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梅PGIP基因的克隆及全序列分析 被引量:17
1
作者 李广平 房经贵 +2 位作者 蔡斌华 章镇 张长青 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期125-127,共3页
通过PCR扩增,从梅基因组中得到1条全长1 192 bp的多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PG IP)基因序列。该序列包含有1个完整的开放阅读框和1个内元。比对结果表明,克隆到的序列与桃、马哈利樱桃中相应序列一致度分别为96%和95%,其蛋白质序列与桃... 通过PCR扩增,从梅基因组中得到1条全长1 192 bp的多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PG IP)基因序列。该序列包含有1个完整的开放阅读框和1个内元。比对结果表明,克隆到的序列与桃、马哈利樱桃中相应序列一致度分别为96%和95%,其蛋白质序列与桃、马哈利樱桃的蛋白质序列一致度分别为97%和94%。该蛋白质序列中包含着一段亮氨酸重复序列。 展开更多
关键词 pgip基因 克隆 序列分析
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中国李PGIP基因的克隆及序列分析 被引量:12
2
作者 李广平 乔玉山 +2 位作者 陶建敏 高志红 章镇 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1870-1873,共4页
以中国李叶片基因组为模板,PGIP基因保守序列为引物,扩增到1条全长1 192 bp的目的片段(Genbank登录号:DQ200847).序列分析表明:该片段与杏、桃、马哈利樱桃、梅的PGIP基因序列一致度达96%~99%,包含有1个完整的开放阅读框和1个内含... 以中国李叶片基因组为模板,PGIP基因保守序列为引物,扩增到1条全长1 192 bp的目的片段(Genbank登录号:DQ200847).序列分析表明:该片段与杏、桃、马哈利樱桃、梅的PGIP基因序列一致度达96%~99%,包含有1个完整的开放阅读框和1个内含子,其编码的氨基酸序列中含有一段典型的亮氨酸重复序列;分子进化分析表明,在分子进化树中,该序列与杏、桃、马哈利樱桃、梅的PGIP序列位于同一类.为植物分子抗病育种提供了1条基因资源. 展开更多
关键词 pgip基因 基因克隆 序列分析
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龙眼梅PGIP基因的克隆及序列分析 被引量:8
3
作者 王家福 朱春林 +3 位作者 陈桂信 潘东明 潘才博 叶露莹 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期55-58,共4页
利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)得到在龙眼梅(PrunusmumeSiebetZucc.Longyan)嫩芽中特异性表达的PGIP基因。DNA序列分析表明,所获得龙眼梅的PGIPcDNA的序列全长为1045bp,该序列与已发表的PGIP基因有很高的同源性。
关键词 龙眼梅 pgip基因 克隆
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转梅PGIP基因增强菊花抗病性研究 被引量:8
4
作者 于淼 刘兆磊 +1 位作者 陈素梅 陈发棣 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1111-1116,共6页
通过农杆菌介导法将梅多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因(PGIP)转入盆栽小菊品种‘05-44-2’中,以提高对真菌病害的抗性。经Hyg抗性筛选,获得232株抗性苗。对其中40株进行PCR检测,有8株扩增出目的条带;对这8株进行RT-PCR检测,发现其中有5个... 通过农杆菌介导法将梅多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因(PGIP)转入盆栽小菊品种‘05-44-2’中,以提高对真菌病害的抗性。经Hyg抗性筛选,获得232株抗性苗。对其中40株进行PCR检测,有8株扩增出目的条带;对这8株进行RT-PCR检测,发现其中有5个株系有目的条带出现,且发生基因转录。转基因菊花的抗病性检测证实,与对照相比,转基因株系对黑斑病有不同程度的抗性,表现为发病延迟,病情指数降低;株系7抗性最强,其苗期病情指数仅为33。 展开更多
关键词 菊花 pgip基因 转化 黑斑病 抗病性
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马哈利樱桃PGIP cDNA克隆及序列分析 被引量:6
5
作者 张军科 张开春 +1 位作者 李嘉瑞 张晓明 《西北植物学报》 CAS CSCD 2001年第6期1123-1127,共5页
以马哈利樱桃 (Prunus mahaleb L .)为材料 ,通过 RT- PCR获得了 1 0 4 5 bp的目的片段 ,经克隆测序 ,证实该片段包含 1个完整的开放阅读框架 ,该阅读框架由 990碱基组成 ,编码 3 3 0个氨基酸。该序列与杏、梨、苹果的 PGIP c DNA序列... 以马哈利樱桃 (Prunus mahaleb L .)为材料 ,通过 RT- PCR获得了 1 0 4 5 bp的目的片段 ,经克隆测序 ,证实该片段包含 1个完整的开放阅读框架 ,该阅读框架由 990碱基组成 ,编码 3 3 0个氨基酸。该序列与杏、梨、苹果的 PGIP c DNA序列同源性分别达 97.2 %、83 .4%和83 .6 % ,可能编码的氨基酸与杏、梨、苹果的 PGIP c DNA所编码的氨基酸的同源性分别达到96 .7%、85 .2 %和 85 .2 %。与已经克隆的 PGIP DNA序列的对比分析表明 ,PGIP DNA序列中包含 2个外显子和 1个内含子 ,内含子全长 1 47bp,符合 TG- AG规律 ,2个外显子长度分别为 5 81 bp、46 4 展开更多
关键词 樱桃 pgip CDNA 基因克隆 测序 真菌病害 抗病性
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九台晚李PGIP基因的克隆及生物信息学分析 被引量:4
6
作者 郭庆勋 张春雨 +2 位作者 王晶莹 周连霞 王彦涛 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期650-653,共4页
以九台晚李叶片基因组为模板,PGIP基因保守序列设计引物,PCR扩增到1条全长1192bp的目的片段(GenBank登录号:GU068978)。该基因包含有1个完整的开放阅读框,由2个外显子和1个内含子构成,外显子总长990bp,编码330个氨基酸,其编码的氨基... 以九台晚李叶片基因组为模板,PGIP基因保守序列设计引物,PCR扩增到1条全长1192bp的目的片段(GenBank登录号:GU068978)。该基因包含有1个完整的开放阅读框,由2个外显子和1个内含子构成,外显子总长990bp,编码330个氨基酸,其编码的氨基酸序列中含有一段典型的亮氨酸重复序列。序列分析表明:该基因与中国李、杏、桃、马哈利樱桃、梅等李属植物的PGIP基因序列一致度达95%-99%。系统进化分析显示出属内亲缘关系较近、属间亲缘关系较远的特点。该序列为植物分子抗病育种提供了1条新的基因资源。 展开更多
关键词 九台晚李 pgip基因 基因克隆 生物信息学
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苹果PGIP基因植物表达载体的构建及转化番茄的研究 被引量:6
7
作者 石玉 张军科 +2 位作者 张毅 洪晓娟 马锋旺 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第5期42-46,共5页
为了验证苹果多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)基因表达产物对植物病原真菌的作用,获得转基因植株,培育抗病新品种,本研究用限制性内切酶SalⅠ、BamHⅠ将已克隆的苹果PGIP基因从克隆载体pMD-18T上切下,定向插入到植物表达载体pWR306的ED... 为了验证苹果多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)基因表达产物对植物病原真菌的作用,获得转基因植株,培育抗病新品种,本研究用限制性内切酶SalⅠ、BamHⅠ将已克隆的苹果PGIP基因从克隆载体pMD-18T上切下,定向插入到植物表达载体pWR306的ED35s启动子和TNOS终止子中间,成功构建了苹果PGIP基因植物表达载体pWR306-PGIP及工程农杆菌,以番茄中蔬四号叶片及茎段为受体,通过农杆菌介导法转化,获得了8株PCR检测阳性的番茄植株。 展开更多
关键词 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因 植物表达载体 根癌农杆菌 遗传转化 番茄
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甜瓜PGIP基因的克隆及表达初步分析 被引量:4
8
作者 段玉娟 郭庆勋 +2 位作者 刘志伟 宋阳 怀凤涛 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第3期38-42,共5页
以甜瓜叶片基因组DNA为模板,PGIP基因保守序列设计引物,PCR扩增到1条全长978 bp的目的片段。该基因包含有1个完整的开放阅读框,没有内含子,编码326个氨基酸,其编码的氨基酸序列中含有一段典型的亮氨酸重复序列。序列比对表明:该基因编... 以甜瓜叶片基因组DNA为模板,PGIP基因保守序列设计引物,PCR扩增到1条全长978 bp的目的片段。该基因包含有1个完整的开放阅读框,没有内含子,编码326个氨基酸,其编码的氨基酸序列中含有一段典型的亮氨酸重复序列。序列比对表明:该基因编码的氨基酸序列与GenBank中的PGIP基因氨基酸序列(AAP41199)同源性为100%;RT-PCR表达分析表明,该基因在甜瓜叶、茎、根、果实中表达,在花中不表达。为植物分子抗病育种提供了1条基因资源。 展开更多
关键词 甜瓜 pgip基因 基因克隆 表达
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苹果PGIP基因部分家族成员启动子的克隆与功能分析 被引量:4
9
作者 符聪慧 王建平 +2 位作者 张冲 马锋旺 张军科 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2169-2178,共10页
根据已发表的苹果基因组序列设计特异引物,克隆了苹果(Malus×domestica Borkh.)品种‘秦冠’和‘太平洋玫瑰’中PGIP家族基因PGIP1和PGIP2的启动子片段,序列分析结果表明PGIP1与PGIP2启动子序列相似度为71%,‘秦冠’和‘太平洋玫... 根据已发表的苹果基因组序列设计特异引物,克隆了苹果(Malus×domestica Borkh.)品种‘秦冠’和‘太平洋玫瑰’中PGIP家族基因PGIP1和PGIP2的启动子片段,序列分析结果表明PGIP1与PGIP2启动子序列相似度为71%,‘秦冠’和‘太平洋玫瑰’的PGIP1、PGIP2启动子相似度都达到了99%。两个品种PGIP1启动子中TATA-box和CAAT-box的数量明显多于PGIP2,PGIP1和PGIP2启动子分别存在茉莉酸甲酯和水杨酸响应元件,暗示PGIP1和PGIP2存在不同的抗病响应途径。构建了启动子︰︰GUS融合表达载体,通过对农杆菌介导法转化烟草叶片中的GUS活性分析,比较了不同启动子的活性。结果表明:PGIP1启动子活性在品种间差异不显著;PGIP2启动子活性在品种间差异显著,‘秦冠’是‘太平洋玫瑰’的2.37倍,可能与品种抗病性差异有关;同一品种中PGIP1启动子活性显著高于PGIP2。 展开更多
关键词 苹果 pgip基因 启动子 顺式作用元件
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桃PGIP基因及其启动子的克隆与分析 被引量:4
10
作者 王秀云 张计育 +3 位作者 高志红 章镇 俞明亮 张妤艳 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期159-167,共9页
桃流胶病是一种严重危害桃树的真菌性病害,为研究PGIP基因在桃抗流胶病及抗其它真菌性病害中的作用,本研究以桃抗流胶病品种‘南京白沙’叶片为材料,对其PGIP基因及启动子序列进行克隆与分析。克隆测序获得了‘南京白沙’桃PGIP基因cDN... 桃流胶病是一种严重危害桃树的真菌性病害,为研究PGIP基因在桃抗流胶病及抗其它真菌性病害中的作用,本研究以桃抗流胶病品种‘南京白沙’叶片为材料,对其PGIP基因及启动子序列进行克隆与分析。克隆测序获得了‘南京白沙’桃PGIP基因cDNA序列(GenBank登录号:HQ453972)和PGIP基因组DNA序列以及起始密码子上游453bp的启动子序列(GenBank登录号:HQ453974),并将该PGIP基因命名为PpPGIP2。‘南京白沙’桃PpPGIP2序列分析显示,该DNA序列具有完整的阅读框,无内含子,与GenBank中登录的李属PGIP基因序列同源性在93%~98%之间,与测序完成的桃全基因组中该基因的序列同源性为96%;PpPGIP2编码的氨基酸序列分析显示,该氨基酸序列含有2个典型的亮氨酸重复序列,信号肽为第1~第24个氨基酸残基;PGIP基因的序列聚类图显示,除了科、属、种间的同源性差异外,桃的种内PGIP基因同源性也有较大差异;PpPGIP2启动子序列分析发现3个抗病相关元件,分别为:GT1CONSENSUS、SEBFCONSSTPR10A和WBOXATNPR1,另外还有与激素调控、胁迫有关的调控元件。本研究对‘南京白沙’桃PGIP基因和启动子的克隆与分析,将为进一步研究桃PGIP基因的表达调控及其功能分析提供参考。 展开更多
关键词 pgip基因 CDNA序列 启动子 调控元件
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利用外源基因抗小麦根腐病的研究进展 被引量:3
11
作者 蒋雯 何德 陶松 《河北农业科学》 2010年第2期50-51,66,共3页
小麦根腐病是严重为害小麦产量的世界性病害之一,在我国东北、西北和华北等麦区广泛分布。小麦根腐菌是多种病原菌复合侵染导致的病害,病菌可寄生也可腐生,适应能力极强。将外源抗病基因转入小麦品种,提高小麦抗性成为提高小麦抗病性的... 小麦根腐病是严重为害小麦产量的世界性病害之一,在我国东北、西北和华北等麦区广泛分布。小麦根腐菌是多种病原菌复合侵染导致的病害,病菌可寄生也可腐生,适应能力极强。将外源抗病基因转入小麦品种,提高小麦抗性成为提高小麦抗病性的1个重要研究方向。主要从β-1,3-葡聚糖酶基因和PGIP这2个方面,介绍了抗小麦根腐病的研究进展。 展开更多
关键词 小麦根腐病 外源基因 Β-1 3-葡聚糖酶基因 pgip
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梅PGIP基因超表达载体的构建及遗传转化 被引量:2
12
作者 李广平 张长青 章镇 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1948-1952,共5页
运用已克隆的梅PGIP基因构建植物超表达载体,将PGIP插入带有启动子super-promoter和终止子nos的中间载体P-Super1300+中,酶切鉴定表明,目的基因已正确地插入载体中.用根癌农杆菌介导法将其转入烟草中,共获得25株潮霉素抗性苗,对其中的1... 运用已克隆的梅PGIP基因构建植物超表达载体,将PGIP插入带有启动子super-promoter和终止子nos的中间载体P-Super1300+中,酶切鉴定表明,目的基因已正确地插入载体中.用根癌农杆菌介导法将其转入烟草中,共获得25株潮霉素抗性苗,对其中的13株进行PCR检测,有12株扩增出了目的条带;进一步对其中的7株进行Southern杂交检测和RT-PCR检测,发现7个株系均有杂交带出现,且均发生了基因转录,说明已成功获得了能够表达PGIP基因的转基因烟草. 展开更多
关键词 pgip基因 表达载体构建 表达载体遗传转化
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草原樱桃PGIP基因的克隆及生物信息学分析 被引量:2
13
作者 于文全 刘海荣 +1 位作者 杨晓华 赵恒田 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2012年第6期38-42,共5页
为了克隆草原樱桃多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因,并进行生物信息学分析。以草原樱桃叶片基因组为模板,PGIP基因保守序列设计引物,通过PCR扩增获得约1 kb的DNA片段。序列分析表明,该基因全长1 193 bp,包含有1个完整的开放阅读框,由2个外... 为了克隆草原樱桃多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因,并进行生物信息学分析。以草原樱桃叶片基因组为模板,PGIP基因保守序列设计引物,通过PCR扩增获得约1 kb的DNA片段。序列分析表明,该基因全长1 193 bp,包含有1个完整的开放阅读框,由2个外显子和1个内含子构成,外显子总长990 bp,编码330个氨基酸,其编码的氨基酸序列中含有一段典型的亮氨酸重复序列,GenBank登录号为GU068977;该基因与中国李、杏、桃、马哈利樱桃、梅等李属植物的PGIP基因序列一致度达95%~99%。系统进化分析显示,属内亲缘关系较近、属间亲缘关系较远的特点。克隆了草原樱桃PGIP基因,为樱桃抗病育种提供一条新的基因资源。 展开更多
关键词 草原樱桃 pgip基因 基因克隆 生物信息学
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西藏一种芥菜型油菜PGIP基因的克隆与序列分析 被引量:2
14
作者 庞博 刘何春 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期94-99,115,共7页
防治油菜菌核病的有效方法是培育抗菌核病的油菜品种。多聚半乳糖醛酸酶阻遏蛋白(polygalacturonase inhibiting protein,PGIP),是植物体内一种重要的抗真菌蛋白。本研究根据NCBI中发表的PGIP基因序列设计引物,从芥菜型油菜‘藏油6号’... 防治油菜菌核病的有效方法是培育抗菌核病的油菜品种。多聚半乳糖醛酸酶阻遏蛋白(polygalacturonase inhibiting protein,PGIP),是植物体内一种重要的抗真菌蛋白。本研究根据NCBI中发表的PGIP基因序列设计引物,从芥菜型油菜‘藏油6号’中克隆得到全长1 048bp的PGIP基因序列。其核酸序列与NCBI数据库中登录的PGIP基因序列同源性为99%。该序列翻译后得到的氨基酸序列与NCBI上公布的油菜PGIP序列同源性为99%。该蛋白质序列中包含8个亮氨酸重复区(leucine-rich repeat,LRR)。过去研究结果显示芥菜型油菜比甘蓝型、白菜型油菜对菌核病的抗性普遍较高,但是未能搞清楚具体的原因,只是提出抗菌核病基因主要分布在芥菜型油菜中,其次是甘蓝型油菜中。通过研究证实了芥菜型油菜上PGIP基因具有保守性、疏水性,而且结构稳定,具有多个信号肽,能够高效地发挥其抗核盘菌的功能。今后在油菜育种上应利用芥菜型油菜的优势,发挥其抗病育种的潜力。 展开更多
关键词 芥菜型油菜 pgip基因 基因克隆 生物信息学
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SA诱导对苹果叶片中PGIP基因表达的影响 被引量:2
15
作者 瞿振芳 符聪慧 +1 位作者 杨婷斐 张军科 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期103-109,共7页
以抗病性不同的两个苹果品种秦冠和礼泉短富为材料,研究在叶面喷施不同浓度的SA对苹果叶片中PGIP基因表达水平的影响。结果表明,0.1和0.01mmol/L的SA叶面喷施处理对苹果叶片PGIP基因表达在0~96h、0~129d均有影响。在SA诱导处理后0~96... 以抗病性不同的两个苹果品种秦冠和礼泉短富为材料,研究在叶面喷施不同浓度的SA对苹果叶片中PGIP基因表达水平的影响。结果表明,0.1和0.01mmol/L的SA叶面喷施处理对苹果叶片PGIP基因表达在0~96h、0~129d均有影响。在SA诱导处理后0~96h内,两种浓度的SA处理均可以促进秦冠叶片PGIP基因的表达,低浓度处理后,PGIP基因表达上调达到峰值的时间较长,峰值较高;高浓度的SA处理能提高礼泉短富叶片PGIP基因的表达水平,低浓度的SA处理抑制其表达。在SA诱导处理后0~129d内,前期(13~27d)秦冠叶片PGIP基因的表达维持在较高水平且低浓度SA处理促进效应大,后期(27~129d)表达量下降,促进效应不明显;高浓度的SA处理促进礼泉短富叶片PGIP基因表达,处理后第40天达到峰值,而低浓度的SA处理抑制其表达。 展开更多
关键词 苹果 pgip基因 水杨酸 荧光实时定量PCR
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低浓度SA诱导桃叶片PGIP基因的表达变化 被引量:1
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作者 魏平 张军科 《北方园艺》 CAS 北大核心 2011年第17期128-130,共3页
通过改良的CTAB方法提取桃叶片总RNA,根据桃PGIP基因开放阅读框设计特异引物,以荧光实时定量PCR技术分析低浓度SA诱导处理后桃叶片PGIP基因的表达水平变化。结果表明:0.002mmol/L SA诱导处理桃叶片后引起PGIP基因表达水平上升,在2h出现... 通过改良的CTAB方法提取桃叶片总RNA,根据桃PGIP基因开放阅读框设计特异引物,以荧光实时定量PCR技术分析低浓度SA诱导处理后桃叶片PGIP基因的表达水平变化。结果表明:0.002mmol/L SA诱导处理桃叶片后引起PGIP基因表达水平上升,在2h出现峰值,表达峰值时(2h)的表达量是最低点(8h)表达量的2.4倍。清水对照在0~8h内PGIP基因的表达几乎没有变化,由此可见,0.002mmol/L的SA对桃叶片PGIP基因的表达有促进作用。 展开更多
关键词 定量PCR pgip基因 水杨酸
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葡萄砧木‘5BB’PGIP基因的克隆及生物信息学分析 被引量:1
17
作者 王宏福 刘艳红 +2 位作者 佟兆国 章镇 陶建敏 《江西农业学报》 CAS 2009年第3期1-3,7,共4页
以葡萄砧木品种‘5BB’(Vitis berlandieri×V.ripria)为试材,通过设计特异引物、PCR扩增,从‘5BB’基因组中得到1条全长1002bp的多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)基因序歹11,该序列包含1个完整的开放阅读框,与欧洲葡萄、其... 以葡萄砧木品种‘5BB’(Vitis berlandieri×V.ripria)为试材,通过设计特异引物、PCR扩增,从‘5BB’基因组中得到1条全长1002bp的多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)基因序歹11,该序列包含1个完整的开放阅读框,与欧洲葡萄、其它果树的相应序列同源性分别为99%和68%,其推导的蛋白质序列中包含一段亮氨酸重复序列,第1~27个氨基酸残基是信号肽,三级结构与菜豆PGIP相似。 展开更多
关键词 5BB pgip 基因克隆 生物信息学分析
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剑麻PGIP基因克隆和表达研究 被引量:1
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作者 张燕梅 王瑞芳 +5 位作者 杨子平 李俊峰 鹿志伟 赵艳龙 陆军迎 周文钊 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2019年第12期2397-2404,共8页
多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(polygalacturonase inhibitor proteins, PGIPs)是一类与植物自身免疫相关的多功能蛋白,在植物防卫反应中扮演着重要角色。为了探讨剑麻PGIP基因的功能,本研究利用PCR的方法从剑麻H.11648中克隆2个剑麻PGIP基... 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(polygalacturonase inhibitor proteins, PGIPs)是一类与植物自身免疫相关的多功能蛋白,在植物防卫反应中扮演着重要角色。为了探讨剑麻PGIP基因的功能,本研究利用PCR的方法从剑麻H.11648中克隆2个剑麻PGIP基因--AhPGIP1和AhPGIP2。利用荧光定量PCR(qRT-PCR)分析AhPGIP1和AhPGIP2基因在烟草疫霉侵染、伤害、低温、盐胁迫、水杨酸(SA)和茉莉酸甲酯(MeJA)处理后的表达模式。结果表明:AhPGIP1基因cDNA全长为1008 bp,编码335个氨基酸,蛋白分子量约为36.7 kDa,等电点为8.65。AhPGIP2基因全长为981 bp,编码326个氨基酸,蛋白分子量约为35.8kDa,等电点为8.98。AhPGIP1基因在烟草疫霉侵染过程中表达水平先下降后明显上升,侵染48h达到最大值,在盐、伤、SA和MeJA处理后表达水平明显上升,分别在3、12、3、12h达到最大值,低温处理6 h表达水平不变,3、12、24 h表达水平明显下降。AhPGIP2基因在烟草疫霉侵染24、36、48 h表达水平明显下降,侵染72 h明显上升并达到最大值,在盐胁迫、低温、SA和MeJA处理后表达水平明显上升,分别在3、24、3、12h达到最大值,在伤处理12h后显著上升并达到最高水平,在3、6、24h明显下降。本研究为深入探讨剑麻PGIP基因在不同逆境胁迫反应中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 剑麻 QRT-PCR 基因表达 pgip
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过表达OsPGIP基因对甘蓝型油菜生长发育影响
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作者 李师 李国林 +1 位作者 王睿 赵云 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期811-817,共7页
本实验旨在探究在油菜中过表达OsPGIP基因对其生长发育的影响.实验包括种子品质指标及幼苗生长状况测定,利用Nikon SMZ18荧光体式显微镜观察花器官形态,RT-PCR鉴定OsPGIP基因表达量,POD,SOD,CAT等抗氧化酶酶活测定,角果数、有效分枝数... 本实验旨在探究在油菜中过表达OsPGIP基因对其生长发育的影响.实验包括种子品质指标及幼苗生长状况测定,利用Nikon SMZ18荧光体式显微镜观察花器官形态,RT-PCR鉴定OsPGIP基因表达量,POD,SOD,CAT等抗氧化酶酶活测定,角果数、有效分枝数及初花天数等重要农艺性状统计.结果显示:与野生型相比,各转基因家系T1代种子千粒重、发芽率及幼苗生长无明显缺陷,柱头及花药器官发育正常,初花天数缩短约8天.本文研究发现过表达PGIP基因能够显著缩短油菜的初花天数,但对其正常生长、结实无明显影响. 展开更多
关键词 pgip基因 抗氧化酶 千粒重 角果数
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新疆红肉苹果PGIP基因的克隆及原核表达 被引量:7
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作者 孙华 王春燕 +5 位作者 宋杨 吴树敬 张芮 冯守千 陈晓流 陈学森 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期1-7,共7页
【目的】研究克隆新疆红肉苹果[Malus sieversii f.neidzwetzkyana(Dieck)Langenf]PGIP基因并进行原核表达,探讨其抗病机制。【方法】根据Genbank中已经发表的‘金冠’苹果PGIP保守区域设计1对特异引物,以新疆红肉苹果叶片总RNA为模板,... 【目的】研究克隆新疆红肉苹果[Malus sieversii f.neidzwetzkyana(Dieck)Langenf]PGIP基因并进行原核表达,探讨其抗病机制。【方法】根据Genbank中已经发表的‘金冠’苹果PGIP保守区域设计1对特异引物,以新疆红肉苹果叶片总RNA为模板,T/A克隆后进行序列测定,并对该序列进行分析。随后将该蛋白成熟肽cDNA片段连接到原核表达载体pET30a(+)中,构建融合表达质粒,转化到E.coli BL21(DE3)中进行表达。【结果】序列分析表明,新疆红肉苹果PGIP基因cDNA编码区全长993 bp,编码330个氨基酸残基,命名为MsPgip,GenBank登录号为JQ001783。MsPgip分子质量为36.6 kD,等电点为7.05,有6个潜在的N-糖基化位点,信号肽为N端24个氨基酸残基。该蛋白质还具有2个连续的24个氨基酸残基大小的LRR基序(LSQLKNLTFLDLSFNNLTGAIPSSLSQ LPNLNALHLDRN-KLTGHIPIS)。与已克隆的‘澳洲青苹’、‘金冠’、‘富士’苹果PGIP氨基酸序列同源性均高达99%。原核表达产物经SDS-PAGE分析表明,表达蛋白的分子质量与预期一致。【结论】克隆了新疆红肉苹果PGIP基因,并可在大肠杆菌中表达。 展开更多
关键词 新疆红肉苹果 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白 基因克隆 表达
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