨机制。方法应用2006年1月至2010年12月郑州大学第一附属医院HCC患者组织建立Hep3B肝癌细胞株,建立HCC裸鼠(购自北京维通利华实验动物技术有限公司)移植瘤模型,PHD-2沉默组利用瘤体内注射的方式将胆固醇修饰的PHD-2 RNA干扰(RNAi)注射入瘤体内,同时设立空白组(不做处理)和生理盐水对照组(注射生理盐水)进行对照研究,每4 d注射1次,观察并记录裸鼠的瘤体生长变化,开始注射药物后第16天处死裸鼠,采集瘤体标本用蛋白质印迹法(Western blot)技术检测PHD-2、p-Smad2/3及癌基因c-Myc的表达。采用免疫组织化学技术(IHC)检测220例HCC临床标本中c-Myc的表达,分析其与PHD-2以及HCC患者临床病理特征的相关性。计数资料进行χ^2检验,相关性分析采用Spearman等级相关检验。结果(1)在HCC裸鼠移植瘤模型中PHD-2沉默组裸鼠瘤体增长缓慢(F=15.607,P<0.05),差异有统计学意义。瘤体标本中PHD-2沉默组p-Smad2/3表达水平明显高于空白组和对照组(0.589±0.074比0.086±0.012、0.091±0.008,F=286.537,P<0.05),差异有统计学意义,而PHD-2沉默组c-Myc的表达水平明显低于其他两组(0.108±0.004比0.539±0.023、0.592±0.087,F=189.468,P<0.05),差异有统计学意义。(2)IHC技术检测220例HCC临床标本中PHD-2及c-Myc的表达,c-Myc的高表达与肿瘤体积较大、分化程度较低、TNM分期较晚、高水平的甲胎蛋白显著相关,与PHD-2的表达显著相关(r=0.557,P<0.01)。结论PHD-2的高表达可以促进HCC细胞在体内的增殖,PHD-2促进HCC进展的作用有可能是通过抑制TGF-β1-Smad信号通路中的p-Smad2/3表达,进而上调癌基因c-Myc的表达来实现的。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 脯氨酸羟化酶-2 P-SMAD2/3 C-MYC

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4-羟基-2-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-5-甲酸的合成工艺改进研究

12

作者 郭慧敏 高骏 +3 位作者 段玉清 毕常芬 王绍杰 李祎亮 《现代药物与临床》 CAS 2018年第12期3092-3095,共4页

目的对4-羟基-2-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-5-甲酸的合成工艺条件进行优化。方法以1-脒基吡唑盐酸盐和乙氧基甲叉基丙二酸二乙酯为起始原料,在三乙胺催化下环合得到中间体4-羟基-2-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-5-甲酸乙酯,再经过氢氧化锂在四氢呋喃–... 目的对4-羟基-2-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-5-甲酸的合成工艺条件进行优化。方法以1-脒基吡唑盐酸盐和乙氧基甲叉基丙二酸二乙酯为起始原料,在三乙胺催化下环合得到中间体4-羟基-2-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-5-甲酸乙酯,再经过氢氧化锂在四氢呋喃–水混合溶剂中水解得到目标化合物。结果合成了目标化合物,经MS、1H-NMR确证了结构,质量分数为99.5%,本合成工艺的总收率为87%。结论该合成工艺具有操作简单、反应条件温和、成本低、产率和纯度较高等优点,适合工业化生产。 展开更多

关键词 脯氨酰羟化酶抑制剂 4-羟基-2-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-5-甲酸 合成工艺

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氨酰4-羟化酶A2通过抑制炎症反应缓解肾纤维化

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作者 葛名欢 祝恒成 +1 位作者 冷艳 杨康 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2024年第7期768-772,共5页

目的:利用体内和体外模型探讨氨酰4-羟化酶A2(P4HA2)对肾间质纤维化的作用及其机制。方法:采用输尿管结扎模型构建动物肾纤维化,使用免疫组化技术检测P4HA2表达水平;采用不同梯度浓度TGF-β刺激HK2细胞构建细胞肾纤维化模型,利用免疫印... 目的:利用体内和体外模型探讨氨酰4-羟化酶A2(P4HA2)对肾间质纤维化的作用及其机制。方法:采用输尿管结扎模型构建动物肾纤维化,使用免疫组化技术检测P4HA2表达水平;采用不同梯度浓度TGF-β刺激HK2细胞构建细胞肾纤维化模型,利用免疫印迹和细胞免疫荧光检测P4HA2蛋白表达变化水平;利用腺病毒转染HK2细胞,使用免疫印迹和酶联免疫吸附试验技术探索P4HA2在细胞水平对NF-κB信号通路和下游炎症因子的影响。结果:与假手术组小鼠比较,模型组小鼠P4HA2表达量显著增加,且集中于肾小管细胞胞质与胞核中。使用50 ng/mL TGF-β刺激HK-2细胞24 h后P4HA2表达水平显著升高,且细胞形态由鹅卵石形变成针尖样长梭形;与转染对照组(scramble)比较,sh-P4HA2抑制NF-κB信号通路相关蛋白表达量,减少下游炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平。结论:P4HA2可能调控NF-κB信号通路,抑制机体炎症反应,缓解肾间质纤维化发展。 展开更多

关键词 氨酰4-羟化酶A2(P4HA2) 肾间质纤维化 炎症反应 NF-ΚB

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FH基因在遗传性平滑肌瘤病及肾癌综合征中的研究进展 被引量：4

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作者 周婷婷 邢金春 《医学综述》 2014年第5期881-884,共4页

遗传性平滑肌瘤及肾细胞癌(HLRCC)综合征不同于普通家族性肾癌,其肾肿瘤比其他类型的家族性肾癌更具侵袭性。延胡索酸水化酶(FH)基因突变导致"假缺氧"驱动机制不依赖低氧环境的低氧诱导因子2α(HIF-2α)的稳定表达,这可能是HL... 遗传性平滑肌瘤及肾细胞癌(HLRCC)综合征不同于普通家族性肾癌,其肾肿瘤比其他类型的家族性肾癌更具侵袭性。延胡索酸水化酶(FH)基因突变导致"假缺氧"驱动机制不依赖低氧环境的低氧诱导因子2α(HIF-2α)的稳定表达,这可能是HLRCC的生物学发病机制。该文就FH基因突变、HIF-α表达及其肿瘤作用机制,与其相关的核转录因子Nrf2基因失活的新观点进行阐述。 展开更多

关键词 延胡索酸水化酶基因 低氧诱导因子2α 脯氨酸羟化酶 核转录因子Nrf2 血管内皮生长因子

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PHD2基因在鲸类低氧信号通路中的功能

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作者 李颖 毕健玲 +1 位作者 王丁 肖武汉 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期767-774,共8页

为研究鲸类低氧适应的分子机制,文章克隆了不同低氧耐受能力的3个鲸类物种,抹香鲸(Physeter macrocephalus)、白鲸(Delphinapterus leucas)和长江江豚(Neophocaena phocaenoids asiaeorientalis)的脯氨酸羟化酶2(PHD2)。通过对其序列进... 为研究鲸类低氧适应的分子机制,文章克隆了不同低氧耐受能力的3个鲸类物种,抹香鲸(Physeter macrocephalus)、白鲸(Delphinapterus leucas)和长江江豚(Neophocaena phocaenoids asiaeorientalis)的脯氨酸羟化酶2(PHD2)。通过对其序列进行分析,发现3个物种PHD2的氨基酸序列非常保守。通过对这3个物种的PHD2的功能进行探究发现:3个物种的PHD2在常氧情况下均可以降解3个物种的HIF-α(包括HIF-1α和HIF-2α)蛋白,而在低氧(O_(2)浓度小于2%)情况下,PHD2则无法明显降解HIF-α蛋白。在常氧下,鲸类的PHD2降解HIF-α是依赖于识别鲸类的HIF-1α上LTLLAP和LEMLAP,HIF-2α的LAQLAP和LETLAP氨基酸片段,推测PHD2是通过对HIF-α序列中的脯氨酸位点进行羟基化修饰后,被VHL-E3泛素连接酶复合体所识别,发生泛素化降解。而在低氧条件下,PHD2的活性受到抑制HIF-α不能被VHL-E3泛素连接酶复合体识别,发生降解。研究对3种不同低氧耐受能力的鲸的PHD2功能进行初步探究,发现3种鲸的PHD2在降解HIF-α(HIF-1α和HIF-2α)的功能与已报道人PHD2功能相似。研究结果为更深入研究鲸类的PHD2与HIF的复杂反馈调控提供依据为脯氨酸羟化酶家族(PHDs)其他成员与HIF相互作用提供重要的参考资料,也为深入研究鲸类的低氧耐受提供基础。 展开更多

关键词 抹香鲸 白鲸 长江江豚 低氧耐受 低氧诱导因子 脯氨酸羟化酶

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脯氨酰-4-羟化酶亚基α-2通过肌醇需要酶1α介导的UPR信号通路调控肝癌细胞凋亡并预测早期肝细胞癌的不良预后

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作者 朱睿安 李朝英 姜颖 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期269-276,共8页

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)严重危害着人类健康。尽管大量研究表明,在HCC早期进行手术切除可提高患者的生存率,但其高复发率仍然阻碍着治疗进程。本研究分析蛋白质组学数据发现。脯氨酰-4-羟化酶亚基α-2(prolyl 4-hydroxy... 肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)严重危害着人类健康。尽管大量研究表明,在HCC早期进行手术切除可提高患者的生存率,但其高复发率仍然阻碍着治疗进程。本研究分析蛋白质组学数据发现。脯氨酰-4-羟化酶亚基α-2(prolyl 4-hydroxylase subunit α-2,P4HA2)在早期HCC组织中高表达,Kaplan-Meier曲线、Cox比例风险回归模型(cox regression model)证明,P4HA2高表达的早期肝癌患者预后较差,且P4HA2可作为患者预后的独立预测因子。通过敲低或过表达实验发现,P4HA2明显促进肿瘤细胞的增殖、迁移等恶性生物学行为。敲低P4HA2激活了由肌醇需要酶1α(inositol-requiring enzyme 1α,IRE1α)介导的促凋亡非折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)。以上结果表明,P4HA2可能通过调节内质网稳态来调控肝癌细胞凋亡,P4HA2有望成为HCC潜在的治疗靶点。 展开更多

关键词 肝细胞癌 脯氨酰-4-羟化酶亚基α-2 预后 细胞凋亡

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