目的探讨BMP和Notch信号通路介导红景天苷诱导骨髓间充质干细胞（MSCs）向神经细胞定向分化的分子机制。方法实验分为对照组、红景天苷诱导组和阻断组。利用细胞免疫荧光化学方法、Real-Time PCR方法和Western blotting方法分别研究了...目的探讨BMP和Notch信号通路介导红景天苷诱导骨髓间充质干细胞（MSCs）向神经细胞定向分化的分子机制。方法实验分为对照组、红景天苷诱导组和阻断组。利用细胞免疫荧光化学方法、Real-Time PCR方法和Western blotting方法分别研究了红景天苷对MSCs的增殖、形态以及对BMP和Notch信号通路的影响。结果红景天苷影响MSCs的增殖且促进其形成神经元样细胞;细胞免疫荧光结果显示,红景天苷可降低Notch1和Jadge1阳性表达率（P〈0.05）;红景天苷诱导细胞12-72 h时,Notch1和Hes1 m RNA表达丰度明显下调（P〈0.05）;特异性阻断剂DAPT阻断Notch信号通路后,神经元细胞标志分子NSE、MAP-2和β-tubulin III m RNA和NSE、β-tubulin III蛋白的表达水平与阻断前比较显著上调（P〈0.05）。12 h时Smad5和Smad8 m RNA的表达水平显著上调（P〈0.01）,且12和24 h时Smad1/5/8蛋白表达上调（P〈0.05）;Noggin阻断BMP信号通路后,NSE、MAP-2和β-tubulin III m RNA的表达丰度与诱导组比较明显下调（P〈0.05）;DAPT和Noggin同时阻断Notch和BMP信号通路后,与单独阻断BMP信号通路后比较,MAP-2和β-tubulin III m RNA的表达上调,NSE和β-tubulin III蛋白的表达水平上调（P〈0.05）。结论红景天苷通过抑制Notch信号通路、激活BMP信号通路诱导MSCs向神经元细胞定向分化。展开更多
文摘目的探讨BMP和Notch信号通路介导红景天苷诱导骨髓间充质干细胞（MSCs）向神经细胞定向分化的分子机制。方法实验分为对照组、红景天苷诱导组和阻断组。利用细胞免疫荧光化学方法、Real-Time PCR方法和Western blotting方法分别研究了红景天苷对MSCs的增殖、形态以及对BMP和Notch信号通路的影响。结果红景天苷影响MSCs的增殖且促进其形成神经元样细胞;细胞免疫荧光结果显示,红景天苷可降低Notch1和Jadge1阳性表达率（P〈0.05）;红景天苷诱导细胞12-72 h时,Notch1和Hes1 m RNA表达丰度明显下调（P〈0.05）;特异性阻断剂DAPT阻断Notch信号通路后,神经元细胞标志分子NSE、MAP-2和β-tubulin III m RNA和NSE、β-tubulin III蛋白的表达水平与阻断前比较显著上调（P〈0.05）。12 h时Smad5和Smad8 m RNA的表达水平显著上调（P〈0.01）,且12和24 h时Smad1/5/8蛋白表达上调（P〈0.05）;Noggin阻断BMP信号通路后,NSE、MAP-2和β-tubulin III m RNA的表达丰度与诱导组比较明显下调（P〈0.05）;DAPT和Noggin同时阻断Notch和BMP信号通路后,与单独阻断BMP信号通路后比较,MAP-2和β-tubulin III m RNA的表达上调,NSE和β-tubulin III蛋白的表达水平上调（P〈0.05）。结论红景天苷通过抑制Notch信号通路、激活BMP信号通路诱导MSCs向神经元细胞定向分化。
