呼吸道感染肺炎克雷伯菌氨基糖苷类修饰酶基因分布及耐药性检测 被引量：10

1

作者 王娜 韩博 +4 位作者 郝玲 任常军 额尔敦高娃 董燕 李铁志 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第4期359-362,380,共5页

目的检测儿科患者呼吸道感染肺炎克雷伯菌的氨基糖苷类修饰酶基因分布情况及耐药性,以指导临床治疗中的抗生素合理选用。方法从儿科呼吸道感染住院患者的痰培养标本中分离肺炎克雷伯菌132株,鉴定后采用KB纸片法进行药敏试验,然后对菌株... 目的检测儿科患者呼吸道感染肺炎克雷伯菌的氨基糖苷类修饰酶基因分布情况及耐药性,以指导临床治疗中的抗生素合理选用。方法从儿科呼吸道感染住院患者的痰培养标本中分离肺炎克雷伯菌132株,鉴定后采用KB纸片法进行药敏试验,然后对菌株氨基糖苷类修饰酶基因进行PCR检测。结果药敏试验显示,肺炎克雷伯菌对阿米卡星、庆大霉素、奈替米星、妥布霉素和小诺霉素5种氨基糖苷类抗生素均有不同程度耐药,耐药率依次为62.12%、75.76%、81.06%,84.85%和79.55%。PCR扩增显示,aac(3)-I、aac(6′)-Ib、ant(3′′)-II和ant(2′′)-I基因大小分别为169、519、284和320bp。132株儿科呼吸道感染肺炎克雷伯菌中有54株检出携带有不同方式的此类基因。其中单独携带aac(3)-II、aac(6′)-Ib、ant(3′′)-I和ant(2′′)-I基因的分别有12、8、3和2株;携带两种氨基糖苷类修饰酶基因的菌株有两种:aac(3)-II基因+aac(6′)-Ib基因16株,aac(3)-II基因+ant(2′′)-I基因7株;携带3种氨基糖苷类修饰酶基因的菌株有两种:aac(3)-II基因+aac(6′)-Ib基因+ant(3′′)-I基因2株,aac(3)-II基因+aac(6′)-Ib基因+ant(2′′)-I基因2株;4种氨基糖苷类修饰酶基因都存在的有2株。结论儿科患者呼吸道感染肺炎克雷伯菌对常用氨基糖甙类抗生素产生不同程度耐药,与普遍携带氨基糖甙类修饰酶基因有关。治疗该菌感染时不建议将阿米卡星、庆大霉素、奈替米星、妥布霉素和小诺霉素5种糖苷类抗生素作为首选药物单独使用,应与其他抗菌药物联合使用。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌 氨基糖苷类修饰酶基因 pcr电泳 儿科呼吸道感染

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β-地贫合并α珠蛋白基因三联体导致中间型地贫的家系分析与产前诊断 被引量：1

2

作者 陈唯 余永雄 +4 位作者 班少雯 陈洁 梁栋 黄小娟 廖彭 《中国优生与遗传杂志》 2023年第7期1462-1465,共4页

目的探讨分析β-地贫合并α珠蛋白基因三联体导致中间型地贫的家系分析和诊断流程,总结中间型地贫的诊断策略及产前诊断临床实践。方法通过家系成员血液学表型、常规地贫基因检测和PCR电泳法及珠蛋白基因测序技术分析β-地贫合并α珠蛋... 目的探讨分析β-地贫合并α珠蛋白基因三联体导致中间型地贫的家系分析和诊断流程,总结中间型地贫的诊断策略及产前诊断临床实践。方法通过家系成员血液学表型、常规地贫基因检测和PCR电泳法及珠蛋白基因测序技术分析β-地贫合并α珠蛋白基因三联体的临床表现;利用羊水细胞DNA对该家系1例地贫高风险胎儿进行产前诊断。结果先证者检出β-地贫CD41-42杂合突变合并αααanti4.2三联体,父亲检出αααanti4.2三联体,母亲检出β-地贫CD41-42杂合突变,胎儿结果未见异常。结论临床表现为中重度贫血的β-地贫杂合突变且未见罕见型变异,应结合临床表现与基因型是否一致,考虑可能合并α珠蛋白基因三联体导致的中间型地贫。 展开更多

关键词 中间型地贫 家系分析 α珠蛋白基因三联体 pcr电泳法 珠蛋白基因测序

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分子生物学技术在生物修复中的应用研究进展 被引量：2

3

作者 许科伟 周青 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期68-72,共5页

随着分子生物学技术如分子杂交、PCR、电泳技术等的发展,微生物学研究领域发生了深刻的变革,灵敏的检测和精确的细菌鉴定成为可能。微生物分子生态学作为分子生物学与微生物生态学交叉而形成的学科,在生物修复方面得到广泛应用。从分子... 随着分子生物学技术如分子杂交、PCR、电泳技术等的发展,微生物学研究领域发生了深刻的变革,灵敏的检测和精确的细菌鉴定成为可能。微生物分子生态学作为分子生物学与微生物生态学交叉而形成的学科,在生物修复方面得到广泛应用。从分子生物学实验技术角度综述了各种微生物分子生物学技术在生物修复中的应用研究情况。 展开更多

关键词 微生物分子生态学 生物修复 分子杂交 pcr 电泳

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4种方法提取口腔致病菌DNA效果的比较 被引量：2

4

作者 王宁 都佳寅 张卫军 《医学理论与实践》 2018年第9期1253-1256,共4页

目的:比较酚-氯仿方法、Chelex-100提取方法、溴化十六烷基三甲铵(CTAB)提取方法及试剂盒提取口腔致病菌DNA的效果。方法:用4种方法提取具核梭杆菌、嗜酸性乳酸杆菌、粘性放线菌及变形链球菌的DNA,比较OD260、OD260/OD230及OD260/OD280... 目的:比较酚-氯仿方法、Chelex-100提取方法、溴化十六烷基三甲铵(CTAB)提取方法及试剂盒提取口腔致病菌DNA的效果。方法:用4种方法提取具核梭杆菌、嗜酸性乳酸杆菌、粘性放线菌及变形链球菌的DNA,比较OD260、OD260/OD230及OD260/OD280数值,同时进行基因组及扩增后的目的基因电泳,检测DNA的完整性及对PCR的影响。结果:Chelex-100方法提取的样本所含DNA浓度较高,但蛋白类的杂质较多。除粘性放线菌外,其他3种方法去除蛋白类杂质效果的差异无统计学意义。CTAB法和酚-氯仿法都可以较好地去除碳水化合物类杂质,对嗜酸性乳酸杆菌,CTAB的效果最佳(P<0.05)。粘性放线菌对试剂盒提取效果有很大影响。结论:对DNA纯度及完整性要求不高的后续实验,Chelex-100为首选方法,否则经典的酚-氯仿方法及改进后的CTAB方法为首选方法。不同的细菌种类显著影响试剂盒的提取效果。 展开更多

关键词 DNA提取 聚合酶链反应 电泳

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应用限制性差异显示技术制备实验用DNA标记物 被引量：1

5

作者 崔东 郑文岭 +3 位作者 马文丽 赵慧 叶长烂 赵林 《广东医学》 CAS CSCD 2002年第4期351-352,共2页

目的　建立实验室用DNA标记物。方法　依据PCR引物设计软件Oligo5设计通用引物 ,对质粒DNA进行PCR。结果　通过PCR反应 ,电泳后可见清晰的DNA条带 ,将已确定长度的DNA片段再进行PCR反应 ,与商用DNA标记物进行比较显示 ,用此法制备的DNA... 目的　建立实验室用DNA标记物。方法　依据PCR引物设计软件Oligo5设计通用引物 ,对质粒DNA进行PCR。结果　通过PCR反应 ,电泳后可见清晰的DNA条带 ,将已确定长度的DNA片段再进行PCR反应 ,与商用DNA标记物进行比较显示 ,用此法制备的DNA标记物可以作为实验室进行凝胶电泳的DNA标记物。结论　采用限制性差异显示技术制备DNA标记物 ,不仅操作简便、快捷、提高工作效益 ,且大大降低费用 。 展开更多

关键词 聚合酶链反应 DNA标记物 RD-pcr 电泳 限制性差异显示技术

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错配修复蛋白和微卫星不稳定在结直肠癌中检测中的对比分析

6

作者 刘坤 罗瑞晨 +3 位作者 许惠娟 管瑛瑛 侯英勇 侯君 《青岛医药卫生》 2024年第3期177-180,共4页

目的 比较PCR-毛细管电泳法与IHC两种检测方法对微卫星状态判断的差异性与一致性,以期寻找到更适合临床广泛开展筛查的方法。方法 326例结直肠癌手术切除标本,IHC方法检测癌组织4种错配修复蛋白MMR蛋白的表达。选取其中68例标本用PCR毛... 目的 比较PCR-毛细管电泳法与IHC两种检测方法对微卫星状态判断的差异性与一致性,以期寻找到更适合临床广泛开展筛查的方法。方法 326例结直肠癌手术切除标本,IHC方法检测癌组织4种错配修复蛋白MMR蛋白的表达。选取其中68例标本用PCR毛细管电泳法检测6个微卫星位点。最后对比这68例患者两种检测结果的敏感性、特异性及一致性。结果 326例结直肠癌手术样本中,有29例IHC结果为dMMR,剩余297例为pMMR。将这29例dMMR标本全部进行PCR毛细管电泳法检测,另挑选297例pMMR中的39例标本进行PCR-毛细管电泳法检测,共计68例。68例标本检测结果显示高度微卫星不稳定(MSI-H)23例,低度微卫星不稳定(MSI-L)5例,微卫星稳定(MSS)40例。统计分析发现,IHC法检测的敏感度和特异性分别为96%和95%,PCR-毛细管电泳法检测的敏感度和特异性分别为93.1%和97.4%,两种方法的一致率达到95.6%。结论 IHC检测MMR蛋白和PCR-毛细管电泳法检测微卫星位点具有较高的一致性,由于IHC方法经济、便捷的特点,更适合在临床推广,因此可以作为临床初筛结直肠癌微卫星不稳定的一种方法。当存在任一MMR蛋白缺失或对有疑问的标本,可进行进一步的PCR-毛细管电泳检测。 展开更多

关键词 结直肠癌 微卫星不稳定 错配修复蛋白 免疫组化 pcr毛细管电泳

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基于四引物扩增受阻突变体系PCR的多重乳腺癌相关SNP位点检测方法的建立 被引量：6

7

作者 刘颖 张晨 +2 位作者 王淼 吴希阳 马学军 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2012年第2期143-147,共5页

为提高单核苷酸多态性检测的通量,引入多重嵌合引物PCR和毛细管电泳对四引物扩增受阻突变体系PCR进行改进.针对乳腺癌位点rs4784227(C>T),rs1219648(G>A)和rs3803662(T>C)设计特异性嵌合引物,经一次PCR扩增后,通过毛细管电泳... 为提高单核苷酸多态性检测的通量,引入多重嵌合引物PCR和毛细管电泳对四引物扩增受阻突变体系PCR进行改进.针对乳腺癌位点rs4784227(C>T),rs1219648(G>A)和rs3803662(T>C)设计特异性嵌合引物,经一次PCR扩增后,通过毛细管电泳分析产物长度,同时确定3个位点的基因型.70份全血和口腔拭子样本,电泳结果均与测序一致,实现成功分型.本方法仅需一次PCR和一次毛细管电泳即可获得3个位点的分型结果,操作简单、快速准确. 展开更多

关键词 单核苷酸多态分型 四引物扩增受阻突变体系pcr 多重pcr 毛细管电泳

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一个脊髓性肌萎缩症的家系报道

8

作者 平泽朋 姜湖铃 《中国优生与遗传杂志》 2023年第5期1013-1017,共5页

目的 对一个生育过脊髓性肌萎缩症患儿的家系进行产前诊断,同时对三种实验室检测技术进行方法学的比较。方法 应用荧光定量PCR、荧光PCR-毛细管电泳法及MLPA对家系外周血样本及绒毛组织、羊水组织进行了检测。同时进行了亲缘鉴定以排除... 目的 对一个生育过脊髓性肌萎缩症患儿的家系进行产前诊断,同时对三种实验室检测技术进行方法学的比较。方法 应用荧光定量PCR、荧光PCR-毛细管电泳法及MLPA对家系外周血样本及绒毛组织、羊水组织进行了检测。同时进行了亲缘鉴定以排除母源污染。结果 第一胎患儿为SMN1基因7、8号外显子纯合缺失合并SMN2基因的3拷贝重复,患儿父亲为SMN1基因第7、8号外显子的杂合缺失携带者合并SMN2基因的3拷贝重复,患儿母亲为SMN1基因第7、8号外显子的杂合缺失携带者,SMN2基因2拷贝。本次妊娠胎儿为SMN1基因第7、8号外显子杂合缺失及SMN2基因3拷贝重复。结论 经检测胎儿仅为SMN1基因杂合缺失的携带者,可继续正常妊娠。同时,荧光PCR-毛细管电泳法和MLPA可同时对SMN1和SMN2基因拷贝数进行检测,检测较为全面,但荧光定量PCR检测操作方便,检测周期短,适合大样本人群的普筛。 展开更多

关键词 SMA 荧光定量pcr MLPA 荧光pcr-毛细管电泳法

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多重荧光PCR在Y染色体微缺失检测中的应用 被引量：3

9

作者 李卫巍 韩莹 +4 位作者 殷玉玲 吴秋月 张静 蒋卫军 夏欣一 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1011-1015,共5页

目的:Y染色体AZF微缺失检测是国内外公认的男性不育辅助检查之一,传统的PCR凝胶电泳因其缺点已不太适应临床需要。本文旨在探讨多重荧光PCR在AZF微缺失检测中的可行性。方法:收集AZF微缺失各种类型样本238例,正常男性样本62例,比对两种... 目的:Y染色体AZF微缺失检测是国内外公认的男性不育辅助检查之一,传统的PCR凝胶电泳因其缺点已不太适应临床需要。本文旨在探讨多重荧光PCR在AZF微缺失检测中的可行性。方法:收集AZF微缺失各种类型样本238例,正常男性样本62例,比对两种不同的检测方法(多重PCR凝胶电泳和多重荧光PCR),Kappa检验比较分析两种方法检测结果的一致性。结果:多重PCR凝胶电泳和多重荧光PCR检测300例临床标本,两者在位点检出率方面完全一致,差异无统计学意义。Kappa检验显示Y染色体AZFa、AZFb、AZFc 3个区6个位点P值及Kappa值均为1,两种方法一致性好,无统计学差异。结论:多重荧光PCR技术比多重PCR凝胶电泳法可大量节约时间,减少工作量,提高临床检验工作效率,是临床Y染色体微缺失检测的优选方法。 展开更多

关键词 Y染色体 AZF微缺失 多重pcr凝胶电泳 多重荧光pcr

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2008年温州市肠道病毒EV71型感染的检测与分析 被引量：3

10

作者 陈栋 郑斌娇 +3 位作者 孙宝昌 王建 吴可可 王震 《中国卫生检验杂志》 CAS 2010年第3期645-647,共3页

目的:监测2008年温州市EV71感染情况,建立温州市手足口病EV 71型检测系统,预防和控制温州市EV71的大规模流行。方法:将样本中病毒进行核酸提取,通过荧光定量PCR、RT-PCR扩增及其电泳,分别检测肠道病毒通用型和EV71型、Cox A16;对EV71型... 目的:监测2008年温州市EV71感染情况,建立温州市手足口病EV 71型检测系统,预防和控制温州市EV71的大规模流行。方法:将样本中病毒进行核酸提取,通过荧光定量PCR、RT-PCR扩增及其电泳,分别检测肠道病毒通用型和EV71型、Cox A16;对EV71型病毒进行VP1测序和亚型分析。结果:检测284份标本的核酸样品,有179份样品为肠道通用病毒阳性,85份样品EV71阳性,4份样品CoxA16阳性。结论:温州市EV71感染主要集中在沿海区域,春夏季高发,易感人群为5岁以下儿童,主要流行的基因型为C4亚型。 展开更多

关键词 肠道病毒感染 EV 实时荧光定量 RT-pcr DNA电泳 手足口病 温州市 感染情况 检测 易感人群

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结直肠癌微卫星不稳定性与程序性死亡配体1表达的临床意义 被引量：1

11

作者 侯少华 齐立温 +2 位作者 纪小红 唐超峰 李海 《宁夏医科大学学报》 2022年第3期223-227,共5页

目的 研究结直肠癌微卫星不稳定性(MSI)与程序性死亡配体1(PD-L1)表达的临床病理特征及其临床意义。方法 收集在宁夏医科大学总医院接受结直肠癌切除术、术后病理确诊为结直肠癌的患者共116例,采用多重荧光PCR结合毛细管电泳方法检测6... 目的 研究结直肠癌微卫星不稳定性(MSI)与程序性死亡配体1(PD-L1)表达的临床病理特征及其临床意义。方法 收集在宁夏医科大学总医院接受结直肠癌切除术、术后病理确诊为结直肠癌的患者共116例,采用多重荧光PCR结合毛细管电泳方法检测6个单核苷酸重复位点(NR-21、NR-24、NR-27、BAT-25、BAT-26、MONO-27)以鉴定微卫星状态。采用免疫组化(IHC)方法检测PD-L1和错配修复(MMR)蛋白(MLH1、MSH2、MSH6和PMS2)。通过分析研究结直肠癌MSI与PD-L1表达的临床病理特征和相关临床意义,并分析PCR与IHC两种方法检测结果的一致性。结果 在MSI-L/MSS与MSI-H的结直肠癌患者间肿瘤部位、肿瘤直径、分化程度差异均具有统计学意义(P均<0.05),而浸润深度、pTNM分期、有无神经或脉管侵犯、有无淋巴结转移之间差异均无统计学意义(P均>0.05);免疫组化和PCR毛细管电泳法的检测结果经Kappa一致性检验,结果一致性较好(Kappa=0.674);结直肠癌组织中PD-L1表达在结直肠癌患者性别、年龄、肿瘤位置、分化程度、浸润深度、pTNM分期、有无神经或脉管侵犯、有无淋巴结转移之间的差异均无统计学意义(P均>0.05);在MSI-L/MSS的结直肠癌患者中,PD-L1阳性率为28.3%,低于MSI-H的结直肠癌患者的70.0%(P<0.05)。结论 PMSI-H可以作为免疫检查点抑制剂(ICI)PD-L1的阳性预测标志物。 展开更多

关键词 微卫星不稳定 PD-L1 免疫组化 pcr-毛细管电泳

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基于多重PCR的DNA Marker制备方法 被引量：2

12

作者 张俊河 王俐 +2 位作者 董卫华 王芳 王天云 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期189-190,200,共3页

报道了一种简便的制备分子量大小为100-1000bp DNA marker的方法,其原理是以一段特异的DNA片段为模板,设计PCR引物,采用多重PCR的方法一次扩增100-1000bp系列条带,酚/氯仿抽提,乙醇沉淀,即可得到条带清晰的DNA marker。

关键词 DNA MARKER pcr 凝胶电泳 制备

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利用荧光PCR⁃毛细管电泳法评价微卫星不稳定性检测国家参考品 被引量：2

13

作者 张文新 黄传峰 +5 位作者 孙楠 高飞 于婷 孙晶 曲守方 黄杰 《分子诊断与治疗杂志》 2020年第5期565-569,574,共6页

目的利用荧光PCR⁃毛细管电泳法评价微卫星不稳定性(MSI)检测国家参考品,验证国家参考品用于相关试剂盒性能评价及临床实验室质量评价的适用性。方法采用3家不同公司的微卫星不稳定性检测试剂盒(荧光PCR⁃毛细管电泳法)对国家参考品进行... 目的利用荧光PCR⁃毛细管电泳法评价微卫星不稳定性(MSI)检测国家参考品,验证国家参考品用于相关试剂盒性能评价及临床实验室质量评价的适用性。方法采用3家不同公司的微卫星不稳定性检测试剂盒(荧光PCR⁃毛细管电泳法)对国家参考品进行阳性参考品符合率、阴性参考品符合率和检测限项目的检测。结果对国家参考品中的62例样本进行检测,其中阳性参考品的结果均为微卫星高度不稳定,阴性参考品的结果均为微卫星稳定,LOD1及LOD3的20%、10%检测限参考品均检出微卫星高度不稳定,但其5%检测限参考品有1家公司未检出相应的微卫星高度不稳定状态。LOD4、LOD5、LOD6及LOD7检测限参考品检测结果均为微卫星稳定或微卫星低度不稳定。结论微卫星不稳定性检测国家参考品,适用于荧光PCR⁃毛细管电泳法试剂盒的性能评价及临床实验室的质量评价。 展开更多

关键词 微卫星不稳定性 国家参考品 荧光pcr⁃毛细管电泳法

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四重PCR结合全自动电泳系统检测食品转基因成分 被引量：2

14

作者 邵改革 闫伟 +3 位作者 董立明 韩舜愈 李飞武 张明 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期133-136,共4页

根据转基因食品中最常见的四种外源元件(CaMV35S启动子、NOS终止子、cry1Ab/cry1Ac基因、bar基因)的核苷酸序列,设计特异性检测引物,扩增产物大小分别为101、180、301、430bp,通过引物浓度、退火温度的优化,特异性、灵敏度测试,并结合... 根据转基因食品中最常见的四种外源元件(CaMV35S启动子、NOS终止子、cry1Ab/cry1Ac基因、bar基因)的核苷酸序列,设计特异性检测引物,扩增产物大小分别为101、180、301、430bp,通过引物浓度、退火温度的优化,特异性、灵敏度测试,并结合微流体芯片全自动电泳技术,建立了同时检测这4个参数的四重PCR方法。结果表明,该方法可特异性地从复杂样品中检测出预期转基因成分,检测灵敏度达到0.1%。本方法特异性好,灵敏度高,适用于食品中转基因成分的快速筛查。 展开更多

关键词 转基因生物 多重pcr 全自动电泳

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成人流感样病例13种病原体检测情况及多重PCR毛细电泳片段分析法检测的临床应用 被引量：1

15

作者 涂鹏 史大伟 +5 位作者 宛瑞杰 田秀君 窦海伟 袁青 陈小华 辛德莉 《国际检验医学杂志》 CAS 2022年第9期1133-1137,共5页

目的探究成人流感样病例中13种病原体分布情况及多重聚合酶链反应(PCR)毛细电泳片段分析法在病原体检测中的应用价值。方法收集2019年12月至2020年2月北方地区189份流感样病例咽拭子标本,采用多重RT-PCR与毛细电泳片段分析法联用技术得... 目的探究成人流感样病例中13种病原体分布情况及多重聚合酶链反应(PCR)毛细电泳片段分析法在病原体检测中的应用价值。方法收集2019年12月至2020年2月北方地区189份流感样病例咽拭子标本,采用多重RT-PCR与毛细电泳片段分析法联用技术得到病原体的检测结果。检测病原体包括甲型流感病毒(InfA)、人腺病毒(HADV)、博卡病毒(Boca)、人鼻病毒(HRV)、甲型流感病毒H1N1(2009)(InfA-H1N1)、季节性流感病毒(InfA-H3N2)、副流感病毒(HPIV)、人偏肺病毒(HMPV)、乙型流感病毒(InfB)、肺炎支原体(MP)、肺炎衣原体(CP)、冠状病毒(HCOV)、人呼吸道合胞病毒(RSV)13种病原体。结果189份流感样病例咽拭子标本中有180份(95.24%)检测出病原体,9份(4.76%)未检测出病原体。180份病原体阳性标本单一病原体150份(83.33%),多种病原体30份(16.67%);145份(80.56%)检测出流感病原体,35份(19.44%)检测出非流感病原体。3种最常见的单一病原体是InfA-H3N2(94份,49.74%),MP(26份,13.76%),InfA(16份,8.47%);3种最常见的多种病原体是InfA-H3N2合并MP感染(15份,7.93%),InfA合并MP感染(7份,3.70%),MP合并HRV感染(3份,1.59%)。结论2019年12月至2020年2月冬季我国北方地区的成人流感病毒主要以InfA-H3N2为主;非流感病毒也可引起流感样病例,以MP感染较多见;部分流感样病例可见混合感染。多重PCR毛细电泳片段分析法有助于全面了解成人流感样病例中病原体分布情况。 展开更多

关键词 成人 流感样病例 呼吸道感染 呼吸道病原体 多重pcr毛细电泳片段分析法

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用毛细管电泳检测伊氏锥虫微环DNAPCR扩增产物

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作者 王云飞 孟秀珍 《中国兽医寄生虫病》 1998年第1期5-7,共3页

毛细管电泳技术用于DNA电泳分析，具有快速、样品用量少、高重复率等特点。本文应用毛细管电泳对动基体微环DNAPCR扩增产物进行检测，结果表明扩增产物分子量片段为300bp到600bP之间，与实验设计相符，且比较纯净。

关键词 伊氏锥虫 pcr 毛细管电泳 检测

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180例不明原因智力障碍儿童的脆性X综合征检出情况

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作者 钟青燕 熊小波 +5 位作者 曾婷 王大永 吴勇聪 袁德健 蔡稔 严提珍 《广西医学》 CAS 2022年第19期2231-2235,共5页

目的通过检测脆性X智力低下1(FMR1)基因突变情况,分析不明原因智力障碍儿童的脆性X综合征(FXS)检出情况。方法纳入180例不明原因智力障碍儿童,采用PCR微流控毛细管电泳技术对其及部分FMR1基因突变患儿家系成员进行FMR1基因突变分析,并采... 目的通过检测脆性X智力低下1(FMR1)基因突变情况,分析不明原因智力障碍儿童的脆性X综合征(FXS)检出情况。方法纳入180例不明原因智力障碍儿童,采用PCR微流控毛细管电泳技术对其及部分FMR1基因突变患儿家系成员进行FMR1基因突变分析,并采用Southern印迹杂交法进行验证。结果在180例智力障碍儿童中,共检出FMR1基因全突变型4例、中间型1例、正常型175例,FXS的检出率为2.22%(4/180);正常型最常见的CGG重复次数是28次和29次。4例全突变型病例中,家系1先证者CGG重复数为190/248/370次,母亲为25次和134次,妹妹为39次和148/218/554次,姨妈为29次和29次;家系2先证者CGG重复次数为859次;家系3先证者CGG重复次数为529次,母亲为31次和76次,姐姐为29次和130次;家系4先证者CGG重复次数为525次。4例FMR1基因全突变型病例样本经Southern印迹杂交法验证,结果都显示有>5.8 kb条带(全突变条带),两种方法基因分型结果完全一致。结论在不明原因智力障碍儿童中存在一定比例的FXS患儿。PCR微流控毛细管电泳技术高效、快速,适合用于智力障碍人群FXS大规模筛查,有助于避免该病患儿的出生。 展开更多

关键词 脆性X综合征 脆性X智力低下1基因 智力障碍 基因检测 pcr微流控毛细管电泳技术

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基于三引物荧光PCR-毛细管电泳法的FMR1基因突变检测技术建立及其在自闭症辅助诊断中的应用 被引量：1

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作者 孙莉 杨琳艳 +2 位作者 叶倩平 杨旭 杨学习 《分子诊断与治疗杂志》 2017年第5期319-324,共6页

目的对自闭症患者FMR1基因5′非编码区CGG重复序列及重复数进行检测,探索检测脆性X综合征的新方法。方法应用三引物荧光PCR-毛细管电泳法(Qseq100TM全自动核酸分析系统检测)对111例自闭症患者进行筛查,检测其FMR1基因5′非编码区CGG序列... 目的对自闭症患者FMR1基因5′非编码区CGG重复序列及重复数进行检测,探索检测脆性X综合征的新方法。方法应用三引物荧光PCR-毛细管电泳法(Qseq100TM全自动核酸分析系统检测)对111例自闭症患者进行筛查,检测其FMR1基因5′非编码区CGG序列,计算CGG重复数,并与ABI 3500Dx基因分析仪毛细管电泳测序法进行结果比较验证。结果 111例临床检测为自闭症的样本中,有2例为FMR1前突变携带者,一例为中间型。与3500Dx毛细管电泳测序结果一致。结论三引物荧光PCR-毛细管电泳法能够用来检测FMR1基因5′非编码区CGG重复序列,在脆性X综合征发病机制及大规模携带者筛查方面都具有一定的应用价值。 展开更多

关键词 自闭症 FMR1基因 脆性X综合征 三引物荧光pcr-毛细管电泳

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不同纯化方法处理DNA合成引物对PCR扩增效率的影响 被引量：1

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作者 赵庆萱 石乐琴 王春晖 《微生物学免疫学进展》 1997年第3期65-67,共3页

对ＤＮＡ合成的幽门螺杆菌尿素酶引物ＨＰ１、ＨＰ２、ＨＰ３、ＨＰ４进行了几种不同的纯化试验，分别采用无水乙醇沉淀法、ＮＴ柱及聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，对其相应的纯化收率，ＰＣＲ扩增效率作了比较及分析。琼脂糖凝胶电泳结果证... 对ＤＮＡ合成的幽门螺杆菌尿素酶引物ＨＰ１、ＨＰ２、ＨＰ３、ＨＰ４进行了几种不同的纯化试验，分别采用无水乙醇沉淀法、ＮＴ柱及聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，对其相应的纯化收率，ＰＣＲ扩增效率作了比较及分析。琼脂糖凝胶电泳结果证实，以无水乙醇沉淀纯化方法的ＰＣＲ扩增效果较为理想。该方法操作简便、稳定高效、省时省力、成本低。为此建议用该法处理ＤＮＡ合成引物。 展开更多

关键词 DNA 合成引物 纯化 收率 聚合物酶链反应

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PCR-毛细电泳片段分析法检测毛细支气管炎病原的临床价值探讨

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作者 季妙玉 吕佳美 +5 位作者 李海燕 陈小芳 温顺航 张海邻 钱燕巧 董琳 《浙江医学》 CAS 2021年第23期2538-2542,共5页

目的探讨PCR-毛细电泳片段分析法(PCR-CEFA)检测毛细支气管炎病原的临床应用价值。方法选取2018年1至12月温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院儿科收治的因毛细支气管炎住院的≤24个月且喘息次数≤2次的患儿932例,采集患儿鼻咽分泌... 目的探讨PCR-毛细电泳片段分析法(PCR-CEFA)检测毛细支气管炎病原的临床应用价值。方法选取2018年1至12月温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院儿科收治的因毛细支气管炎住院的≤24个月且喘息次数≤2次的患儿932例,采集患儿鼻咽分泌物,采用PCR-CEFA检测呼吸道合胞病毒(RSV)、鼻病毒(RV)、流感病毒(Flu)、副流感病毒(HPIV)、腺病毒(ADV)等8种病毒核酸;直接免疫荧光法(DFA)检测RSV、HPIV、Flu、ADV抗原;并收集患儿性别、年龄、既往喘息史、湿疹史、哮喘家族史、家族过敏性疾病史、总IgE、血嗜酸性粒细胞计数(B-Eos)等资料。比较两种方法、不同年龄组患儿病毒检出率及RSV组与RV组患儿流行病学资料及实验室检查结果。结果PCR-CEFA病毒检出率为88.2%,高于DFA的33.6%,差异有统计学意义(P<0.01)。PCR-CEFA对RSV、HPIV、Flu、ADV的检出率均高于DFA,差异均有统计学意义(均P<0.01)。以DFA为参照,PCR-CEFA检测RSV、HPIV、Flu、ADV的特异度均达80%以上。≤12月龄患儿RSV检出率高于>12~24月龄患儿,RV、ADV、HBoV检出率均低于>12~24月龄患儿,差异均有统计学意义(均P<0.05)。RV组患儿年龄、B-Eos升高比例均明显高于RSV组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论与DFA比较,PCR-CEFA病毒检出率更高,病毒检测种类更多,具有良好的特异度,有利于早期明确毛细支气管炎病原。 展开更多

关键词 毛细支气管炎 呼吸道病毒 直接免疫荧光法 pcr-毛细电泳片段分析法

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