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PRL-3在前列腺癌组织中的表达及其意义 被引量:8
1
作者 赵易 武国军 +5 位作者 张瑞 沈岚 于垂恭 王映梅 药立波 袁建林 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第1期39-41,共3页
目的:研究蛋白酪氨酸磷酸酶PRL-3在前列腺癌及前列腺癌旁增生组织中的表达及其与临床病理特征和生物学行为的关系。方法:采用免疫组织化学S-P法检测60例前列腺石蜡包埋组织中PRL-3的表达情况,其中前列腺增生组织12例,前列腺癌组织48例,... 目的:研究蛋白酪氨酸磷酸酶PRL-3在前列腺癌及前列腺癌旁增生组织中的表达及其与临床病理特征和生物学行为的关系。方法:采用免疫组织化学S-P法检测60例前列腺石蜡包埋组织中PRL-3的表达情况,其中前列腺增生组织12例,前列腺癌组织48例,均为存档石蜡切片。并应用χ2检验方法分析PRL-3在前列腺癌组织中表达的意义与临床病理特征之间的关系。结果:免疫组化结果显示PRL-3表达定位于前列腺癌组织的细胞浆,癌组织与癌旁增生组织的阳性率为分别为79.2%和25.0%(P<0.05),癌组织中PRL-3的表达明显高于癌旁增生组织。PRL-3表达水平在不同年龄段、有无家族史之间差异无显著性(P>0.05),在不同Gleason评分之间差异有显著性(P<0.05),在不同临床TNM分期之间差异无显著性(P>0.05),在血清PSA浓度≤20ng/mL与PSA浓度>20ng/mL组间差异无显著性(P>0.05)。结论:PRL-3的表达与前列腺癌发生发展机制关系较密切,PRL-3蛋白可作为前列腺癌诊断、治疗及预后判断过程中的一种较有价值的病理学指标。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 prl-3基因 良性前列腺增生 免疫组织化学
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人大肠癌细胞PRL-3基因启动子Snail结合位点的初步研究 被引量:3
2
作者 杨发达 李建明 +2 位作者 周军 柳玉红 丁彦青 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期401-405,共5页
目的确定转录因子Snail可与PRL-3基因启动子区结合。方法应用生物信息学方法获得PRL-3基因启动子区域,并对其潜在的Snail结合位点进行预测,进一步应用Snail抗体染色质免疫共沉淀技术结合PCR技术检测PRL-3基因启动子序列,以确定转录因子S... 目的确定转录因子Snail可与PRL-3基因启动子区结合。方法应用生物信息学方法获得PRL-3基因启动子区域,并对其潜在的Snail结合位点进行预测,进一步应用Snail抗体染色质免疫共沉淀技术结合PCR技术检测PRL-3基因启动子序列,以确定转录因子Snail可与PRL-3基因启动子结合。结果应用TRED在线分析系统确定PRL-3基因的启动子区域位于PRL-3基因上游-700bp至299bp之间,在该启动子区域存在多个转录因子如Snail、n-MYC、ARNT、E74A、NF-kappaB、NRF-2及AML-1等的结合位点;在启动子区域的-500bp至-451bp之间存在Snail结合的核心寡核苷酸序列CACCTG,在其他多个区域存在多个类似这一核心序列的DNA序列;应用染色质免疫沉淀技术结合PCR扩增的方法对人大肠癌细胞株SW480细胞进行分析,发现Snail可与人大肠癌细胞株SW480PRL-3基因的启动子区域的DNA片断结合。结论转录因子Snail可与人大肠癌细胞SW480PRL-3基因启动子结合,参与PRL-3基因的调控。 展开更多
关键词 染色质免疫沉淀技术 SNAIL 启动子 prl-3
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沉默PRL-3基因表达抑制胃癌生长研究 被引量:5
3
作者 蔡世荣 王昭 +4 位作者 陈创奇 崔冀 张常华 何裕隆 詹文华 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期618-621,共4页
目的探究miRNA干扰沉默PRL-3基因表达对胃癌生长的作用。方法构建表达人工PRL-3 miRNA的慢病毒载体,转染SGC7901细胞并沉默其PRL-3表达;噻唑蓝(MTT)试验评价PRL-3在SGC7901细胞增殖中的作用;移植瘤生长试验评估其在胃癌生长中的作... 目的探究miRNA干扰沉默PRL-3基因表达对胃癌生长的作用。方法构建表达人工PRL-3 miRNA的慢病毒载体,转染SGC7901细胞并沉默其PRL-3表达;噻唑蓝(MTT)试验评价PRL-3在SGC7901细胞增殖中的作用;移植瘤生长试验评估其在胃癌生长中的作用。结果与转染空载体组比较,转染PRL-3 miRNA的慢病毒载体可抑制SGC7901细胞的增殖。荷瘤动物实验表明,转染PRL-3组肿瘤大小为(1.92±0.18)cm^3,转染空载体组为(4.74±0.39)cm^3,两组差异有统计学意义(P〈0.05)。结论沉默PRL-3表达可抑制胃癌SGC7901细胞的增殖,并抑制移植瘤的生长,可作为一种有潜力的抗肿瘤靶点。 展开更多
关键词 胃肿瘤 prl-3基因 肿瘤生长
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PRL-3基因在结直肠癌原发灶中的表达及其临床意义 被引量:2
4
作者 廉朋 蔡国响 +2 位作者 徐烨 蔡三军 师英强 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2006年第10期823-827,共5页
背景与目的:据报道,PRL-3基因表达在结直肠癌中具有显著的转移相关性。本研究探讨PRL-3基因在结直肠癌原发灶中的表达强度及其与主要临床病理学指标的相关性,以及在结直肠癌预后判断中的临床意义。方法:提取1998—2000年接受手术治疗并... 背景与目的:据报道,PRL-3基因表达在结直肠癌中具有显著的转移相关性。本研究探讨PRL-3基因在结直肠癌原发灶中的表达强度及其与主要临床病理学指标的相关性,以及在结直肠癌预后判断中的临床意义。方法:提取1998—2000年接受手术治疗并且具有完整随访信息的结直肠癌患者196例,采用免疫组织化学技术检测PRL-3表达情况,同时收集相关临床病理资料和随访信息进行相关性分析和预后研究。结果:在196例标本中,PRL-3高表达阳性率为49.5%(97/196),与肿瘤的组织分化程度、脉管侵犯、Dukes分期、手术性质以及术后转移的发生相关;单因素和多因素分析提示PRL-3表达是结直肠癌患者的重要预后因素。结论:PRL-3的表达是结直肠癌患者的一个新的预后指标,此基因的高水平表达提示术后脏器转移发生的可能性升高,并且和术后生存时间的缩短关系密切。 展开更多
关键词 结直肠癌 prl-3基因 预后
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PRL-3基因RNA干扰慢病毒载体的构建及稳定感染HepG2单克隆细胞株的建立 被引量:2
5
作者 黄德好 苏树英 陈规划 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期862-866,共5页
目的构建PRL-3基因RNA干扰慢病毒载体并建立被稳定感染的HepG2单克隆细胞株。方法设计PRL-3基因特异性RNAi靶序列,合成靶序列的DNA oligo,退火形成双链DNA,与含绿色荧光蛋白(GFP)编码基因的pGCL-GFP线性化载体连接,产生重组慢病毒质粒LV... 目的构建PRL-3基因RNA干扰慢病毒载体并建立被稳定感染的HepG2单克隆细胞株。方法设计PRL-3基因特异性RNAi靶序列,合成靶序列的DNA oligo,退火形成双链DNA,与含绿色荧光蛋白(GFP)编码基因的pGCL-GFP线性化载体连接,产生重组慢病毒质粒LV-PRL3-siRNA,转化感受态细胞,PCR筛选阳性克隆,并测序鉴定。用Lipofectamine 2000将LV-PRL3-siRNA、pHelper 1.0和pHelper 2.0这3种质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒,经孔稀释法,测定病毒滴度。重组慢病毒感染肝癌HepG2细胞,进行RealTime-PCR和Western-Blot验证PRL-3基因的沉默效果,筛选出最佳干扰序列组及阴性对照组的单克隆细胞株。结果成功构建PRL-3基因RNA干扰慢病毒载体并获得相应的慢病毒,浓缩病毒悬液的滴度为6E+8 Tu.mL-1。重组慢病毒对HepG2细胞PRL-3基因表达有明显沉默作用,其中第一干扰序列效果最明显。筛选出最佳干扰序列组及阴性对照组的单克隆肝癌细胞株。结论成功构建人PRL-3基因特异性的慢病毒干扰载体,并筛选出最佳干扰序列组及阴性对照组的单克隆肝癌细胞株。 展开更多
关键词 RNA干扰 慢病毒 prl-3基因 肝细胞癌
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PRL-3及其同源异形体重组杆粒的构建和鉴定 被引量:1
6
作者 何太平 熊亮 +1 位作者 莫丽儿 梁念慈 《广东医学院学报》 2008年第5期489-491,495,共4页
目的构建PRL-3及其同源异形体重组杆状病毒表达载体,为下一步表达PRL-3及其同源异形体蛋白并从中草药活性成分中筛选出PRL-3抑制剂奠定基础。方法应用RT-PCR方法从高转移卵巢癌细胞HO-8910PM扩增PRL-3及其同源异形体编码序列,克隆到供... 目的构建PRL-3及其同源异形体重组杆状病毒表达载体,为下一步表达PRL-3及其同源异形体蛋白并从中草药活性成分中筛选出PRL-3抑制剂奠定基础。方法应用RT-PCR方法从高转移卵巢癌细胞HO-8910PM扩增PRL-3及其同源异形体编码序列,克隆到供体质粒pFastBac HTB,在DH10Bac菌中进行同源重组,经3种抗生素和蓝白斑筛选,得到Bacmid-HTB-PRL-3和Bacmid-HTB-PRL-3-variant,PCR鉴定其正确性。结果与结论成功构建了PRL-3及其同源异形体重组杆粒。 展开更多
关键词 prl-3 杆状病毒 基因重组
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PRL-3基因沉默对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响 被引量:1
7
作者 钟琰 吴爱国 +1 位作者 纪术峰 沈三弟 《新医学》 2011年第6期370-374,共5页
目的:观察短发夹状小干扰RNA(shRNA)沉默PRL-3基因对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡的影响。方法:构建PRL-3基因特异性shRNA表达载体,使用脂质体法将PRL-3-shRNA表达载体转染入MCF-7细胞。采用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测转染后M... 目的:观察短发夹状小干扰RNA(shRNA)沉默PRL-3基因对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡的影响。方法:构建PRL-3基因特异性shRNA表达载体,使用脂质体法将PRL-3-shRNA表达载体转染入MCF-7细胞。采用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测转染后MCF-7细胞PRL-3基因mRNA和蛋白的表达;运用MTT法检测转染后MCF-7细胞的增殖水平,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:酶切鉴定和测序分析证实PRL-3-shRNA表达载体成功构建。转染成功后,PRL-3-shRNA组PRL-3基因mRNA和蛋白表达水平明显降低。MTT结果显示MCF-7细胞转染PRL-3-shRNA后细胞增殖水平降低;流式细胞仪检测显示,PRL-3-shRNA转染后,MCF-7细胞凋亡率明显增高。结论:沉默PRL-3基因表达可抑制MCF-7细胞的增殖,促进其凋亡。 展开更多
关键词 乳腺癌 prl-3 SHRNA 基因治疗 细胞增殖 凋亡
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PRL-3基因对结直肠癌细胞增殖能力的影响 被引量:1
8
作者 柳玉红 温寿青 +4 位作者 陈蕾 邱立 汪春福 曹亚平 邹桂华 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2012年第8期680-684,共5页
目的:探讨PRL-3的过表达或敲低对结直肠癌细胞增殖能力的影响.方法:利用MTT法、平板克隆形成实验检测PRL-3对细胞体外增殖的影响;应用流式细胞术检测PRL-3对细胞周期的影响.结果:应用MTT法,检测PRL-3对SW480/EGFP、SW480-EGFP-PRL-3、SW... 目的:探讨PRL-3的过表达或敲低对结直肠癌细胞增殖能力的影响.方法:利用MTT法、平板克隆形成实验检测PRL-3对细胞体外增殖的影响;应用流式细胞术检测PRL-3对细胞周期的影响.结果:应用MTT法,检测PRL-3对SW480/EGFP、SW480-EGFP-PRL-3、SW480/EGFP/Mock及SW480-PRL-3-KD1细胞体外增殖能力的影响,经析因方差分析,4组差异具有显著性(F=23.463,P=0.000);不同时间点对细胞体外增殖的影响差异具有显著性(F=71.515,P=0.000);各组细胞与各时间组两因素交互效应显著(F=2.128,P=0.008);除第1天外,其他各时间点细胞组间的细胞增殖差异具有显著性.经LSD法多重比较,结果表明,与SW480/EGFP/Mock和SW480/EGFP细胞相比,SW480-EGFP-PRL-3细胞的增殖速度加快,而SW480-PRL-3-KD1细胞的增殖速度减慢.平板克隆形成实验显示SW480-EGFP-PRL-3细胞克隆形成能力明显增强,而SW480-PRL-3-KD1细胞克隆形成能力显著下降,差异具有显著的统计学意义(F=44.411,P=0.000).结论:PRL-3基因可促进结直肠癌细胞的增殖. 展开更多
关键词 结直肠癌 prl-3 肿瘤增殖
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PRL-3基因对结直肠癌细胞形态及粘附、运动能力的影响 被引量:1
9
作者 柳玉红 陈蕾 +3 位作者 邱立 温寿青 曹亚平 邹桂华 《热带医学杂志》 CAS 2012年第4期432-435,F0002,共5页
目的探讨PRL-3的过表达或敲低对结直肠癌细胞相应的生物学特性的影响。方法常规进行细胞培养,应用倒置相差显微镜、扫描电镜观察细胞结构;应用运动小室实验检测PRL-3对结直肠癌迁移能力的影响;应用细胞粘附实验测定细胞在I型胶原上的粘... 目的探讨PRL-3的过表达或敲低对结直肠癌细胞相应的生物学特性的影响。方法常规进行细胞培养,应用倒置相差显微镜、扫描电镜观察细胞结构;应用运动小室实验检测PRL-3对结直肠癌迁移能力的影响;应用细胞粘附实验测定细胞在I型胶原上的粘附性。结果粘附实验结果表明,与SW480/EGFP/mock和SW480/EGFP细胞相比,SW480-EGFP-PRL-3细胞的粘附能力增强,而SW480-PRL-3-KD1细胞的粘附能力减弱,差异有统计学意义(F=22.013,P<0.01)。运动小室实验证明,SW480/EGFP、SW480-EGFP-PRL-3、SW480/EGFP/mock及SW480-PRL-3-KD1细胞的运动能力差异有统计学意义(F=21.368,P<0.01),说明PRL-3与结直肠癌细胞的运动迁移能力有关。结论 PRL-3基因是结直肠癌细胞粘附、迁移的促进基因。 展开更多
关键词 结直肠癌 prl-3 粘附 迁移
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PRL-3基因对胶质母细胞瘤替莫唑胺敏感性的影响
10
作者 杨羽淇 王盈雯 +1 位作者 贾博 郭庆东 《中国医药导报》 CAS 2023年第11期14-18,共5页
目的研究PRL-3基因在胶质母细胞瘤中的表达及其对胶质母细胞瘤替莫唑胺敏感性的影响。方法通过TCGA数据库分析PRL-3基因在胶质母细胞瘤及正常组织中表达情况,进一步选取空军军医大学第一附属医院诊治的15例胶质母细胞瘤患者术后肿瘤组织... 目的研究PRL-3基因在胶质母细胞瘤中的表达及其对胶质母细胞瘤替莫唑胺敏感性的影响。方法通过TCGA数据库分析PRL-3基因在胶质母细胞瘤及正常组织中表达情况,进一步选取空军军医大学第一附属医院诊治的15例胶质母细胞瘤患者术后肿瘤组织(原发性10例,复发性5例),采用免疫组织化学法检测PRL-3阳性细胞在胶质母细胞瘤中的表达情况。选取人胶质母细胞瘤LN229细胞系及替莫唑胺耐药的LN229/TMZ-R细胞系,采用qRT-PCR、Western blot检测PRL-3 mRNA及蛋白的表达情况。选取LN229、SHG44细胞系及对替莫唑胺不敏感的U87细胞系,分别设置正常组、对照组、空载质粒组、PRL-3过表达组、PRL-3下调组。比较正常组、空载质粒组、PRL-3过表达组、PRL-3下调组PRL-3 mRNA表达情况以验证PRL-3过表达及下调是否成功。然后将对照组、PRL-3过表达组、PRL-3下调组采用替莫唑胺(LN229、SHG44细胞系加入替莫唑胺100μmol/L,U87细胞系加入替莫唑胺500μmol/L)进行处理,正常组不处理,72 h后采用CCK-8法测定细胞活性。结果数据库分析显示,原发性胶质母细胞瘤中PRL-3表达高于正常组织,且随肿瘤级别增高而升高(P<0.05)。复发性胶质母细胞瘤组织中PRL-3阳性细胞免疫组织化学法评分高于原发性胶质母细胞瘤组织(P<0.05)。LN229/TMZ-R细胞系中PRL-3 mRNA表达高于LN229细胞系(P<0.05),PRL-3蛋白在LN229/TMZ-R细胞系中高表达。PRL-3过表达组PRL-3 mRNA高于正常组,PRL-3下调组PRL-3 mRNA低于正常组(P<0.05)。在LN229、SHG44、U87细胞系中,对照组细胞活性低于正常组,PRL-3过表达组细胞活性高于对照组,PRL-3下调组细胞活性低于对照组(P<0.05)。结论PRL-3基因低表达可以增强胶质母细胞瘤对替莫唑胺治疗的敏感性,有望成为协同替莫唑胺化疗的有益靶点。 展开更多
关键词 prl-3基因 胶质母细胞瘤 替莫唑胺 化疗
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PRL-3基因的克隆及其原核表达载体的构建表达
11
作者 周军 李建明 +1 位作者 柳玉红 丁彦青 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期641-643,共3页
目的克隆人PRL-3基因并构建其原核表达载体。方法设计PRL-3特异性引物,提取人大肠癌细胞系SW480总RNA,用RT-PCR方法获取人PRL-3cDNA。经T-A克隆,通过双酶切鉴定及测序确认后,构建人PRL-3基因的原核表达载体pGEX-4T-1-PRL-3。结果成功扩... 目的克隆人PRL-3基因并构建其原核表达载体。方法设计PRL-3特异性引物,提取人大肠癌细胞系SW480总RNA,用RT-PCR方法获取人PRL-3cDNA。经T-A克隆,通过双酶切鉴定及测序确认后,构建人PRL-3基因的原核表达载体pGEX-4T-1-PRL-3。结果成功扩增出人PRL-3全长cDNA,并构建pGEX-4T-1-PRL-3原核表达载体,测序结果表明PRL-3全长cDNA与GenBank中PRL-3序列完全一致,SDS-PAGE胶分析表明,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了重组蛋白。结论获得人PRL-3基因全长cDNA并构建其原核表达载体,使其在大肠杆菌中获得了高效表达,为深入研究PRL-3基因在大肠癌发生发展中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 大肠癌 prl-3 基因克隆 原核表达
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结肠癌肝转移灶人PRL-3基因的扩增与克隆 被引量:1
12
作者 徐旭 新燕 +3 位作者 李志伟 张克斌 张朝军 于水情 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2006年第3期236-239,共4页
目的从人结肠癌肝转移病灶标本中提取染色体RNA,聚合酶链反应(PCR)扩增及克隆人PRL-3基因。方法收集人结肠癌肝转移标本,提取总RNA,逆转录为cDNA,PCR扩增 PRL-3序列,A-T克隆于pMD-18T载体中,转化大肠杆菌JM109株,提取质粒,对重组质粒进... 目的从人结肠癌肝转移病灶标本中提取染色体RNA,聚合酶链反应(PCR)扩增及克隆人PRL-3基因。方法收集人结肠癌肝转移标本,提取总RNA,逆转录为cDNA,PCR扩增 PRL-3序列,A-T克隆于pMD-18T载体中,转化大肠杆菌JM109株,提取质粒,对重组质粒进行酶切与测序鉴定。结果通过酶切、PCR与测序3种方法证实所获得的基因片断为PRL-3基因。结论克隆到序列正确的人源性PRL-3基因,为实现PRL-3基因的高效表达及制备相应抗体奠定了基础。 展开更多
关键词 蛋白质酪氨酸磷酸酶 聚合酶链反应 基因扩增
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人PRL-3基因真核表达载体构建及相关蛋白生物信息学分析
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作者 周军 李建明 +2 位作者 杨发达 柳玉红 丁彦青 《中国热带医学》 CAS 2008年第3期380-383,共4页
目的克隆人PRL-3基因并构建其真核表达载体,并运用生物信息学方法对PRL-3的相互作用蛋白进行预测分析。方法运用RT-PCR技术,从人大肠癌细胞系SW480细胞中扩增出人PRL-3cDNA,经T-A克隆,构建人PRL-3基因的真核表达载体pcDNA3-PRL-3,通过... 目的克隆人PRL-3基因并构建其真核表达载体,并运用生物信息学方法对PRL-3的相互作用蛋白进行预测分析。方法运用RT-PCR技术,从人大肠癌细胞系SW480细胞中扩增出人PRL-3cDNA,经T-A克隆,构建人PRL-3基因的真核表达载体pcDNA3-PRL-3,通过双酶切鉴定及测序确认,并利用生物信息学方法预测分析其相互作用蛋白。结果成功扩增出人PRL-3全长cDNA,构建pcDNA3-PRL-3真核表达载体,测序结果表明PRL-3全长cDNA与GeneBank中PRL-3序列完全一致。利用模式生物果蝇相互作用蛋白数据库DIP,利用基于保守的蛋白相互作用分析方法,预测认为肌动蛋白家族成员ARP6和功能尚不清楚的小G蛋白家族ARL-3可能是PRL-3的相互作用蛋白,提示PRL-3可能是联系信号分子和细胞骨架系统的重要桥梁,参与构建了一条独特的结直肠癌转移信号途径。结论成功克隆PRL-3基因全长cDNA并构建其真核表达载体,并利用生物信息学方法,初步预测PRL-3的相互作用蛋白,为进一步深入研究PRL-3在大肠癌发生发展中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 prl-3 蛋白相互作用 生物信息学
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探寻肝再生磷酸酶3在膀胱癌细胞T24中的作用
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作者 薛庆 于垂恭 +2 位作者 于磊 武国军 袁建林 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第25期4829-4832,4850,共5页
目的:已经有研究证明肝再生磷酸酶3(Phosphatase of Regenerating Liver-3,PRL-3)在消化道肿瘤的发生发展过程中起到重要作用,但其在膀胱癌中发挥何种作用尚不清楚,本次研究主要探寻PRL-3在膀胱癌细胞T24中作用,以求为膀胱癌的治疗提供... 目的:已经有研究证明肝再生磷酸酶3(Phosphatase of Regenerating Liver-3,PRL-3)在消化道肿瘤的发生发展过程中起到重要作用,但其在膀胱癌中发挥何种作用尚不清楚,本次研究主要探寻PRL-3在膀胱癌细胞T24中作用,以求为膀胱癌的治疗提供新思路。方法:采用siRNA干涉的方法下调T24中PRL-3蛋白表达水平,通过western blot方法检测干涉效果,绘制细胞生长曲线、构建裸鼠种植瘤模型,检测PRL-3下调对细胞体外及体内增殖的影响。结果:我们所设计的siRNA能够下调PRL-3在A498细胞中的表达(F=7.26,P<0.05),细胞生长曲线显示下调PRL-3能够抑制细胞的增殖,这种作用从干涉后的第60h开始,随时间增加作用愈加明显(F≥8.35,P<0.05);动物实验表明,siRNA下调PRL-3能够抑制T24细胞在活体内的增殖,从干涉后第21天开始这种作用开始体现出来(F≥10.46,P<0.05),并且干涉组的肿瘤肿瘤明显低于两个对照组(F=13.63,P<0.05)。结论:我们构建的siRNA能够在T24细胞中实现对PRL-3蛋白的下调,siRNA介导的PRL-3蛋白下调能够明显抑制T24细胞在活体外及活体内的增殖,这初步证明PRL-3在膀胱癌中发挥重要的作用。随着我们对PRL-3分子进一步深入的了解,揭示其发挥作用的具体机制,PRL-3很可能成为膀胱癌基因治疗的新靶点。 展开更多
关键词 膀胱癌 prl-3 SIRNA 基因治疗
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靶向PRL-3基因的shRNA慢病毒载体的构建及鉴定
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作者 王燕 乔立娇 陈耀平 《宁夏医科大学学报》 2019年第1期28-32,共5页
目的构建PRL-3基因特异性shRNA慢病毒干扰载体,感染结肠癌SW480细胞,研究PRL-3基因在结肠癌细胞株中的表达抑制情况。方法设计并合成3对特异性针对PRL-3基因的shRNA序列,构建到慢病毒载体中,测序鉴定载体构建情况,转染293T细胞,荧光显... 目的构建PRL-3基因特异性shRNA慢病毒干扰载体,感染结肠癌SW480细胞,研究PRL-3基因在结肠癌细胞株中的表达抑制情况。方法设计并合成3对特异性针对PRL-3基因的shRNA序列,构建到慢病毒载体中,测序鉴定载体构建情况,转染293T细胞,荧光显微镜下观察转染效率。收集到的病毒上清感染结肠癌SW480细胞,RT-PCR检测各组细胞中PRL-3 mRNA表达水平。结果经测序鉴定成功构建3对PRL-3基因的RNAi重组慢病毒载体,包装、浓缩后其滴度为5×108 TU·mL-1,3对PRL-3 shRNA病毒载体感染结肠癌SW480细胞株后,Real-time PCR显示,各组PRL-3基因敲减效率分别达到89.6%、83.2%和88.8%,PRL-3 shRNA1重组慢病毒载体干扰效率最佳。结论本研究成功构建了靶向PRL-3基因的shRNA慢病毒载体,PRL-3 shRNA1可抑制SW480细胞中PRL-3基因表达水平。 展开更多
关键词 结肠癌 prl-3基因 慢病毒载体
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人再生肝脏蛋白磷酸酶-3基因的克隆与测序
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作者 徐旭 新燕 +3 位作者 李志伟 张克斌 张朝军 于水情 《华北国防医药》 2006年第2期79-81,F0002,共4页
目的:从人结肠癌肝转移病灶标本中提取染色体RNA,PCR扩增及克隆人PRL-3基因。方法:收集人结肠癌肝转移标本,提取总RNA,逆转录为cDNA,PCR扩增PRL-3序列,A-T克隆于pMD-18T载体中,转化大肠杆菌JM109株,提取质粒,对重组质粒进行酶切与测序... 目的:从人结肠癌肝转移病灶标本中提取染色体RNA,PCR扩增及克隆人PRL-3基因。方法:收集人结肠癌肝转移标本,提取总RNA,逆转录为cDNA,PCR扩增PRL-3序列,A-T克隆于pMD-18T载体中,转化大肠杆菌JM109株,提取质粒,对重组质粒进行酶切与测序鉴定。结果:通过酶切、PCR与测序三种方法证实所获得的基因片断为PRL-3基因。结论:克隆到序列正确的人源性PRL-3基因,为实现PRL-3基因的高效表达及制备相应抗体奠定了基础。 展开更多
关键词 prl-3基因 克隆 序列分析
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PRL-3基因在前列腺癌组织中的表达分析
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作者 赵易 武国军 +5 位作者 张瑞 沈岚 于垂恭 王映梅 药立波 袁建林 《科学技术与工程》 2010年第1期200-203,共4页
检测PRL-3在前列腺癌中的表达,探讨其与前列腺癌发生发展的关系。Westernblot、RT-PCR检测52例前列腺癌组织及其对应癌旁增生组织,12例阳性淋巴结相对表达水平,并分析其表达水平与临床病理学指标的关系。结果52例前列腺癌中PRL-3基因表... 检测PRL-3在前列腺癌中的表达,探讨其与前列腺癌发生发展的关系。Westernblot、RT-PCR检测52例前列腺癌组织及其对应癌旁增生组织,12例阳性淋巴结相对表达水平,并分析其表达水平与临床病理学指标的关系。结果52例前列腺癌中PRL-3基因表达量较相应癌旁增生组织高,差异有统计学意义(p<0.05),12例淋巴结转移灶PRL-3表达量明显高于原发肿瘤、阴性淋巴结及癌旁增生组织(p<0.01)。PRL-3基因的表达水平与前列腺癌分化程度、淋巴结转移有关(p<0.05),与年龄、家族史、血清PSA含量无关(p>0.05)。说明PRL-3的表达与前列腺癌发生发展关系密切,PRL-3可作为前列腺癌诊断、治疗及预后判断过程中的一种较有价值的指标。 展开更多
关键词 prl-3基因 前列腺癌 转移
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