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微小核糖核酸-148a调控胰腺癌细胞中ErbB3的表达
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作者 冯慧 姚玮艳 +2 位作者 陈熹 张辰宇 王亚雷 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期399-402,共4页
目的 在胰腺癌细胞中寻找并验证微小核糖核酸（miRNA）-148a的下游调控基因.方法 运用生物信息学方法预测miRNA-148a调控的目的基因,构建含目的基因的3’端非翻译区（3＇-UTR）的荧光素酶报告质粒,用脂质体转染miRNA-148a类似物和抑制... 目的 在胰腺癌细胞中寻找并验证微小核糖核酸（miRNA）-148a的下游调控基因.方法 运用生物信息学方法预测miRNA-148a调控的目的基因,构建含目的基因的3’端非翻译区（3＇-UTR）的荧光素酶报告质粒,用脂质体转染miRNA-148a类似物和抑制剂进入胰腺癌细胞BXPC-3,检测荧光素酶活性,确定miRNA-148a是否直接与靶基因3’-UTR结合.同时改变胰腺癌细胞BXPC-3中miRNA-148a表达水平,用Western免疫印迹法在蛋白水平检测靶基因ErbB3表达的变化.统计学处理采用单因素方差分析.结果 生物信息学发现ErbB3和miRNA-148a上有一个保守的结合靶位点.miRNA-148a直接与ErbB3的3’-UTR结合,使荧光素酶活性下降到阴性对照的[-（25.00±4.70）％,F=4.66,P＜O.01]；过表达miRNA-148a后,BXPC-3细胞中ErbB3蛋白水平灰度值下降到阴性对照的[（26.16±4.69）％,F=6.563,P＜O.05].结论 miRNA-148a在胰腺癌细胞株BXPC-3中直接靶向并调控ErbB3的表达. 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 微RNAS 癌基因蛋白质v-erbb 聚合酶链反应 免疫印迹法
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