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小反刍兽疫病毒N蛋白原核表达与间接ELISA检测方法的建立 被引量:15
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作者 孙雨 赵柏林 +7 位作者 王晓英 董浩 翟新验 曲萍 胡冬梅 杨天意 石慧 宋晓晖 《动物医学进展》 北大核心 2017年第1期6-10,共5页
小反刍兽疫病毒(PPRV)N蛋白是病毒粒子的主要结构蛋白,也是诊断小反刍兽疫的主要靶蛋白。为获得高效表达的可溶性N蛋白,并建立基于N蛋白的小反刍兽疫的间接ELISA检测方法,通过优化密码子、优化表达条件等条件探索,在大肠埃希菌表达系统... 小反刍兽疫病毒(PPRV)N蛋白是病毒粒子的主要结构蛋白,也是诊断小反刍兽疫的主要靶蛋白。为获得高效表达的可溶性N蛋白,并建立基于N蛋白的小反刍兽疫的间接ELISA检测方法,通过优化密码子、优化表达条件等条件探索,在大肠埃希菌表达系统中获得了高效表达的可溶性N蛋白,进一步基于N蛋白建立了间接ELISA检测方法,该方法对其他相关的羊类病原无交叉反应,其组内与组间变异系数均低于9%,具有良好的重复性。对480份临床血清样品进行检测,同时用法国IDVET竞争ELISA试剂盒进行比较,符合率达到98.33%。本研究为进一步开发成熟的小反刍兽疫抗体检测试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 小反刍兽疫 n活性蛋白 可溶性表达与纯化 间接酶联免疫吸附试验
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Efficient and Soluble Expression of N Protein of Peste Des Petits Ruminants Virus and Development of Indirect ELISA
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作者 Sun Yu Zhao Bolin +7 位作者 Wang Xiaoying Dong Hao Zhai Xinyan Qu Ping Hu Dongmei Yang Tianyi Shi Hui Song Xiaohui 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2017年第1期15-18,共4页
[ Objective] The paper was to get effective soluble N protein to establish indirect ELISA method for Peste des petits ruminants (PPR). [ Method] Soluble N protein with high expression was obtained from Escherichia c... [ Objective] The paper was to get effective soluble N protein to establish indirect ELISA method for Peste des petits ruminants (PPR). [ Method] Soluble N protein with high expression was obtained from Escherichia coli expression system through codon optimization and optimization of expression conditions, and indirect ELISA detection method based on N protein was further established. [ Result] The assay had no cross reaction with other sheep pathogens. The intra- and inter-batch variation coefficients were less than 9%, indicating the method had good repeatability. Furthermore, totally 480 clinical serum samples were detec- ted by the assay, and the agreement rate with commercial ELISA kit (IDVET) was 98.33%. [ Conclusion] The study laid a foundation for further development of mature PPRV antibody detection kits. 展开更多
关键词 Pestedes petits ruminants n active protein Soluble expression and purification Indirect ELISA
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运动对正常大鼠心肌JNK激活及MKP-1表达的影响 被引量:2
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作者 王颖 王晋明 +3 位作者 朱珊珊 李华 王芳 涂欣 《中华物理医学与康复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期2-4,共3页
目的 探讨运动对大鼠心肌c Jun氨基末端活化蛋白激酶 (JNK)活性及丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶 1(MKP 1)表达的影响 ,从JNK失活的角度探讨运动对心肌组织生长的影响。方法  14周龄雄性SD大鼠 40只 ,随机分为对照组、急性运动组和运动训... 目的 探讨运动对大鼠心肌c Jun氨基末端活化蛋白激酶 (JNK)活性及丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶 1(MKP 1)表达的影响 ,从JNK失活的角度探讨运动对心肌组织生长的影响。方法  14周龄雄性SD大鼠 40只 ,随机分为对照组、急性运动组和运动训练 1周组、2周组、3周组。采用运动平板进行运动训练 ,坡度为 10 % ,速度为 15m/min ,每次运动 3 0min。急性运动组仅运动 3 0min ;运动训练各组 ,每日 1次。采用免疫沉淀法检测左室心肌JNK活性 ,Westernblot检测MKP 1蛋白表达水平。结果 急性运动显著增加心肌p46JNK、p5 4JNK活性 ,分别为对照组的 2 .2 ,2 .6倍 ;MKP 1的表达水平与对照组相比有增加趋势 ,但无统计学意义。运动训练呈时间依赖性促进运动后心肌MKP 1表达水平、抑制JNK活化。结论 运动训练能增强正常大鼠心肌组织MKP 1的可诱导性 ,抑制JNK过度活化。 展开更多
关键词 运动 大鼠 心肌 JnK激活 MKP-1 表达
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阿司匹林抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖及p44/42MAPK的表达 被引量:1
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作者 刘振华 刘亚杰 +3 位作者 刘卉 欧阳平 赖文岩 许顶立 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 2005年第5期452-454,共3页
目的观察阿司匹林(ASA)对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞增殖和磷酸化p44/42丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)表达的影响。方法体外培养SD大鼠血管平滑肌细胞,应用不同浓度的ASA(1mmol/L、2mmol/L、5mmol/L及10mmol/L)分别作用并设立对照进行比... 目的观察阿司匹林(ASA)对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞增殖和磷酸化p44/42丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)表达的影响。方法体外培养SD大鼠血管平滑肌细胞,应用不同浓度的ASA(1mmol/L、2mmol/L、5mmol/L及10mmol/L)分别作用并设立对照进行比较,采用MTS/PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态,利用p44/42磷酸化抗MAPK抗体的蛋白免疫印迹法测定磷酸化p44/42MAPK蛋白表达。结果各组的细胞增殖率分别为对照组0.79±0.14;ASA1mmol/L组0.81±0.16;ASA2mmol/L组0.83±0.08;ASA5mmol/L组0.60±0.07;ASA10mmol/L组0.35±0.05。统计分析显示5mmol/L和10mmol/L的ASA分别能明显抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖(P<0.05)。ASA对大鼠血管平滑肌细胞的磷酸化p44/p42MAPK蛋白表达有显著的抑制作用(P<0.05)。结论ASA对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞增殖和磷酸化p44/42MAPK蛋白表达均有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 阿司匹林 平滑 血管 细胞分裂 丝裂素活化蛋白激酶
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磷酸化的JNK和p38在高温致神经管畸形上皮细胞中的表达变化
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作者 刘文静 张天亮 +3 位作者 冷昭廷 王力 于丽 张立明 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2013年第6期480-484,共5页
目的探讨高温致神经管畸形(neural tube defects,NTD)的分子机制,为防治神经管畸形提供理论依据。方法利用高温致金黄地鼠NTD动物模型,应用免疫荧光染色技术,观察NTD发生过程中磷酸化c-Jun氨基末端活化蛋白激酶(p-JNK)和磷酸化p38(p-p38... 目的探讨高温致神经管畸形(neural tube defects,NTD)的分子机制,为防治神经管畸形提供理论依据。方法利用高温致金黄地鼠NTD动物模型,应用免疫荧光染色技术,观察NTD发生过程中磷酸化c-Jun氨基末端活化蛋白激酶(p-JNK)和磷酸化p38(p-p38)在胚胎神经管上皮的表达变化。结果 p-JNK和p-p38的免疫阳性产物表达于胚胎神经管上皮细胞及其周围间充质细胞的胞浆中,高温后不同时间点胚胎神经管上皮细胞内的p-JNK和p-p38的表达量均较对照组减弱。结论磷酸化JNK和p38参与了神经管的正常发育,其表达量降低可能是高温致NTD发生的重要途径之一。 展开更多
关键词 神经管畸形 高温 JnK P38 金黄地鼠
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