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胃动素受体激动剂对肠肌间神经元内钙的影响 被引量:8
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作者 杨侠 董蕾 杨希恩 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期760-763,共4页
目的探讨胃动素受体激动剂对体外培养大鼠肠肌间神经元内钙的影响。方法采用免疫荧光标记技术鉴定原代培养的肠肌间神经元;应用钙离子(Ca2+)指示剂Fluo-3/AM作为细胞内Ca2+的荧光探针,对负载培养的神经元,应用激光共聚焦显微镜技术检测... 目的探讨胃动素受体激动剂对体外培养大鼠肠肌间神经元内钙的影响。方法采用免疫荧光标记技术鉴定原代培养的肠肌间神经元;应用钙离子(Ca2+)指示剂Fluo-3/AM作为细胞内Ca2+的荧光探针,对负载培养的神经元,应用激光共聚焦显微镜技术检测胃动素及红霉素引起的单个神经元内Ca2+荧光强度(FI)的变化。结果胃动素和红霉素引起的神经元内Ca2+浓度变化为:(1)在Hank's液中,胃动素浓度为10-8、10-7、10-6mol/L时,神经元内Ca2+浓度逐渐升高,其峰高(峰值减去静息值)分别为10.6±2.1、15.9±1.2、30.6±3.7,相邻两组间存在显著性差异(P<0.05)。FI相对变化百分比分别为(40.1±6.3)%、(63.0±11.2)%、(100.8±18.4)%,相邻两组间存在显著性差异(P<0.05),且呈明显剂量依赖性。(2)在Hank's液中,10μg/ml红霉素可引起神经元内Ca2+浓度升高,其峰高为23.2±5.6,FI相对变化百分数为(82.8±13.0)%。(3)当用胃动素受体的抗体孵育后,再加入10μg/ml红霉素,其胞内Ca2+浓度的升高几乎完全被抑制。结论胃动素和红霉素均可引起体外培养肠肌间神经元的功能应答。胃动素可明显升高肠肌间神经元内Ca2+浓度,且呈剂量依赖性;红霉素可作用于肠肌间神经元胃动素受体引起胞内Ca2+浓度的升高。 展开更多
关键词 胃动素 胃动素受体 红霉素 肠肌间神经元
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溃疡性结肠炎大鼠结肠肌层突触小体相关蛋白25的表达变化 被引量:2
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作者 商博鑫 董蕾 +2 位作者 史海涛 王华 杨素贞 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第20期3270-3276,共7页
目的:观察溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠结肠肌层分子量为25 kDa的突触小体相关蛋白(synaptosomal associated protein of 25kDa,SNAP-25)的表达情况.方法:应用2,4-二硝基苯磺酸(2,4-dinitrobenzene sulfonic acid,DNBS)灌... 目的:观察溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠结肠肌层分子量为25 kDa的突触小体相关蛋白(synaptosomal associated protein of 25kDa,SNAP-25)的表达情况.方法:应用2,4-二硝基苯磺酸(2,4-dinitrobenzene sulfonic acid,DNBS)灌肠的方法制作大鼠UC模型,免疫组织化学评估结肠肌层SNAP-25标记的神经轴突的密度,Western blot半定量检测肌层SNAP-25含量,HE染色法评价结肠炎症状态,生化检测方法评价结肠匀浆髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活力、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力及丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量的变化,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测白介素1円(interleukin1円,IL-1円)含量的变化.结果:在DNBS诱导的UC大鼠,结肠肌层中SNAP-25标记的轴突密度减小为对照的22.60%(23.76个/百个平滑肌细胞±13.24个/百个平滑肌细胞vs 5.37个/百个平滑肌细胞±1.96个/百个平滑肌细胞,P<0.01),肠道肌层SNAP-25蛋白表达量减少为对照组的34.31%(P<0.01).与对照组相比,结肠组织中MPO活力增高(1.91 U/g wet weight±0.58U/g wet weight vs 0.99 U/g wet weight±0.21U/g wet weight,P<0.01),SOD活力显著降低(4.11 U/mg protein±1.80 U/mg protein vs 9.01U/mg protein±2.17 U/mg protein,P<0.01),MDA含量增高(1.72 nmol/mg protein±0.28nmol/mg protein vs 1.11 nmol/mg protein±0.27 nmol/mg protein,P<0.01),IL-1円表达量增高(181.51 pg/mg protein±55.30 pg/mg protein vs 84.27 pg/mg protein±42.27 pg/mg protein,P<0.01).结论:DNBS诱导的UC大鼠的结肠肌层SNAP-25蛋白表达量明显减少,肠道组织炎症及氧化应激水平增高可能是其重要原因之一. 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 肠肌间神经元 突触小体相关蛋白25 炎症 氧化应激
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Effect of motilin and erythromycin on intracellular Ca2+ mobilization in rat myenteric neurons in culture
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作者 杨侠 董蕾 杨希恩 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2006年第3期148-152,共5页
Objective: To investigate the effects of motilin and erythromycin on intracellular Ca2+ mobi-lization in cultured myenteric neurons of rats. Methods: The cultured myenteric neurons were identified with immunofluoresce... Objective: To investigate the effects of motilin and erythromycin on intracellular Ca2+ mobi-lization in cultured myenteric neurons of rats. Methods: The cultured myenteric neurons were identified with immunofluorescence staining technique. Motilin-induced and erythromycin-induced intracellular Ca2+ mobilization was studied in primary cultures of myenteric neurons using the ratiometric Ca2+ indicator Furo3/AM, with a laser confocal microscope. Results: The effects of motilin and erythromycin on intracellular Ca2+ mobilization were as follows: (1)In Hank's solution, 10 -8, 10-7, 10-6 mol/L motilin could elevate intracellular Ca2+ concentration ([Ca2+]i)in a dose-dependent manner. (2) In Hank's solution, 10μg/ ml erythromycin also could induce the elevation of [Ca2+]i. (3) After pretreatment with antibody against the motilin receptor in Hank's solution, the Ca2+ response to erythromycin was almost restricted. Conclusion: It is suggested that motilin could increase [Ca2+]i in myenteric neurons in a dose-dependent manner, and erythromycin may also have this effectivenesss by binding to the motilin receptor. 展开更多
关键词 MOTILIN motilin receptor erythromycin myenteric neuron Ca^2+
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伴有胃肠动力障碍的重症急性胰腺炎大鼠结肠肠肌间神经丛一氧化氮合成酶神经元的变化 被引量:15
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作者 刘颖 林中 +1 位作者 胡琼花 郑清华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期274-277,共4页
目的观察伴有胃肠动力障碍的重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠结肠肠神经系统(enteric nervous system,ENS)肌间神经丛一氧化氮合成酶(nitric oxide synthase,NOS)神经元的变化,以探讨SAP胃肠动力障碍的神经机制。方... 目的观察伴有胃肠动力障碍的重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠结肠肠神经系统(enteric nervous system,ENS)肌间神经丛一氧化氮合成酶(nitric oxide synthase,NOS)神经元的变化,以探讨SAP胃肠动力障碍的神经机制。方法20只SD大鼠随机均分为假手术组和SAP组,逆行胰胆管穿刺逆行注射5%牛磺胆酸钠制作SAP模型。检测腹部X线、小肠推进比,胰腺病理评分。制作肌间神经丛全层标本,应用双重免疫荧光染色法观察NOS神经元的形态及占总神经元的百分比。结果与假手术组相比,SAP组大鼠肠管明显扩张,SAP组小肠推进比显著降低(P<0.01),胰腺病理评分明显增高(P<0.01),NOS神经元胞体大而染色深,结间束NOS神经纤维粗大,NOS神经元比例为(40.74±5.15)%明显高于假手术组(P<0.01)。结论结肠肌间丛NOS神经元表达增多可能是大鼠SAP胃肠动力障碍神经机制之一。 展开更多
关键词 重症急性胰腺炎 胃肠动力障碍 肠神经系统 肌间神经丛 一氧化氮合成酶神经元
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大鼠肠肌间神经元胃动素受体的表达及胃动素引起神经元内钙信号的机制 被引量:8
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作者 杨侠 董蕾 杨浩 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期683-686,共4页
目的观察大鼠肠肌间神经元胃动素受体(MTLR)的表达,并探讨胃动素引起神经元内钙信号的机制。方法采用免疫荧光双标技术观察大鼠肠肌间神经元MTLR的表达;应用激光共聚焦显微镜技术检测不同药物处理组胃动素引起的单个神经元内Ca2+荧光强... 目的观察大鼠肠肌间神经元胃动素受体(MTLR)的表达,并探讨胃动素引起神经元内钙信号的机制。方法采用免疫荧光双标技术观察大鼠肠肌间神经元MTLR的表达;应用激光共聚焦显微镜技术检测不同药物处理组胃动素引起的单个神经元内Ca2+荧光强度的变化。结果大鼠肠肌间神经元呈MTLR免疫反应阳性表达;在Hank's液中,10-6mol/L胃动素可引起神经元内Ca2+浓度的显著升高,其峰高(峰值减去静息值)为30.6±3.7,荧光强度相对变化百分比为(100.8±18.4)%。在D-Hank's液(去除细胞外Ca2+)中或用L型钙离子通道阻断剂维拉帕米预处理细胞后,胃动素可轻度升高胞内Ca2+浓度。与单独应用胃动素组相比差异有统计学意义(P<0.05)。当分别用G蛋白拮抗剂NEM和PLC抑制剂Compound48/80预处理细胞后再加入胃动素,胞内Ca2+浓度升高的程度明显降低,与单独应用胃动素组相比差异有统计学意义(P<0.05)。当用PKC抑制剂D-鞘氨醇预处理细胞后,再加入胃动素,其峰高和荧光强度相对变化百分比同单独应用胃动素组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论大鼠肠肌间神经元能自身表达MTLR。胃动素可明显升高神经元内Ca2+浓度,胞内Ca2+浓度的升高既源于外钙的内流又源于内钙的释放。外钙的内流主要通过L型Ca2+通道,G蛋白偶联型MTLR-PLC-IP3途径参与细胞内钙的释放。 展开更多
关键词 胃动素 胃动素受体 肠肌间神经元 钙信号
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仔猪小肠肌间神经丛NDP阳性神经元形态的定量研究 被引量:6
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作者 张原 滕可导 +3 位作者 张晗 赵琪 王瑞玲 李莲军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期705-710,共6页
采用小肠铺片NADPH黄递酶组化染色和细胞影像分析的方法对0、5、28日龄的仔猪小肠肌间神经丛神经元群体的形态参数进行定量测定。结果表明:随日龄增长,小肠肌间神经元胞体面积增大,出生后的头几天尤为明显。NDP阳性肌间神经元胞核面积... 采用小肠铺片NADPH黄递酶组化染色和细胞影像分析的方法对0、5、28日龄的仔猪小肠肌间神经丛神经元群体的形态参数进行定量测定。结果表明:随日龄增长,小肠肌间神经元胞体面积增大,出生后的头几天尤为明显。NDP阳性肌间神经元胞核面积平均值与胞体面积平均值呈正相关。胞体面积平均值在0日龄为234.98±23.48μm2,5日龄为346.30±33.07μm2,28日龄为364.17μm2;胞核面积平均值在0日龄为69.85±6.27μm2,5日龄为88.25±2.39μm2,28日龄为84.15μm2。核质比随日龄呈下降趋势,核质比在0日龄为0.298±0.003,5日龄为0.257±0.027,28日龄为0.231。上述测量值不仅表现出日龄差异,而且在同一日龄小肠的前后段亦有所不同。NDP阳性神经元胞体和胞核大小都以十二指肠最大,空肠前段次之,回肠最小。0日龄仔猪神经元胞体面积分布在100~300μm2之间的占70.79%,5日龄和28日龄胞体面积分布在100~400μm2之间的分别占64.81%和63.22%。肌间神经丛NDP阳性神经元主要为Dogiel 型神经元。 展开更多
关键词 小肠 阳性神经元 肌间神经丛 NDP 出生后 组化染色 回肠 日龄 仔猪 核质
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多巴胺受体在大鼠胃体肌间神经丛氮能神经元的定位 被引量:3
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作者 樊瑞芳 郑丽飞 +3 位作者 冯小燕 张晓丽 张悦 朱进霞 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第3期426-431,共6页
目的研究5种多巴胺受体在大鼠胃体肌间神经丛一氧化氮能神经元的分布。方法本文主要采用冰冻切片和全层铺片的免疫荧光组织化学方法观察胃体肌间神经丛中多巴胺受体的分布,以及与一氧化氮能神经元的共定位情况。结果 5种多巴胺受体亚型... 目的研究5种多巴胺受体在大鼠胃体肌间神经丛一氧化氮能神经元的分布。方法本文主要采用冰冻切片和全层铺片的免疫荧光组织化学方法观察胃体肌间神经丛中多巴胺受体的分布,以及与一氧化氮能神经元的共定位情况。结果 5种多巴胺受体亚型的免疫荧光和一氧化氮合酶的免疫荧光在胃体肌间神经丛均有分布,而且在一氧化氮合酶免疫阳性的神经元上存在有多巴胺受体D_1、D_2、D_3和D_5的免疫阳性,而D_4没有明显的免疫阳性表达。结论多巴胺受体D_1、D_2、D_3和D_5分布在胃体肌间神经丛一氧化氮能神经元上,可能通过调节一氧化氮的合成和释放进而调节胃体平滑肌的运动。 展开更多
关键词 多巴胺受体 胃肌间神经丛 一氧化氮能神经元
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犬和大鼠回肠壁丛内5-羟色胺能神经元免疫组织化学观察
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作者 邓成国 林传友 +2 位作者 殷光甫 茹立强 李林 《解剖学研究》 CAS 2003年第1期47-49,T006,共4页
目的 观察犬和大鼠回肠壁丛内 5 羟色胺能神经元。方法 应用 5 羟色胺 (5 HT)抗体的免疫组织化学改良法对正常小狗 (5只 )回肠切片标本、正常大鼠 (8只 )和 5 羟色胺酸前处理大鼠 (4只 )回肠外纵肌全层铺片标本内含 5 HT免疫反应... 目的 观察犬和大鼠回肠壁丛内 5 羟色胺能神经元。方法 应用 5 羟色胺 (5 HT)抗体的免疫组织化学改良法对正常小狗 (5只 )回肠切片标本、正常大鼠 (8只 )和 5 羟色胺酸前处理大鼠 (4只 )回肠外纵肌全层铺片标本内含 5 HT免疫反应性 (5 HT IR)神经元进行了观察研究。结果 正常大鼠回壁内神经节 (丛 )内可见少数 5 HT IR核周体 ,及肠肌丛周围和节间束中含有丰富的 5 HT IR纤维。 5 羟色胺酸 (5 HTP)处理后大鼠与正常鼠相比较 ,回肠壁丛内 5 HT IR胞体和带膨体纤维的可见数稍多 ,及免疫反应性增强。正常狗远端内 5 HT IR神经元胞体和纤维非常丰富 5 HT IR基础丛内有 1~ 4个 5 HT IR神经元胞体。结论 本研究对犬和大鼠肠内 5 HT能神经元的存在提供了直接的形态学证据 ,肠 5 展开更多
关键词 大鼠 回肠壁丛 5-羟色胺能神经元 免疫组织化学 回肠切片标本 胃肠运动
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