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酿酒酵母线粒体NADH激酶功能相关表型研究 被引量：1
1
作者 李志君 史锋 廖祥儒 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期128-133,共6页
NADH激酶是辅酶NADP(H)从头合成的关键途径。酿酒酵母中由POS5基因编码的线粒体NADH激酶是线粒体NADPH供应的重要来源之一。由IDP1基因编码的一种关键的NADP+依赖性脱氢酶也能够供应线粒体NADPH。通过对POS5单缺失体、IDP1单缺失体、POS... NADH激酶是辅酶NADP(H)从头合成的关键途径。酿酒酵母中由POS5基因编码的线粒体NADH激酶是线粒体NADPH供应的重要来源之一。由IDP1基因编码的一种关键的NADP+依赖性脱氢酶也能够供应线粒体NADPH。通过对POS5单缺失体、IDP1单缺失体、POS5IDP1双缺失体关键的表型研究,包括它们的生长性能、温度敏感性、对非发酵性碳源的利用能力、线粒体及细胞质内代表性氨基酸的合成性能,初步解析酿酒酵母线粒体中NADPH的主要供应方式及NADH激酶在线粒体中的功能。 展开更多
关键词 nadh激酶 NADPH 表型 酿酒酵母
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代谢工程改造Escherichia coli生产L-苹果酸 被引量：1
2
作者 董晓翔 陈修来 +1 位作者 刘立明 史仲平 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期269-275,共7页
为了高效生产L-苹果酸,首先在大肠杆菌w3110中敲除ldh A、pox B、pfl B和pta-ack A基因积累丙酮酸,为L-苹果酸合成提供前体,并且通过苹果酸酶的引入构建L-苹果酸一步合成路径,将丙酮酸转化为L-苹果酸.在此基础上,敲除frd BC、fum B和fum... 为了高效生产L-苹果酸,首先在大肠杆菌w3110中敲除ldh A、pox B、pfl B和pta-ack A基因积累丙酮酸,为L-苹果酸合成提供前体,并且通过苹果酸酶的引入构建L-苹果酸一步合成路径,将丙酮酸转化为L-苹果酸.在此基础上,敲除frd BC、fum B和fum AC阻断L-苹果酸代谢路径,并结合pos5基因的表达对胞内辅因子路径进行优化.结果表明:(1)ldh A、pox B、pfl B和pta-ack A基因的敲除能有效地提高丙酮酸产量到20.9 g/L;(2)苹果酸酶突变及过量表达使得L-苹果酸和琥珀酸产量分别提高了87.2%和31.6%,达到1.46 g/L和3.25 g/L;(3)通过敲除frd BC、fum B和fum AC,L-苹果酸产量增加到3.42 g/L;(4)pos5基因的表达降低了胞内NADH/NAD+比率,增加了NADPH含量,最终突变菌株Escherichia coli F0921的L-苹果酸产量达到9.34 g/L.因此,通过苹果酸酶构建L-苹果酸生物合成路径提高L-苹果酸的生产是可行的,结果可为代谢工程改造大肠杆菌生产L-苹果酸提供了新的研究思路. 展开更多
关键词 大肠杆菌 L-苹果酸 苹果酸酶 nadh激酶 代谢工程 基因敲除
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酿酒酵母POS5基因过表达对L-异亮氨酸合成的促进作用
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作者 李坤 还晓静 +1 位作者 史锋 王小元 《工业微生物》 CAS CSCD 2014年第4期28-32,共5页
L-异亮氨酸是人体必需氨基酸之一,具有很大的商业价值。在谷氨酸棒杆菌中,合成一分子L-异亮氨酸需要消耗四分子NADPH。因此,提高胞内NADPH浓度是提高L-异亮氨酸产量的重要手段之一。在乳糖发酵短杆菌JHI3-156中过量表达酿酒酵母的NADH... L-异亮氨酸是人体必需氨基酸之一,具有很大的商业价值。在谷氨酸棒杆菌中,合成一分子L-异亮氨酸需要消耗四分子NADPH。因此,提高胞内NADPH浓度是提高L-异亮氨酸产量的重要手段之一。在乳糖发酵短杆菌JHI3-156中过量表达酿酒酵母的NADH激酶编码基因POS5△MTS,发酵48 h表达菌株JHI3-156/pDXW-10-POS5△MTS的胞内NADP^+浓度增加了27μmol/L(17%),NADPH浓度增加了36μmol/L(96%);发酵72 h后L-异亮氨酸产量是(3.02±0.52)g/L,比对照菌(1.96±0.04)g/L提高了54%。本研究表明,过表达POS5△MTS基因能提高NADPH的供应,促进了L-异亮氨酸的生物合成。 展开更多
关键词 乳糖发酵短杆菌JHI3-156 nadh激酶 POS5AMTS L-异亮氨酸
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