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淫羊藿苷对成骨细胞成骨分化的影响及Wnt/-catenin信号系统的关系研究 被引量：30
1
作者 涂艳 熊莉娜 +3 位作者 柳湘洁 雷超 李凝旭 张瑞芸 《中国中医急症》 2017年第3期448-450,466,共4页
目的探讨淫羊藿苷对成骨细胞分化及其细胞内Wnt/-catenin信号通路的影响。方法取SD大鼠,采用全骨髓贴壁法分离并体外培养骨髓间充质干细胞(rBMSC),并用贴壁筛选法进行体外培养rBMSC,给予淫羊藿苷3、6、9 d后,观察对照组与淫羊藿苷处理... 目的探讨淫羊藿苷对成骨细胞分化及其细胞内Wnt/-catenin信号通路的影响。方法取SD大鼠,采用全骨髓贴壁法分离并体外培养骨髓间充质干细胞(rBMSC),并用贴壁筛选法进行体外培养rBMSC,给予淫羊藿苷3、6、9 d后,观察对照组与淫羊藿苷处理组的碱性磷酸酶(ALP)活性,对碱性磷酸酶阳性克隆(CFUALP-F)以及矿化结节形成的影响。采用Western blot方法检测每组-catenin和Runx2组蛋白表达水,采用RT-PCR方法检测淫羊藿苷对Wnt10b、GSK-3、-catenin及LEF1 mRNA水平的影响。结果淫羊藿苷可以提高ALP的活性,碱性磷酸酶克隆数和矿化结节的形成。Western blot结果显示,淫羊藿苷可以提高-catenin和Runx2的蛋白表达水平;RT-PCR结果显示,淫羊藿苷可以提高Wnt10b、GSK-3、-catenin及LEF1表达水平。结论初步证明淫羊藿苷可以激活Wnt/-catenin信号通路,参与并调控BMSC的成骨分化。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 成骨细胞 成骨分化 wnt/-catenin信号通路
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大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养及成骨分化 被引量：3
2
作者 罗宗键 陈玉丙 +2 位作者 刘长剑 贾全章 刘建国 《中国实验诊断学》 2008年第3期306-308,共3页
目的建立大鼠骨髓间质干细胞(rat mesenchymal stemcells,rMSCs)体外分离、纯化及扩增的方法及诱导rM-SCs向成骨分化,并进一步研究,提供理想的种子细胞。方法采用贴壁筛选法分离rMSCs,并通过不断传代进行纯化和扩增培养,检测rMSCs生长周... 目的建立大鼠骨髓间质干细胞(rat mesenchymal stemcells,rMSCs)体外分离、纯化及扩增的方法及诱导rM-SCs向成骨分化,并进一步研究,提供理想的种子细胞。方法采用贴壁筛选法分离rMSCs,并通过不断传代进行纯化和扩增培养,检测rMSCs生长周期,绘制细胞生长曲线。检测碱性磷酸酶活性,钙结节的形成。结果rMSCs在体外分离培养扩增,rMSCs形态呈长梭形,细胞周期显示第3代MSCs约有81.48%的细胞处于G0/G1期,细胞生长曲线呈S形。经地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C诱导的rMSCs,碱性磷酸酶染色呈阳性,并有钙结节形成。结论所建立的分离和培养方法获取的是rMSCs,具有rMSCs生物学特性,同时具有向成骨细胞分化的能力,是组织工程研究中良好的细胞来源,也为进一步研究提供了理想种子细胞。 展开更多
关键词 间充质干细胞 分离培养 成骨诱导 大鼠
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化脓链球菌脂磷壁酸对人牙周膜干细胞分化能力的影响 被引量：4
3
作者 靳路远 朱文晶 夏登胜 《北京口腔医学》 CAS 2018年第1期1-4,共4页
目的研究脂磷壁酸(LTA)对牙周膜干细胞(PDLSCs)分化能力的影响,从而探讨G+细菌毒素LTA对人牙周膜干细胞再生牙周组织的影响。方法用0.1、1和10μg/ml的LTA作用于PDLSCs,采用MTT方法及流式细胞术检测细胞的增殖及凋亡情况,使用碱性磷酸... 目的研究脂磷壁酸(LTA)对牙周膜干细胞(PDLSCs)分化能力的影响,从而探讨G+细菌毒素LTA对人牙周膜干细胞再生牙周组织的影响。方法用0.1、1和10μg/ml的LTA作用于PDLSCs,采用MTT方法及流式细胞术检测细胞的增殖及凋亡情况,使用碱性磷酸酶染色和茜素红染色对细胞的成骨分化能力进行比较;应用油红O染色鉴定成脂分化能力,实时定量PCR检测成骨成脂相关基因的变化,研究LTA在PDLSCs分化中的作用。结果 1μg/ml及10μg/ml LTA显著降低PDLSCs增殖率,细胞凋亡增加。ALP染色及活性结果表明,早期成骨能力各组之间没有显著差异;茜素红染色结果及钙离子浓度定量测定显示,随LTA浓度升高,PDLSCs晚期成骨能力降低,并具有LTA浓度依赖性。成骨相关基因Runx2表达表现相同变化趋势。油红O染色结果表明,随着LTA浓度的增加,PDLSCs的成脂分化能力升高,成脂相关基因PPARγ表达升高,具有LTA浓度依赖性。结论 LTA降低PDLSCs成骨分化能力,同时促进细胞成脂分化能力,表明LTA抑制PDLSCs介导的牙周组织再生。 展开更多
关键词 脂磷壁酸 人牙周膜干细胞 成骨分化 成脂分化
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HDAC2在高糖影响骨髓间充质干细胞成骨分化中的作用 被引量：1
4
作者 韩倩倩 刘钊 +2 位作者 王庆 王亚敏 杨熙 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第10期1568-1572,共5页
目的:探讨糖尿病与骨代谢的关系以及潜在的表观遗传学机制。方法:运用即时聚合酶链锁反应(RT-PCR)检测糖尿病小鼠与野生型小鼠骨髓中成骨相关因子及组蛋白去乙酰化酶(HDACs)的m RNA表达情况,体外培养小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),检测... 目的:探讨糖尿病与骨代谢的关系以及潜在的表观遗传学机制。方法:运用即时聚合酶链锁反应(RT-PCR)检测糖尿病小鼠与野生型小鼠骨髓中成骨相关因子及组蛋白去乙酰化酶(HDACs)的m RNA表达情况,体外培养小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),检测高糖培养7,15 d后其成骨相关因子及HDACs的m RNA及蛋白表达变化,染色质免疫共沉淀(ChIP)分析HDAC2与Runx2启动子区域结合情况。结果:糖尿病小鼠骨髓中成骨相关因子mRNA较对照组均出现下调,OCN、Col1降低尤为显著(P<0.05),HDAC2m RNA表达较对照组升高明显(P<0.05)。RT-PCR与Western Blot检测结果可见BMSCs ALP、OCN、Runx2、OSX的mRNA及蛋白表达在7 d及15 d均随着葡萄糖浓度的升高而降低,而HDAC2的表达随着葡萄糖浓度的升高而增加。染色质免疫共沉淀结果示25mM葡萄糖处理组BMSCs中HDAC2与Runx2基因启动子上、下游结合比例明显高于对照组(P<0.001;P<0.05)。结论:糖尿病可通过HDAC2抑制Runx2转录活性,从而抑制骨髓间充质干细胞成骨分化影响骨代谢。 展开更多
关键词 组蛋白去乙酰化酶 糖尿病 成骨分化
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骨髓间充质干细胞成骨分化的研究进展 被引量：1
5
作者 卞泗善 肖毅 徐展望 《内蒙古中医药》 2013年第31期125-126,共2页
骨髓间充质干细胞的成骨分化是近10年来骨组织工程种子细胞的研究热点,本文查阅相关文献,对近年骨髓间充质干细胞成骨分化进行综述。
关键词 骨髓间充质干细胞 成骨分化 综述
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不同年龄段大鼠脂肪间充质干细胞增殖及成骨能力的研究 被引量：1
6
作者 枟涛 秦书俭 +3 位作者 王超 田志逢 王茹 单伟 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期216-220,共5页
通过研究年龄对大鼠脂肪间充质干细胞增殖、成骨分化的影响,从而为临床寻找理想的种子细胞来源。用密度梯度离心法分离不同年龄段脂肪间充质干细胞进行培养,并保留贴壁细胞传代,观察细胞生长情况,检测其增殖活性,诱导后茜素红染色,钙离... 通过研究年龄对大鼠脂肪间充质干细胞增殖、成骨分化的影响,从而为临床寻找理想的种子细胞来源。用密度梯度离心法分离不同年龄段脂肪间充质干细胞进行培养,并保留贴壁细胞传代,观察细胞生长情况,检测其增殖活性,诱导后茜素红染色,钙离子浓度测定。结果显示,传代细胞的增殖速度比原代细胞快,但随着年龄的增长脂肪间充质干细胞的增殖能力下降。诱导条件下,各年龄组均出现矿化结节,但钙离子浓度随年龄增加而降低。本实验提示,脂肪间充质干细胞增殖和成骨分化能力随着年龄的增加而降低,但各年龄段脂肪间充质干细胞经过体外增殖、诱导后均可满足临床应用中不同患者的要求。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 年龄 体外培养 增殖 成骨分化
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BMP9通过ERK5信号通路调控根尖牙乳头干细胞成骨／成牙本质分化 被引量：6
7
作者 孔令姣 王金华 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期527-531,共5页
目的研究骨形成蛋白9(BMP9)是否通过激活ERK5信号通路调控永生化根尖牙乳头干细胞(i SCAP)成骨/成牙本质向分化。方法首先使用ERK5抑制剂BIX02189作用于BMP9的腺病毒转染i SCAP,采用Western blotting检测ERK5蛋白的磷酸化水平变化;然后... 目的研究骨形成蛋白9(BMP9)是否通过激活ERK5信号通路调控永生化根尖牙乳头干细胞(i SCAP)成骨/成牙本质向分化。方法首先使用ERK5抑制剂BIX02189作用于BMP9的腺病毒转染i SCAP,采用Western blotting检测ERK5蛋白的磷酸化水平变化;然后通过碱性磷酸酶(ALP)染色、RT-PCR及茜素红染色检测成骨/成牙本质相关基因Runx2、OCN、OPN和DMP1的表达,研究BMP9对i SCAP成骨/成牙本质分化的影响。结果 BMP9可以上调ERK5磷酸化水平,BIX02189干预后ERK5磷酸化下降;ALP染色,RT-PCR检测表达及茜素红染色均发现BMP9可以促进Runx2、OCN、OPN、DMP1阳性表达,而BIX02189则抑制成骨/成牙本质分化。结论 BMP9可以通过激活ERK5信号通路促进根尖牙乳头干细胞成骨/成牙本质分化。 展开更多
关键词 永生化根尖牙乳头干细胞 骨形成蛋白9 ERK5 成骨/成牙本质分化
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骨髓基质细胞的成骨分化 被引量：2
8
作者 顾祖超 李起鸿 +3 位作者 赵玉峰 许建中 杨柳 周红星 《中国临床康复》 CSCD 2002年第24期3656-3657,T001,共3页
目的观察兔骨髓基质细胞的生长特点及诱导条件下的成骨能力。方法使用密度梯度离心分离兔骨髓基质细胞进行培养,保留贴壁细胞传代,观察在培养液中添加地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠条件下骨髓基质细胞生长及成骨分化情况。结果骨髓... 目的观察兔骨髓基质细胞的生长特点及诱导条件下的成骨能力。方法使用密度梯度离心分离兔骨髓基质细胞进行培养,保留贴壁细胞传代,观察在培养液中添加地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠条件下骨髓基质细胞生长及成骨分化情况。结果骨髓基质细胞呈成纤维细胞样表现,增殖能力强。诱导条件下第2代细胞的碱性磷酸酶活性明显增高,10～12d达到最高峰,并且出现矿化结节。结论使用本实验方法,获得的骨髓基质细胞可作为骨组织工程的种子细胞。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 地塞米松 成骨诱导 成骨分化
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