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淫羊藿苷对体外培养骨髓基质干细胞成骨性分化的影响 被引量：38
1
作者 陈克明 葛宝丰 +4 位作者 马慧萍 刘兴炎 白孟海 马丽萍 吕明波 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2008年第9期642-645,632,共5页
目的研究淫羊藿苷对体外培养骨髓基质干细胞增殖与成骨性分化的影响,了解其是否具有促进骨形成活性。方法将10-8、10-7、10-6、10-5和10-4mol/L 5种浓度的淫羊藿苷分别加入原代培养大鼠骨髓基质干细胞(rBMSCs)中,采用MTT法分析细胞增殖... 目的研究淫羊藿苷对体外培养骨髓基质干细胞增殖与成骨性分化的影响,了解其是否具有促进骨形成活性。方法将10-8、10-7、10-6、10-5和10-4mol/L 5种浓度的淫羊藿苷分别加入原代培养大鼠骨髓基质干细胞(rBMSCs)中,采用MTT法分析细胞增殖情况。在成骨性诱导培养条件下,比较淫羊藿苷组和不加药的对照组间在碱性磷酸酶阳性克隆数(CFU-FALP)、碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素分泌量、钙盐沉积量和钙化结节数等方面的差异,采用RT-PCR和实时荧光定量PCR分析成骨性分化的标志蛋白和细胞因子的基因表达差异。结果淫羊藿苷无促进细胞增殖活性,但10-5mol/L及更高浓度抑制细胞增殖。10-5mol/L淫羊藿苷强烈促进原代培养rBMSCs的成骨性分化,表现在加药组的CFU-FALP数量、胞内ALP活性、骨钙素分泌量、钙盐沉积量和钙化结节数等在培养不同阶段均高于或显著高于对照组,包括骨涎蛋白、骨桥素、类胰岛素-I和BMP2等在内的多种标志蛋白和细胞因子基因表达水平也显著提高。结论淫羊藿苷强烈促进骨髓基质干细胞的成骨性分化,表明其具有促进骨形成生理活性。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 骨髓基质干细胞 成骨性分化 增殖
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骨髓间充质干细胞复合骨形态发生蛋白和纤维蛋白修复节段性骨缺损 被引量：2
2
作者 陈克明 葛宝丰 +3 位作者 刘兴炎 白孟海 王勇 高梅 《骨与关节损伤杂志》 2004年第12期820-822,共3页
目的　用自体骨髓间充质干细胞 (MSCs)、骨形态发生蛋白 (BMP)和纤维蛋白的复合物修复骨缺损。方法　抽取兔自体骨髓并分离和大量培养MSCs。在 12只MSCs供体兔的两侧桡骨中段造成 1 5cm缺损 ,一侧植入自体MSCs、 15mgBMP和纤维蛋白的复... 目的　用自体骨髓间充质干细胞 (MSCs)、骨形态发生蛋白 (BMP)和纤维蛋白的复合物修复骨缺损。方法　抽取兔自体骨髓并分离和大量培养MSCs。在 12只MSCs供体兔的两侧桡骨中段造成 1 5cm缺损 ,一侧植入自体MSCs、 15mgBMP和纤维蛋白的复合物 (B +M +F) ,另一侧植入自体MSCs与纤维蛋白的复合物 (M +F)。另一组等数量实验兔造成相同缺损后 ,一侧植入 15mgBMP与纤维蛋白的复合物 (B +M ) ,另一侧留作空白对照。术后第 2 ,4 ,8周做放射学、组织学和ECT检查。结果　B +M +F组在术后 2周即产生填满缺损区的骨痂影 ,8周时骨缺损得到良好修复。B +M组所产生骨痂量和修复效果均不如B +M +F组 ,但优于M +F组。结论　用自体骨髓间充质干细胞复合骨形态发生蛋白和纤维蛋白修复骨缺损是一种切实可行和有效的方法。 展开更多
关键词 纤维蛋白 骨形态发生蛋白 节段性骨缺损 植入 自体骨髓 修复 骨痂 骨髓间充质干细胞 复合物 BMP
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骨髓间充质干细胞对小鼠动脉粥样硬化炎性反应的影响
3
作者 王治校 郑晓新 +4 位作者 王崇全 李晓艳 冯高科 朱红玲 蒋学俊 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2015年第3期201-205,共5页
目的 研究骨髓间充质干细胞（MSC）对小鼠动脉粥样硬化炎性反应的影响.方法 分离培养载脂蛋白E基因敲除（ApoE-/-）小鼠的骨髓MSC并进行鉴定.36只小鼠随机数字法分为3组：阴性对照（Neg）组（n=12）,阳性对照（Pos）组（n=12）和MSC移植... 目的 研究骨髓间充质干细胞（MSC）对小鼠动脉粥样硬化炎性反应的影响.方法 分离培养载脂蛋白E基因敲除（ApoE-/-）小鼠的骨髓MSC并进行鉴定.36只小鼠随机数字法分为3组：阴性对照（Neg）组（n=12）,阳性对照（Pos）组（n=12）和MSC移植（MSC）组（n=12）,3组小鼠均予高脂饮食喂养12周制作动脉粥样硬化动物模型.Pos组和MSC组小鼠分别经尾静脉注入DMEM培养液和MSC,每3周注射1次,持续12周.实验结束时处死小鼠,取小鼠脾脏、主动脉根部淋巴结组织和外周血检测CD4＋CD25＋调节性T细胞百分比和功能,免疫荧光组织化学检测主动脉根部斑块组织淋巴细胞和巨噬细胞浸润.酶联免疫吸附法（ELISA）检测3组小鼠血清高敏C反应蛋白（hs-CRP）、基质金属蛋白酶1（MMP-1）、干扰素γ（IFN-γ）、转化生长因子β（TGF-β）和白细胞介素10（IL-10）水平.结果 与Neg组、Pos组比较,MSC组小鼠脾脏及淋巴结组织CD4＋CD25＋/CD4＋比例显著升高,且脾脏Foxp3＋CD25＋/CD4＋比例也显著增加（均P＜0.05）.MSC组调节性T细胞抑制效应性T细胞增殖的能力显著增加.与Neg组、Pos组比较,MSC组小鼠血清TGF-β和IL-10水平升高,而IFN-γ、hs-CRP和MMP-1水平显著降低（均P＜0.05）.免疫荧光组织化学检测显示各组小鼠斑块组织中淋巴细胞和巨噬细胞浸润无明显差异.结论 MSC对动脉粥样硬化炎性反应具有抑制作用. 展开更多
关键词 间充质干细胞 动脉粥样硬化 调节性T细胞 炎症
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淫羊藿苷对大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响 被引量：20
4
作者 蒋绍艳 宋丹妮 +1 位作者 史玉朋 常宏 《海南医学院学报》 CAS 2009年第10期1198-1200,共3页
目的:探讨淫羊藿苷对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法:采用差速贴壁法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞仪鉴定表面标志。取第3代细胞加入10-6mol/L淫羊藿苷培养基,对照组仅加入等量普通培养基进行培养。通过镜下观... 目的:探讨淫羊藿苷对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法:采用差速贴壁法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞仪鉴定表面标志。取第3代细胞加入10-6mol/L淫羊藿苷培养基,对照组仅加入等量普通培养基进行培养。通过镜下观察细胞形态,流式细胞仪测定细胞表面标志,碱性磷酸酶试剂盒测定诱导细胞碱性磷酸酶活性,组织化学染色观察钙化结节形成能力。结果:体外培养的细胞表达CD29、CD44、CD105、CD166。淫羊藿苷诱导组细胞碱性磷酸酶呈阳性反应并有钙化结节形成,而对照组未见钙化结节形成。结论:淫羊藿苷能够诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,可视为一种良好的骨诱导活性因子。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 骨髓间充质干细胞 成骨分化
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纤维蛋白用做骨组织工程载体并修复骨缺损 被引量：11
5
作者 陈克明 葛宝丰 +2 位作者 刘兴炎 白孟海 王勇 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第16期1241-1243,共3页
[目的]研究将纤维蛋白用做骨组织工程的载体材料。[方法]将兔骨髓基质干细胞(BMSCs)在体外大量培养扩增后,与同种兔纤维蛋白制成凝胶复合物,对复合物进行成骨性诱导培养,观察细胞增殖与分化情况。进而将含自体BMSCs的复合物填充于兔桡... [目的]研究将纤维蛋白用做骨组织工程的载体材料。[方法]将兔骨髓基质干细胞(BMSCs)在体外大量培养扩增后,与同种兔纤维蛋白制成凝胶复合物,对复合物进行成骨性诱导培养,观察细胞增殖与分化情况。进而将含自体BMSCs的复合物填充于兔桡骨节段性缺损区,观察其对骨缺损的修复效果。[结果]BMSCs与纤维蛋白复合物在体外培养条件下可保持完整形状、细胞大量增殖,并发生成骨性分化和分泌钙盐。植入复合物的骨缺损区修复效果显著优于植入单纯纤维蛋白。[结论]纤维蛋白可为BMSCs提供良好的增殖与分化环境,二者复合物可用于组织工程法修复骨缺损。 展开更多
关键词 骨髓基质干细胞 纤维蛋白 载体 组织工程 骨缺损区 修复效果 组织工程载体 蛋白复合物 体外培养条件 增殖与分化
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陇中损伤散含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞增殖与成骨性分化的影响 被引量：12
6
作者 李盛华 叶丙霖 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2010年第3期4-7,共4页
目的:研究不同浓度的陇中损伤散含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖与成骨性分化的影响。方法:取三月龄wistar大鼠骨髓,分离BMSCs进行原代培养,在第一次换液后分别加入2%,5%,10%的陇中损伤散含药血清,通过倒置显微镜观察细胞形... 目的:研究不同浓度的陇中损伤散含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖与成骨性分化的影响。方法:取三月龄wistar大鼠骨髓,分离BMSCs进行原代培养,在第一次换液后分别加入2%,5%,10%的陇中损伤散含药血清,通过倒置显微镜观察细胞形态变化,MTT法测量骨髓间充质干细胞增殖情况;偶氮偶合法进行碱性磷酸酶阳性克隆(CFU-FALP)组织化学染色,vonKossa染色法测定钙化结节数目,免疫细胞化学技术检测Ⅰ型胶原表达;于不同时间进行ALP活性及钙盐沉积量的测定。结果:陇中损伤散含药血清对BMSCs的影响呈剂量依赖性,其中以浓度为10%时作用最强。MTT结果显示陇中损伤散含药血清能明显促进BMSCs增殖;损伤散含药血清还能显著促进其成骨性分化。结论::陇中损伤散活性代谢产物能促进BMSCs的增殖和成骨性分化;陇中损伤散对骨髓间充质干细胞的这种作用可能是其促进骨折愈合、防治骨质疏松的细胞学机制之一。 展开更多
关键词 陇中损伤散 合药血清 骨髓间充质干细胞 增殖 成骨性分化
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