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Bmo-miR-2755*对丝素蛋白基因BmFib-L和BmP25表达的调控作用 被引量：3
1
作者 范洋洋 陈晨 +4 位作者 王欣 宋菲 唐顺明 易咏竹 沈兴家 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期847-853,共7页
为了研究家蚕miRNA对丝素蛋白基因表达的调控作用,采用生物信息学方法筛选获得对家蚕丝素轻链基因（BmFib-L）和P25蛋白基因（BmP25）有潜在调控作用的Bmo-miR-2755＊。利用半定量RT-PCR技术分析Bmo-miR-2755＊及其靶基因BmFib-L、BmP2... 为了研究家蚕miRNA对丝素蛋白基因表达的调控作用,采用生物信息学方法筛选获得对家蚕丝素轻链基因（BmFib-L）和P25蛋白基因（BmP25）有潜在调控作用的Bmo-miR-2755＊。利用半定量RT-PCR技术分析Bmo-miR-2755＊及其靶基因BmFib-L、BmP25在家蚕4~5龄期幼虫后部丝腺和5龄3 d幼虫不同组织器官中的表达水平,结果显示三者在后部丝腺组织中的表达水平都较高,呈现严格的时空特异性。以pcDNA3质粒为载体,构建Bmo-miR-2755＊的重组表达载体pcDNA3[ie1-egfpprimiR-2755＊-SV40];以pGL3.0-Basic质粒为载体,分别构建BmFib-L 3＇UTR、BmP25 3＇UTR与荧光素酶报告基因luc融合的重组报告质粒pGL3.0[A3-luc-Fib-L-3＇UTR-SV40]和pGL3.0[A3-luc-P25-3＇UTR-SV40]。以海肾荧光素酶表达载体pRL-CMV为内参,分别将构建的Bmo-miR-2755＊重组表达载体和2个重组报告质粒共转染BmN细胞,通过检测细胞中的荧光素酶活性,明确Bmo-miR-2755＊可显著下调BmFib-L基因的表达,并能上调BmP25基因的表达,但上调作用未达显著水平。上述结果为研究家蚕miRNA的功能和阐明蚕丝蛋白基因表达调控分子机制提供了新的实验数据。 展开更多
关键词 miRNA 家蚕 Bmo-miR-2755＊ 丝素轻链基因 p25基因 表达调控
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四川省眉山市六个柑橘品种上衰退病毒分离株的组群构成、基因型及遗传特征 被引量：3
2
作者 钟可 易龙 +2 位作者 周俊 陈波 黄爱军 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期732-741,共10页
为有效利用弱毒株系交叉保护(mild strain cross protection,MSCP)防控柑橘衰退病,分别采用限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)、双向逆转录-聚合酶链式反应(bi-directional reverse transcription p... 为有效利用弱毒株系交叉保护(mild strain cross protection,MSCP)防控柑橘衰退病,分别采用限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)、双向逆转录-聚合酶链式反应(bi-directional reverse transcription polymerase chain reaction,BD-PCR)及多重分子标记对四川省眉山市6个柑橘品种30个样品上的柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)分离株进行组群构成、基因型、遗传特征和系统发育树分析。结果表明,在30个柑橘样品中,70.0%的样品为多种CTV组群混合侵染,且多为强毒和弱毒株系混合侵染;6个柑橘品种上CTV组群构成存在差异,温州蜜柑品种主要为组群1和组群3混合侵染,纽荷尔脐橙品种均为组群3和组群5混合侵染,其他4个品种主要为组群3和组群5混合侵染和组群3单一侵染。6个柑橘品种上CTV分离株均由3~5种基因型构成,构成较相似,均包括T3、T30、T36三种基因型,而不知火品种上未检出B165基因型。6个柑橘品种上CTV分离株的核苷酸序列相似性较高,介于92.4%~99.8%之间;遗传分化系数介于-0.114~0.467,基因流介于-35.89~52.92之间,其中纽荷尔脐橙CTV种群与除沃柑外其他品种的CTV种群的分化系数均大于0.281,基因流均小于1.00,表明这6个柑橘品种CTV种群之间存在基因交流,但纽荷尔脐橙CTV种群与其他品种交流不频繁;所有CTV分离株均被聚为3个不同的类群,其中春见、蜜柑、爱媛品种上大部分CTV分离株被聚为类群I,纽荷尔脐橙品种上所有CTV分离株被聚为类群II,而沃柑、不知火品种上大部分CTV分离株被聚为类群III;CTV种群间变异百分比为80.86%,表明寄主品种是CTV分离株p25基因遗传分化的重要因素。 展开更多
关键词 柑橘衰退病毒 p25基因 组群构成 基因型 序列分析
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玉米P_(25)自交系抗锈病基因的遗传分析及SSR分子标记定位 被引量：54
3
作者 刘章雄 王守才 +2 位作者 戴景瑞 黄烈健 曹海河 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第8期706-710,共5页
以玉米南方型锈病免疫自交系P2 5和感病自交系F3 4 9及F1、F2 、B1和B2 为材料 ,采用主基因 多基因混合遗传模型研究了P2 5的抗病遗传规律。结果表明 :自交系P2 5的抗病基因为一主基因 ,表现为加性效应 ,没有检测出多基因 ,其在F2 、B1... 以玉米南方型锈病免疫自交系P2 5和感病自交系F3 4 9及F1、F2 、B1和B2 为材料 ,采用主基因 多基因混合遗传模型研究了P2 5的抗病遗传规律。结果表明 :自交系P2 5的抗病基因为一主基因 ,表现为加性效应 ,没有检测出多基因 ,其在F2 、B1和B2 群体的遗传率分别为 81 88%、38 14 %和 5 5 1%。利用SSR分子标记技术 ,以组合P2 5×F3 4 9的F2 :3 家系作为构图群体 ,构建了玉米SSR遗传连锁图谱 ,并将玉米抗南方型锈病基因定位于 10号染色体上 ,与phi0 5 9标记的遗传距离为 5 8cM。 展开更多
关键词 玉米 p25自交系 抗锈病基因 遗传分析 SSR 分子标记 定位
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家蚕丝蛋白Fhx/P25基因启动子区域的克隆及序列分析 被引量：12
4
作者 刘炜彬 贡成良 +3 位作者 薛仁宇 周文林 诸戌娴 曹广力 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期17-23,共7页
为研究家蚕Fhx/P25基因在时空上的调控机制,通过PCR扩增获得家蚕丝素蛋白Fhx/P25基因的启动子序列并进行克隆和序列分析。进一步构建了由Fhx/P25启动子驱动报告基因DsRed的表达载体pSK-P25-DsRed-PolyA,并通过家蚕BmN细胞进行瞬时表达... 为研究家蚕Fhx/P25基因在时空上的调控机制,通过PCR扩增获得家蚕丝素蛋白Fhx/P25基因的启动子序列并进行克隆和序列分析。进一步构建了由Fhx/P25启动子驱动报告基因DsRed的表达载体pSK-P25-DsRed-PolyA,并通过家蚕BmN细胞进行瞬时表达。结果显示:Fhx/P25基因的启动子序列符合真核生物启动子特点,具有丝腺特异性表达启动子的特征,TATA框的保守序列为TATAA,位于-28—-32处,CAAT基序有3个,其中-110—-117和-90—-87处的2个CAAT基序可能具有活性;二级结构分析显示:Fhx/P25启动子区域具有复杂的茎环结构,这可能与蛋白表达的组织特异性、时间性以及活性有关。基因启动子可以驱动红色荧光基因DsRed在家蚕BmN培养细胞中的瞬时表达。 展开更多
关键词 家蚕 Fhx/p25基因 启动子 序列分析
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家蚕Fhx/P25基因的一种新的转录模式分析研究(英文) 被引量：8
5
作者 刘春 赵萍 +3 位作者 程廷才 查幸福 夏庆友 向仲怀 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第8期740-746,共7页
家蚕Fhx/P25蛋白是丝素蛋白的主要成分之一,过去报道只在家蚕后部丝腺特异的转录表达.通过对大规模的家蚕EST序列分析发现,Fhx/P25基因不仅在家蚕后部丝腺高效转录,而且在家蚕幼虫五龄第三天的卵巢组织及其他组织也有转录;分析还发现Fhx... 家蚕Fhx/P25蛋白是丝素蛋白的主要成分之一,过去报道只在家蚕后部丝腺特异的转录表达.通过对大规模的家蚕EST序列分析发现,Fhx/P25基因不仅在家蚕后部丝腺高效转录,而且在家蚕幼虫五龄第三天的卵巢组织及其他组织也有转录;分析还发现Fhx/P25基因在丝腺和卵巢组织中有不同的转录起始位点,在卵巢组织中的转录起始位点比在丝腺中的至少要提前115bp左右.用RT-PCR和FQ-PCR进一步验证,以上分析结果均正确.分析还发现Fhx/P25mRNA存在选择性拼接.以上结果表明Fhx/P25基因并不是组织特异转录基因,它的转录表达存在复杂的调控机制,可能还有其他功能. 展开更多
关键词 家蚕 Fhx/p25蛋白 转录起始位点 选择性拼接
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1型鸭疫里默氏杆菌p25蛋白基因(p25)的克隆表达及免疫学活性
6
作者 齐冬梅 袁建丰 +2 位作者 覃宗华 吴彩燕 谢明权 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期654-658,共5页
为探讨1型鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)p25蛋白的免疫原性,从RA1型基因组DNA中扩增出p25基因全长ORF,生物信息学分析显示其为含有完整保守结构域PRK00110的一未知功能保守蛋白。p25基因经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后,插入... 为探讨1型鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)p25蛋白的免疫原性,从RA1型基因组DNA中扩增出p25基因全长ORF,生物信息学分析显示其为含有完整保守结构域PRK00110的一未知功能保守蛋白。p25基因经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后,插入原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达质粒pET-32a(+)-p25。测序正确后,将重组表达质粒pET-32a(+)-p25转入E.coli Rosetta,并成功进行了诱导表达。SDS-PAGE分析表明,表达的重组蛋白与预期大小一致,表达产物主要以可溶性形式存在;Western blotting检测显示,该蛋白具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏杆菌 p25蛋白基因 原核表达 免疫原性
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