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透明颤菌血红蛋白基因在金色链霉菌中的克隆与表达 被引量：10
1
作者 孟春 叶勤 +3 位作者 石贤爱 邱荔 宋思扬 郭养浩 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期305-310,共6页
分别用质粒pJJ6 99与pUC1 9(vhb) ,pIJ70 2与pBR3 2 2 (vhb) ,构建大肠杆菌 链霉菌穿梭质粒 ,将透明颤菌血红蛋白基因转入金色链霉菌。在低溶解氧浓度下 ,透明颤菌血红蛋白的表达 ,可提高金色链霉菌氧的利用效率 ,产物合成比原始菌株提... 分别用质粒pJJ6 99与pUC1 9(vhb) ,pIJ70 2与pBR3 2 2 (vhb) ,构建大肠杆菌 链霉菌穿梭质粒 ,将透明颤菌血红蛋白基因转入金色链霉菌。在低溶解氧浓度下 ,透明颤菌血红蛋白的表达 ,可提高金色链霉菌氧的利用效率 ,产物合成比原始菌株提高 40 %～ 6 0 %。在局部低氧的环境中 ,采用四环素抗性基因启动子带动血红蛋白基因表达 ,可有效发挥透明颤菌血红蛋白的氧传递效率 。 展开更多
关键词 透明颤菌 血红蛋白基因 金色链霉菌 克隆 表达 四环素 抗性基因启动子 天然启动子
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低氧诱导透明颤菌血红蛋白基因在大肠杆菌中的表达 被引量：2
2
作者 张锋 赵晓瑜 周艳芬 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2006年第B10期20-22,共3页
合成透明颤菌血红蛋白基因(vgb)的天然低氧启动子,与vgb结构基因拼接得到570 bp的vgb基因,将该基因克隆到pUC18质粒中重组为pUC_LV质粒,转化大肠杆菌得到重组子。通过低氧诱导10 h后,重组菌的密度较对照增加了67.4%,经SDS_PAGE和CO差光... 合成透明颤菌血红蛋白基因(vgb)的天然低氧启动子,与vgb结构基因拼接得到570 bp的vgb基因,将该基因克隆到pUC18质粒中重组为pUC_LV质粒,转化大肠杆菌得到重组子。通过低氧诱导10 h后,重组菌的密度较对照增加了67.4%,经SDS_PAGE和CO差光谱分析证明重组菌表达了有活性的透明颤菌血红蛋白(VHb)。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白基因 天然启动子 大肠杆菌 低氧诱导
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透明颤菌血红蛋白基因克隆及在紫色非硫细菌中的表达 被引量：1
3
作者 张立国 罗人明 +5 位作者 周集体 吕红 杜进民 郭建博 罗晓 王晓磊 《河北工业科技》 CAS 2008年第1期1-4,共4页
构建了含有透明颤菌血红蛋白基因的可转化大肠杆菌-紫色非硫细菌穿梭质粒（pHSG-MG-vgb），将其转化到紫色非硫细菌（Rhodopseudo palustns），获得了基因工程菌EPB01。经SDS-PAGE和CO示差分光光谱分析证明，重组菌株表达了有活性的透... 构建了含有透明颤菌血红蛋白基因的可转化大肠杆菌-紫色非硫细菌穿梭质粒（pHSG-MG-vgb），将其转化到紫色非硫细菌（Rhodopseudo palustns），获得了基因工程菌EPB01。经SDS-PAGE和CO示差分光光谱分析证明，重组菌株表达了有活性的透明颤菌血红蛋白，通过低溶解氧诱导后，基因工程菌EPB01的菌体密度较对照菌增加了24%-32%。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白基因 天然启动子 光合细菌 基因工程菌 低氧诱导
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苹果异戊烯基转移酶基因启动子调控特性研究 被引量：1
4
作者 杜传慧 付艳 +3 位作者 王利敏 仇占南 李晨辉 朱元娣 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期455-463,共9页
异戊烯基转移酶(IPT)是细胞分裂素合成途径的第一限速酶,过表达苹果MdIPT3a的转基因烟草表现出典型的细胞分裂素特异的生长表型,可作为苹果同源转基因的潜在筛选标记。为阐明MdIPT3a自主启动子对基因表达的调控作用,本试验克隆了富士苹... 异戊烯基转移酶(IPT)是细胞分裂素合成途径的第一限速酶,过表达苹果MdIPT3a的转基因烟草表现出典型的细胞分裂素特异的生长表型,可作为苹果同源转基因的潜在筛选标记。为阐明MdIPT3a自主启动子对基因表达的调控作用,本试验克隆了富士苹果MdIPT3a基因上游启动子序列,分别构建不同长度的MdIPT3a启动子驱动GUS基因的植物表达载体,以CaMV35S驱动GUS基因的表达载体作为对照,遗传转化烟草W38,并对转基因植株进行GUS定性和定量分析,探讨不同长度的MdIPT3a启动子对GUS表达的影响。结果表明,转基因植株的各组织均有GUS染色,不同长度的MdIPT3a启动子均能驱动GUS基因表达,最小的有效启动子长446 bp,且含MdIPT3a启动子的转基因植株GUS表达水平显著低于含35S启动子的对照植株。本试验结果为Md IPT3a的同源转基因技术研究提供了一定的理论参考。 展开更多
关键词 MdIPT3a启动子 GUS基因 转基因表达 遗传转化
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利用REF启动子构建橡胶树乳管特异表达载体及GUS基因的瞬时表达 被引量：4
5
作者 丛明 凌华 +2 位作者 黄惠琴 吕家森 鲍时翔 《热带作物学报》 CSCD 2005年第2期29-33,共5页
采用SDS法提取橡胶树基因组DNA,用2套引物进行PCR扩增,得到2条REF条带,它们与NCBI报道的REF序列间的同源性分别是98.9%,98.4%。用克隆得到的REF片段分别替换载体质粒pBI121中的CaMV35S启动子,得到利用橡胶内源性启动子构建的橡胶树REF... 采用SDS法提取橡胶树基因组DNA,用2套引物进行PCR扩增,得到2条REF条带,它们与NCBI报道的REF序列间的同源性分别是98.9%,98.4%。用克隆得到的REF片段分别替换载体质粒pBI121中的CaMV35S启动子,得到利用橡胶内源性启动子构建的橡胶树REF启动子瞬时表达载体(pBIR1和pBIR2)。用基因枪法转化橡胶树组培苗叶片后,GUS组织化学检测显示叶脉为GUS染色阳性。研究中发现,长度为306bp的REF启动子片段可以实现REF启动子的全部功能。从而成功地构建了橡胶树乳管瞬时表达载体,为外源基因的橡胶树乳管特异表达载体的构建打下了基础。 展开更多
关键词 橡胶树 内源性启动子 乳管特异 瞬时表达
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