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题名利用酵母双杂交系统筛选NKD1结合蛋白质
被引量：2
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作者
刘迁
于华裔
沈颖
王婉怡
王林林
韩晓东
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机构
江苏大学附属武进医院/徐州医科大学临床学院
内蒙古农业大学生命科学学院
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出处
《现代肿瘤医学》
CAS
北大核心
2022年第5期757-762,共6页
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基金
国家自然科学基金面上项目(编号:81872275)
江苏省卫生健康委科研基金面上项目(编号:M2020002)。
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文摘
目的:酵母双杂交技术筛选结肠癌细胞中与裸角质层同源蛋白1(naked cuticle homolog 1,NKD1)相互结合的蛋白质,从而进一步了解NKD1。方法:以结肠癌细胞SW480的cDNA为模板,克隆NKD1基因,并将其成功构建在pGBKT7诱饵载体上。利用酵母双杂交技术从结肠癌SW480细胞文库进行筛选。结果:初步筛选获得13个阳性克隆菌株。经测序,在数据库中BLAST比对后,共确定为8种不同基因编码的蛋白片段。回转实验进一步验证了这8种不同基因编码的蛋白均能够激活酵母双杂交系统中的His3、Ade2和LacZ报告基因。这8种不同基因中的4种基因编码的蛋白片段为YWHA蛋白家族成员,其中2种都是编码YWHAE蛋白片段。在结肠癌HCT116细胞中通过免疫共沉淀实验进一步验证,NKD1与YWHAE在结肠癌细胞中可以相互结合。结论:结肠癌细胞中,证实YWHAE是NKD1结合蛋白质,通过调控胰岛素的敏感性,进而调控结肠癌细胞对葡萄糖的摄入。
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关键词
结肠癌
酵母双杂交
肿瘤标志物
裸角质层同源蛋白1
免疫共沉淀
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Keywords
colon cancer
yeast two-hybrid
tumor markers
naked cuticle homolog 1
immunoprecipitation
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分类号
R735.35
[医药卫生—肿瘤]
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题名NKD1和APC在乳腺癌组织中的表达及意义
被引量：3
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作者
曹子龙
张卓
胡建立
申铉三
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机构
内蒙古民族大学附属医院普外科
内蒙古民族大学
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出处
《中国普外基础与临床杂志》
CAS
2015年第10期1226-1229,共4页
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文摘
目的检测裸角质膜同源蛋白(NKD1)和结肠腺瘤性息肉病基因(adenomatouspolyposis coli,APC)在乳腺癌组织中的表达情况,探讨其临床意义及两者之间的相关性。方法选取75例乳腺癌患者的癌组织标本及其对应的距乳腺癌组织5 cm以上的正常乳腺组织作为对照,应用免疫组织化学染色方法检测NKD1和APC的表达情况,并分析其与乳腺癌病理特征间的关系以及两者之间的相关性。结果 NKD1和APC在正常乳腺组织中的表达阳性率明显高于乳腺癌组织(82.67%比36.00%;89.33%比45.33%),其差异有统计学意义(P<0.05);NKD1的表达与乳腺癌患者的年龄无关(P>0.05),而与其分化程度、TNM分期、淋巴结转移及远处脏器转移有关(P<0.05);APC的表达与患者年龄、乳腺癌的分化程度和淋巴结转移无关(P>0.05),而与其TNM分期及远处脏器转移有关(P<0.05)。NKD1和APC在乳腺癌组织中的表达呈正相关关系(r=0.609,P<0.05)。结论 NKD1和APC可能参与了乳腺癌的发生发展及远处脏器转移,并且两者可能在乳腺癌进展中存在着协同作用。
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关键词
乳腺癌
裸角质膜同源蛋白
结肠腺瘤性息肉病基因
免疫组织化学
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Keywords
Breast carcinoma
naked cuticle homolog 1
Adenomatouspolyposis coli
Immunohistochemistry
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分类号
R737.9
[医药卫生—肿瘤]
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