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猪流行性腹泻病毒部分N基因的原核表达及表达产物反应原性分析 被引量：3
1
作者 张博 李守军 +1 位作者 吕茂杰 杨保收 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第3期637-643,共7页
为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)部分N蛋白的原核表达产物是否具有抗原性,并为建立PEDV的间接ELISA方法奠定基础,本试验应用RT-PCR技术扩增N基因的部分核酸序列,经克隆后将目的片段连接到原核表达载体pET-30a(+)中。重组菌于37℃、0.5 mmo... 为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)部分N蛋白的原核表达产物是否具有抗原性,并为建立PEDV的间接ELISA方法奠定基础,本试验应用RT-PCR技术扩增N基因的部分核酸序列,经克隆后将目的片段连接到原核表达载体pET-30a(+)中。重组菌于37℃、0.5 mmol/L IPTG诱导4h后进行SDS-PAGE分析,并进行Western blotting鉴定。结果显示,构建的原核表达重组质粒测序正确,且该蛋白与抗血清(PEDV高免血清)具有良好的反应活性。本试验成功构建了PEDV部分N基因原核表达载体,为后续PEDV感染的血清学诊断方法的建立提供依据。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 N基因片段 原核表达 反应原性
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