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水产动物源嗜水气单胞菌药物敏感性及QRDR基因突变分析 被引量:15
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作者 薛慧娟 邓玉婷 +5 位作者 姜兰 吴雅丽 谭爱萍 王伟利 罗理 赵飞 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第23期149-153,共5页
为了解临床分离的59株嗜水气单胞菌对喹诺酮类药物的耐药性及其靶基因gyrA和parC编码的喹诺酮类耐药决定区(QRDR)的突变情况。采用纸片琼脂扩散法测定15种抗菌药物对水产动物源嗜水气单胞菌的耐药情况,采用PCR法扩增gyrA和parC,并通过... 为了解临床分离的59株嗜水气单胞菌对喹诺酮类药物的耐药性及其靶基因gyrA和parC编码的喹诺酮类耐药决定区(QRDR)的突变情况。采用纸片琼脂扩散法测定15种抗菌药物对水产动物源嗜水气单胞菌的耐药情况,采用PCR法扩增gyrA和parC,并通过测序分析其靶基因突变情况。结果表明:24株(40.7%)嗜水气单胞菌对喹诺酮类药物耐药,其中对萘啶酸、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星的耐药率依次为40.7%、16.9%、20.3%、8.5%。敏感菌株QRDR靶位点未发生突变,24株喹诺酮类耐药菌株中gyrA基因编码的第83位氨基酸均存在Ser→Ile突变;19株菌parC基因编码的第87位氨基酸也发生突变,其中18株为Ser→Ile突变,1株为Ser→Arg突变,有5株未检测到突变;ParC亚基氨基酸突变的菌株其GyrA亚基均同时发生氨基酸突变。表明临床分离的嗜水气单胞菌对喹诺酮类药物耐药程度不一,其中萘啶酸的耐药最为严重,诺氟沙星、氧氟沙星和环丙沙星敏感性较高。喹诺酮类耐药菌株GyrA亚基QRDR氨基酸突变,可能是引起萘啶酸耐药的主要原因。临床分离嗜水气单胞菌QRDR区域的突变具有随机性,但靶位点GyrA的Ser83→Ile以及ParC的Ser87→Ile是最主要的突变方式,另外喹诺酮类药物耐药性的产生可能还与其他耐药机制存在关联。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 喹诺酮类 GYRA基因 parc基因
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耐环丙沙星鲍氏不动杆菌的gyrA基因及parC基因突变分析 被引量:13
2
作者 李燕 宋瑱 宋晓红 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期6-8,共3页
目的研究本地区临床分离鲍氏不动杆菌环丙沙星耐药表型与DNA旋转酶A亚单位gyrA基因及拓扑异构酶ⅣparC基因突变的关系。方法收集28株耐药株及2株敏感株,通过PCR扩增其gyrA基因及parC基因,并对扩增产物进行限制性片段长度多态性分析(PCR-... 目的研究本地区临床分离鲍氏不动杆菌环丙沙星耐药表型与DNA旋转酶A亚单位gyrA基因及拓扑异构酶ⅣparC基因突变的关系。方法收集28株耐药株及2株敏感株,通过PCR扩增其gyrA基因及parC基因,并对扩增产物进行限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)及DNA序列分析。结果敏感株的gyrA基因产物经HinfⅠ酶切后可产生两个片段,耐药株则产生1个片段;而parC基因产物经HinfⅠ酶切后,敏感株及耐药株均产生两个片段;DNA测序显示,5株耐药株gyrA基因存在Ser83→Leu及Ala88→Thr突变,其中Ser83→Leu的突变是导致HinfI酶切位点消失的原因,而1株敏感株无突变;1株敏感株与1株耐药株的pcrC基因存在Ser108→Ile突变,另外14株耐药株存在多位点同义突变。结论与parC基因相比,gyrA基因突变是鲍氏不动杆菌对环丙沙星耐药的主要分子基础,环丙沙星的高水平耐药可能需要多种不同的突变。 展开更多
关键词 鲍氏不动杆菌 耐药 GYRA基因 parc基因 喹诺酮
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呼吸道感染患者肺炎克雷伯菌gyrA基因和parC基因突变情况及其耐药机制分析 被引量:13
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作者 张明华 杨钢 李晶 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第1期65-68,共4页
目的通过药敏试验探究肺炎克雷伯菌的耐药情况,分析其gyrA基因和parC基因突变与其耐药性的相关性,进而为呼吸道感染肺炎克雷伯菌的临床治疗提供指导。方法从呼吸道感染患者体内分离肺炎克雷伯菌并进行鉴定,然后测定其对各种抗生素的耐... 目的通过药敏试验探究肺炎克雷伯菌的耐药情况,分析其gyrA基因和parC基因突变与其耐药性的相关性,进而为呼吸道感染肺炎克雷伯菌的临床治疗提供指导。方法从呼吸道感染患者体内分离肺炎克雷伯菌并进行鉴定,然后测定其对各种抗生素的耐药情况,并通过基因测序研究gyrA基因和parC基因的突变情况与其耐药性关系。结果药敏试验结果显示,肺炎克雷伯菌对诺氟沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、加雷沙星、加替沙星和莫西沙星的耐药率分别为45.65%、39.13%、30.43%、27.17%、13.30%、14.13%和10.87%。通过PCR方法成功地对gyrA和parC基因进行了扩增,并从电泳图得出gyrA基因分子量大小为449bp、parC基因分子量大小为319bp。通过基因测序比对发现,gyrA基因的83位、87位和parC基因的80位、91位都有不同类型的突变,这些突变与肺炎克雷伯菌的耐药性密切相关。结论 gyrA基因和parC基因突变与肺炎克雷伯菌的耐药性密切相关,但是若要彻底解决其耐药性问题,应从源头上控制抗生素的合理选用,从而更好地指导呼吸道感染的临床治疗。 展开更多
关键词 呼吸道感染 肺炎克雷伯菌 GYRA基因 parc基因 耐药率
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肺炎克雷伯杆菌对氟喹诺酮耐药的机制研究 被引量:12
4
作者 廖景光 李小燕 +5 位作者 李敏妍 张耀森 梁艳容 高炎超 崔志新 黎敏 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2012年第2期145-148,共4页
目的研究肺炎克雷伯杆菌对氟喹诺酮类药物(FQNs)的耐药机制。方法筛选临床分离的对环丙沙星耐药的肺炎克雷伯杆菌共10株,采用微量肉汤稀释法检测菌株对5种氟喹诺酮类药物的MIC值;采用PCR方法检测菌株染色体和质粒携带的喹诺酮耐药基因(g... 目的研究肺炎克雷伯杆菌对氟喹诺酮类药物(FQNs)的耐药机制。方法筛选临床分离的对环丙沙星耐药的肺炎克雷伯杆菌共10株,采用微量肉汤稀释法检测菌株对5种氟喹诺酮类药物的MIC值;采用PCR方法检测菌株染色体和质粒携带的喹诺酮耐药基因(gyrA基因、parC基因和qnr基因)并测序;质粒接合试验验证qnr基因的转移性。结果 10株肺炎克雷伯杆菌对5种氟喹诺酮类药物均产生耐药性。扩增产物经测序发现10株肺炎克雷伯杆菌染色体的gyrA基因和parC基因均有突变;有2株菌株(K79和K107)携带qnrA基因,这2株菌的接合菌对喹诺酮抗菌药的MIC值上升了5~30倍;未检测到qnrB阳性的菌株。结论 gyrA和parC基因突变是肺炎克雷菌对氟喹诺酮类产生耐药机制的主要原因,质粒上qnrA基因的存在,也是产生喹诺酮耐药的一个重要因素。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯杆菌 氟喹诺酮耐药 GYRA基因 parc基因 QNR基因
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肺炎克雷伯菌gyrA基因与parC基因的突变研究 被引量:9
5
作者 徐艳 付英梅 +3 位作者 张文莉 郭丽双 刘爱平 张凤民 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期350-352,共3页
目的探讨肺炎克雷伯菌对环丙沙星和左氧氟沙星的药物敏感性,及对喹诺酮敏感和耐药菌株中gyrA与parC基因的突变情况。方法收集肺炎克雷伯菌临床分离株231株,采用K-B纸片法测定肺炎克雷伯菌对环丙沙星和左氧氟沙星的敏感性,随机选取对环... 目的探讨肺炎克雷伯菌对环丙沙星和左氧氟沙星的药物敏感性,及对喹诺酮敏感和耐药菌株中gyrA与parC基因的突变情况。方法收集肺炎克雷伯菌临床分离株231株,采用K-B纸片法测定肺炎克雷伯菌对环丙沙星和左氧氟沙星的敏感性,随机选取对环丙沙星和左氧氟沙星均耐药菌株4株和均敏感的菌株3株,分别PCR扩增gyrA基因和parC基因的耐药决定区,扩增片段长度分别为625、319bp,PCR扩增产物经纯化后测序并做序列分析。结果肺炎克雷伯菌对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率分别为51.1%(118/231)和45.9%(106/231);gyrA和parC基因经序列分析显示,耐药株均有gyrA基因的突变,其中1株出现第83、87和27位氨基酸的改变,2株出现第83位氨基酸的改变,1株出现第47位点的改变;环丙沙星敏感株中未出现gyrA基因的突变。4株耐药株均有parC基因的突变,引起相应氨基酸Ser80→Arg的改变,2株环丙沙星敏感株也发生了同样的改变。结论哈尔滨地区肺炎克雷伯菌对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药性显著,在喹诺酮耐药株中有gyrA和parC基因的同时突变,在敏感株中也发现了parC基因的突变。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 喹诺酮 GYRA基因 parc基因
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嗜水气单胞菌对氟喹诺酮类药物的敏感性及耐药相关基因分析 被引量:8
6
作者 王晓丰 薛晖 +1 位作者 丁正峰 杨林 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第6期1298-1303,共6页
为明确嗜水气单胞菌临床分离株对常用氟喹诺酮类药物的敏感性和耐药菌株中gyrA和parC基因的突变情况。试验采用自动化细菌药敏分析仪测定4种常用氟喹诺酮类药物对23株鱼源嗜水气单胞菌的最低抑菌浓度,并依据耐药数目的不同选取9株嗜水... 为明确嗜水气单胞菌临床分离株对常用氟喹诺酮类药物的敏感性和耐药菌株中gyrA和parC基因的突变情况。试验采用自动化细菌药敏分析仪测定4种常用氟喹诺酮类药物对23株鱼源嗜水气单胞菌的最低抑菌浓度,并依据耐药数目的不同选取9株嗜水气单胞菌,PCR扩增其gyrA及parC基因的喹诺酮抗性决定区(QRDR),直接测序后进行多序列比对分析。结果显示:嗜水气单胞菌对诺氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星和环丙沙星的耐药率依次为8.7%、30.4%、73.9%和43.5%;序列分析发现gyrA基因编码的第83位氨基酸存在Ser→Ile、Ser→Val的突变,parC基因编码的第87位氨基酸同样存在Ser→Ile的突变。表明临床分离的嗜水气单胞菌对恩诺沙星耐药最为严重,氧氟沙星、环丙沙星次之,对诺氟沙星较为敏感;尽管绝大多数耐药菌株的药物靶位基因QRDR区域有突变发生,但是菌株的耐药性与药物靶位基因QRDR区域有无发生突变并不存在线性关联,提示我们药物靶位的变化并非是氟喹诺酮类耐药菌株唯一的抗性机制。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 氟喹诺酮 GYRA基因 parc基因
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鸡源性沙门氏菌氟喹诺酮类耐药株与拓扑异构酶Ⅳ关系研究 被引量:6
7
作者 刘芳萍 李昌文 +4 位作者 刘立新 李睿 罗鹏志 卢斯亮 张秀英 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期94-98,共5页
采用常规PCR法,以雏鸡沙门氏菌NCTC5776作为质控菌株,取临床分离的对5种氟喹诺酮类药物(环丙沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、单诺沙星和沙拉沙星)均耐药的9株鸡源性沙门氏菌耐药株,提取其染色体DNA。设计引物parCF和parCR、parEF和parER,分... 采用常规PCR法,以雏鸡沙门氏菌NCTC5776作为质控菌株,取临床分离的对5种氟喹诺酮类药物(环丙沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、单诺沙星和沙拉沙星)均耐药的9株鸡源性沙门氏菌耐药株,提取其染色体DNA。设计引物parCF和parCR、parEF和parER,分别扩增菌株拓扑异构酶Ⅳ parC基因和parE基因的氟喹诺酮类耐药决定区(QRDR),对PCR扩增产物进行测序及序列分析。与质控菌株相比,9株临床分离耐药株parC基因QRDR的核苷酸未发生任何突变,菌株37的parE基因第1434位碱基发生T→C突变,菌株55的parE基因第1434位碱基发生T→C突变,菌株60的parE基因第1517位碱基发生T→C突变。菌株60的parE基因第506位氨基酸发生F→S突变,即Phe→Ser取代,且位于QRDR内,其余菌株的氨基酸均未发生变化。上述结果提示,parE基因突变与耐药性有一定关系,但是拓扑异构酶Ⅳ变异可能并非沙门氏菌耐药性产生的主要原因。 展开更多
关键词 沙门氏菌 氟喹诺酮类药物 拓扑异构酶IV parc基因 parE基因
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gyrA、parC及mdfA基因测序鉴定肺炎克雷伯菌 被引量:6
8
作者 黄支密 糜家睿 +5 位作者 单浩 盛以泉 夏守慧 沈娟 杨伟平 邹玉秀 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第18期4348-4350,共3页
目的探讨gyrA、parC和mdfA基因测序鉴定临床分离的泛耐药肺炎克雷伯菌的必要性。方法采用gyrA、parC和mdfA基因测序方法对经法国生物梅里埃公司API 20E系统(API LAB plus)和MicroScan WalkAway96Plus全自动细菌鉴定系统鉴定为克雷伯菌... 目的探讨gyrA、parC和mdfA基因测序鉴定临床分离的泛耐药肺炎克雷伯菌的必要性。方法采用gyrA、parC和mdfA基因测序方法对经法国生物梅里埃公司API 20E系统(API LAB plus)和MicroScan WalkAway96Plus全自动细菌鉴定系统鉴定为克雷伯菌属或产气肠杆菌的19株临床分离株进行分子鉴定。结果 19株菌gyrA、parC、mdfA基因PCR扩增均阳性,基因序列经GenBank中的BLASTn程序进行同源性比较分析,表明与2株完成全基因组测序的肺炎克雷伯菌肺炎亚种NTUH-K2044(Accession:AP006725.1)和MGH 78578(Accession:CP000647.1)最为接近,均为99.0%同源,证实19株均为肺炎克雷伯菌。结论采用gyrA、parC和mdfA基因测序鉴定肺炎克雷伯菌结果准确。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 GYRA基因 parc基因 mdfA基因 分子鉴定
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鲍曼不动杆菌喹诺酮类耐药基因突变分析 被引量:6
9
作者 王敏 覃章顺 +3 位作者 李先平 杜世杰 曹虹 陈进伟 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2010年第2期86-90,共5页
目的调查鲍曼不动杆菌对喹诺酮类药物的耐药情况,并对喹诺酮类耐药基因突变进行分析。方法对中南大学湘雅附二医院2002~2008年间鲍曼不动杆菌临床分离株的耐药情况进行统计。同时于2008年7~12月随机收集50株鲍曼不动杆菌,PCR扩增gyr... 目的调查鲍曼不动杆菌对喹诺酮类药物的耐药情况,并对喹诺酮类耐药基因突变进行分析。方法对中南大学湘雅附二医院2002~2008年间鲍曼不动杆菌临床分离株的耐药情况进行统计。同时于2008年7~12月随机收集50株鲍曼不动杆菌,PCR扩增gyrA基因和parC基因,并对扩增产物进行限制性片段长度多态性分析(PCR—RFLP),选取部分PCR扩增产物进行测序和分析。结果鲍曼不动杆菌对喹诺酮类药物的耐药率呈逐年上升的趋势。50株鲍曼不动杆菌对环丙沙星耐药率为62%,对左氧氟沙星耐药率为46%。gyrA基因及parC基因扩增分别获得305bp和400bp的基因产物。PCR-RFLP结果显示,对gyrA基因,耐药株100%不能被HinfI酶切,敏感株53%能被HinfI酶切;对parC基因,耐药株29%能被HinfI酶切,敏感株有63%能被HinfI酶切。分析测序结果,耐药株中的gyrA基因和parC基因存在突变,未被酶切的敏感株也存在突变,使HinfI的识别序列GACTC变为GACTT,酶切位点GANTC消失。被酶切耐药株中发现parC基因新的突变点,第89碱基密码子GAA中的A突变成G,被酶切敏感株的parC基因出现多个位点的同义突变。结论鲍曼不动杆菌临床分离株对喹诺酮类药物耐药情况严重,呈逐年上升的趋势。鲍曼不动杆菌对喹诺酮类药物产生耐药与gyrA基因突变和parC基因突变有关。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 喹诺酮 GYRA parc 基因突变
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猪链球菌对氟喹诺酮类药物的耐药性与靶位突变相关性 被引量:5
10
作者 芮萍 马增军 +3 位作者 段玲欣 刘谢荣 倪静 沈建忠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期600-604,共5页
旨在了解猪链球菌对氟喹诺酮类药物耐药性与parC、gyrA基因突变的相关性,通过微量稀释法测定34株猪链球菌对4种氟喹诺酮类药物的MIC值,采用PCR方法扩增并测序分析了临床分离的猪链球菌对氟喹诺酮类药物10株耐药株和9株敏感株的parC和gyr... 旨在了解猪链球菌对氟喹诺酮类药物耐药性与parC、gyrA基因突变的相关性,通过微量稀释法测定34株猪链球菌对4种氟喹诺酮类药物的MIC值,采用PCR方法扩增并测序分析了临床分离的猪链球菌对氟喹诺酮类药物10株耐药株和9株敏感株的parC和gyrA基因喹诺酮耐药决定区(QRDRs)。在氟喹诺酮类药物耐药菌株parC基因QRDRs发生Ser79→Phe、Arg 87→Leu的氨基酸突变,在4株高度耐药菌株gyrA基因QRDRs发生Arg66→Ser,Ser81→Arg氨基酸突变;当菌株对氟喹诺酮类药物敏感时,parC和gyrA基因的QRDR区均未有突变;而当MIC≥32μg.L-1时,parC的氨基酸发生了Ser79→Phe的突变,同时发生gyrA氨基酸Arg66→Ser,Ser81→Arg突变。结果表明,猪链球菌对氟喹诺酮类药物低水平类耐药是由parC单一位点突变引起,而高水平耐药是由parC和gyrA双位点突变引起。 展开更多
关键词 猪链球菌 氟喹诺酮类药物 parc基因 GYRA基因
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80株大肠埃希菌靶位基因突变对喹诺酮耐药影响 被引量:5
11
作者 赵瑞华 舒明星 陈淑贞 《中国感染控制杂志》 CAS 2002年第1期12-15,共4页
目的 探讨大肠埃希菌靶位基因突变对喹诺酮类药物耐药的影响。方法 本研究分别用琼脂稀释法和K -B纸片扩散法药敏试验检测了 80株致泌尿系感染的大肠埃希菌环丙沙星MIC的分布和对四种喹诺酮类药物的敏感性 ;PCR扩增大肠埃希菌的gyrA和... 目的 探讨大肠埃希菌靶位基因突变对喹诺酮类药物耐药的影响。方法 本研究分别用琼脂稀释法和K -B纸片扩散法药敏试验检测了 80株致泌尿系感染的大肠埃希菌环丙沙星MIC的分布和对四种喹诺酮类药物的敏感性 ;PCR扩增大肠埃希菌的gyrA和 parC基因的QRDR区 ,分别对其进行限制性内切酶酶切分析和SSCP分析 ,以检测药物靶位基因可能存在的突变。结果  80株致泌尿系感染的大肠埃希菌中有 4 7株对环丙沙星耐药 ,耐药率达 5 8.75 % ,2 0株对环丙沙星敏感的菌株 gyrA基因QRDR区未发生改变 ,而 13株敏感株和 4 7株耐药株gyrA 2 4 7bp位点处均存在突变 ,且这 13株对环丙沙星敏感的菌株均对萘啶酸耐药。 33株对环丙沙星敏感的菌株parCSSCP分析 ,均未存在突变。 结论 ① 80株致泌尿系感染的大肠埃希菌对环丙沙星的敏感性和对萘啶酸的敏感性存在明显差异 ;②gyrA基因是大肠埃希菌喹诺酮类药物的主要作用靶位。在某些菌株中 ,其 2 4 7位核苷酸位点的改变仅使细菌对环丙沙星的敏感性下降 ,parCQRDR区的突变使细菌的耐药程度增加。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 喹诺酮类药物 靶位基因 GYRA parc
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鲍曼不动杆菌对喹诺酮类药物的耐药机制分析 被引量:4
12
作者 戴宁 陈济超 +2 位作者 王占伟 赵素蕊 高占成 《实用检验医师杂志》 2011年第2期94-96,共3页
目的 探讨鲍曼不动杆菌(Acinetobacterbaumanii,Ab)对喹诺酮类药物的耐药机制。方法收集2007年11月至2008年10月全国多省市21家医院院内下呼吸道感染住院患者痰标本2698份进行培养鉴定,对Ab分离株进行药敏检测,采用聚合酶链反应对A... 目的 探讨鲍曼不动杆菌(Acinetobacterbaumanii,Ab)对喹诺酮类药物的耐药机制。方法收集2007年11月至2008年10月全国多省市21家医院院内下呼吸道感染住院患者痰标本2698份进行培养鉴定,对Ab分离株进行药敏检测,采用聚合酶链反应对Ab的不同耐药基因进行扩增,并进行序列分析。结果2698份痰标本共计培养出39株Ab。对环丙沙星耐药率为61.54%,对左氧氟沙星耐药率为53.85%。39株Ah中有30株(76.92%)发生parC基因突变,19株(48.72%)发生gyrA基因突变,15株同时发生parC基因和gyrA基因突变。结论Ab对喹诺酮类药物耐药机制主要与gyrA、parC基因突变有关。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 喹诺酮类 抗药性 GYRA基因 parc基因
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志贺菌对氟喹诺酮的耐药机制及流行状况研究 被引量:3
13
作者 游升荣 孙自镛 陈晶 《中国卫生检验杂志》 CAS 2006年第3期283-285,共3页
目的:研究志贺菌对氟喹诺酮的耐药机制及其流行状况。方法:对氟喹诺酮耐药志贺菌的gyrA基因和parC基因进行扩增、测序,查找突变点;用重复基因外回文序列-聚合酶链式反应(REP-PCR)对志贺菌进行基因分型。结果:两株耐氟喹诺酮的菌株都存在... 目的:研究志贺菌对氟喹诺酮的耐药机制及其流行状况。方法:对氟喹诺酮耐药志贺菌的gyrA基因和parC基因进行扩增、测序,查找突变点;用重复基因外回文序列-聚合酶链式反应(REP-PCR)对志贺菌进行基因分型。结果:两株耐氟喹诺酮的菌株都存在gyrA基因87位Asp(GAC)→Asn(AAC)和177位G ly(GGT)→Ser(AGT)的点突变,一株另有120位M et(ATG)→Leu(CTG)、203位Ile(ATC)→Leu(CTC)、204位Ser(AGC)→Thr(ACC)和205位Ile(ATT)→Leu(CTT)的点突变,另一株还有204位Ser(AGC)→Ile(AAC)的点突变。除87位点突变外,其余突变位点均未见报道。parC基因未发现点突变。REP-PCR基因分型结果提示16株宋内志贺菌有7种指纹图谱,12株福氏志贺菌有两种指纹图谱。结论:两株志贺菌对氟喹诺酮耐药是由gyrA基因点突变所致,耐药表型对突变的类型有一定的预见性,但耐药程度与突变频率的相关性不确定。2004年夏秋季武汉地区散发流行的志贺菌有相同或相似的克隆,血清型单一的宋内志贺菌存在基因多样性,福氏志贺菌中f2 a比f4 c的遗传多样性高。REP-PCR是一种快捷有效的基因分型法,可用于志贺菌同源性分析及暴发流行时的追根溯源。 展开更多
关键词 志贺菌 耐药 氟喹诺酮 GYRA基因 parc基因 REP—PCR
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耐环丙沙星鲍曼不动杆菌gyrA和parC突变模式分析 被引量:4
14
作者 刘丁 练向群 +1 位作者 王政 黄兆松 《中国感染控制杂志》 CAS 2008年第1期12-14,38,共4页
目的对临床耐环丙沙星的鲍曼不动杆菌进行gyrA和parC基因突变模式的分子流行病学调查。方法采用E-test法测定环丙沙星对94株临床分离鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC);对鲍曼不动杆菌的gyrA和parC基因进行聚合酶链反应(PCR)-限制性内切... 目的对临床耐环丙沙星的鲍曼不动杆菌进行gyrA和parC基因突变模式的分子流行病学调查。方法采用E-test法测定环丙沙星对94株临床分离鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC);对鲍曼不动杆菌的gyrA和parC基因进行聚合酶链反应(PCR)-限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)分析及DNA测序。结果在94株鲍曼不动杆菌中,只有38株(40.43%)对环丙沙星敏感(MIC≤1mg/L),而对环丙沙星的耐药率接近60%;PCR-RFLP分析结果表明,对环丙沙星耐药的56株菌都发生了gyrA和parC基因突变,且parC基因的突变率(87.50%)略高于gyrA基因(82.14%)。结论鲍曼不动杆菌对环丙沙星的耐药与gyrA和parC基因突变相关,其中parC基因突变的明显增长值得重视。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 环丙沙星 抗菌药物 抗药性 微生物 GYRA基因 parc基因 突变
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神经外科患者感染肺炎克雷伯菌耐药株parC基因变异分析及抗生素合理选用 被引量:4
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作者 胡成旺 蔡中立 张忠 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第7期644-647,共4页
目的研究神经外科患者感染肺炎克雷伯菌耐药株parC基因变异情况,分析菌株耐药性,以指导临床治疗的合理用药。方法收集2014年3月至2015年1月间神经外科院内感染患者的痰液等标本,作细菌培养后采用VITEK-2Compact全自动细菌鉴定仪进行鉴定... 目的研究神经外科患者感染肺炎克雷伯菌耐药株parC基因变异情况,分析菌株耐药性,以指导临床治疗的合理用药。方法收集2014年3月至2015年1月间神经外科院内感染患者的痰液等标本,作细菌培养后采用VITEK-2Compact全自动细菌鉴定仪进行鉴定,采用K-B纸片法检测肺炎克雷伯菌对喹诺酮类抗菌药物耐药性。提取parC基因,电泳鉴定后测序,分析其变异情况。结果药敏试验显示,分离株肺炎克雷伯菌对诺氟沙星、氧氟沙星、培氟沙星、左氧氟沙星、依诺沙星以及环丙沙星的耐药率分别为88.57%、82.86%、60.00%、51.43%、40.00%和32.86%,对加替沙星敏感。PCR扩增肺炎克雷伯菌parC基因片段大小为423bp。基因测序后与标准株对比,实验株80位氨基酸密码子由AGC突变为ATC,相应氨基酸由丝氨酸突变为异亮氨酸;实验株91位氨基酸密码子由AAT突变为GAT,相应氨基酸由天冬酰胺突变为天冬氨酸。结论肺炎克雷伯菌的耐药性产生与其parC基因位点突变有关。神经外科患者感染肺炎克雷伯菌的药物治疗应首选加替沙星。 展开更多
关键词 神经外科 肺炎克雷伯菌 parc基因 抗生素
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耐氟喹诺酮类铜绿假单胞菌gyrA及parC基因突变研究 被引量:2
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作者 谭艳 方治平 宋晓红 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期932-935,共4页
目的 研究临床分离的耐氟喹诺酮类铜绿假单胞菌gyrA及parC基因突变情况。方法 测定临床分离的 5 5株铜绿假单胞菌MIC值 ,从中筛选出 1株敏感菌和 8株耐药菌 ,以标准敏感菌株ATCC2 785 3作为质控菌株。用聚合酶链反应 (PCR)扩增gyrA及p... 目的 研究临床分离的耐氟喹诺酮类铜绿假单胞菌gyrA及parC基因突变情况。方法 测定临床分离的 5 5株铜绿假单胞菌MIC值 ,从中筛选出 1株敏感菌和 8株耐药菌 ,以标准敏感菌株ATCC2 785 3作为质控菌株。用聚合酶链反应 (PCR)扩增gyrA及parC基因的喹诺酮耐药决定区 (QR DR) ,扩增产物片段长度分别为 35 1bp、397bp。用限制性内切酶SacⅡ消化gyrAPCR产物 ,同时对上述 10株菌的gyrA及parC基因的喹诺酮决定区 (QRDR)进行PCR DNA直接测序分析。结果 有 8株耐菌株的gyrA基因在 83位 (ACC→ATC)有突变 ,导致氨基酸Thr→Ile的改变 ;有 3株高度耐药菌gyrA基因同时在 87位 (GAC→GGC)有突变 ,导致氨基酸Asp→Gly的改变 ;有 4株耐药菌株的parC基因在 87位有TCG→TTG突变 ,导致氨基酸由Ser→Leu的改变。同时具gy rA和parC突变MIC值是仅具gyrA突变菌株MIC值的 2~ 16倍。未发现parC突变单独存在。另外 ,有 6株耐药菌gyrA的 132位有CAC→CAT的突变 ;所有耐药菌株parC基因 115位有GCT→GCG的突变 ,该突变未引起氨基酸的改变。结论 gyrA83、87位突变及parC基因 87位突变都可引起铜绿假单胞菌对氟喹诺酮类药物产生耐药 ,但以gyrA基因 83位突变为主 ,合并gyrA基因 87位及parC基因 87位突变可增加耐药程度。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 氟喹诺酮类药物 GYRA基因 parc基因 耐药机制
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淋球菌氟喹诺酮耐药性的分子机制探讨 被引量:4
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作者 叶萍 王晓川 吴志华 《中国麻风皮肤病杂志》 北大核心 2004年第5期424-426,共3页
目的 : 探讨GyrA、ParC基因变异与淋球菌氟喹诺酮耐药性的相关关系。方法 : 首先对 78株淋球菌临床分离株环丙沙星最低抑菌浓度 (MIC)进行检测和GyrA、ParC基因进行PCR扩增 ,然后分别将 2株敏感菌、2株中介菌和 8株耐药菌的GyrA、Par... 目的 : 探讨GyrA、ParC基因变异与淋球菌氟喹诺酮耐药性的相关关系。方法 : 首先对 78株淋球菌临床分离株环丙沙星最低抑菌浓度 (MIC)进行检测和GyrA、ParC基因进行PCR扩增 ,然后分别将 2株敏感菌、2株中介菌和 8株耐药菌的GyrA、ParC基因进行DNA序列测定。结果 : 所有 78株淋球菌均扩增出GyrA、ParC基因 ;2株敏感菌和 1株中介菌的GyrA、ParC基因未发现突变 ,另外 1株中介菌中和 8株耐药菌中GyrA、ParC基因发现有一个或多个位点突变。结论 : GyrA、ParC基因变异可能是导致淋球菌氟喹诺酮耐药的重要分子机制。 展开更多
关键词 C基因 淋球菌 氟喹诺酮 分子机制 耐药性 耐药菌 位点突变 最低抑菌浓度(MIC) 临床分离株 环丙沙星
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嗜麦芽窄食单胞菌对氟喹诺酮类抗菌药的耐药机制研究 被引量:2
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作者 胡晓彦 贾坤如 +3 位作者 熊建球 胡龙华 张玲玲 桂炳东 《实验与检验医学》 CAS 2011年第4期350-352,365,共4页
目的探讨嗜麦芽窄食单胞菌的DNA解旋酶和拓扑异构酶Ⅳ与氟喹诺酮类抗菌药物的耐药关系。方法选择氟喹诺酮类抗菌药物耐药且主动外排表型机制阴性的临床分离菌株19株和氟喹诺酮类抗菌药物敏感株10株,对其gyrA和parC的喹诺酮决定区域的基... 目的探讨嗜麦芽窄食单胞菌的DNA解旋酶和拓扑异构酶Ⅳ与氟喹诺酮类抗菌药物的耐药关系。方法选择氟喹诺酮类抗菌药物耐药且主动外排表型机制阴性的临床分离菌株19株和氟喹诺酮类抗菌药物敏感株10株,对其gyrA和parC的喹诺酮决定区域的基因进行PCR扩增,扩增产物进行测序,BLAST比对分析其氨基酸序列。采用SPSS软件进行统计学分析。结果 19株耐药菌的gyrA和parC基因各有7株菌核苷酸发生了碱基替换改变但均为同义突变,有2株菌在gyrA基因中124位氨基酸发生了突变由谷氨酸变为天冬氨酸(GAA→GAC),在氟喹诺酮类抗菌药物敏感组中也同样有1株发生同样的突变,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论嗜麦芽窄食单胞菌对氟喹诺酮类抗菌药物耐药与主动外排泵、外膜的通透性降低有关,但与解旋酶和拓谱异构酶Ⅳ的靶位点改变无显著关系。 展开更多
关键词 嗜麦芽窄食单胞菌 氟喹诺酮 耐药性 GYRA基因 parc基因
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淋病奈瑟菌GyrA基因及ParC基因突变与耐喹诺酮类药物的关系 被引量:1
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作者 谢平 糜祖煌 +2 位作者 李琴 张稷 肖琛月 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2003年第4期275-278,共4页
目的 :探讨淋病奈瑟菌DNA回旋酶A亚单位GyrA基因及拓扑异构酶ⅣC亚单位ParC基因突变与耐喹诺酮类药物之间的关系。 方法 :采用DNA序列测定法对 2 0株无锡地区淋病奈瑟菌临床分离株的GyrA及ParC基因的喹诺酮耐药决定区 (QRDR)相关序列... 目的 :探讨淋病奈瑟菌DNA回旋酶A亚单位GyrA基因及拓扑异构酶ⅣC亚单位ParC基因突变与耐喹诺酮类药物之间的关系。 方法 :采用DNA序列测定法对 2 0株无锡地区淋病奈瑟菌临床分离株的GyrA及ParC基因的喹诺酮耐药决定区 (QRDR)相关序列进行测序分析 ,并利用琼脂扩散法检测了该 2 0株淋病奈瑟菌临床分离株对诺氟沙星药物的敏感性。 结果 :2 0株被检淋病奈瑟菌菌株在GyrA基因的两个常见突变位点之一的Ser91处均未发生突变 ,却在另一位点Asp95处则均有突变 ;而 19株被检淋病奈瑟菌菌株中有 16株发生了ParC基因的 86、87、88、91位点突变。 结论 :GyrA基因的Asp95位点突变与ParC基因的Asp86、Ser87、Ser88和Glu91位点突变共同参与了淋病奈瑟菌对喹诺酮类药物产生的耐药。 展开更多
关键词 淋病奈瑟菌 CyrA基因 parc基因 喹诺酮 耐药性 基因突变
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GyrA and ParC Gene Mutation of Clinically Isolated Fluoroquinolones-resistant Strain of Salmonella 被引量:2
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作者 LIU Fangping TONG Hengmin 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2006年第1期47-50,共4页
Nine strains resistant to five fluoroquinolones (Ciprofloxacin, Ofloxacin, Enrofloxacin, Danofloxacin, Sarafloxacin) were isolated from clinical samples and extracted the chromosomal DNA of these strains. Designed p... Nine strains resistant to five fluoroquinolones (Ciprofloxacin, Ofloxacin, Enrofloxacin, Danofloxacin, Sarafloxacin) were isolated from clinical samples and extracted the chromosomal DNA of these strains. Designed primers to amplify the Quinolone-resistance-determining region (QRDR) of gyrA and par(?,, then the PCR products were sequenced and analyzed. In comparision with NCTC5776, a single mutation was found at base 371 in gyrA of strain 38 which changed from C to T, and a single mutation was found at base 350 in gyrA of strain 60 which changed from A to C. No mutation was found in gyrA of the rest The mutation of strain 38 led to an amino acid substitution of Arg99Cys and the mutation of 60 led to an amino acid substitution of Met 92 Leu. No mutation was found in parC QRDR of all the isolates. These results indicats that the DNA gyrase will be the primary target to salmonella of fluoroquinolone. 展开更多
关键词 FLUOROQUINOLONE SALMONELLA GYRA parc gene mutation
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