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羧甲基壳聚糖对氧化应激诱导雪旺细胞凋亡及BDNF与GDNF表达的影响 被引量:6
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作者 贺斌 陶海鹰 刘世清 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1530-1535,共6页
目的研究羧甲基壳聚糖(carboxymethylated chitosan,CMCS)对氧化应激诱导大鼠雪旺细胞(Schwann cells,SCs)凋亡的保护作用及对SCs内脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(glia... 目的研究羧甲基壳聚糖(carboxymethylated chitosan,CMCS)对氧化应激诱导大鼠雪旺细胞(Schwann cells,SCs)凋亡的保护作用及对SCs内脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF)表达的影响。方法取24只3-5日龄SD大鼠(体重25-30 g,雌雄不限)双侧坐骨神经,体外分离培养SCs,S-100免疫荧光染色鉴定。于SCs培养基中加入0.01、0.10、1.00 mmol/L H2O2溶液进行诱导,作用3、6、12、24 h后采用CCK-8检测细胞增殖以及流式细胞术检测细胞凋亡,筛选H2O2诱导氧化应激SCs凋亡模型的最佳作用浓度及时间。取第2代SCs,根据不同处理方法分成5组:空白对照组(PBS处理)、1.00 mmol/L H2O2诱导组、1.00 mmol/L H2O2+50μg/m L CMCS处理组、1.00 mmol/L H2O2+100μg/m L CMCS处理组、1.00 mmol/L H2O2+200μg/m L CMCS处理组。培养24 h后,采用CCK-8检测SCs增殖,流式细胞术检测SCs早期凋亡,实时定量PCR及Western blot检测SCs内BDNF、GDNF m RNA及蛋白表达。结果分离培养的细胞经S-100免疫荧光染色鉴定阳性率达95%以上。CCK-8及流式细胞术检测示,H2O2可明显抑制SCs增殖并诱发早期凋亡,且呈浓度依赖性,1.00 mmol/L H2O2溶液作用24 h效果最明显,为模型制备最佳作用浓度及时间。当加入50-200μg/m L CMCS后,SCs增殖活性增加、细胞凋亡率降低,且随CMCS浓度增加上述效应增强。实时定量PCR及Western blot检测示,与空白对照组比较,1.00 mmol/L H2O2诱导组BDNF、GDNF m RNA及蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P〈0.05);加入50、100、200μg/m L CMCS作用后,随CMCS浓度增加,BDNF、GDNF m RNA及蛋白表达逐渐增加,与空白对照组及1.00 mmol/L H2O2诱导组比较以及各CMCS处理组间比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论 CMCS对氧化应激诱导大鼠SCs凋亡具有保护作用,并促进凋亡SCs分泌BDNF与GDNF。 展开更多
关键词 羧甲基壳聚糖 雪旺细胞 氧化损伤 细胞凋亡 脑源性神经营养因子 胶质细胞源性神经营养因子 大鼠
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重度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者呼出气一氧化氮水平及其与涎液化糖链抗原的相关性 被引量:1
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作者 杨家盛 孙瑞琳 +3 位作者 王燕 林国辉 刘庆峰 江小运 《中国当代医药》 CAS 2021年第24期52-54,共3页
目的探讨重度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者呼出气一氧化氮(FeNO)及其与涎液化糖链抗原(KL-6)的相关性。方法选取2017年1月—2018年12月广东省第二人民医院收治的70例重度OSAHS患者作为试验组,选择同期70例健康者作为对照... 目的探讨重度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者呼出气一氧化氮(FeNO)及其与涎液化糖链抗原(KL-6)的相关性。方法选取2017年1月—2018年12月广东省第二人民医院收治的70例重度OSAHS患者作为试验组,选择同期70例健康者作为对照组。比较两组体重指数(BMI)、呼吸暂停低通气指数(AHI)、最低血氧饱和度(LSaO_(2))、KL-6和FeNO水平,分析FeNO与BMI、AHI、LSaO_(2)、KL-6的相关性。结果试验组的BMI和AHI水平高于对照组,LSaO_(2)低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);试验组的KL-6和FeNO水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。FeNO水平与BMI、AHI、KL-6呈正相关(r=0.43,0.57,0.37,P<0.05);FeNO水平与LSaO_(2)呈负相关(r=-0.49,P<0.05)。结论重度OSAHS患者血清中KL-6和FeNO水平升高,并且FeNO水平与KL-6、AHI呈正相关,与LSaO_(2)呈负相关,提示FeNO与疾病严重程度相关,可作为评估病情的指标之一。 展开更多
关键词 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征 涎液化糖链抗原 呼出气一氧化氮检测 气道炎症 氧化应激反应肺损伤
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黄连解毒汤抗氧化作用的血清药理学研究 被引量:37
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作者 宋珏 路通 +1 位作者 谢林 刘晓东 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2010年第4期118-122,共5页
目的:研究黄连解毒汤及其单味药对细胞氧化损伤保护作用的药效动力学,并对其血清药理学方法进行探讨。方法:采用血清药理学方法,研究黄连、黄芩、黄连解毒汤含药血清对H2O2所致PC12细胞氧化应激损伤保护作用的时间-效应关系;并研究黄连... 目的:研究黄连解毒汤及其单味药对细胞氧化损伤保护作用的药效动力学,并对其血清药理学方法进行探讨。方法:采用血清药理学方法,研究黄连、黄芩、黄连解毒汤含药血清对H2O2所致PC12细胞氧化应激损伤保护作用的时间-效应关系;并研究黄连、黄芩、黄连解毒汤提取物和小檗碱、黄芩苷纯品对氧化损伤保护作用的剂量-效应关系。结果:各药的含药血清对细胞氧化损伤都有明显的保护作用,其中以黄连解毒汤作用最强,黄芩和黄芩苷次之,黄连最弱;在试验浓度范围内,黄连解毒汤和黄芩提取物对模型细胞有剂量依赖性保护作用,而黄连没有保护作用;在0.15~10μg.mL-1浓度范围内,黄芩苷对细胞模型有保护作用,且呈剂量依赖性。0.15~10 ng.mL-1浓度范围内,小檗碱没有明显的保护作用。结论:黄连解毒汤体内抗氧化作用强于各单味药;黄芩苷可能是黄芩及其含药血清中的抗氧化成份之一,而小檗碱与含药血清的抗氧化作用无关;黄连解毒汤及其单味药含药血清对细胞氧化应激模型的保护作用呈时间和剂量依赖性。 展开更多
关键词 黄连解毒汤 血清药理学 PC12细胞 过氧化氢 氧化应激损伤
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染料木素及大豆苷元调控线粒体介导的细胞凋亡减轻京尼平诱导的肝细胞损伤 被引量:9
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作者 任艳青 田宇柔 +3 位作者 王心茹 李柳潼 牛丽颖 王鑫国 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期130-135,共6页
目的:通过探究淡豆豉主要药效成分染料木素、大豆苷元对栀子致毒成分京尼平所致HepG2细胞损伤的保护作用,进一步揭示栀子与淡豆豉配伍减毒的机制。方法:采用250μmol/L京尼平建立HepG2细胞损伤模型,将不同浓度染料木素、大豆苷元(0.5~10... 目的:通过探究淡豆豉主要药效成分染料木素、大豆苷元对栀子致毒成分京尼平所致HepG2细胞损伤的保护作用,进一步揭示栀子与淡豆豉配伍减毒的机制。方法:采用250μmol/L京尼平建立HepG2细胞损伤模型,将不同浓度染料木素、大豆苷元(0.5~10)μmol/L与京尼平共孵育于HepG2细胞,测定细胞存活率及氧化应激水平(胞内锰-超氧化物歧化酶Mn-SOD、过氧化氢酶CAT活力,谷胱甘肽GSH含量及活性氧ROS水平);高内涵技术(high content screening,HCS)检测线粒体功能(线粒体膜电位mitochondrial membrane potential,MMP和细胞色素C水平)及细胞凋亡情况;Western Blot法检测线粒体凋亡通路蛋白Bcl-2、Bax、Bcl-xL、Bik、Caspase-3表达水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组细胞存活率显著下降(P<0.01);Mn-SOD、CAT活力及GSH水平显著降低(P<0.01);ROS释放量显著增加(P<0.01);细胞色素C水平及细胞膜通透性显著增加、MMP显著降低、细胞核固缩、浓染及细胞数量显著下降(P<0.01);Bax、Bik、Caspase 3蛋白表达水平显著上调,Bcl-2、Bcl-xL蛋白表达显著下调(P<0.01)。与模型对照组相比,1、2.5、5、10μmol/L染料木素、大豆苷元可明显升高细胞存活率(P<0.05或P<0.01);2.5、5、10μmol/L染料木素、大豆苷元可明显升高细胞Mn-SOD活力及GSH含量,2.5、5、10μmol/L染料木素及5、10μmol/L大豆苷元可显著升高细胞CAT活力(P<0.05或P<0.01)。5μmol/L染料木素、5μmol/L大豆苷元、2.5μmol/L染料木素+2.5μmol/L大豆苷元可使ROS释放量显著减少,细胞色素C含量和细胞膜通透性下降,MMP上升,显著改善核固缩及核内染色质凝集等凋亡情况(P<0.05或P<0.01);且Bcl-2、Bcl-xL蛋白表达显著上调,Bax、Bik、Caspase-3蛋白表达显著下调(P<0.01)。结论:染料木素和大豆苷元可通过保护线粒体,减少线粒体介导的细胞凋亡显著改善京尼平诱发的肝细胞损伤,栀子与淡豆豉配伍减毒的机制与此相关。 展开更多
关键词 染料木素 大豆苷元 京尼平 栀子 淡豆豉 配伍减毒 氧化应激性肝损伤 线粒体凋亡通路
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