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β射线对NIH3T3成纤维细胞细胞周期的影响及牛磺酸的干预作用 被引量:4
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作者 范雁 徐爱华 +2 位作者 周迎会 陈美 吴士良 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2005年第6期470-472,共3页
目的:观察β射线对NIH3T3成纤维细胞周期的影响,探讨β放射损伤的机制及牛磺酸(taurine)的辐射防护作用.方法:以不同剂量的高能电子射线模拟β射线照射NIH3T3细胞,加药组分别为(50 mg/L、100 mg/L、200mg/L)选择15 Gy照射剂量,采用流式... 目的:观察β射线对NIH3T3成纤维细胞周期的影响,探讨β放射损伤的机制及牛磺酸(taurine)的辐射防护作用.方法:以不同剂量的高能电子射线模拟β射线照射NIH3T3细胞,加药组分别为(50 mg/L、100 mg/L、200mg/L)选择15 Gy照射剂量,采用流式细胞术检测各组细胞的细胞周期率.结果:β辐射后细胞发生G2期阻滞,且与照射剂量呈正相关(P≤0.01).在0~15 Gy剂量范围内,β辐照12 h后未观察到细胞发生凋亡.加入牛磺酸后,G2期受阻现象得到缓和,G2/M期百分率与药物剂量呈负相关(P≤0.01).结论:β辐射后NIH3T3细胞属于G2期延迟细胞,牛磺酸可通过一定机制使受损的细胞不能通过G1期,从而有助于加强对细胞受损DNA的修复,起到辐射防护的作用. 展开更多
关键词 β辐照 nih3T3细胞 细胞周期 牛磺酸
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肺纤方对小鼠肺纤维化模型及NIH3T3成纤维细胞作用机制的研究 被引量:5
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作者 谢纬 唐明文 +3 位作者 郭竹英 陈生 黄俊浩 曾梓苑 《现代医院》 2021年第5期792-797,共6页
目的在前期二次造模实验基础上,建立小鼠肺纤维化模型,观察肺纤方对肺纤维化小鼠模型的干预作用,并探讨不同浓度的肺纤方煎剂对体外培养NIH3T3成纤维细胞细胞增殖的影响及可能的作用机制。方法将60只雄性昆明小鼠,随机取出其中50只,气... 目的在前期二次造模实验基础上,建立小鼠肺纤维化模型,观察肺纤方对肺纤维化小鼠模型的干预作用,并探讨不同浓度的肺纤方煎剂对体外培养NIH3T3成纤维细胞细胞增殖的影响及可能的作用机制。方法将60只雄性昆明小鼠,随机取出其中50只,气管内雾化吸入博莱霉素(8 mg/kg)造模,造模第10天后再次给予吸入博来霉素(8 mg/kg)二次造模,第25天将其随机分为5组:模型组、甲泼尼龙组、肺纤方高、中、低剂量组,每组10只。其余10只小鼠气管内滴入及灌胃等容生理盐水作为空白对照组。处死后取肺脏标本进行肺组织肺泡炎、纤维化评价方法和肺组织羟脯氨酸(Hyp)测定。培养小鼠NIH3T3成纤维细胞,分为对照组、肺纤方低、中、高剂量组,分别给予生理盐水、低、中、高浓度剂量肺纤方煎剂处理,一段时间后进行平板克隆形成实验和Western blot法测定细胞增殖和CyclinD1、MMP2、TIMP1蛋白的表达水平。结果采用肺纤方各组及甲泼尼龙组小鼠肺泡炎、纤维化评分和Hyp含量均明显低于模型组(P<0.05),且肺纤方各组上述指标值随着肺纤方剂量的增加而降低,但高剂量组与甲泼尼龙组比较,无显著性差异(P>0.05);肺纤方各组具有抑制NIH3T3细胞的增殖能力,且呈时间依赖,但无浓度依赖性;肺纤方各组对CyclinD1和MMP2蛋白的表达均有下调,且一定范围内随药物浓度增加,CyclinD1蛋白表达下调越明显;同时肺纤方各组TIMP1蛋白的表达有所增加,但是差异不显著;而肺纤方各组GAPDH条带灰度比值无明显差异。结论肺纤方能够有效抑制博来霉素致小鼠肺纤维化,同时能抑制NIH3T3细胞的增殖,可能机制为其抑制CyclinD1蛋白表达和改善MMPs/TIMPs系统平衡,但上述效应与药剂浓度无正相关性。 展开更多
关键词 肺纤方 肺纤维化 nih3T3成纤维细胞 作用机制
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双氢青蒿素对小鼠肺纤维化的影响及作用机制
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作者 白君 陈珠妮 +3 位作者 叶景焕 熊广 李亚清 谢纬 《中南医学科学杂志》 CAS 2023年第6期848-852,952,共6页
目的探讨双氢青蒿素对小鼠肺纤维化的影响及其可能机制。方法将SPF小鼠35只随机分成空白对照组、模型组、甲泼尼龙组、双氢青蒿素低、高剂量组,每组7只;成模后,分别用药物治疗14天后处死小鼠,取肺脏标本进行肺泡炎症、肺纤维化评分和羟... 目的探讨双氢青蒿素对小鼠肺纤维化的影响及其可能机制。方法将SPF小鼠35只随机分成空白对照组、模型组、甲泼尼龙组、双氢青蒿素低、高剂量组,每组7只;成模后,分别用药物治疗14天后处死小鼠,取肺脏标本进行肺泡炎症、肺纤维化评分和羟脯氨酸测定。培养成纤维细胞,分为对照组、甲泼尼龙低、高剂量组、双氢青蒿素低、中、高剂量组,分别给与药物处理,MTS法检测成纤维细胞增殖率,蛋白质印迹法测定成纤维细胞相关蛋白水平。结果双氢青蒿素组及甲泼尼龙组肺泡炎症、纤维化评分和羟脯氨酸含量均明显低于模型组;双氢青蒿素组和甲泼尼龙组抑制NIH3T3细胞增殖能力,且呈时间、剂量依赖性;各剂量双氢青蒿素组和甲泼尼龙组均可下调MMP-2和Cyclin D1蛋白及上调TIMP1表达,且一定范围内呈剂量依赖性。结论小鼠肺泡炎症和肺纤维化程度能被双氢青蒿素有效减轻,同时成纤维细胞的增殖可被其抑制,在一定范围内上述效应与药物剂量相关。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 肺纤维化 nih3T3成纤维细胞
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重组白细胞介素13对成纤维细胞增殖的影响 被引量:1
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作者 肖莉 李振华 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期574-576,F0002,共4页
目的:观察重组白细胞介素13(rIL-13)对NIH3T3细胞增殖作用的影响,探讨肺纤维化的发病机制。方法:NIH3T3细胞分为rIL-13组和不含rIL-13的对照组r,IL-13组加入不同浓度的rIL-13,作用24及48h。透射电镜观察3T3细胞的超微结构,Hoechst试剂... 目的:观察重组白细胞介素13(rIL-13)对NIH3T3细胞增殖作用的影响,探讨肺纤维化的发病机制。方法:NIH3T3细胞分为rIL-13组和不含rIL-13的对照组r,IL-13组加入不同浓度的rIL-13,作用24及48h。透射电镜观察3T3细胞的超微结构,Hoechst试剂盒观察细胞DNA形态变化,噻唑蓝比色试验(MTT法)测定细胞增殖率。结果r:IL-13呈剂量依赖方式刺激3T3细胞细胞生长。经rIL-13 80 ng/ml孵育的细胞DNA合成增加,细胞核增大,细胞质中可见较多核糖体及线粒体。rIL-13组细胞增殖率增加,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论r:IL-13可能通过促进成纤维细胞增殖,在肺纤维化的发病机制中发挥重要作用。 展开更多
关键词 重组白细胞介素13 nih 3T3细胞 细胞增殖
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STK15的表达对NIH3T3细胞的影响
5
作者 朱焱 王禄增 +6 位作者 杨威 于洋 王维 董婉维 汪瑛 秦英 郑志红 《中国比较医学杂志》 CAS 2010年第2期17-20,I0002,共5页
目的构建pcDNA3.1-STK15表达质粒,探讨STK15基因对小鼠成纤维细胞(NIH3T3)的影响。方法构建pcDNA3.1-STK15质粒,将其转染NIH3T3,应用RT-PCR、免疫细胞化学和Western印迹方法检测STK15的表达;MTT法检测细胞增殖能力;Transwell检测细胞侵... 目的构建pcDNA3.1-STK15表达质粒,探讨STK15基因对小鼠成纤维细胞(NIH3T3)的影响。方法构建pcDNA3.1-STK15质粒,将其转染NIH3T3,应用RT-PCR、免疫细胞化学和Western印迹方法检测STK15的表达;MTT法检测细胞增殖能力;Transwell检测细胞侵袭能力。结果转染pcDNA3.1-STK15质粒的NIH3T3细胞在48 h有STK15的表达,而且该细胞的增殖速度和穿透Matrigel胶的细胞数均明显高于对照组(P<0.05)。结论STK15基因具有增加细胞增殖和细胞侵袭力的功能,进而形成肿瘤。 展开更多
关键词 STK15 细胞转染nih3T3
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促进成骨与抑制成脂基因共转染NIH3T3成纤维细胞中的表达
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作者 蒋林栋 李劲峰 +3 位作者 马源 李成 李月白 王义生 《中国实用医刊》 2016年第24期1-4,共4页
目的:检测降钙素基因相关肽基因(CGRP)和沉默过氧化物酶体增殖子活化受体-γ(PPARγ)共转染NIH3T3成纤维细胞中的表达。方法培养 NIH3T3成纤维细胞,收集细胞随机分为五组,正常组:正常培养细胞,不做特殊处理,作为正常对照;空... 目的:检测降钙素基因相关肽基因(CGRP)和沉默过氧化物酶体增殖子活化受体-γ(PPARγ)共转染NIH3T3成纤维细胞中的表达。方法培养 NIH3T3成纤维细胞,收集细胞随机分为五组,正常组:正常培养细胞,不做特殊处理,作为正常对照;空载体组:仅用空载体 pGFP-V-RS 质粒转染细胞,作为阴性对照组;CGRP 组:用重组载体 pGFP-V-RS-exCGRP 质粒转染细胞;siPPARγ组:用重组载体 pGFP-V-RS-siPPARγ质粒转染细胞;双基因组:用重组双基因载体 pGFP-V-RS-siPPARγ-exCGRP 质粒转染细胞。电转染成功后,继续培养细胞48 h,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)与蛋白质免疫印迹法(Western blot)分别检测各组细胞内 PPARγ、CGRP mRNA 与蛋白的表达。结果双基因组中 CGRP 基因呈高表达,明显高于正常组、空载体组、siPPARγ组,差异均有统计学意义(P <0.05);与 CGRP 组中 CGRP 基因表达量相近,差异未见统计学意义(P >0.05)。双基因组细胞中 PPARγ基因呈低表达,明显低于正常组、空载体组、CGRP 组,差异均有统计学意义(P <0.05);与 siPPARγ组细胞中 PPARγ基因表达量相似,差异未见统计学意义(P >0.05)。结论促进成骨基因和抑制成脂基因共转染 NIH3T3成纤维细胞,能够上调细胞中 CGRP 基因表达,同时下调 PPARγ基因表达。 展开更多
关键词 基因 转染 降钙素基因相关肽 过氧化物酶体增殖子活化受体-γ nih3T3 成纤维细胞
原文传递
血清诱导NIH3T3成纤维细胞增殖过程中核仁蛋白B23含量的变化
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作者 杨新林 王永潮 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期283-286,共4页
利用核仁蛋白B23的单克隆抗体以及间接免疫荧光和蛋白质免疫印迹方法,研究了血清饥饿的NIH3T3成纤维细胞受血清诱导重新进入增殖周期后,核仁蛋白B23含量的变化,以及有丝分裂期和间期NIH3T3细胞中B23蛋白含量的差异。结果发现,生长至汇... 利用核仁蛋白B23的单克隆抗体以及间接免疫荧光和蛋白质免疫印迹方法,研究了血清饥饿的NIH3T3成纤维细胞受血清诱导重新进入增殖周期后,核仁蛋白B23含量的变化,以及有丝分裂期和间期NIH3T3细胞中B23蛋白含量的差异。结果发现,生长至汇合状态的细胞在无血清培养液中培养24h后,检测到的B23蛋白含量较低,加入10%小牛血清能够引起细胞内B23蛋白含量显著增加,而且在加入血清6h后就已经发生。结果还显示,用微管抑制剂秋水仙酰胺阻断得到的有丝分裂期细胞中B23蛋白含量明显高于间期细胞。以上结果提示,核仁蛋白B23在血清诱导NIH3T3细胞增殖的早期阶段以及细胞由G_2期进入M期时均可能起着一定的调节作用。 展开更多
关键词 核仁蛋白 B23 成纤维细胞 血清诱导 免疫荧光
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原核表达的萝卜PHGPx和谷胱甘肽对NIH3T3细胞氧化损伤的联合保护作用 被引量:1
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作者 刘冠兰 李甜 +2 位作者 刘进元 严泽民 段明星 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期13-18,共6页
将大肠杆菌中高效表达的萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(RsPHGPx)及其底物还原型谷胱甘肽(GSH)联合作用于H2O2、过氧化叔丁基(t-BHP)以及磷脂氢过氧化物(PLPCOOH)损伤的小鼠NIH3T3成纤维细胞,研究其对于细胞过氧化损伤的保护作用。发现... 将大肠杆菌中高效表达的萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(RsPHGPx)及其底物还原型谷胱甘肽(GSH)联合作用于H2O2、过氧化叔丁基(t-BHP)以及磷脂氢过氧化物(PLPCOOH)损伤的小鼠NIH3T3成纤维细胞,研究其对于细胞过氧化损伤的保护作用。发现单独加入10μg/ml RsPHGPx并不能明显保护细胞应对过氧化损伤,但是10μg/ml RsPHGPx与3mg/mlGSH共同作用,可显著提高GSH对细胞过氧化损伤的保护效果,提高细胞存活率,降低细胞膜脂质过氧化水平和胞内活性氧(ROS)水平,保护细胞维持形态完整和抑制细胞凋亡。这一联合作用结果说明RsPHGPx的催化作用可以快速清除细胞内多种过氧化物,高效地保护细胞免受过氧化损伤,为RsPHGPx的应用提供了实验依据。 展开更多
关键词 萝卜PHGPx 谷胱甘肽 过氧化物损伤 小鼠nih3T3成纤维细胞
原文传递
HA-P软腭植入材料的研制及细胞毒性检测 被引量:1
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作者 付晓燕 汪建 +1 位作者 张余 熊敏 《广州医学院学报》 2006年第6期14-17,共4页
目的 研制一种新的治疗鼾症的软腭植入系统微创手术的生物材料并于体外检测其细胞毒性,探讨将其应用于软腭植入系统的可能性。方法:将羟基磷灰石颗粒(HA)、聚乳酸-三亚甲基碳酸酯P(LATMC)按一定比例复合,利用有机溶剂注模法,制... 目的 研制一种新的治疗鼾症的软腭植入系统微创手术的生物材料并于体外检测其细胞毒性,探讨将其应用于软腭植入系统的可能性。方法:将羟基磷灰石颗粒(HA)、聚乳酸-三亚甲基碳酸酯P(LATMC)按一定比例复合,利用有机溶剂注模法,制备重组软腭植入材料;并采用MTT检测法,将不同浓度的HAP浸提液与NIH-3T3成纤维细胞接触1、3、5d,检测细胞的增殖活性,计算细胞的相对增殖度,用6级毒性法进行评级。结果:研制不同浓度的HA-P材料浸提液在不同的时间点培养的细胞均正常增殖(P〉0.05)。毒性级别为0~1级。结论 研制的HA-P材料具有良好的细胞相容性,可能是一种良好的软腭植入系统材料。 展开更多
关键词 软腭植入 羟基磷灰石 聚乳酸-三亚甲基碳酸酯 细胞毒性 nih-3T3小鼠成纤维细胞
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QUANTITATIVE STUDY ON APOPTOSIS INDUCED BY ELECTROMAGNETIC PULSES IN NIH-3T3 FIBROBLASTS
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作者 ZHAO Mei - lan, CAO Xiao - zhe, WANG De - wen, GU Qing - yang, LIU Jie (Department of Pathology, Beijing Institute of Radiation Medicine, Beijing 100850, China) 《中国体视学与图像分析》 2002年第2期72-76,共5页
Aim: To observe the apoptotic changes following exposure to EMP and to explore the possible injury mechanism in NIH - 3T3 fibroblasts. Methods: Following NIH - 3T3 cells were exposed to EMP,the proliferation and viabi... Aim: To observe the apoptotic changes following exposure to EMP and to explore the possible injury mechanism in NIH - 3T3 fibroblasts. Methods: Following NIH - 3T3 cells were exposed to EMP,the proliferation and viability of NIH - 3T3 fibroblasts were estimated by hemacytometer and MTT Measurements. Apoptotic rate was measured by flow cytometer. The imnmohistochemical SP method was used to determine bcl- 2, p53. The positively stained cells were analyzed with CMIAS- Ⅱ image analysis system at a magnification 400. All data were analyzed by SPSS8.0 software. Results: The proliferation and viability of NIH- 3T3 cells were markedly inhibited and significant apoptosis was induced following exposure to EMP.EMP could increase the number of non- adherent cells, the highest ratio (33.9%) of non- adherent cells also occurred at 6h. The As70 value of MTT decreased immediately at 1 h, 6h following the cells were exposed as compared with the control (P < 0.05). The highest ratio of apoptosis was 15.07% at 6h, then decreased gradually. Down - regulation of bcl - 2 and up - regulation of p53 were induced by EMP ( P < 0.05). Conclusions: EMP could promote apoptosis of NIH - 3T3 fibroblasts. EMP could also down - regulate bcl - 2 level and up - regulate p53 level in NIH - 3T3 fibroblasts. Bcl - 2 and p53 gene may take part in the process of apoptosis. 展开更多
关键词 nih-3T3成纤维细胞 P53基因 BCL-2基因 电磁暴露 细胞凋亡
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丹参对转化生长因子β_1刺激的NIH/3T3细胞表达Ⅰ型胶原和c-fos mRNA的影响 被引量:9
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作者 王晓玲 刘平 +4 位作者 童普德 谭英姿 钱汝红 胡旭东 蒋文娟 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2001年第1期19-20,共2页
目的:观察丹参对TGFβ_1刺激的NIH/3T3成纤维细胞功能的影响。方法:将丹参灌胃给正常大鼠,分离含药血清,温育TGFβ_1刺激的成纤维细胞。RT-PCR法检测Ⅰ型胶原和c-fos的基因表达。结果:经TGFβ_1刺激后,细胞Ⅰ型胶原和c-fos的mRNA表达明... 目的:观察丹参对TGFβ_1刺激的NIH/3T3成纤维细胞功能的影响。方法:将丹参灌胃给正常大鼠,分离含药血清,温育TGFβ_1刺激的成纤维细胞。RT-PCR法检测Ⅰ型胶原和c-fos的基因表达。结果:经TGFβ_1刺激后,细胞Ⅰ型胶原和c-fos的mRNA表达明显增加,丹参含药血清可分别抑制由TGFβ_1引起的细胞Ⅰ型胶原和c-fos的mRNA表达的增加,结论:丹参可能通过抑制c-fos的基因表达进而抑制Ⅰ型胶原的基因表达。 展开更多
关键词 丹参 nih/3T3成纤维细胞 转化生长因子β1 Ⅰ型胶原 C-FOS 中药 药理
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