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利用EDA融合标签高效表达猪圆环病毒2型壳蛋白(英文)
被引量：
1
1
作者
郭婉莹
申欢欢
+1 位作者
刘起涛
郑悦亭
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期183-188,共6页
原核生物作为宿主细胞被广泛应用于异源蛋白质的重组表达,并且为生物活性蛋白质的制备提供了一种高效、经济的方法,因而在分子生物学中得到普遍的应用。然而,病毒蛋白在使用原核重组表达系统进行重组表达时,会出现病毒蛋白溶解性差和表...
原核生物作为宿主细胞被广泛应用于异源蛋白质的重组表达,并且为生物活性蛋白质的制备提供了一种高效、经济的方法,因而在分子生物学中得到普遍的应用。然而,病毒蛋白在使用原核重组表达系统进行重组表达时,会出现病毒蛋白溶解性差和表达量低等问题。因此,通过使用各种融合标签以增加目的重组蛋白的表达量和溶解性成为有效的方法。本研究通过使用3种融合标签(EDA标签、MBP标签和GST标签)以获得表达量高的可溶性重组表达猪圆环病毒2型壳蛋白;并比较3种融合标签对该蛋白表达量、溶解性和稳定性的影响。研究结果表明,EDA标签可以显著提高重组表达的猪圆环病毒2型壳蛋白表达量,并且能够增强该蛋白的稳定性;MBP标签可增强重组表达的猪圆环病毒2型壳蛋白表达量,但是不能改善该蛋白的稳定性;GST标签能够增强该重组表达蛋白的表达量,但是不能增强该蛋白的溶解性和稳定性。本研究将EDA作为PCV2-CP蛋白的融合标签,显著提高PCV2-CP-EDA重组蛋白的表达量和增强该重组蛋白的稳定性,为病毒蛋白的可溶性重组表达提供了一种新的融合标签。
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关键词
重组表达
融合标签
EDA
猪圆环病毒
2
型壳蛋白
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职称材料
稳定表达猪圆环病毒2型衣壳蛋白P815细胞系的建立
被引量：
2
2
作者
宋勤叶
杨汉春
+1 位作者
郭鑫
盖新娜
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期646-648,662,共4页
应用脂质体介导的基因转染方法,将表达猪圆环病毒2型(porcine circovirus,PCV2)衣壳蛋白的重组质粒pcDNA3.1-orf2转染P815细胞,筛选G418抗性单克隆细胞,并经PCR、RT-PCR和间接免疫荧光鉴定,随后对目的蛋白表达稳定性进行了检测。结果表...
应用脂质体介导的基因转染方法,将表达猪圆环病毒2型(porcine circovirus,PCV2)衣壳蛋白的重组质粒pcDNA3.1-orf2转染P815细胞,筛选G418抗性单克隆细胞,并经PCR、RT-PCR和间接免疫荧光鉴定,随后对目的蛋白表达稳定性进行了检测。结果表明PCV2orf2基因已经整合进P815细胞基因组DNA中,ORF2编码的衣壳蛋白在获得的阳性P815细胞中稳定表达,建立了稳定表达PCV2衣壳蛋白的P815细胞系。该细胞系的建立为PCV2新型疫苗的研究提供了必要的实验材料,同时也可为其他病毒疫苗的研究提供有价值的参考。
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关键词
pcv
2
衣壳蛋白
P815细胞系
表达
CTL杀伤活性
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职称材料
题名
利用EDA融合标签高效表达猪圆环病毒2型壳蛋白(英文)
被引量：
1
1
作者
郭婉莹
申欢欢
刘起涛
郑悦亭
机构
河南农业大学牧医工程学院
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期183-188,共6页
基金
Supported by Major State Basic Research Development Program of China(973 Plan,No.2011CB100802)
Key Scientific Research Project of Henan Province(No.16A230012)
文摘
原核生物作为宿主细胞被广泛应用于异源蛋白质的重组表达,并且为生物活性蛋白质的制备提供了一种高效、经济的方法,因而在分子生物学中得到普遍的应用。然而,病毒蛋白在使用原核重组表达系统进行重组表达时,会出现病毒蛋白溶解性差和表达量低等问题。因此,通过使用各种融合标签以增加目的重组蛋白的表达量和溶解性成为有效的方法。本研究通过使用3种融合标签(EDA标签、MBP标签和GST标签)以获得表达量高的可溶性重组表达猪圆环病毒2型壳蛋白;并比较3种融合标签对该蛋白表达量、溶解性和稳定性的影响。研究结果表明,EDA标签可以显著提高重组表达的猪圆环病毒2型壳蛋白表达量,并且能够增强该蛋白的稳定性;MBP标签可增强重组表达的猪圆环病毒2型壳蛋白表达量,但是不能改善该蛋白的稳定性;GST标签能够增强该重组表达蛋白的表达量,但是不能增强该蛋白的溶解性和稳定性。本研究将EDA作为PCV2-CP蛋白的融合标签,显著提高PCV2-CP-EDA重组蛋白的表达量和增强该重组蛋白的稳定性,为病毒蛋白的可溶性重组表达提供了一种新的融合标签。
关键词
重组表达
融合标签
EDA
猪圆环病毒
2
型壳蛋白
Keywords
recombinant
expression
fusion
tag
E.
coli
2
-keto-3-deoxy-6-phosphogluconate
aldolase（EDA）
pcv
2-
capsid
protein
分类号
Q71 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
稳定表达猪圆环病毒2型衣壳蛋白P815细胞系的建立
被引量：
2
2
作者
宋勤叶
杨汉春
郭鑫
盖新娜
机构
中国农业大学农业部预防兽医学重点开放实验室
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期646-648,662,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30400321)
文摘
应用脂质体介导的基因转染方法,将表达猪圆环病毒2型(porcine circovirus,PCV2)衣壳蛋白的重组质粒pcDNA3.1-orf2转染P815细胞,筛选G418抗性单克隆细胞,并经PCR、RT-PCR和间接免疫荧光鉴定,随后对目的蛋白表达稳定性进行了检测。结果表明PCV2orf2基因已经整合进P815细胞基因组DNA中,ORF2编码的衣壳蛋白在获得的阳性P815细胞中稳定表达,建立了稳定表达PCV2衣壳蛋白的P815细胞系。该细胞系的建立为PCV2新型疫苗的研究提供了必要的实验材料,同时也可为其他病毒疫苗的研究提供有价值的参考。
关键词
pcv
2
衣壳蛋白
P815细胞系
表达
CTL杀伤活性
Keywords
pcv
2
capsid
protein
P815
cell
line
expression
CTL
lysis
activity
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用EDA融合标签高效表达猪圆环病毒2型壳蛋白(英文)
郭婉莹
申欢欢
刘起涛
郑悦亭
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
下载PDF
职称材料
2
稳定表达猪圆环病毒2型衣壳蛋白P815细胞系的建立
宋勤叶
杨汉春
郭鑫
盖新娜
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
2
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职称材料
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