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PTC-209诱导体外螺旋神经元损伤作用及机制
1
作者 朱国霞 罗家胜 +1 位作者 张霞婧 吴永翔 《西部医学》 2024年第2期186-190,197,共6页
目的 探讨Bmi1特异性抑制剂PTC-209诱导体外培养耳蜗器官螺旋神经元(SGNs)、听觉神经纤维(ANFs)的损伤作用,并分析其可能的调控机制。方法 选用P3新生SD仔鼠进行耳蜗器官培养,首先与不同浓度PTC-209进行培养,确定损伤模型(PTC-209组),... 目的 探讨Bmi1特异性抑制剂PTC-209诱导体外培养耳蜗器官螺旋神经元(SGNs)、听觉神经纤维(ANFs)的损伤作用,并分析其可能的调控机制。方法 选用P3新生SD仔鼠进行耳蜗器官培养,首先与不同浓度PTC-209进行培养,确定损伤模型(PTC-209组),即10μM PTC-209与耳蜗器官共培养48 h。随后将10μM PTC-209与5 mM GSH共培养,确定最佳保护模型(GSH+PTC-209组),即Pre6h 5 mM GSH对10μM PTC-209培养48 h。最后将实验分为Ctrl组、GSH组、PTC-209组及GSH+PTC-209组,培养结束后予MitoSOXRed进行组织染色,激光共聚焦显微镜观察。结果 PTC-209诱导耳蜗SGNs和ANFs损伤随浓度增高和作用时间延长而加重,其损伤作用呈时间和浓度依赖性。不同时间预处理GSH对PTC-209诱导SGNs和ANFs损伤存在差异保护作用,将各组的ANFs进行统计分析发现Pre 6 h GSH 5 mM+PTC-209 10μM组与其余各组ANFs差异均有统计学意义(P<0.01),提示Pre 6 h 5 mM GSH对10μM PTC-209培养48 h诱导SGNs和ANFs的损伤有显著保护作用。MitoSOX Red染色显示Ctrl组、GSH组及GSH+PTC-209组均未见红色荧光标记的ROS在SGNs、支持细胞(SCs)和ANFS蓄积;PTC-209组红色荧光标记的ROS在SGNs、SCs和ANFS大量蓄积。统计分析显示PTC-209组和Ctrl组、GSH+PTC-209组ROS的红色荧光光密度值差异均有统计学意义(q分别为343.5、349.3,P<0.01)。结论 PTC-209可诱导SGNs处细胞内的自由基和线粒体中ROS大量蓄积,进而导致氧化还原失衡,促进SGNs死亡,但是调控机制尚需要进一步探讨。 展开更多
关键词 ptc-209 BMI1 ROS蓄积 耳蜗器官培养 螺旋神经元细胞
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Bmi-1小分子抑制剂PTC-209对肾癌细胞生物学行为的影响及机制 被引量：1
2
作者 区景运 谭晓军 +2 位作者 胡波 刘璠娜 尹良红 《山东医药》 CAS 2019年第14期27-30,共4页
目的观察Bmi-1小分子抑制剂PTC-209对肾细胞癌(简称肾癌)细胞生物学行为的影响,并探讨其机制。方法以0、1、2. 5、5、10μmol/L的PTC-209作用于肾癌786-O细胞,采用CCK-8法测算培养24、48 h时的细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞... 目的观察Bmi-1小分子抑制剂PTC-209对肾细胞癌(简称肾癌)细胞生物学行为的影响,并探讨其机制。方法以0、1、2. 5、5、10μmol/L的PTC-209作用于肾癌786-O细胞,采用CCK-8法测算培养24、48 h时的细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期分布情况,划痕实验观察细胞迁移能力,克隆形成实验观察细胞克隆集落形成能力,荧光定量PCR法及Western blotting法检测细胞中的Notch1及Notch信号通路下游靶基因发状分裂相关增强子1(HES1)、髓细胞组织增生蛋白(MYC)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子2A(CDKN2A)、Cyclin D1和Bcl-2。结果随着PTC-209作用浓度升高及作用时间的延长,786-O细胞存活率减少(P均<0. 05);随着PTC-209作用浓度升高,786-O细胞凋亡率、G_0/G_1期细胞比例增加,S期及G_2/M期细胞比例、细胞迁移率及克隆形成数减少(P均<0. 05);与0μmol/L比较,5μmol/L的PTC-209作用后786-O细胞中Notch1、HES1、MYC、CDKN2A、Cyclin D1、Bcl-2基因及蛋白表达均减少(P均<0. 05)。结论 PTC-209可抑制肾癌细胞增殖,促进细胞凋亡,将细胞阻滞于G_0/G_1期,减弱细胞迁移及克隆形成能力;该作用与PTC-209影响肾癌细胞中Notch信号通路相关基因表达有关。 展开更多
关键词 ptc-209 肾肿瘤 NOTCH通路 细胞凋亡 细胞周期 细胞增殖
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BMI1小分子抑制剂PTC-209对人肾癌细胞786-O干细胞的干性抑制作用 被引量：1
3
作者 赵爱月 许天文 +2 位作者 傅德强 林建光 连建烽 《临床合理用药杂志》 2018年第32期7-9,共3页
目的观察PTC-209对人肾癌细胞786-O干细胞的干性抑制作用。方法用成球实验培养786-O干细胞,用Western blot法检测BMI1蛋白的表达水平。用对照载体和PTC-209处理786-O细胞,记录786-O细胞的成球效率和侵袭能力。建立裸鼠人786-O肾癌移植... 目的观察PTC-209对人肾癌细胞786-O干细胞的干性抑制作用。方法用成球实验培养786-O干细胞,用Western blot法检测BMI1蛋白的表达水平。用对照载体和PTC-209处理786-O细胞,记录786-O细胞的成球效率和侵袭能力。建立裸鼠人786-O肾癌移植瘤模型,实验分为对照组和PTC-209干预组。测量皮下移植瘤体积并记录肿瘤生长情况。结果 Western blot结果显示BMI1蛋白表达水平在肾癌干细胞的表达与对照组相比,PTC-209能显著抑制786-O细胞的成球能力较强(17.6±6.0 vs.6.1±2.5,P<0.05),对照组侵袭的细胞,高于PTC-209干预组(116.5±10.7)个vs.(32.3±4.8)个(P<0.05),PTC-209干预组在裸鼠体内786-O细胞成瘤速度及瘤体生长速度均较对照组慢。结论 BMI1参与786-O肾癌干细胞的干性调节与移植肿瘤的生长。 展开更多
关键词 肾癌 786-O 肿瘤干细胞 BMI1 ptc-209
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PTC-209靶向抑制Bmi1对人舌鳞癌细胞的体外抗癌作用 被引量：1
4
作者 王琼 吴亚平 +4 位作者 黄蓉 程杰 杨建荣 王琰玲 李中武 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2017年第7期836-841,共6页
目的:检测Bmi1(B lymphoma Mo-MLV insertion region 1)小分子化学抑制剂PTC-209对人舌鳞癌细胞中Bmi1表达的抑制作用,并探讨其对体外人舌鳞癌细胞生物表型的影响。方法:对人舌鳞癌细胞系Cal27予以PTC-209处理,通过蛋白质免疫印迹、实... 目的:检测Bmi1(B lymphoma Mo-MLV insertion region 1)小分子化学抑制剂PTC-209对人舌鳞癌细胞中Bmi1表达的抑制作用,并探讨其对体外人舌鳞癌细胞生物表型的影响。方法:对人舌鳞癌细胞系Cal27予以PTC-209处理,通过蛋白质免疫印迹、实时定量逆转录聚合酶链反应检测PTC-209干预后细胞内Bmi1的表达变化;通过MTT、Transwell、划痕试验等分析PTC-209处理对人舌鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响;应用克隆形成、肿瘤球培养、流式分选等实验分析PTC-209对人舌鳞癌细胞系中肿瘤干细胞亚群的影响。结果:PTC-209能显著下调人舌鳞癌细胞中Bmi1的表达,并具有浓度和时间依赖效应(P<0.05);PTC-209体外干预可明显抑制细胞增殖、侵袭和迁移能力,增强细胞对顺铂和5-FU的药物敏感性;PTC-209能显著降低细胞克隆形成率、肿瘤球形成以及ALDH+亚群细胞比例。结论:PTC-209能在体外抑制人舌鳞癌细胞中Bmi1的表达,具有抑制细胞增殖、侵袭迁移和降低肿瘤干细胞亚群比例等抗肿瘤效应。 展开更多
关键词 人舌鳞状细胞癌 BMI1 ptc-209
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