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实时荧光定量PCR检测脂多糖对NR8383细胞TNF-α mRNA的影响
1
作者 熊东林 丁成志 +1 位作者 曾振国 钱克俭 《实用临床医学（江西）》 CAS 2011年第4期1-3,6,共4页
目的实时荧光定量PCR检测脂多糖(LPS)诱导NR8383肺泡巨噬细胞前后TNF-αmRNA的表达情况。方法体外培养的肺泡巨噬细胞系NR8383分成LPS刺激组和PBS(磷酸盐缓冲液)对照组,LPS终浓度为1μg.mL-1,共培养2 h后,TRIzol法提取细胞总RNA,SYBR Gr... 目的实时荧光定量PCR检测脂多糖(LPS)诱导NR8383肺泡巨噬细胞前后TNF-αmRNA的表达情况。方法体外培养的肺泡巨噬细胞系NR8383分成LPS刺激组和PBS(磷酸盐缓冲液)对照组,LPS终浓度为1μg.mL-1,共培养2 h后,TRIzol法提取细胞总RNA,SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测细胞TNF-αmR-NA的表达,结合管家基因β-Actin进行相对定量分析。结果荧光定量PCR未发现非特异性扩增。与对照组比较,LPS刺激组细胞TNF-αmRNA上调了124.1倍,差异有统计学意义(P<0.01)。结论用于本研究TNF-αmRNA的荧光定量PCR检测体系特异性好,结果可靠,为进一步实验奠定了基础。 展开更多
关键词 实时荧光定量PCR nr8383细胞系 肿瘤坏死因子-Α 脂多糖
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氯胺酮对脂多糖诱导的大鼠肺泡巨噬细胞氧化应激的影响 被引量：19
2
作者 顾达民 陈宇 +1 位作者 张小宝 付诚章 《实用临床医药杂志》 CAS 2008年第8期1-2,7,共3页
目的研究氯胺酮对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞氧化应激的影响。方法体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383经氯胺酮(10、100和1000μmol/L)预处理,LPS刺激24 h后,应用试剂盒检测细胞培养上清液中丙二醛(MDA)及超氧化物岐化酶(SOD)... 目的研究氯胺酮对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞氧化应激的影响。方法体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383经氯胺酮(10、100和1000μmol/L)预处理,LPS刺激24 h后,应用试剂盒检测细胞培养上清液中丙二醛(MDA)及超氧化物岐化酶(SOD)的水平。结果与PBS组比较,LPS组培养上清液中MDA水平均明显增加,而SOD水平显著下降,而氯胺酮预处理组(100和1000μmol/L)对此具有抑制作用。结论氯胺酮对LPS所致的NR8383细胞的氧化应激损伤具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 氯胺酮 LPS 大鼠肺泡巨噬细胞系nr8383 丙二醛 超氧化物岐化酶
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艾拉莫德对脂多糖激活大鼠肺泡巨噬细胞系TNFα产生及NF-κB活性的抑制作用 被引量：17
3
作者 蒋叶 吕伟 +3 位作者 余书勤 姚琳 绪广林 张锡然 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期401-405,共5页
目的研究非甾体抗炎药艾拉莫德(T-614)对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞系(NR8383)前炎症反应因子TNFα基因表达、蛋白合成的影响及其对核因子κB(NF-κB)的作用。方法体外培养NR8383经T-614(13.4,26.7及53.4μmol.L-1)处理,LPS刺... 目的研究非甾体抗炎药艾拉莫德(T-614)对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞系(NR8383)前炎症反应因子TNFα基因表达、蛋白合成的影响及其对核因子κB(NF-κB)的作用。方法体外培养NR8383经T-614(13.4,26.7及53.4μmol.L-1)处理,LPS刺激后应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中TNFα的水平,半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TNFαmRNA水平,ELISA法检测NF-κB的活性。结果T-614对LPS诱导的NR8383细胞TNFαmRNA水平和蛋白水平的上调有显著抑制作用,对NF-κB的转录活性也有抑制作用。结论T-614可能通过抑制LPS诱导的NR8383的NF-κB活性而降低TNFα的产生。 展开更多
关键词 艾拉莫德 大鼠肺泡巨噬细胞系nr8383 肿瘤坏死因子Α 核因子ΚB
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氯胺酮对脂多糖诱发的大鼠肺泡巨噬细胞一氧化氮及氧自由基生成的影响 被引量：3
4
作者 张小宝 朱敏敏 +1 位作者 黄海慧 傅诚章 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1115-1117,共3页
目的:研究氯胺酮对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞一氧化氮(NO)、羟自由基(.OH)及超氧阴离子(O2.-)生成的影响。方法:体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383分为对照组(C组),LPS组(L组)及不同浓度氯胺酮预处理组(K1、K2和K3组)。检测... 目的:研究氯胺酮对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞一氧化氮(NO)、羟自由基(.OH)及超氧阴离子(O2.-)生成的影响。方法:体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383分为对照组(C组),LPS组(L组)及不同浓度氯胺酮预处理组(K1、K2和K3组)。检测细胞培养上清液中NO、.OH及O2.-水平。结果:L组NO、.OH及O2.-水平显著高于C组,K2和K3组的NO、.OH及O2.-水平显著低于L组,K2和K3组间无统计学差异。结论:氯胺酮对LPS所致的NR8383的NO、.OH及O2.-的升高有抑制作用。 展开更多
关键词 氯胺酮 LPS 大鼠肺泡巨噬细胞株nr8383 一氧化氮 羟自由基 超氧阴离子
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氯胺酮对脂多糖诱导的大鼠肺泡巨噬细胞抗氧化能力的影响
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作者 尤克强 张小宝 傅诚章 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第16期2121-2122,共2页
目的研究氯胺酮对脂多糖（LPS）刺激的大鼠肺泡巨噬细胞（AM）抗氧化能力的影响。方法体外培养大鼠肺泡AM株NR8383经氯胺酮（10、100、1000μmol/L）预处理,LPS刺激24h后,应用试剂盒检测细胞培养上清液中总抗氧化能力（T-AOC）及谷胱甘... 目的研究氯胺酮对脂多糖（LPS）刺激的大鼠肺泡巨噬细胞（AM）抗氧化能力的影响。方法体外培养大鼠肺泡AM株NR8383经氯胺酮（10、100、1000μmol/L）预处理,LPS刺激24h后,应用试剂盒检测细胞培养上清液中总抗氧化能力（T-AOC）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平。结果与磷酸盐缓冲液（PBS）组比较,LPS组培养上清液中T-AOC和GSH-Px水平均明显下降。低浓度氯胺酮预处理组（10μmol/L）与LPS组比较,差异无统计学意义。而较高浓度氯胺酮预处理组（100、1000μmol/L）与LPS组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论一定浓度氯胺酮对LPS刺激的NR8383细胞T-AOC和GSH-Px水平降低具有明显改善作用。 展开更多
关键词 氯胺酮 脂多糖 大鼠肺泡巨噬细胞系nr8383 总抗氧化能力 谷胱甘肽过氧化物酶
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