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氧化修饰高密度脂蛋白对培养人动脉平滑肌细胞细胞周期蛋白D_1基因表达的影响 被引量:4
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作者 江渝 刘秉文 +1 位作者 覃扬 孙芝琳 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第6期978-982,共5页
动脉平滑肌细胞(sm ooth m uscle cell,SMC)是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)斑块中的主要细胞,它的增殖在AS形成过程中极其重要.利用体外培养的人主动脉SMC,观察了天然高密度脂... 动脉平滑肌细胞(sm ooth m uscle cell,SMC)是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)斑块中的主要细胞,它的增殖在AS形成过程中极其重要.利用体外培养的人主动脉SMC,观察了天然高密度脂蛋白(native high density lipoprotein,N-HDL)及氧化修饰HDL(oxidized HDL,OX-HDL)对培养人主动脉SMC cyclin D1(细胞周期蛋白D1)基因转录表达的影响.结果表明:(1)N-HDL对SMCcyclin D1基因表达无影响(P> 0.05);(2)OX-HDL使SMCcyclin D1基因表达显著增强(P<0.01),其表达量随时间(2、12、24 h)延长而增加.上述结果表明,OX-HDL的致AS作用可能与其刺激SMCcyclin D1基因表达增加有关. 展开更多
关键词 SMC HDL AS CYCLIN D1基因 氧化修饰 基因表达
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氧化修饰高密度脂蛋白对培养人动脉平滑肌细胞原癌基因c-fos及PDGF受体基因表达的影响 被引量:4
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作者 江渝 刘秉文 +1 位作者 覃扬 孙芝琳 《华西医科大学学报》 CSCD 2000年第1期37-41,共5页
动脉平滑肌细胞 (sm ooth muscle cell,SMC)的增殖在动脉粥样硬化 (atherosclerosis,AS)的形成过程中极其重要。利用体外培养的人主动脉 SMC,观察了天然高密度脂蛋白 (Native high density lipoprotein N-HDL)及氧化修饰 HDL(OX- HDL)... 动脉平滑肌细胞 (sm ooth muscle cell,SMC)的增殖在动脉粥样硬化 (atherosclerosis,AS)的形成过程中极其重要。利用体外培养的人主动脉 SMC,观察了天然高密度脂蛋白 (Native high density lipoprotein N-HDL)及氧化修饰 HDL(OX- HDL)对培养的人主动脉 SMC原癌基因 c- fos及 PDGF受体基因转录表达的影响。结果表明 :1 N- HDL 对 SMC c- fos,PDGF受体基因表达无影响 (P>0 .0 5 ) ;2 OX- HDL 对 SMC PDGF受体基因表达无影响 (P>0 .0 5 ) ;3OX- HDL使 SMC c- fos基因表达显著增强 (P<0 .0 1 ) .上述结果表明 ,OX- HDL的致 AS作用可能与刺激 SMC c- 展开更多
关键词 动脉平滑肌细胞 C-FOS基因 PDGF受体基因
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氧化型高密度脂蛋白对细胞凋亡及细胞内钙离子浓度的影响 被引量:3
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作者 李莹 张泉三 曾智 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2005年第2期186-188,共3页
目的 通过研究氧化型高密度脂蛋白对培养的内皮细胞致凋亡以及细胞内钙离子浓度的影响,阐述其致动脉粥样硬化机理,并探讨其引起细胞损伤的机制。方法 用铜离子引发脂质过氧化过程,制备氧化型高密度脂蛋白,用MTT检测法检测细胞活性,PI... 目的 通过研究氧化型高密度脂蛋白对培养的内皮细胞致凋亡以及细胞内钙离子浓度的影响,阐述其致动脉粥样硬化机理,并探讨其引起细胞损伤的机制。方法 用铜离子引发脂质过氧化过程,制备氧化型高密度脂蛋白,用MTT检测法检测细胞活性,PI染色法检测细胞凋亡。结果 氧化型高密度脂蛋白可诱导内皮细胞发生凋亡;细胞内钙离子浓度则随氧化型高密度脂蛋白浓度的升高呈现逐渐下降的趋势。结论 氧化型高密度脂蛋白引起细胞损伤的机制可能与钙离子浓度升高有关,体内氧化型高密度脂蛋白通过内皮细胞凋亡的途径损伤血管内皮,引发动脉粥样硬化。 展开更多
关键词 病理学与病理生理学 高密度脂蛋白 脂质过氧化 ECV304细胞 动脉粥样硬化 细胞凋亡 钙离子
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氧化型高密度脂蛋白与冠状动脉粥样硬化性心脏病的相关性分析 被引量:3
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作者 张海龙 刘辉 +2 位作者 王学惠 郭军霞 张永春 《医学信息》 2019年第11期67-71,共5页
目的研究冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)患者血浆中氧化型高密度脂蛋白(ox-HDL)水平与冠状动脉病变程度(Gensini评分)之间的相关性,ox-HDL与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的比值(ox-HDL/HDL-C)相较HDL-C对血浆HDL真实水平的代表性。方法选... 目的研究冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)患者血浆中氧化型高密度脂蛋白(ox-HDL)水平与冠状动脉病变程度(Gensini评分)之间的相关性,ox-HDL与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的比值(ox-HDL/HDL-C)相较HDL-C对血浆HDL真实水平的代表性。方法选取2018年7月~2019年2月于新乡医学院第一附属医院心内科二病区住院行冠状动脉造影被确诊为冠心病的患者84例为实验组,另选取冠状动脉造影正常者44例为对照组,通过酶联免疫吸附剂(ELISA)检测所有研究对象血浆中ox-HDL水平,应用Pearson相关性分析实验组内ox-HDL、ox-HDL/HDL-C分别与Hcy、冠状动脉粥样硬化病变程度(采用Gensini评分评价)的相关性。结果实验组ox-HDL水平高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);ox-HDL与Gensini评分呈现明显的正相关(r=0.335,P<0.01);oxHDL/HDL-C与Gensini评分之间呈显著正相关(r=0.819,P<0.01);多因素Logistic回归分析结果表明ox-HDL水平与冠心病的病变程度相关。结论ox-HDL是冠心病的危险因素,应用ox-HDL及ox-HDL/HDL-C可以更好的评价冠状动脉病变程度以及冠心病患者血浆HDL-C的真实水平,ox-HDL可能会成为动脉粥样硬化的新的危险因素和治疗的新靶点。 展开更多
关键词 氧化型高密度脂蛋白 冠心病 GENSINI评分 相关性
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氧化型高密度脂蛋白、白细胞介素-1β与老年冠心病的相关性 被引量:2
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作者 郁洁 洪侃 +4 位作者 王滨 王卓 杨颖 张炳山 郁志明 《实用老年医学》 CAS 2020年第3期263-265,共3页
目的研究氧化型高密度脂蛋白(ox-HDL)与IL-1β在老年CHD病人中的表达情况及其与CHD的相关性。方法选取我院128例CHD病人为研究对象,其中包含心绞痛组67例,急性心肌梗死(AMI)组61例,并以同期52例冠脉造影正常者为对照组。比较各组ox-HDL... 目的研究氧化型高密度脂蛋白(ox-HDL)与IL-1β在老年CHD病人中的表达情况及其与CHD的相关性。方法选取我院128例CHD病人为研究对象,其中包含心绞痛组67例,急性心肌梗死(AMI)组61例,并以同期52例冠脉造影正常者为对照组。比较各组ox-HDL、IL-1β的水平,并分析其与Gensini评分的相关性。结果AMI组血清ox-HDL、IL-1β水平均显著高于心绞痛组及对照组,心绞痛组血清ox-HDL、IL-1β水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。AMI组的Gensini评分为(62.4±8.3)分,明显高于心绞痛组的(37.6±6.5)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,老年CHD病人血清ox-HDL、IL-1β水平与Gensini评分均呈正相关(r=0.679、0.692,P<0.001)。结论ox-HDL、IL-1β在老年CHD发病机制的研究中具有重要的临床价值。 展开更多
关键词 老年人 冠心病 氧化型高密度脂蛋白 白细胞介素-1Β
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氧化修饰高密度脂蛋白促进C57BL/6J小鼠骨髓源性树突状细胞成熟活化 被引量:1
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作者 许增祥 谢闵 +2 位作者 唐雅玲 王双 杨永宗 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期39-42,共4页
目的探讨氧化型高密度脂蛋白对C57BL/6J小鼠骨髓源性树突状细胞成熟活化及部分免疫功能的影响。方法制备C57BL/6J小鼠骨髓细胞悬液,利用树突状细胞专用分离液和细胞粘附性差异去除杂细胞,用重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和重组... 目的探讨氧化型高密度脂蛋白对C57BL/6J小鼠骨髓源性树突状细胞成熟活化及部分免疫功能的影响。方法制备C57BL/6J小鼠骨髓细胞悬液,利用树突状细胞专用分离液和细胞粘附性差异去除杂细胞,用重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和重组小鼠白细胞介素4使其分化为骨髓源性树突状细胞。实验分为PBS阴性对照、高密度脂蛋白组、氧化型高密度脂蛋白组和脂多糖阳性对照组。采用流式细胞术检测骨髓源性树突状细胞CD86和MHCⅡ的表达率;液体闪烁计数检测各实验组骨髓源性树突状细胞刺激同源T淋巴细胞增殖的能力;ELISA法检测分泌到培养基中的白细胞介素12和白细胞介素10。结果与PBS组相比,氧化型高密度脂蛋白处理的骨髓源性树突状细胞,其CD86、MHCⅡ表达率、混合淋巴细胞反应液体闪烁计数和细胞因子分泌量都明显升高;高密度脂蛋白组各项指标升高不如氧化型高密度脂蛋白明显。结论氧化型高密度脂蛋白可促进C57BL/6J小鼠骨髓源性树突状细胞成熟活化和细胞因子的分泌。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 树突状细胞 氧化型高密度脂蛋白 成熟 免疫 高密度脂蛋白
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氧化高密度脂蛋白和氧化低密度脂蛋白单克隆抗体的制备
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作者 张娟 范平 白怀 《实用医院临床杂志》 2012年第2期49-51,共3页
目的制备抗氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)和氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)单克隆抗体(McAb)。方法以Ox-HDL和Ox-LDL为抗原,免疫BALB/C小鼠,用杂交瘤技术建立稳定分泌抗相关抗原的McAb。用protein A柱亲和层析法纯化腹水中McAb,用Dot-ELISA和ELIS... 目的制备抗氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)和氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)单克隆抗体(McAb)。方法以Ox-HDL和Ox-LDL为抗原,免疫BALB/C小鼠,用杂交瘤技术建立稳定分泌抗相关抗原的McAb。用protein A柱亲和层析法纯化腹水中McAb,用Dot-ELISA和ELISA等鉴定其生物学活性。结果获得3株不同结合特性的抗Ox-HDL和Ox-LDL的单克隆杂交瘤细胞(1C4G12,6H9A4A11和8C1A6),2株为IgG1亚型,1株为IgG2b亚型;腹水效价大于105,Dot-ELISA和ELISA检测证实1C4G12为具有对Ox-HDL和Ox-LDL交叉反应性的McAb,其与Ox-HDL单抗6H9A4A11可构成双抗体夹心体系测定Ox-HDL水平,而与Ox-LDL单抗8C1A6构成的体系可测定Ox-LDL水平。结论本实验通过构建3株不同特性的交叉反应性McAb,可用于测定Ox-HDL和Ox-LDL免疫方法的建立。 展开更多
关键词 氧化低密度脂蛋白 氧化高密度脂蛋白 单克隆抗体 酶联免疫吸附测定
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内毒素致内皮细胞损伤中Ox—LDL与Ox—HDL变化的研究
8
作者 姜怡邓 马胜超 +3 位作者 李娜 李萍 哈丽娜 刘学英 《医学信息》 2012年第6期111-112,共2页
目的观察内毒素(Lipopolysaccharide,LPS)对内皮细胞(Endochelial Cell。EC)的活性以及胞内氧化低密度脂蛋白(Oxidized Low Density Lipoprotein,Ox—LDL)与氧化高密度脂蛋白(Oxidized High Density Lipoprotein,Ox—HDL)含... 目的观察内毒素(Lipopolysaccharide,LPS)对内皮细胞(Endochelial Cell。EC)的活性以及胞内氧化低密度脂蛋白(Oxidized Low Density Lipoprotein,Ox—LDL)与氧化高密度脂蛋白(Oxidized High Density Lipoprotein,Ox—HDL)含量变化的影响。方法选择体外培养的内皮细胞(EC)为研究对象,加入不同浓度的内毒素(分别为10ng/mL、100ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL)培养24h后收集细胞,用MTT法检测LPS对内皮细胞增殖的影响,并用酶联免疫吸附法(ELISA)检测胞内Ox—LDL与Ox—HDL含量变化。结果不同浓度的内毒素干预内皮细胞,内皮细胞的活性均下降,以1000ng/mL干预组下降了3980%最显著(P〈0.01)。细胞中的Ox—LDL和Ox—HDL含量均上升,以100ng/mL干预组最显著(P〈0.01),均升高了2倍。结论内毒素能导致内皮细胞损伤.使Ox—LDL和Ox—HDL的合成和释放增加,对动脉粥样硬化的发生发展起到一定的促进作用. 展开更多
关键词 内毒素 内皮细胞 氧化低密度脂蛋白 氧化高密度脂蛋白 动脉粥样硬化
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氧化修饰高密度脂蛋白对大鼠颗粒细胞激素分泌的影响及相关机制 被引量:1
9
作者 马金平 李红娟 李艳敏 《分子诊断与治疗杂志》 2020年第3期376-380,共5页
目的研究氧化修饰高密度脂蛋白(Ox-HDL)对大鼠颗粒细胞激素分泌的影响及相关机制。方法 30只6周龄SPF级SD雌性大鼠经适应性饲养5 d后,采用孕激素拮抗剂米非司酮进行多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠造模。随机选择25只雌鼠,每天对大鼠进行1次... 目的研究氧化修饰高密度脂蛋白(Ox-HDL)对大鼠颗粒细胞激素分泌的影响及相关机制。方法 30只6周龄SPF级SD雌性大鼠经适应性饲养5 d后,采用孕激素拮抗剂米非司酮进行多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠造模。随机选择25只雌鼠,每天对大鼠进行1次皮下注射,每次剂量0.2 mL米非司酮(20 mg/mL),连续14 d。其余5只雌鼠作为对照组。选择造模成功的15只雌鼠,分为模型组,低剂量组及高剂量组,每组5只。对照组及模型组大鼠尾静脉注射0.05 mL生理盐水,连续14 d。低剂量组和高剂量组每天尾静脉注射0.05 m L Ox-HDL溶液(浓度分别为200、400μmol/L),连续14 d。并收集大鼠卵巢颗粒细胞。采用ELISA试验检测大鼠血清雌激素及孕酮水平;采用HE染色检测Ox-HDL对PCOS卵巢病理形态的影响观察;采用Hoechest33258凋亡染色检测大鼠颗粒细胞凋亡水平的影响;采用RT-PCR法检测Ox-HDL对大鼠颗粒细胞Bcl-2、FSHR、StAR及Bax基因表达的作用;采用Western blot法检测Ox-HDL对大鼠颗粒细胞Bcl-2、FSHR、StAR及Bax蛋白表达的作用。结果 PCOS大鼠在Ox-HDL作用后,雌激素及孕酮水平均下降差异有统计学意义(P<0.05),高剂量组的雌激素及孕酮均显著低于其它各组差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色发现PCOS大鼠给予高剂量Ox-HDL后,囊肿卵泡进一步增多,颗粒细胞排列较为疏松,大鼠卵巢病理症状有一定加剧。Hoechest33258凋亡染色检测发现高剂量组细胞凋亡水平显著高于其它各组(P<0.05)。RT-PCR实验发现发现Ox-HDL可抑制颗粒细胞Bcl-2、FSHR、StAR基因的mRNA表达水平差异有统计学意义;Ox-HDL可促进颗粒细胞Bax基因的mRNA表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting实验发现发现Ox-HDL可抑制颗粒细胞Bcl-2、FSHR、StAR蛋白表达水平;Ox-HDL可促进颗粒细胞Bax蛋白表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Ox-HDL可促使PCOS大鼠卵巢病理症状加剧,诱导颗粒细胞发� 展开更多
关键词 氧化修饰高密度脂蛋白 颗粒细胞 激素分泌
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氧化高密度脂蛋白对培养的人脐静脉内皮细胞血管紧张素转化酶表达的影响
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作者 李晓庆 王秋林 +1 位作者 张磊 姜轶 《四川医学》 CAS 2008年第7期805-808,共4页
目的探讨氧化高密度脂蛋白(ox-HDL)对人血管内皮细胞血管紧张素转化酶(ACE)表达的影响。方法人脐静脉内皮细胞株复苏、传代后取生长良好3~6代用于实验。分为①空白对照组:加无血清培养基;②不同浓度组:ox-HDL(终浓度分别为20、4... 目的探讨氧化高密度脂蛋白(ox-HDL)对人血管内皮细胞血管紧张素转化酶(ACE)表达的影响。方法人脐静脉内皮细胞株复苏、传代后取生长良好3~6代用于实验。分为①空白对照组:加无血清培养基;②不同浓度组:ox-HDL(终浓度分别为20、40、80mg/L)与人脐静脉内皮细胞孵育24h;③不同时间组:以终浓度为40mg/L氧化型高密度脂蛋白分别刺激6、12和24h。提取细胞总RNA及蛋白,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测血管紧张素转化酶mRNA表达,以蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测ACE蛋白表达量。结果ox-HDL呈剂量(浓度)和时间依赖性使ACE基因及蛋白表达量增加,与对照组比较,ox-HDL各浓度刺激组ACE mRNA表达增加1.43、2.41、2.98倍,ACE蛋白表达增加为1.32、2.0、2.54倍(P均〈0.01),不同浓度组间比较差异亦有统计学意义(P〈0.01)。于6、12和24h,ACE mRNA表达增加1.64、2.08、2.43倍,ACE蛋白表达增加1.52、1.78、1.99倍(P均〈0.01),不同时间组间比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论ox-HDL呈剂量(浓度)和时间依赖性显著上调ACE基因及蛋白表达,并通过这一机制参与动脉粥样硬化形成。 展开更多
关键词 氧化高密度脂蛋白 血管紧张素转化酶 人脐静脉内皮细胞
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氧化高密度脂蛋白对兔树突状细胞的成熟及趋化因子分泌的影响
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作者 雷霄 赵文锐 +5 位作者 傅强 川玲 梁英魁 王升 郭烽 李志樑 《转化医学杂志》 2012年第3期147-150,共4页
目的在体外观察氧化高密度脂蛋白(oxidation-high density lipoprotein,ox-HDL)诱导兔外周血源性树突状细胞(dendritic cells,DCs)成熟情况,并观察ox-HDL对DCs趋化因子巨噬细胞炎性蛋白-1α(macro-phage inflammatory protein-1 alpha,M... 目的在体外观察氧化高密度脂蛋白(oxidation-high density lipoprotein,ox-HDL)诱导兔外周血源性树突状细胞(dendritic cells,DCs)成熟情况,并观察ox-HDL对DCs趋化因子巨噬细胞炎性蛋白-1α(macro-phage inflammatory protein-1 alpha,MIP-1α)和单核细胞趋化蛋白-1(macrophage chemoattractant protein-1,MCP-1)分泌的影响情况,探讨ox-HDL对DCs成熟及趋化作用的影响。方法 12只新西兰大白兔心尖穿刺采集外周血标本,分离培养树突状细胞;同时,冻存血浆,提取HDL并氧化修饰。培养的细胞随机分为磷酸盐缓冲液组、HDL组及ox-HDL组,分别加入磷酸盐缓冲液、HDL、ox-HDL干预24 h后收集细胞,检测细胞表面CD86、主要组织相容性复合物Ⅱ(major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ)、CD14表达。分别于12、24、48 h取细胞培养上清液测定趋化因子MIP-1α和MCP-1。结果 ox-HDL可以上调DCs表面CD86和MHCⅡ的表达,同时下调CD14的表达,细胞的形态由不成熟往成熟转变。细胞培养上清液中MCP-1随时间和ox-HDL浓度升高而逐渐升高,而MIP-1α水平受树突状细胞是否成熟影响不大。结论 ox-HDL可以促进DCs的成熟,并增加趋化因子MCP-1的分泌,导致斑块性质的不稳定,可能与斑块的免疫反应及炎症的活化相关。 展开更多
关键词 氧化高密度脂蛋白 树突状细胞 趋化因子 动脉粥样硬化 斑块
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应用Dil标记的氧化高密度脂蛋白观察人单核细胞源性的树突状细胞成熟的研究 被引量:2
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作者 尹学亮 李志梁 +5 位作者 傅强 严全能 吴宏超 吕永恒 缪绯 刘映峰 《热带医学杂志》 CAS 2007年第12期1162-1164,F0004,共4页
目的探讨氧化修饰高密度脂蛋白(OxHDL)和高密度脂蛋白(HDL)对人单核细胞源的树突状细胞(DCs)免疫功能的影响。方法从人外周血清中离心提取高密度脂蛋白,经氧化后,分别用Dil荧光标记。将人外周血分离的单核细胞加入包含rhGM-CSF(20ng/mL)... 目的探讨氧化修饰高密度脂蛋白(OxHDL)和高密度脂蛋白(HDL)对人单核细胞源的树突状细胞(DCs)免疫功能的影响。方法从人外周血清中离心提取高密度脂蛋白,经氧化后,分别用Dil荧光标记。将人外周血分离的单核细胞加入包含rhGM-CSF(20ng/mL)和rhIL-4(20ng/mL)的培养基中培养,使其分化为DCs。以PBS作阴性对照,分别与50μg/mL的标记好的OxHDL和HDL混合培养48h后,动态观察DCs成熟过程中的形态学变化,流式细胞术检测DCs成熟表型(CD1#、CD80、CD86、HLA-DR)。结果使用Dil标记的方法良好地显示了DCs摄取OxHDL的形态学变化,OxHDL可促进DCs成熟表型HLA-DR、CD1$的表达(P<0.05),而HDL无此作用。结论Dil是适合DCs形态学研究的良好的荧光标记物,OxHDL可促进DCs成熟。 展开更多
关键词 树突状细胞 动脉粥样硬化 氧化高密度脂蛋白
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氧化修饰高密度脂蛋白激活活性氧启动p38信号促使大鼠卵巢颗粒细胞凋亡 被引量:2
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作者 郭琴 吴敏敏 陶莹 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第19期3055-3060,共6页
背景:多囊卵巢综合征患者体内高密度脂蛋白发生了部分氧化修饰,而氧化修饰高密度脂蛋白与排卵障碍的关系及其机制尚不清楚。目的:探讨氧化修饰高密度脂蛋白对卵巢颗粒细胞凋亡的影响,并分析其可能的作用机制。方法:构建多囊卵巢综合征... 背景:多囊卵巢综合征患者体内高密度脂蛋白发生了部分氧化修饰,而氧化修饰高密度脂蛋白与排卵障碍的关系及其机制尚不清楚。目的:探讨氧化修饰高密度脂蛋白对卵巢颗粒细胞凋亡的影响,并分析其可能的作用机制。方法:构建多囊卵巢综合征大鼠模型,取心脏血并分离血清,进一步分离高密度脂蛋白,采用高密度脂蛋白炎症指数、丙二醛水平和脂蛋白琼脂糖凝胶电泳法检验其氧化程度。分离正常大鼠卵巢颗粒细胞,分别给予模型大鼠血清分离的高密度脂蛋白和氧化修饰高密度脂蛋白处理,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,H2DCF-DA染色检测活性氧生成水平,Western blot检测p38信号活性。卵巢颗粒细胞分别给予活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)和四甲基哌啶(Tempol)和p38抑制剂SB203580预处理后,再给予氧化修饰高密度脂蛋白处理,然后检测细胞凋亡、活性氧生成和p38信号活性。结果与结论:多囊卵巢综合征模型大鼠血清中高密度脂蛋白部分发生氧化修饰。模型大鼠血清分离的高密度脂蛋白和氧化修饰高密度脂蛋白抑制卵巢颗粒细胞活力和促进细胞凋亡(均P<0.05),二者能促进大鼠卵巢颗粒细胞活性氧生成和提高p38活性(均P<0.05)。NAC、Tempol和SB203580均能逆转氧化修饰高密度脂蛋白诱导的卵巢颗粒细胞凋亡(均P<0.05);Tempol、NAC能抑制氧化修饰高密度脂蛋白诱导的p38活性(均P<0.05);SB203580对活性氧的生成没有调节作用(P>0.05)。结果表明:多囊卵巢综合征能促使高密度脂蛋白发生部分氧化修饰,氧化修饰高密度脂蛋白能通过激活活性氧-p38信号通路促使大鼠卵巢颗粒细胞凋亡。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 氧化修饰高密度脂蛋白 卵巢颗粒细胞 凋亡 活性氧 P38
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硫化氢通过激活Akt抑制铁死亡减轻ox-HDL诱导的人脐静脉内皮细胞功能障碍
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作者 王燕霞 吴泽凡 +2 位作者 易琪龙 刘宁雅 姜志胜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期961-970,共10页
目的:探讨硫化氢(H_(2)S)对氧化高密度脂蛋白(ox-HDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)铁死亡及内皮细胞功能损伤的作用及机制。方法:体外培养HUVECs,用200 mg/L ox-HDL、铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1)、蛋白激酶B(PKB/Akt)激动剂SC7... 目的:探讨硫化氢(H_(2)S)对氧化高密度脂蛋白(ox-HDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)铁死亡及内皮细胞功能损伤的作用及机制。方法:体外培养HUVECs,用200 mg/L ox-HDL、铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1)、蛋白激酶B(PKB/Akt)激动剂SC79、Akt抑制剂MK-22062HCl(MK)和/或H_(2)S处理细胞24 h,Western blot检测相关蛋白,流式细胞术和免疫荧光染色检测细胞内活性氧(ROS)水平,铁离子检测试剂盒检测细胞内铁离子含量,单核细胞黏附实验检测单核细胞黏附到内皮细胞的数量。结果:与对照组相比,ox-HDL组酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)蛋白表达升高1.45倍(P<0.01),谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达降低29.79%(P<0.05),ROS水平和铁离子含量分别升高4.81倍和1.40倍(P<0.01),p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值降低45.65%和41.68%(P<0.01),内皮细胞功能相关蛋白IL-6、ICAM-1和TNF-α表达分别升高1.18倍、1.24倍和1.41倍(P<0.05),内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达下降35.24%(P<0.01),与单核细胞的黏附作用升高3.43倍(P<0.01)。与ox-HDL组相比,ox-HDL+H_(2)S组内皮细胞铁死亡相关蛋白ACSL4降低22.32%(P<0.05),GPX4增加1.27倍(P<0.01),p-Akt/Akt比值增加1.52倍(P<0.01);荧光显微镜结果表明ROS表达降低50.35%(P<0.01);IL-6、ICAM-1和TNF-α蛋白表达分别降低13.34%、9.83%和13.46%(P<0.05),eNOS升高1.22倍(P<0.01),单核细胞黏附数量降低59.05%(P<0.01)。与ox-HDL组相比,ox-HDL+SC79组GPX4蛋白表达升高1.49倍(P<0.01),ACSL4表达降低20.72%,ROS和铁离子含量分别降低59.31%和23.85%(P<0.05)。与ox-HDL+H_(2)S组相比,ox-HDL+H_(2)S+MK组GPX4蛋白表达降低21.28%,ACSL4蛋白表达增加1.16倍(P<0.05)。结论:H_(2)S通过激活Akt抑制ox-HDL诱导的HUVECs铁死亡,从而减轻其功能损伤。 展开更多
关键词 硫化氢 氧化高密度脂蛋白 人脐静脉内皮细胞 铁死亡 PI3K/AKT信号通路
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普罗布考抑制氧化低密度脂蛋白诱导的人肾近曲小管上皮细胞转分化的作用及机制研究 被引量:2
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作者 朱冰冰 迟杨峰 +3 位作者 王浩 刘育军 王云满 彭文 《临床肾脏病杂志》 2015年第10期620-625,共6页
目的研究普罗布考对氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,Ox-LDL)诱导的人肾近曲小管上皮细胞HK-2转分化的保护作用,并探讨凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-... 目的研究普罗布考对氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,Ox-LDL)诱导的人肾近曲小管上皮细胞HK-2转分化的保护作用,并探讨凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1,LOX-1)及氧化应激在其中的作用和相互关系。方法采用不同浓度Ox-LDL(0-100ug/ml)孵育HK-2细胞,并予普罗布考(20umol/L)和LOX-1抑制剂多聚肌苷酸(250ug/m1)干预。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法检测细胞增殖情况,用DCFH—DA法检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)活性,生化比色法检测一氧化氮(nitric oxide,N0)浓度,Western blot检测E-钙粘素(cadherin)、a平滑肌动蛋白(a-smooth muscle actin,a-SMA)、LOX-1、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide 2'-phosphate reduced tetrasodium salt,NADPH)氧化酶4(NOX4)表达。结果12.5~200ug/ml浓度范围内的Ox-LDL对HK-2细胞的增殖无明显影响,25-100ug/ml的Ox-LDL以浓度依赖方式促进HK-2细胞LOX-1、a-SMA蛋白表达上升,E-cadherin下降。而多聚肌苷酸、普罗布考能使LOX-1、a-SMA蛋白表达抑制,E-cadherin表达上调。50ug/ml的Ox-LDL能促进NOX4表达上调,ROS活性增加(451.5ug/ml kg839.8ug/ml,P〈0.05),NO含量略增加(46.0umol/L比46.2umol/L),但无统计学意义(P〉0.05)。而多聚肌苷酸、普罗布考能使NOX4表达下调,ROS活性下降,但对NO浓度无明显影响。结论Ox-LDL可诱导HK-2细胞转分化,其机制可能与其结合LOX-1促进氧化应激有关,而普罗布考可以通过降低LOX-1,抑制氧化应激损伤,从而延缓HK-2细胞转分化的进程。 展开更多
关键词 肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化 人肾近曲小管上皮细胞 氧化低密度脂蛋白 凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1 活性氧
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Ox-HDL通过调控caspase-1对po4小鼠动脉粥样硬化斑块炎症介质及细胞焦亡的影响
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作者 吴惠娟 于涛 +1 位作者 黄通平 寇宗科 《中国循证心血管医学杂志》 2022年第2期168-171,共4页
目的探讨氧化修饰高密度脂蛋白(ox-HDL)调控caspase-1对po4小鼠动脉粥样硬化斑块炎症介质及细胞焦亡的影响。方法高脂饲料(胆固醇1.25%、脂肪基础饲料83.25%、0.125%氯化胆盐)饲养至12周,建立po4动脉粥样硬化小鼠模型,检测血清高密度脂... 目的探讨氧化修饰高密度脂蛋白(ox-HDL)调控caspase-1对po4小鼠动脉粥样硬化斑块炎症介质及细胞焦亡的影响。方法高脂饲料(胆固醇1.25%、脂肪基础饲料83.25%、0.125%氯化胆盐)饲养至12周,建立po4动脉粥样硬化小鼠模型,检测血清高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、总胆固醇(TC)水平确定小鼠血脂水平,大体油红O染色确定纤维粥样斑块的形成,油红染色见斑块中央大片的红色脂滴池存在、且有纤维组织覆盖,说明动脉硬化小鼠模型构建成功。12周龄po4动脉粥样硬化小鼠随机编号分为对照组(n=8)和实验组(n=8),对照组小鼠经尾静脉注射生理盐水,剂量为14 ml/kg体重;实验组小鼠经尾静脉注射等体积0.9%氯化钠配置的ox-HDL,浓度100μg/ml。两组均2次/周注射,共注射6周。6周后,获取小鼠主动脉并依次采用大体油红O染色检测纤维粥样斑块的形成、TUNEL法检测细胞焦亡情况、免疫组化检测主动脉根部核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族热蛋白结构域3炎性小体(NLRP3)、caspase-1表达水平、免疫沉淀技术检测ox-HDL与caspase-1的共表达作用。结果实验组主动脉斑块面积、TUNEL阳性细胞及NLRP3、caspase-1表达水平均大于对照组(P<0.05)。Ox-HDL、HDL与caspase-1共转染小鼠细胞,结果ox-HDL组荧光活性低于HDL组(P<0.05),HDL组和caspase-1组荧光活性差异无统计学意义(P>0.05)。结论Ox-HDL可通过介导caspase-1促进斑块进展及诱导NLRP3炎性小体活化,加剧斑块炎性反应和细胞焦亡。 展开更多
关键词 氧化修饰高密度脂蛋白 CASPASE-1 动脉粥样硬化 斑块 炎症介质 小鼠
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高密度脂蛋白氧化修饰对大鼠巨噬细胞胆固醇流出的影响及其机制 被引量:4
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作者 成安 吴满平 +1 位作者 陈佩芳 梅美珍 《上海医科大学学报》 CSCD 1997年第5期335-338,共4页
研究高密度脂蛋白-3(HDL3)氧化修饰对其介导大鼠腹腔巨噬细胞胆固醇(ch)流出功能影响及细胞Ch流出机制。HDL3和其组分载脂蛋白A-I(ApoA-I)经CU2+氧化修饰后分别与巨噬细胞(Mφ)一起培养,测定细胞ch流出量。结果:牛血清白蛋... 研究高密度脂蛋白-3(HDL3)氧化修饰对其介导大鼠腹腔巨噬细胞胆固醇(ch)流出功能影响及细胞Ch流出机制。HDL3和其组分载脂蛋白A-I(ApoA-I)经CU2+氧化修饰后分别与巨噬细胞(Mφ)一起培养,测定细胞ch流出量。结果:牛血清白蛋白(对照组)介导3.98%细胞ch流出,HDL3和氧化HDL3(Ox—HDL3)组分别为41.78%和17.43%,ApoA—I和Ox-ApoA一I分别为40%和17.33%。结论:1.HDL氧化修饰后介导细胞ch流出功能显著降低。2.HDL的这一功能是由其ApoA—I组分介导的。 展开更多
关键词 巨噬细胞 胆固醇流出 高密度 脂蛋白 氧化修饰
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槲皮素对氧化高密度脂蛋白致内皮细胞损伤的保护作用 被引量:1
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作者 肖秀凤 杨瑞莉 +5 位作者 林淑贤 刘译聪 苏可 周璇 喻红 魏蕾 《微循环学杂志》 2008年第2期16-18,共3页
目的:研究槲皮素(Que)对含氧化高密度脂蛋白(oxHDL)血浆致人内皮细胞株(ECV304)损伤的保护作用。方法:常规培养ECV304细胞被分成5组:对照组(ECV304+HDL)、oxHDL组(ECV304+ox-HDL)、Que大剂量处理组(ECV304+oxHDL+80μmol/LQue)、Que中... 目的:研究槲皮素(Que)对含氧化高密度脂蛋白(oxHDL)血浆致人内皮细胞株(ECV304)损伤的保护作用。方法:常规培养ECV304细胞被分成5组:对照组(ECV304+HDL)、oxHDL组(ECV304+ox-HDL)、Que大剂量处理组(ECV304+oxHDL+80μmol/LQue)、Que中剂量处理组(ECV304+oxHDL+60μmol/LQue)及Que小剂量处理组(ECV304+oxHDL+40μmol/LQue),培养24h后平行检测各组ECV304形态、细胞内脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量、细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果:中、大剂量组ECV304形态较oxHDL组有明显改善,更接近于对照组;与oxHDL组相比,中、大剂量Que处理组ECV304培养液中LDH活性及MDA含量明显降低(P<0.01),而小剂量Que处理组结果无显著差异(P>0.05)。结论:Que对oxHDL致ECV304损伤有保护作用。 展开更多
关键词 内皮细胞损伤 氧化高密度脂蛋白 保护作用 槲皮素 心血管疾病 动脉粥样硬化 内皮细胞功能 常见多发病
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