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胶原样结构巨噬细胞受体介导染矽尘大鼠肺组织细胞线粒体凋亡信号通路研究 被引量:13
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作者 张林 姚三巧 +11 位作者 何艳玲 李清钊 郝小惠 袁腾 黄娜 郭菲菲 袁聚祥 白玉萍 刘楠 陈刚 袁扬 云翔 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2014年第1期7-13,共7页
目的通过抑制大鼠肺泡巨噬细胞(AM)表面胶原样结构巨噬细胞受体(MARCO),探讨MARCO介导的线粒体凋亡通路的信号机制及其在矽肺发生发展中的作用。方法无特定病原体级健康成年雄性SD大鼠48只随机分为多聚鸟苷酸(PolyG)组、矽肺模型组和对... 目的通过抑制大鼠肺泡巨噬细胞(AM)表面胶原样结构巨噬细胞受体(MARCO),探讨MARCO介导的线粒体凋亡通路的信号机制及其在矽肺发生发展中的作用。方法无特定病原体级健康成年雄性SD大鼠48只随机分为多聚鸟苷酸(PolyG)组、矽肺模型组和对照组,每组16只。除对照组外,其余2组进行矽肺造模。PolyG组于造模当天经尾静脉一次性注射给药剂量为1.5 mg/kg体质量PolyG干预,其余2组给予等体积灭菌生理氯化钠溶液。染尘后第28、56天分别处死3组大鼠各8只,收集一侧肺泡灌洗液,分离纯化AM。苏木素-伊红染色观察肺组织病理变化,免疫印迹法测定肺组织内MARCO、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(CytC)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-9和Caspase-3水平,流式细胞术检测AM线粒体去极化率和活性氧(ROS)阳性率,实时定量荧光聚合酶链式反应分析Ⅰ型和Ⅲ型前胶原mRNA表达水平。结果染尘后第28、56天对照组和PolyG组MARCO、Bax、CytC、Caspase-9、Caspase-3相对表达水平、线粒体去极化率、ROS阳性率以及Ⅰ型、Ⅲ型前胶原mRNA表达水平均低于同时间点矽肺模型组(P<0.01),而Bcl-2相对表达水平高于同时间点矽肺模型组(P<0.01);第28天PolyG组与对照组组间MARCO、CytC、Caspase-3相对表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),第56天PolyG组与对照组组间MARCO、CytC、Caspase-3、Bax相对表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。对照组上述10个指标第28天检测结果与第56天比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与第28天比较,第56天矽肺模型组线粒体去极化率和ROS阳性率差异均无统计学意义(P>0.05),Bcl-2相对表达水平降低(P<0.01),其他7个指标均升高(P<0.01)。与第28天比较,第56天PolyG组CytC、Bax相对表达水平、线粒体去极化、ROS阳性率降低(P<0.01),其他6个指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 展开更多
关键词 胶原样结构巨噬细胞受体 矽肺 肺泡巨噬细胞 多聚鸟苷酸 前胶原 细胞凋亡 线粒体凋亡通路
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多聚鸟嘌呤核苷酸对矽尘致大鼠肺纤维化干预作用及机制研究 被引量:10
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作者 杨萌 王娜 姚三巧 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2017年第1期25-30,共6页
目的观察多聚鸟嘌呤核苷酸(Poly G)对染矽尘大鼠肺纤维化的干预作用,并探讨其作用机制。方法无特定病原体级健康成年雄性SD大鼠随机分为对照组、矽肺模型组和4个干预组(即干预1、2、3、4次组),每组5只。除对照组外,其余5组大鼠均以非暴... 目的观察多聚鸟嘌呤核苷酸(Poly G)对染矽尘大鼠肺纤维化的干预作用,并探讨其作用机制。方法无特定病原体级健康成年雄性SD大鼠随机分为对照组、矽肺模型组和4个干预组(即干预1、2、3、4次组),每组5只。除对照组外,其余5组大鼠均以非暴露式气管插管法一次性予质量浓度为50.0 g/L的矽尘混悬液1.0 m L造模,4个干预组大鼠分别于造模后第1~21天内腹腔注射1、2、3、4次剂量为2.5 mg/kg体质量的Poly G。造模后28 d处死大鼠,观察肺部组织病理学改变情况,以Ashcroft评分法评估肺纤维化程度,以蛋白免疫印迹法测定肺组织内胶原样结构巨噬细胞受体(MARCO)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、E-钙黏蛋白(E-cad)、波形蛋白(Vimentin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白相对表达水平。结果矽肺模型组大鼠肺泡腔内有大量尘细胞聚集,肺间质内出现弥漫性的胶原沉积,说明矽肺造模成功;干预1次组大鼠肺泡结构基本完整,肺纤维化程度较矽肺模型组明显减轻。与对照组比较,矽肺模型组大鼠肺组织Ashcroft评分和MARCO、TGF-β1、Vimentin、α-SMA的蛋白相对表达水平均升高(P<0.05),E-cad相对表达水平下降(P<0.05);与矽肺模型组比较,干预1次组大鼠肺组织的TGF-β1、Vimentin和α-SMA的蛋白相对表达水平均下降(P<0.05),E-cad相对表达水平升高(P<0.05)。Poly G干预次数与大鼠肺组织的Ashcroft评分和MARCO、TGF-β1、E-cad、Vimentin、α-SMA的蛋白相对表达水平之间均无剂量-效应关系。结论 Poly G可改善矽尘所致的大鼠肺组织炎症和纤维化,以在造模后第1天进行一次性干预(2.5 mg/kg体质量,腹腔注射)效果较好,其机制可能与低剂量Poly G抑制上皮间质转化的进程从而减少胶原合成有关。 展开更多
关键词 矽肺 多聚鸟嘌呤核苷酸 胶原样结构巨噬细胞受体 肺纤维化 转化生长因子-Β1 上皮间质转化
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多聚鸟苷酸干预大鼠矽肺纤维化的内质网应激作用机制 被引量:7
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作者 王娜 杨萌 +2 位作者 雷素英 千新来 姚三巧 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2017年第4期399-407,共9页
目的探讨肌醇需求激酶1(IRE1)介导的内质网应激(ERS)细胞凋亡途径在多聚鸟苷酸(PolyG)干预大鼠矽肺纤维化中的作用及机制。方法将无特定病原体级成年雄性SD大鼠随机分为对照组(24只)、矽肺模型组(24只)、PolyG预防组(16只)和PolyG治疗组... 目的探讨肌醇需求激酶1(IRE1)介导的内质网应激(ERS)细胞凋亡途径在多聚鸟苷酸(PolyG)干预大鼠矽肺纤维化中的作用及机制。方法将无特定病原体级成年雄性SD大鼠随机分为对照组(24只)、矽肺模型组(24只)、PolyG预防组(16只)和PolyG治疗组(16只),采用一次性吸入式气管滴注法,对照组大鼠予灭菌0.9%氯化钠溶液1 mL,其余3组大鼠均予质量浓度为50.0 g/L的矽尘混悬液1 mL以构建矽肺纤维化大鼠模型。PolyG预防组大鼠于造模当天,PolyG治疗组大鼠于造模第28天,均一次性经尾静脉注射剂量为2.5 mg/kg体质量的PolyG,于PolyG给药后第28和56天各处死大鼠8只。观察各组大鼠肺组织病理改变情况,以免疫印迹法测定葡萄糖调节蛋白-78(GRP78)、IRE1、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Casepase)-3、Casepase-12、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的蛋白相对表达水平。结果病理组织学检查结果显示:对照组大鼠肺组织结构正常;矽肺模型组大鼠肺组织肺泡结构破坏严重,出现纤维细胞性结节及大量胶原沉积;PolyG预防组和PolyG治疗组大鼠矽结节及胶原沉积均较矽肺模型组减少。矽肺模型组大鼠肺组织中GRP78、IRE1、CHOP、Caspase-3、Caspase-12、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的蛋白相对表达水平均高于对照组(P<0.05)。除PolyG预防组IRE1和CHOP外,PolyG预防组和治疗组大鼠上述7个蛋白指标的表达水平均低于矽肺模型组(P<0.05),但仍高于对照组(P<0.05)。造模后第56天,PolyG预防组GRP78、IRE1、Caspase-3、Caspase-12、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的蛋白相对表达水平均低于PolyG治疗组(P<0.05)。结论 IRE1介导的ERS未折叠蛋白反应可能参与了PolyG干预大鼠矽肺纤维化的过程;PolyG可有效预防和治疗矽肺纤维化,以预防性给药效果更佳。 展开更多
关键词 矽肺 肺纤维化 多聚鸟苷酸 内质网应激 肌醇需求激酶1 葡萄糖调节蛋白 CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 胶原
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Raman spectroscopic study of G-A mismatches 被引量:1
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作者 廖昱博 孟耀勇 +1 位作者 雷浩东 王英 《Chinese Physics B》 SCIE EI CAS CSCD 2007年第11期3332-3338,共7页
G-A mismatches are non-canonical base pairs that widely occur in native nucleic acids. They have been found to be functionally important in adopting unusual structures. In this paper, G-A mispairing was studied by Ram... G-A mismatches are non-canonical base pairs that widely occur in native nucleic acids. They have been found to be functionally important in adopting unusual structures. In this paper, G-A mispairing was studied by Raman spectral characterization of Polyadenylic acid (PolyA), Polyguanylic acid (PolyG) and their equimolar mixture in solution of 0.08 mol/L Na^+, pH7.0. The experiment showed the following three results. (1) At the experimental conditions used in the present work, PolyA and G A complexes existed as single-stranded and double-stranded helix of A form, respectively. And PolyG mainly occurred to be anti-parallel quadruplex conformers. (2) The formation of G A complexes, on one hand strengthened parts of base stacking interactions especially for PolyG, leading to Raman hypochromism effect with some corresponding bands shifting, and on the other hand weakened other base stacking interactions especially for PolyA to a certain degree. During this process, the backbone of PolyG underwent a significant change, but PolyA still conserved its main chain conformation. (3) The formation of G A complexes was stabilized by two interbase hydrogen- bond interactions (i.e. N6H2(A)-N3 (G) and N7 (A)--N2H2(G)) and a third hydrogen bond between O2^+ (G) and N6 (A). The third hydrogen bond was responsible for the remarkable changes of PolyG backbone conformation. 展开更多
关键词 G-A mismatches Raman spectroscopy Polyadcnylic acid (PolyA) polyguanylic acid (PolyG)
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