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正常人不同部位皮肤表皮干细胞分布规律的研究 被引量:16
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作者 陈晓东 利天增 +6 位作者 祁少海 谢举临 徐盈斌 潘姝 袁即山 张涛 梁惠珍 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期53-56,共4页
目的观察正常人不同部位皮肤表皮干细胞分布的规律,分析用P63、CD29单标记和双标记法鉴定表皮干细胞的可行性。方法取5例正常人头顶部、足背、足底、阴阜(阴毛区)、阴囊等21个部位的全层皮肤组织,采用免疫组织化学生物素-链霉亲和素-辣... 目的观察正常人不同部位皮肤表皮干细胞分布的规律,分析用P63、CD29单标记和双标记法鉴定表皮干细胞的可行性。方法取5例正常人头顶部、足背、足底、阴阜(阴毛区)、阴囊等21个部位的全层皮肤组织,采用免疫组织化学生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶(SP)染色法,用P63、CD29作为一抗进行单、双标记。对染色结果作图像分析并以阳性单位(PU)值表示,观察表皮干细胞在各部位皮肤中的分布情况。结果 P63单标记法及P63、CD29双标记法染色均显示, 正常人体21个部位中,足背皮肤的PU值最小,头皮PU值最大。CD29单标记法染色显示,足底皮肤 PU值[(11.9±1.5)%]最小,头皮PU值[(29.1±5.0)%]最大。毛发区皮肤P63、CD29单、双标记染色的PU值均高于汗毛区(P<0.01),但躯干与四肢部位皮肤P63、CD29单标记及双标记染色的 PU值比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论正常人头顶部、阴阜、阴囊皮肤组织中的表皮干细胞多于其他部位。P63、CD29单标记法对表皮干细胞的敏感性较高,特异性较低,而P63、CD29 双标记法的敏感性较低,特异性较高;后者不失为鉴定表皮干细胞较为简便、有效的方法。 展开更多
关键词 皮肤 干细胞 抗原 CD29 p63 免疫组织化学
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基因物质p63、β1整合素对正常人不同部位皮肤表皮干细胞的表达和意义 被引量:11
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作者 陈晓东 利天增 +5 位作者 祁少海 谢举临 袁即山 徐盈斌 潘姝 张涛 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1376-1378,共3页
目的 探讨基因物质 p63、β1整合素对正常人不同部位皮肤表皮干细胞的表达情况及意义。方法 在 5例正常人尸体上各取 2 1个不同部位的全层皮肤组织 ,采用免疫组织化学SP法 ,用基因物质 p63、β1整合素作为第一抗体标记表皮干细胞 ,并... 目的 探讨基因物质 p63、β1整合素对正常人不同部位皮肤表皮干细胞的表达情况及意义。方法 在 5例正常人尸体上各取 2 1个不同部位的全层皮肤组织 ,采用免疫组织化学SP法 ,用基因物质 p63、β1整合素作为第一抗体标记表皮干细胞 ,并通过图像分析 ,研究表皮干细胞在正常人不同部位皮肤中的表达情况。结果  (1)头皮 p63的PU值 [阳性单位 (% ) ] (4 2 .17± 3 .10 )最大 ,与面皮、腋部、上臂内侧、前臂内侧、腰背部、手背、足背及足底差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;足背p63的PU值(2 1.19± 6.89)最小 ,与身体其他部位差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。头皮CD2 9的PU值 (2 9.13± 4.99)最大 ,与身体其他部位差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) ;足底CD2 9的PU值 (11.89±1.5 2 )最小 ,阴囊与面皮、腰背、上臂内外侧、手掌、手背、腹部及足底差异有显著性 (P <0 .0 5 )。(2 )正常人不同部位多毛组与汗毛组 p63、CD2 9的PU值差异有显著性(P <0 .0 0 0 1)。(3 )躯干组与四肢组p63、CD2 9的PU值差异无显著性 (P >0 .0 5 )。(4 )屈侧与伸侧p63、CD2 9的PU值差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论  (1) p63、CD2 9对正常人不同部位皮肤表皮干细胞的表达不同 ,头皮、阴阜、阴囊皮肤组织中的阳性表达较高 。 展开更多
关键词 基因物质 p63 Β1整合素 正常人群 皮肤表皮 干细胞 基因表达 CD29
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枸杞多糖通过TLR2-NF-κB/p38调控树突状细胞的成熟 被引量:6
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作者 张晓羽 兰亚如 +6 位作者 张晓娣 杨浩凯 李飞龙 薛晓楠 吴成 王琦 苏春霞 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1293-1298,共6页
目的探讨枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)促进骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDC)成熟的分子机制。方法6~8周龄C57BL/6小鼠♂,无菌取骨髓细胞,经granulocyte-mononuclear colony-stimulating... 目的探讨枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)促进骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDC)成熟的分子机制。方法6~8周龄C57BL/6小鼠♂,无菌取骨髓细胞,经granulocyte-mononuclear colony-stimulating factor(GM-CSF)和interleukine-4(IL-4)连续诱导7 d,收获悬浮及半贴壁细胞,即为未成熟的树突状细胞;RPMI 1640处理组为阴性对照,LPS处理组为阳性对照。未成熟树突状细胞分别用50、100、200 mg·L^-1 LBP处理30 min,另外,用Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)抑制剂C29作用1 h后,再加不同浓度的LBP处理30 min,收集各组细胞。RT-qPCR检测不同处理组中TLR2、NF-κB、p38的mRNA表达水平;Western-blot检测不同处理组中TLR2、NF-κB及p-NF-κB、p38及p-p38的蛋白表达水平。结果LBP可以明显上调BMDC中TLR2、NF-κB和p38 mRNA及蛋白的表达。同时,TLR2抑制剂C29明显抑制LBP诱导BMDC中TLR2、NF-κB mRNA及蛋白表达水平,明显减弱p38蛋白的表达,对p38mRNA的表达有减低的趋势。结论LBP可能通过诱导BMDC中TLR2-NF-κB/p38的活化,促进BMDC的成熟。 展开更多
关键词 树突状细胞 枸杞多糖 TLR2 NF-ΚB p38 TLR2抑制剂C29
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P53和TRIM29基因在非小细胞肺癌中的表达及其在临床病理诊断中的意义 被引量:4
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作者 杨春梅 贺建清 +3 位作者 杨明金 王静 付道芳 杜月君 《解放军医药杂志》 CAS 2019年第5期22-25,共4页
目的探讨P53和TRIM29基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及在其临床病理诊断中的意义。方法将2015年1月—2017年12月我院诊治的104例NSCLC患者的临床资料进行回顾性分析,并取其癌组织和相应癌旁正常组织标本,分为癌组织组和癌旁组织组,... 目的探讨P53和TRIM29基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及在其临床病理诊断中的意义。方法将2015年1月—2017年12月我院诊治的104例NSCLC患者的临床资料进行回顾性分析,并取其癌组织和相应癌旁正常组织标本,分为癌组织组和癌旁组织组,每组104例。比较癌组织组和癌旁组织组的TRIM29表达,探讨TRIM29、P53表达与临床病理因素相关性。结果癌组织组和癌旁组织组TRIM29、P53表达存在显著差异性(P<0.01)。肺鳞癌和肺腺癌组织中TRIM29表达情况与癌旁组织存在显著差异性(P<0.01)。肺腺癌及肺鳞癌中,TRIM29表达与临床分期、组织病理分级、淋巴结转移、P53表达均呈正相关性(P<0.01)。结论 NSCLC癌组织中P53和TRIM29基因较癌旁正常组织呈明显高表达,TRIM29表达与临床分期、组织病理分级、淋巴结转移及P53表达呈正相关性,临床可通过检测P53和TRIM29水平提高病理诊断准确率。 展开更多
关键词 非小细胞肺 基因 p53 基因 TRIM29 基因表达 临床病理诊断
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非小细胞肺癌中TRIM29与p53、β-catenin表达及意义 被引量:4
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作者 钱妍娟 周志毅 冯一中 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期283-287,共5页
目的观察TRIM29、p53及β-catenin在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达,探讨TRIM29表达与NSCLC病理诊断、临床病理特征的关系、应用价值及TRIM29-p53-β-catenin通路在NSCLC发病机制中的作用。方法采用免疫组化En... 目的观察TRIM29、p53及β-catenin在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达,探讨TRIM29表达与NSCLC病理诊断、临床病理特征的关系、应用价值及TRIM29-p53-β-catenin通路在NSCLC发病机制中的作用。方法采用免疫组化EnVision两步法检测315例NSCLC组织和癌旁正常肺组织中TRIM29、p53及β-catenin的表达,分析TRIM29表达与组织类型、临床资料和预后的关系,以及TRIM29、p53及β-catenin三者表达的相互关系。结果 (1)315例NSCLC中TRIM29表达明显高于癌旁组织。(2)TRIM29表达与p53、β-catenin异常表达、组织学分级、临床分期及淋巴结转移呈正相关。(3)TRIM29在肺鳞癌及腺癌中表达差异有显著性。(4)NSCLC中p53表达与β-catenin蛋白异常表达显著相关。(5)Log-rank检验显示,在肺鳞癌中TRIM29高表达、癌组织低分化、有淋巴结转移、高临床分期患者预后较差,COX多因素模型检测显示,TRIM29高表达及高临床分期是独立的预后性指标。(6)Log-rank检验显示,在肺腺癌中高年龄、TRIM29高表达、癌组织低分化、有淋巴结转移、高临床分期者预后较差(P均<0.05),COX多因素模型检测显示,高临床分期是独立的预后性指标。结论TRIM29表达对肺癌组织学分型(特别是低分化鳞癌和低分化腺癌的鉴别)具有实用参考意义,对临床分期及治疗具有参考价值,可提高患者术后生存评估。 展开更多
关键词 肺肿瘤 非小细胞肺癌 TRIM29 p53 Β-CATENIN 病理诊断 预后
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甲基对硫磷降解菌P-29的筛选及降解特性研究 被引量:2
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作者 华菊玲 邱星辉 +3 位作者 黄瑞荣 罗任华 李小美 涂雪琴 《江西农业学报》 CAS 2007年第2期66-67,共2页
采用富集培养法,从长期受农药污染的土壤中分离得到1株能高效降解甲基对硫磷的菌株P-29,经鉴定为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。该菌株以甲基对硫磷为唯一碳源时,30℃培养30h降解率达84.69%,其酶活性随培养时间的增加呈上升趋势。
关键词 甲基对硫磷 降解 pSEUDOMONAS AERUGINOSA p-29 筛选
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Hath1基因抑制结肠癌细胞的增殖 被引量:3
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作者 朱代华 龚建平 +2 位作者 任柯 孙建明 魏思东 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1005-1008,1011,共5页
目的研究Hath1基因对结肠癌细胞增殖的影响。方法将重组质粒pcDNA3.1(+)-Hath1转化至HT29结肠癌细胞中,随机挑选3个过表达Hath1的HT29细胞克隆,通过定量实时RT-PCR方法检测Hath1 mRNA、Muc2mRNA的表达;Western blotting检测Hath1、Muc2... 目的研究Hath1基因对结肠癌细胞增殖的影响。方法将重组质粒pcDNA3.1(+)-Hath1转化至HT29结肠癌细胞中,随机挑选3个过表达Hath1的HT29细胞克隆,通过定量实时RT-PCR方法检测Hath1 mRNA、Muc2mRNA的表达;Western blotting检测Hath1、Muc2、cyclinD1和p27表达;通过软琼脂克隆形成实验和裸鼠移植实验,观察Hath1基因对HT29细胞增殖能力的影响。结果 Hath1基因可上调p27和下调cyclinD1的表达,抑制HT29细胞的增殖。结论 Hath1基因可能在结肠癌的发病中扮演抗癌基因的作用。 展开更多
关键词 Hath1基因 结肠肿瘤 HT29 MUC2 CYCLIND1 p27
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细粒棘球蚴重组抗原P-29结构与功能的生物信息学分析 被引量:1
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作者 丁淑琴 师志云 +1 位作者 朱佳佳 赵巍 《国外医学(医学地理分册)》 CAS 2011年第2期87-90,共4页
目的应用生物信息学分析软件预测细粒棘球蚴重组抗原P-29氨基酸序列的结构与功能。方法应用NCBI、Expasy等在线生物信息学网站及DNAstar、Rasmol等软件包分析P-29与其他物种的同源序列,进行多序列同源比对;预测二级结构、三级结构;预测... 目的应用生物信息学分析软件预测细粒棘球蚴重组抗原P-29氨基酸序列的结构与功能。方法应用NCBI、Expasy等在线生物信息学网站及DNAstar、Rasmol等软件包分析P-29与其他物种的同源序列,进行多序列同源比对;预测二级结构、三级结构;预测主要抗原表位等。结果细粒棘球绦虫重组抗原P-29与其他物种的同源性比对结果表明与多房棘球绦虫同源性最高为97%,依次为日本血吸虫73.9%,冈比亚按蚊70.5%,埃及伊蚊66.2%;预测该蛋白分子质量约为27 ku,PI为5.69,具有1个跨膜区,位于212-215,8个抗原表位,其结构域位于5-238位。结论生物信息学预测结果提示该可能是免疫诊断、药物作用及疫苗潜在的靶分子。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 p-29 生物信息学 结构 功能
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细粒棘球绦虫(中国大陆株)特异性抗原P-29重组蛋白的生物信息学分析 被引量:1
9
作者 王元 王娅娜 +2 位作者 师志云 刘丽华 赵巍 《宁夏医科大学学报》 2012年第7期673-675,691,F0003,共5页
目的应用生物信息学分析软件预测细粒棘球蚴中国大陆株诊断抗原P-29氨基酸序列,了解该蛋白的特性,预测其抗原表位,为P-29进一步应用研究提供理论依据。方法应用DNAStar、BIOSUN、EXPASY/SignalP、protparam、psite/softberry生物分析软... 目的应用生物信息学分析软件预测细粒棘球蚴中国大陆株诊断抗原P-29氨基酸序列,了解该蛋白的特性,预测其抗原表位,为P-29进一步应用研究提供理论依据。方法应用DNAStar、BIOSUN、EXPASY/SignalP、protparam、psite/softberry生物分析软件对P-29的二级结构、抗原表位、信号肽、极性进行预测分析,用EXPASY/SWISSMODEL对蛋白的三维结构进行模拟。结果 P-29基因开放阅读框编码一个由238个氨基酸残基组成的多肽,分子式为C1180H1906N324O386S9,其蛋白分子量为27095.58 Da,等电点为5.649,有37个碱性氨基酸,41个酸性氨基酸,68个极性氨基酸和76个疏水性氨基酸,半衰期是30 h,结构稳定,呈亲水性且为带负电荷的酸性蛋白,α-螺旋水平较高,有15个抗原决定簇,无信号肽,有2个N-糖基化位点,6个蛋白激酶C磷酸化位点,11个酪蛋白激酶II磷酸化位点及7个微体羧基端目标信号位点。结论根据生物信息学预测的结果表明,P-29可能是免疫诊断、药物作用及疫苗潜在的靶分子。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴中国大陆株 p-29 生物信息学
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Structure of β-emitting nuclei ^(29)P
10
作者 周冬梅 郑永男 +7 位作者 张锡珍 袁大庆 左翼 范平 王志强 骆海龙 许国基 朱升云 《Chinese Physics C》 SCIE CAS CSCD 2009年第S1期218-220,共3页
The extoic structure of 29P was investigated by measuring its magnetic moment in the ground state with β-NMR method. We got the experimental value of 1.2346 μN after diamagnetism correction. It is very close to the ... The extoic structure of 29P was investigated by measuring its magnetic moment in the ground state with β-NMR method. We got the experimental value of 1.2346 μN after diamagnetism correction. It is very close to the calculated value of 1.1009 μN computed with shell model. The shell model calculation also gave a proton density distribution of 29P with a long tail. The present results show that 2s1/2 proton in the 29P may lead to the proton-skin structure. 展开更多
关键词 29p magnetic moment β-NMR proton density distribution proton-skin
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miRNA-29a和miRNA-10a-5p对脓毒症所致急性肾损伤患者28 d死亡率的预测价值 被引量:25
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作者 霍锐 戴敏 +3 位作者 樊艺 周竞峥 李莉 祖建 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期646-651,共6页
目的探讨miR-29a和miR-10a-5p对评估脓毒症伴有急性肾损伤(AKI)患者28 d死亡率的预测价值。方法收集我院124例急性肾损伤患者(AKI)血清样本,分为观察组(74例脓毒症所致AKI)和对照组(脓毒症无AKI)41例,记录患者一般情况,并用RT-PCR检测其... 目的探讨miR-29a和miR-10a-5p对评估脓毒症伴有急性肾损伤(AKI)患者28 d死亡率的预测价值。方法收集我院124例急性肾损伤患者(AKI)血清样本,分为观察组(74例脓毒症所致AKI)和对照组(脓毒症无AKI)41例,记录患者一般情况,并用RT-PCR检测其中miR-29a和miR-10a-5p的表达情况,随访28 d,记录患者生存情况,采用Pearson相关分析检验miR-29a和miR-10a-5p与观察组患者血清肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys-C)和肾损伤分子1(KIM-1)的相关性;多因素Logistic回归分析miR-29a、miR-10a-5p、Scr、Cys-C、KIM-1以及其他危险因素与脓毒症患者28 d死亡率的相关性。ROC曲线分析比较miR-29a和miR-10a-5p与Cys-C和Scr在脓毒症患者预后评估中的价值,最后进一步用统计学方法分析miR-29a和miR-10a-5p联合与Scr及Cys-C联合对脓毒症患者预后评估的价值。结果随访28 d后:(1)74例AKI患者中21例死亡,占整体人数的35.53%;(2)相比于生存组,死亡组患者血清Scr及Cys-C表达上升(P<0.05),死亡组患者血清中miR-29a和miR-10a-5p表达升高,有统计学意义(P<0.05);(3)Pearson相关分析结果显示miR-29a和miR-10a-5p分别与Scr、Cys-C及KIM-1表达呈正相关;(4)多因素回归结果显示,miR-29a和miR-10a-5p均为脓毒症患者死亡的独立危险因素;(5)ROC曲线分析结果显示miR-29a和miR-10a-5p曲线下面积(au Ro C)分别为0.82(95%CI,0.71-0.89)及0.75(95%CI,0.64-0.85),Cys-C、Scr和KIM-1曲线下面积分别为0.72(95%CI,0.66-0.86)、0.71(95%CI,0.63-0.84)及0.81(95%CI,0.72-0.81)。miR-29a及miR-10a-5p二者联合检测的au ROC值优于单一检测miR-29a、miR-10a-5p、Cys-C、Scr和KIM-1(P<0.05)。结论 miR-29a和miR-10a-5p在评估脓毒症患者死亡率时具有良好的预测价值。 展开更多
关键词 脓毒症 miR-29a miR-10a-5p 急性肾损伤 生存率
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TiC颗粒增强钛基复合材料的形变断裂 被引量:20
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作者 毛小南 周廉 +1 位作者 曾泉浦 魏海荣 《稀有金属材料与工程》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第4期217-220,共4页
通过对 Ti C颗粒增强钛基复合材料断裂研究表明 :Ti C颗粒的缺陷比例对复合材料的断裂裂纹扩展速率有较大影响。形状规则且无缺陷的粒子在受力的初期不易破断 ,可较大提高裂纹扩展所需能量。反之 ,易破碎的粒子则增加了裂纹尖端的扩展应... 通过对 Ti C颗粒增强钛基复合材料断裂研究表明 :Ti C颗粒的缺陷比例对复合材料的断裂裂纹扩展速率有较大影响。形状规则且无缺陷的粒子在受力的初期不易破断 ,可较大提高裂纹扩展所需能量。反之 ,易破碎的粒子则增加了裂纹尖端的扩展应力 ,提高了裂纹扩展速率。适当的热处理可提高裂纹扩展所需塑性功 ,从而在一定范围内改善复合材料塑性。 展开更多
关键词 塑性功 应力 颗粒增强钛基复合材料 断裂
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黄芩素通过促进miR-29a-3p抑制MAP2K6改善骨性关节炎模型大鼠软骨细胞退化 被引量:20
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作者 杨波 龙慧 +2 位作者 王郑钢 曾德辉 张彬 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期32-37,共6页
目的:探索黄芩素(Baicalein)改善软骨细胞退化的可能机制。方法:用不同浓度黄芩素处理OA大鼠,观察软骨退化情况,并检测炎性细胞因子水平。用不同剂量黄芩素处理OA细胞模型,检测各组细胞的活力及凋亡情况,双荧光素酶报告验证miR-29a-3p、... 目的:探索黄芩素(Baicalein)改善软骨细胞退化的可能机制。方法:用不同浓度黄芩素处理OA大鼠,观察软骨退化情况,并检测炎性细胞因子水平。用不同剂量黄芩素处理OA细胞模型,检测各组细胞的活力及凋亡情况,双荧光素酶报告验证miR-29a-3p、MAP2K6的靶向关系。结果:与假手术组比较,OA模型组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著增高,细胞活力显著降低,细胞凋亡率显著增高,与模型对照组比较,黄芩素10、20、30 mg/kg能够显著降低OA模型血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平,能够显著改善OA大鼠软骨细胞活性抑制及凋亡情况,能够缓解OA模型软骨组织番红氧失染情况;miR-29a-3p与MAP2K6存在靶向关系,黄芩素10μmol/L能够明显下调OA细胞中MAP2K6、p38/p-p38、MAX蛋白表达水平。结论:黄芩素可以通过调节miR-29a-3p靶向抑制MAP2K6的磷酸化,提高软骨细胞活性,抑制细胞凋亡从而改善OA引起的软骨细胞退化。 展开更多
关键词 骨性关节炎 黄芩素 微小RNA-29-3p MAp2K6
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bcl-2和p53在丹皮酚诱导人结直肠癌HT-29细胞凋亡中的作用及其机制 被引量:11
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作者 计春燕 谭诗云 +1 位作者 汪毅 刘长青 《中国全科医学》 CAS CSCD 2007年第5期364-366,共3页
目的探讨bcl-2和p53在丹皮酚(paeonol,Pae)诱导人结直肠癌HT-29细胞凋亡过程中的作用及可能的作用机制。方法应用透射电镜技术和原位末端标记(TUNEL)法观察不同浓度的Pae对HT-29细胞凋亡的诱导作用,应用免疫细胞化学技术检测用药前、后... 目的探讨bcl-2和p53在丹皮酚(paeonol,Pae)诱导人结直肠癌HT-29细胞凋亡过程中的作用及可能的作用机制。方法应用透射电镜技术和原位末端标记(TUNEL)法观察不同浓度的Pae对HT-29细胞凋亡的诱导作用,应用免疫细胞化学技术检测用药前、后凋亡相关基因bcl-2及p53表达的变化,并与对照组比较。结果透射电镜观察到Pae作用后HT-29细胞出现典型的细胞凋亡形态;Pae在15.63mg/L、62.50mg/L、250.00mg/L3种浓度下作用48h均可诱导HT-29细胞凋亡,TUNEL法显示各组凋亡指数(AI)间差别有显著性意义(P<0.05);免疫细胞化学染色显示Pae作用后HT-29细胞bcl-2及p53蛋白表达显著降低。结论Pae能抑制HT-29细胞增殖并诱导其凋亡,其作用可能与下调bcl-2及p53蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 结直肠癌 HT-29细胞 基因 BEL-2 基因 p53 丹皮酚
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miR-29b通过抑制N2a细胞p53凋亡通路减轻氧糖剥夺/再灌注损伤 被引量:11
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作者 陈立 邹伟婕 +3 位作者 张宇 张帅 王黎洲 周石 《介入放射学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期451-457,共7页
目的探讨微小核糖核酸(miR)-29b过表达是否抑制脑缺血损伤,进一步探讨其潜在机制。方法体外培养小鼠成神经细胞瘤N2a细胞,构建氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)模型,模拟体外脑缺血损伤。N2a细胞随机分为空白对照组、OGD/R组、OGD/R+转染miR-29b... 目的探讨微小核糖核酸(miR)-29b过表达是否抑制脑缺血损伤,进一步探讨其潜在机制。方法体外培养小鼠成神经细胞瘤N2a细胞,构建氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)模型,模拟体外脑缺血损伤。N2a细胞随机分为空白对照组、OGD/R组、OGD/R+转染miR-29b激动剂组、OGD/R+转染miR-29b抑制剂组、转染miR-29b激动剂阴性对照组、转染miR-29b抑制剂阴性对照组。实时定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测各组miR-29b表达,溴化噻唑蓝四氮唑(MTT)比色法、乳酸脱氢酶(LDH)法检测miR-29b激动剂和抑制剂对OGD/R诱导细胞活性和凋亡的影响,Hoechst 33258染色法观察N2a细胞形态学特征及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(caspase)-3活性,免疫印迹法定量分析促凋亡蛋白Bax、Bcl-2及p53表达。结果经OGD/R处理的N2a细胞中miR-29b水平明显降低。miR-29b激动剂显著增加细胞活力,减少LDH漏出率,改善细胞核在凋亡过程中形态学变化,增强OGD/R条件下caspase-3活性;miR-29b抑制剂加剧OGD/R诱导的细胞毒性和细胞凋亡。miR-29b激动剂阻断OGD/R诱导的Bax和p53蛋白表达增加,降低Bcl-2蛋白表达;miR-29b抑制剂加剧OGD/诱导的这些凋亡相关蛋白改变。p53基因敲除的p53 si RNA降低细胞活力,增加LDH漏出率,逆转miR-29b激动剂对细胞损伤的改善作用。结论 miR-29b通过负调控p53依赖性凋亡途径减轻脑缺血性损伤,可能为缺血性脑卒中提供一潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 miR-29b 脑缺血 p53基因 细胞凋亡 成神经细胞瘤N2a细胞
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Matrine suppresses lipopolysaccharide-induced fibrosis in human peritoneal mesothelial cells by inhibiting the epithelial-mesenchymal transition 被引量:12
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作者 Yi-Zheng Li Xi Peng +2 位作者 Yun-Hua Ma Fu-Ji Li Yun-Hua Liao 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2019年第6期664-670,共7页
Background: Peritoneal fibrosis is the primary reason that patients with end-stage renal disease (ESRD) have to cease peritoneal dialysis. Peritonitis caused by Gram-negative bacteria such as Escherichia coli (E. coli... Background: Peritoneal fibrosis is the primary reason that patients with end-stage renal disease (ESRD) have to cease peritoneal dialysis. Peritonitis caused by Gram-negative bacteria such as Escherichia coli (E. coli) were on the rise. We had previously shown that matrine inhibited the formation of biofilm by E. coli. However, the role of matrine on the epithelial-mesenchymal transition (EMT) in peritoneal mesothelial cells under chronic inflammatory conditions is still unknown. Methods: We cultured human peritoneal mesothelial cells (HPMCs) with lipopolysaccharide (LPS) to induce an environment that mimicked peritonitis and investigated whether matrine could inhibit LPS-induced EMT in these cells. In addition, we investigated the change in expression levels of the miR-29b and miR-129-5p. Results: We found that 10 jjig/ml of LPS induced EMT in HPMCs. Matrine inhibited LPS-induced EMT in HPMCs in a dose-dependent manner. We observed that treatment with matrine increased the expression of E-cadherin (F= 50.993, P< 0.01), and decreased the expression of alpha-smooth muscle actin (F= 32.913, P < 0.01). Furthermore, we found that LPS reduced the expression levels of miR- 29b and miR-129-5P in HPMCs, while matrine promoted the expression levels of miR-29b and miR-129-5P. Conclusions: Matrine could inhibit LPS-induced EMT in HPMCs and reverse LPS inhibited expressions of miR-29 b and miR-129- 5P in HPMCs, ultimately reduce peritoneal fibrosis. These findings provide a potential theoretical basis for using matrine in the prevention and treatment of peritoneal fibrosis. 展开更多
关键词 MATRINE Human pERITONEAL MESOTHELIUM cells LIpOpOLYSACCHARIDE miR-129-5p miR-29b
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miR-29b-3p靶向IGF1调控非酒精性脂肪肝脂质代谢及肝纤维化 被引量:11
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作者 杨仁国 贺微微 罗婷婷 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第1期66-72,共7页
目的探讨miR-29b-3p在非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)模型中的表达情况,并确定miR-29b-3p在脂质沉积和肝细胞纤维化中的潜在功能。方法使用棕榈酸(PA)构建L02细胞NAFLD模型。通过RT-qPCR或Western blot测定细胞中miR-29b-3p和胰岛素样生长因... 目的探讨miR-29b-3p在非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)模型中的表达情况,并确定miR-29b-3p在脂质沉积和肝细胞纤维化中的潜在功能。方法使用棕榈酸(PA)构建L02细胞NAFLD模型。通过RT-qPCR或Western blot测定细胞中miR-29b-3p和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的表达水平。将miR-29b-3p模拟物/抑制剂或IGF-1 siRNA转染到NAFLD细胞模型中,通过油红O染色,甘油三酯和总胆固醇测定法测定脂质积累。使用双重荧光素酶实验确定miR-29b-3p和IGF-1之间的靶向关系。结果 miR-29b-3p在NAFLD体外细胞模型中上调,而IGF-1则在下降;miR-29b-3p显著抑制了L02细胞模型中的脂质蓄积和纤维化程度;沉默IGF-1增强了miR-29b-3p过表达并对L02细胞模型的脂质积累和纤维化产生影响。结论 miR-29b-3p通过靶向IGF-1对肝细胞L02细胞模型中脂质蓄积和纤维化产生负调控作用,表明miR-29b-3p可能是NAFLD的治疗靶标。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪肝疾病 miR-29b-3p 胰岛素样生长因子-1 脂肪堆积 纤维化 L02细胞
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微小RNA-216a、324-5p、29a在急性胰腺炎患者外周血中的表达及其与并发肝损伤的相关性 被引量:10
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作者 韩永艳 王春耀 +5 位作者 杨林 赵国尧 刘慧丽 李景周 陈培莉 崔抗 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第27期2126-2131,共6页
目的探讨微小RNA(miR)-216a、miR-324-5p、miR-29a在急性胰腺炎(AP)患者外周血中表达的意义及与胰腺炎并发肝损伤的相关性。方法采用病例对照研究设计,选取2017年6月至2019年5月商丘市第一人民医院收治的130例AP患者,分为轻症AP组(MAP组... 目的探讨微小RNA(miR)-216a、miR-324-5p、miR-29a在急性胰腺炎(AP)患者外周血中表达的意义及与胰腺炎并发肝损伤的相关性。方法采用病例对照研究设计,选取2017年6月至2019年5月商丘市第一人民医院收治的130例AP患者,分为轻症AP组(MAP组)和中重症AP组(SAP组),肝损伤组54例(MAP 20例、SAP 34例)与非肝损伤组76例(均为MAP);另选取40名健康志愿者为健康组。比较MAP组、SAP组、健康组以及肝损伤组与非肝损伤组外周血miR-216a、miR-324-5p、miR-29a表达水平,并分析其与临床指标相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析外周血各miRNA水平对AP并发肝损伤的预测价值。结果MAP组、SAP组外周血miR-216a、miR-29a水平均高于健康组,miR-324-5p水平低于健康组(均P<0.01);SAP组外周血miR-216a、miR-29a水平均高于MAP组,miR-324-5p水平低于健康组(均P<0.01)。Balthazar CT评分、急性生理与慢性健康状况评分(APACHEⅡ)评分、C反应蛋白水平、住院时间与外周血miR-216a、miR-29a水平均呈正相关(均P<0.05),与miR-324-5p水平呈负相关(均P<0.05)。肝损伤组外周血miR-216a、miR-29a水平高于非肝损伤组,且在肝损伤组中SAP患者高于MAP患者(均P<0.05);肝损伤组外周血miR-324-5p水平低于非肝损伤组,且肝损伤组中SAP患者低于MAP患者(均P<0.05)。外周血miR-216a、miR-324-5p、miR-29a预测AP并发肝损伤的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.694、0.750、0.814。结论miR-216a、miR-29a水平在AP患者外周血中表达增高,miR-324-5p水平降低,与Balthazar CT评分、APACHEⅡ评分、C反应蛋白水平、住院时间关系密切,且对AP并发肝损伤有一定预测价值,其中miR-29a预测价值最高。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 肝损伤 微小RNA-216a 微小RNA-324-5p 微小RNA-29a
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小型猪肝脏细胞色素P450基因CYP3A29克隆与序列分析 被引量:8
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作者 商海涛 杨家大 +1 位作者 魏泓 桂蓓 《畜牧与兽医》 北大核心 2008年第5期21-25,共5页
设计引物通过RT-PCR扩增巴马香猪和贵州小型猪香猪药物代谢关键P450基因CYP3A29基因的全长编码区,纯化并克隆入pMD 18-T载体,通过序列测定和比对分析其序列变异情况。17头小型猪共发现CYP3A29基因的5个单核苷酸变异位点,均表现为同义替... 设计引物通过RT-PCR扩增巴马香猪和贵州小型猪香猪药物代谢关键P450基因CYP3A29基因的全长编码区,纯化并克隆入pMD 18-T载体,通过序列测定和比对分析其序列变异情况。17头小型猪共发现CYP3A29基因的5个单核苷酸变异位点,均表现为同义替换,对编码的氨基酸序列无影响;猪CYP3A29的单核苷酸变异和品系相关,在不同品系中可表现出品系特有的单核苷酸变异;贵州小型香猪G3 a2902发现1个可变剪接,缺失89 bp并产生移码,改变编码蛋白。本研究克隆的巴马香猪和贵州小型香猪CYP3A29基因及其序列变异情况,可为其作为药物代谢模型的应用提供技术资料。 展开更多
关键词 细胞色素p450 小型猪 CYp3A29 变异 可变剪接
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Rho A蛋白通路在DLC-1基因调控人结肠癌HT29细胞周期中的作用及其机制 被引量:10
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作者 吴平平 苏昀 +3 位作者 金治 吴鹏 徐佳佳 黄培林 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2009年第4期247-251,共5页
目的:探讨Rho A蛋白通路在DLC-1(frequently deleted in liver cancer-1)基因调控人结肠癌HT29细胞周期中的作用及其机制。方法:构建pcDNA3.1-DLC1质粒载体,脂质体法转染HT29细胞,筛选稳定细胞系;pull-down方法分析Rho A蛋白活性;实时定... 目的:探讨Rho A蛋白通路在DLC-1(frequently deleted in liver cancer-1)基因调控人结肠癌HT29细胞周期中的作用及其机制。方法:构建pcDNA3.1-DLC1质粒载体,脂质体法转染HT29细胞,筛选稳定细胞系;pull-down方法分析Rho A蛋白活性;实时定量PCR检测细胞周期相关蛋白Cyclin D1、p21的表达变化;流式细胞仪检测细胞周期分布。结果:野生型人结肠癌HT29细胞DLC-1基因表达呈阴性,经转染获得DLC-1稳定表达细胞系。与野生型及空载组HT29细胞相比,转染组细胞RhoA蛋白活性下降;Cyclin D1表达下调,p21表达上调;G1期及凋亡细胞数增加,而G2期细胞数下降。结论:转染DLC-1基因引起人结肠癌HT29细胞Rho A蛋白活性下调,进而可能通过对Cyclin D1、p21表达的调控使细胞周期G1期阻滞并诱导凋亡,同时分裂前期细胞数减少,细胞增殖受抑。 展开更多
关键词 肝癌缺失基因-1 RHO A蛋白 CYCLIN D1基因 p21基因 细胞周期 HT29细胞株
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