HBIG联合HBVac阻断HBV宫内感染的研究 被引量：1

1

作者 李银姬 岳亚飞 张树林 《中国优生与遗传杂志》 2005年第6期67-69,共3页

目的探讨孕期多次联合注射乙型肝炎免疫球蛋白(HBIG)和乙型肝炎疫苗(HBVac)阻断乙型肝炎病毒HBV)宫内感染效果。方法对30例HBsAg阳性孕妇从孕20周开始联合注射HBIG和HBVac,另23例未行注射的HBsAg阳性孕妇作对照。采用敏感特异的套式聚... 目的探讨孕期多次联合注射乙型肝炎免疫球蛋白(HBIG)和乙型肝炎疫苗(HBVac)阻断乙型肝炎病毒HBV)宫内感染效果。方法对30例HBsAg阳性孕妇从孕20周开始联合注射HBIG和HBVac,另23例未行注射的HBsAg阳性孕妇作对照。采用敏感特异的套式聚合酶链反应检测孕妇及新生儿血清及外周血单个核细胞(PBMC)中HBVDNA。结果阻断组和对照组新生儿血清HBVDNA检出率分别为10%(3/30)和34.8%(8/23),二组差异显著,而PBMC中HBVDNA检出率二组无显著性差异;阻断组孕妇血清HBVDNA水平下降率38.5%(10/26),而对照组10.5%(2/19),差异显著,PBMC中HBVDNA水平二组无显著性差异。结论孕期多次联合注射HBIG和HBVac可有效降低孕妇体内HBVDNA水平,从而降低HBV宫内感染率,但对孕妇PBMC中HBV影响不大,并不降低新生儿PBMC中HBVDNA的检出率。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 宫内感染 乙型肝炎免疫球蛋白 乙型肝炎疫苗 聚合酶链反应 外周血单个核细胞

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人巨细胞病毒感染套式PCR基因诊断方法的研究 被引量：2

2

作者 步恒富 马立人 +4 位作者 刘志红 刘耀清 周中慧 王全立 黎伟明 《中国公共卫生学报》 1996年第4期247-249,共3页

依据人巨细胞病毒主要早期基因核苷酸序列，建立了其套式ＰＣＲ诊断方法．并组装了较为实用的ＰＣＲ诊断试剂盒．该方法特异性强，敏感性较普通ＰＣＲ技术高２—３个数量级，标本处理方法简单，并可在６ｈ内判定结果，是一种在临床上值... 依据人巨细胞病毒主要早期基因核苷酸序列，建立了其套式ＰＣＲ诊断方法．并组装了较为实用的ＰＣＲ诊断试剂盒．该方法特异性强，敏感性较普通ＰＣＲ技术高２—３个数量级，标本处理方法简单，并可在６ｈ内判定结果，是一种在临床上值得推广应用的技术． 展开更多

关键词 聚合酶链反应 套式pcr 人巨细胞病毒 基因诊断

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进口锦鲤暴发病病原的nested-PCR鉴定 被引量：59

3

作者 刘荭 史秀杰 +1 位作者 高隆英 江育林 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期414-418,共5页

为了查明锦鲤暴发性疾病的病因 ,将患病锦鲤的脑、肝、脾和肾等组织悬液接种到CO、CK和EPC等鱼类细胞系中培养 ,均未发现细胞病变 ;从病灶中取样进行病原菌的分离和培养 ,证明锦鲤有副溶血弧菌和嗜水气单胞菌的感染。制备锦鲤疱疹病毒 (... 为了查明锦鲤暴发性疾病的病因 ,将患病锦鲤的脑、肝、脾和肾等组织悬液接种到CO、CK和EPC等鱼类细胞系中培养 ,均未发现细胞病变 ;从病灶中取样进行病原菌的分离和培养 ,证明锦鲤有副溶血弧菌和嗜水气单胞菌的感染。制备锦鲤疱疹病毒 (KHV)的 2对引物KHV9/ 5F和KHV9/ 5R ,KHV1和KHV2 ,用嵌套式聚合酶链式反应 (nested -PCR)在脑和脾脏组织的抽提物中扩增出长度为 4 12bp的特异性的DNA片段。将该片段的nested -PCR扩增产物纯化后 ,克隆、测序。用NCBI -Blast软件将测序结果在Genebank中进行搜寻、比较 ,结果发现与注册号为AF4 1180 3的KHV基因序列的一部分片段有 99%的同源性。因此初步判断这次锦鲤暴发性疾病是由KHV引起的 。 展开更多

关键词 锦鲤 暴发病 病原 nested-pcr鉴定 嵌套式聚合酶链式反应

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悦目金蛛丝蛋白TuSp1重复模块特征 被引量：2

4

作者 王金雷 陈格飞 +2 位作者 李佳 林瑛 孟清 《东华大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期196-201,200-201,共6页

针对蜘蛛管状腺丝蛋白(TuSp)结构进行克隆和分析,基于悦目金蛛(Argiope amoena,A.amoena)管状腺总RNA,利用简并引物和巢式聚合酶链反应(PCR)技术克隆AaTuSp1编码基因序列1273bp,其包含3个重复单元,每个重复单元编码176个氨基酸,重复单... 针对蜘蛛管状腺丝蛋白(TuSp)结构进行克隆和分析,基于悦目金蛛(Argiope amoena,A.amoena)管状腺总RNA,利用简并引物和巢式聚合酶链反应(PCR)技术克隆AaTuSp1编码基因序列1273bp,其包含3个重复单元,每个重复单元编码176个氨基酸,重复单元之间的序列同源性高达97%以上,且富含丙氨酸(Ala)和丝氨酸(Ser),其次是甘氨酸(Gly),组成了一系列PolyT,PolyA,PolyS,SQ和GX模体结构,推测与其独特的力学性能相关.系统进化分析表明,不同于典型蛛丝蛋白MaSp,Flag等,AaTuSp1及近系包卵丝蛋白形成一个独立的进化分支.研究结果为基于TuSp1合成仿生蛛丝提供了新的结构基因蓝图. 展开更多

关键词 悦目金蛛 管状腺丝蛋白 重复单元 巢式聚合酶链反应(pcr) 进化

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疑似梅毒患者血液47KDa和15KDa膜免疫原基因的测定 被引量：2

5

作者 邓秀娥 涂晨 李文竹 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2012年第10期883-885,889,共4页

目的研究巢式聚合酶链反应(PCR)在排除梅毒血清学试验假阳性中的作用。方法用巢式PCR和常规PCR扩增90例疑似梅毒患者全血中梅毒螺旋体(TP)的47KDa和15KDa的膜免疫原基因,并与血清学方法(RPR,TPPA)的检验结果作比较。结果巢式PCR检测TP... 目的研究巢式聚合酶链反应(PCR)在排除梅毒血清学试验假阳性中的作用。方法用巢式PCR和常规PCR扩增90例疑似梅毒患者全血中梅毒螺旋体(TP)的47KDa和15KDa的膜免疫原基因,并与血清学方法(RPR,TPPA)的检验结果作比较。结果巢式PCR检测TP的敏感性和特异性分别为93.33%和96.67%,两者符合率为96.67%;两种PCR方法检测结果差异有统计学意义(P<0.01),巢式PCR敏感性高于常规PCR。结论巢式PCR检测全血中TP较常规PCR灵敏,通过检测47KDa和15KDa的膜免疫原基因,有助于排除梅毒血清学试验假阳性,提高了梅毒诊断的准确率。 展开更多

关键词 梅毒螺旋体 巢式聚合酶链反应(pcr) 膜免疫原基因

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巢式PCR检测舌苔幽门螺杆菌临床研究 被引量：2

6

作者 谢静芳 缪伟峰 金小晶 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2012年第11期59-61,共3页

目的:幽门螺杆菌(H.pylori)是消化道疾病的常见致病菌,实验检测舌苔中是否存在H.pylori比较困难。利用巢式PCR检测舌苔幽门螺杆菌分布,并分析舌苔H.pylori与胃H.pylori的相关性。方法:用13C或14C尿素呼气试验(UBT)检测胃H.pylori;随机刮... 目的:幽门螺杆菌(H.pylori)是消化道疾病的常见致病菌,实验检测舌苔中是否存在H.pylori比较困难。利用巢式PCR检测舌苔幽门螺杆菌分布,并分析舌苔H.pylori与胃H.pylori的相关性。方法:用13C或14C尿素呼气试验(UBT)检测胃H.pylori;随机刮取80份舌苔样本,其中UBT阳性病人舌苔样本55份,UBT阴性病人舌苔样本25份,用巢式PCR检测舌苔H.pylori,以H.pylori的热休克蛋白HSP60基因为引物。结果 :巢式PCR检测出44份的舌苔H.pylori感染为阳性;数据统计分析后,UBT阳性与PCR阳性的相关性较好(两组McNemar检验P=0.061>0.05)。结论:胃H.pylori阳性的人群中,其舌苔感染H.pylori的可能性很大,舌苔是人体H.pylori的主要储存地,考虑为胃内H.pylori感染和复发的原因之一。 展开更多

关键词 H.PYLORI 舌苔 巢式pcr

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犬贾第虫巢式PCR检测方法的建立 被引量：2

7

作者 李棕松 高珺珊 +7 位作者 翟涛 吴威 宫鹏涛 李建华 杨举 李赫 张国才 张西臣 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第11期1668-1671,共4页

目的建立犬贾第虫巢式PCR检测方法并进行验证。方法根据犬贾第虫Rnase P基因序列设计两对特异性引物,通过优化Mg2+浓度和退火温度建立巢式PCR检测方法,并进行灵敏度和特异性验证。用优化的巢式PCR方法检测60份犬临床粪样。结果建立的巢... 目的建立犬贾第虫巢式PCR检测方法并进行验证。方法根据犬贾第虫Rnase P基因序列设计两对特异性引物,通过优化Mg2+浓度和退火温度建立巢式PCR检测方法,并进行灵敏度和特异性验证。用优化的巢式PCR方法检测60份犬临床粪样。结果建立的巢式PCR方法的最佳Mg2+浓度为3.0 mmol/L;最佳退火温度为53℃;对犬贾第虫的最低检测量可达1个虫体DNA/ml;对柔嫩艾美尔球虫、伊氏锥虫、弓形虫、阴道毛滴虫、犬心丝虫等寄生虫基因组DNA的扩增结果均为阴性;60份犬临床粪样贾第虫的检出率为61.7%。结论建立的巢式PCR检测方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于犬贾第虫感染的临床检测。 展开更多

关键词 犬 贾第虫 巢式聚合酶链反应

原文传递

套式聚合酶链式反应(Nested PCR)检测肺炎衣原体 被引量：1

8

作者 王伟 纪国伟 《中国优生与遗传杂志》 1997年第6期36-36,38,共2页

肺炎衣原体（Chlamydiapneumoniae．CPn）可引起人类急性呼吸道炎症，临床表现以肺炎为主，已在世界上许多国家和地区引起流行，本文介绍通过套式PCR检测CPn，共检测109例呼吸道感染者之咽拭标本，检出13例阳性（阳性率12％）．提示CPn... 肺炎衣原体（Chlamydiapneumoniae．CPn）可引起人类急性呼吸道炎症，临床表现以肺炎为主，已在世界上许多国家和地区引起流行，本文介绍通过套式PCR检测CPn，共检测109例呼吸道感染者之咽拭标本，检出13例阳性（阳性率12％）．提示CPn的呼吸道感染在我国并不少见。实验结果表明，套式PCR用于CPn检测方法的建立，有敏感、特异、简便、快速的特点，具有良好的应用前景。 展开更多

关键词 肺炎衣原体 套式pcr 呼吸道感染 聚合酶链反应

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肾癌组织中支原体DNA检测的临床意义

9

作者 曹军 李建平 +1 位作者 程伟 陈琦 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期683-685,共3页

目的探讨肾癌的临床病理特征与支原体DNA的相关性。方法选取本院肾癌石蜡包埋标本95例,采用支原体通用引物的巢式多聚酶链反应技术检测肾癌组织中的支原体DNA。结果肾癌组织中的支原体DNA阳性率为81.1%;中、低分化肾癌组织中的支原体DN... 目的探讨肾癌的临床病理特征与支原体DNA的相关性。方法选取本院肾癌石蜡包埋标本95例,采用支原体通用引物的巢式多聚酶链反应技术检测肾癌组织中的支原体DNA。结果肾癌组织中的支原体DNA阳性率为81.1%;中、低分化肾癌组织中的支原体DNA阳性率(90.9%)高于高分化肾癌组织(72.6%)(P<0.05);中、晚期肾癌组织中的支原体DNA阳性率(92.9%)高于早期肾癌组织(71.7%)(P<0.01);支原体DNA阳性患者的3、5年生存率(57.9%、37.5%)低于支原体DNA阴性患者(89.7%、81.8%)(P<0.01)。结论支原体DNA阳性率与肾癌病理分级和临床分期密切相关,支原体感染可能会影响肾癌的生物学行为及预后。 展开更多

关键词 支原体感染 肾癌 巢式多聚酶链反应

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乙脑病毒嵌套式RT-PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：12

10

作者 高正琴 贺争鸣 +2 位作者 邢瑞昌 卫礼 王吉 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第4期279-282,共4页

目的　建立适用于检测人用猪源性生物制品中外源性乙脑病毒(JEV)的嵌套式RT- PCR方法。方法　根据已公布的JEV序列(GenBank登录号为M5 5 5 0 6 ) ,设计合成两对引物,对JEV感染的乳鼠脑组织和培养JEV的BHK 2 1细胞抽提RNA进行RT PCR和RT ... 目的　建立适用于检测人用猪源性生物制品中外源性乙脑病毒(JEV)的嵌套式RT- PCR方法。方法　根据已公布的JEV序列(GenBank登录号为M5 5 5 0 6 ) ,设计合成两对引物,对JEV感染的乳鼠脑组织和培养JEV的BHK 2 1细胞抽提RNA进行RT PCR和RT nestedPCR ,将PCR产物进行了克隆测序;同时对猪细小病毒(PPV)、猴空泡病毒4 0 (SV4 0 )及正常乳鼠脑组织、正常BHK 2 1细胞、PK15细胞、BSC 1细胞提取核酸进行PCR ,并对2 10份临床样品进行了检测。结果　PCR产物经琼脂糖凝胶电泳检测,JEV感染的乳鼠脑组织和培养JEV的BHK 2 1细胞均扩增出10 15bp和6 2 2bp目的基因片段,而PPV、SV4 0及未感染JEV的乳鼠脑组织、正常BHK 2 1细胞、PK15细胞、BSC 1细胞均未见特异性扩增条带,2 10份猪组织样品中未检出阳性样品。RT nestedPCR检测的最低限度为10PFU病毒。从样品核酸的提取到PCR扩增及检测结果的报告可在8小时内完成。结论　本研究建立的RT NestedPCR方法具有快速、特异、敏感、可靠的特点,可用于人用猪源性生物制品中外源性JEV的污染检测。 展开更多

关键词 乙脑病毒 反转录-嵌套式聚合酶链反应 检测

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儿童唾液幽门螺杆菌感染的检测与分析 被引量：1

11

作者 石宏 王洁 +2 位作者 董福生 平雅坤 张清彬 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 2004年第3期269-270,共2页

目的　调查儿童唾液中幽门螺杆菌 (HP)感染情况。方法　采用巢式聚合酶链式反应对 6 2例儿童的唾液进行HP检测。结果　 6 2例儿童中唾液HP阳性率为 4 8.4 % (30 / 6 2 ) ;有消化道症状儿童和无消化道症状儿童唾液HP阳性率分别为 6 1.9% ... 目的　调查儿童唾液中幽门螺杆菌 (HP)感染情况。方法　采用巢式聚合酶链式反应对 6 2例儿童的唾液进行HP检测。结果　 6 2例儿童中唾液HP阳性率为 4 8.4 % (30 / 6 2 ) ;有消化道症状儿童和无消化道症状儿童唾液HP阳性率分别为 6 1.9% (2 6 / 4 2 )、2 0 .0 % (4 / 2 0 ) ,差异有显著性。结论　应重视儿童唾液的HP感染及其与儿童消化道疾病的关系。 展开更多

关键词 儿童 唾液幽门螺杆菌感染 检测 分析 巢式聚合酶链式反应

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进口黄檀属木材DNA提取与分子鉴定方法初步研究 被引量：11

12

作者 伏建国 刘金良 +2 位作者 杨晓军 安榆林 骆嘉言 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期627-632,共6页

由于黄檀属Dalbergia种类较多,很多种类通过形态学方法难以区分,给中国进口木材检验鉴定工作带来了很大困难。为了研究黄檀属木材的分子鉴定方法,选取进口木材中常见的7种黄檀属木材,通过比较不同的木材DNA提取和纯化方法,摸索出了适合... 由于黄檀属Dalbergia种类较多,很多种类通过形态学方法难以区分,给中国进口木材检验鉴定工作带来了很大困难。为了研究黄檀属木材的分子鉴定方法,选取进口木材中常见的7种黄檀属木材,通过比较不同的木材DNA提取和纯化方法,摸索出了适合于黄檀属木材的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)十二烷基硫酸钠(SDS)磁珠相结合的DNA提取和纯化体系,利用巢式聚合酶链式反应(PCR)扩增出433 bp的matK基因片段,共发现12个碱基位点差异,可以将7种进口黄檀属木材及我国的降香黄檀Dalbergia odorifera逐一区分开,为黄檀属木材分子识别鉴定研究工作奠定了良好的基础。 展开更多

关键词 林业工程 黄檀属木材 DnA提取 纯化 巢式pcr MATK基因 鉴定

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应用通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应检测肠道病毒(英文) 被引量：6

13

作者 张寿斌 廖华 +3 位作者 黄呈辉 谭庆瑜 张炜灵 陈侃 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2004年第22期33-37,共5页

目的设计通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应(RT-n-PCR),以达到广泛。特异及快速诊断肠道病毒(Enterovirus,EV)感染。方法在EV基因组5'端非编码区(5'-UTR)设计二对通用第物,建立RT-n-PCR检测方法,对3种EV和3种非EV标准株以及16... 目的设计通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应(RT-n-PCR),以达到广泛。特异及快速诊断肠道病毒(Enterovirus,EV)感染。方法在EV基因组5'端非编码区(5'-UTR)设计二对通用第物,建立RT-n-PCR检测方法,对3种EV和3种非EV标准株以及165例可疑EV感染的327份临床标本进行检测。结果EV标准株均在电泳中检测到一清晰312bp扩增条带,而非EV标准株则无扩增条带;共有104份标本检测到相应大小扩增条带,阳性率31.8%;147例病例同时检测了粪便和咽拭子,粪便阳性49例,咽拭子阳性44例,其中粪便和咽拭子同时阳性35例,粪便和咽拭子EV阳性比较无显著性差异(P>0.05)。病例总阳性数64例,阳性率38.8%。结论RT-n-PCR可以准确地检测出肠道病毒,特异性强,用时少,同时检测多份标本可以提高EV阳性率。 展开更多

关键词 逆转录聚合酶链反应 肠道病毒 通用引物

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临床病毒性脑炎标本的博尔纳病病毒核酸检测 被引量：1

14

作者 姚能云 徐平 郭振元 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期154-157,共4页

目的探讨临床病毒性脑炎（viral eneephalitis，VE）患者与博尔纳病病毒（Borna disease virus，BDV）感染的关系，分析BDV感染的病毒性脑炎患者临床特征。方法用荧光定量巢式逆转录聚合酶链反应（FQ-nRT-PCR）方法检测病毒性脑炎患者... 目的探讨临床病毒性脑炎（viral eneephalitis，VE）患者与博尔纳病病毒（Borna disease virus，BDV）感染的关系，分析BDV感染的病毒性脑炎患者临床特征。方法用荧光定量巢式逆转录聚合酶链反应（FQ-nRT-PCR）方法检测病毒性脑炎患者及非感染性疾病施行蛛网膜下腔阻滞麻醉的手术患者脑脊液单个核细胞（cembmspinl fluid mononuclear cell，CSFMC）中BDV p24基因片段，同时用β-肌动蛋白（β-actin）作为内参照，脑脊液（CSF）阳性标本基因测序分析并总结出临床特征。结果32例病毒性脑炎脑脊液标本BDVp24基因片段检出率为12．5％（4/32），拷贝数〉10^2/μl。对其中一份CSF阳性标本测序后，与BDV标准病毒株Ⅴ和马源的BDV病毒株H1766序列比较同源性分别为95．35％和98．84％。在4个位点出现基因突变（nt1649 T→C、nt1656 G→A、nt1670 C→T、nt1676 C→T）。该目的基因片段与马源的BDV病毒株亲缘关系最近。阳性脑炎患者主要以精神行为异常为临床特征。结论贵州省遵义市部分病毒性脑炎的发生与BDV感染有关，主要以精神行为异常为临床特征。 展开更多

关键词 病毒性脑炎 博尔纳病病毒 荧光定量巢式逆转录聚合酶链反应

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