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基于核壳荧光纳米颗粒的一种新型纳米pH传感器 被引量:9
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作者 段菁华 王柯敏 +6 位作者 何晓晓 谭蔚泓 刘斌 何春梅 莫远尧 黄杉生 李杜 《湖南大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第2期1-5,15,共6页
改进了一种基于新型的荧光染料——二氧化硅的核壳荧光纳米颗粒的纳米 p H传感器 ,以异硫氰酸荧光素 ( FITC)标记的羊抗人免疫球蛋白 Ig G为核材料 ,采用实验条件简单的油包水的微乳液方法制备荧光纳米颗粒 ,该方法有效地防止了荧光染... 改进了一种基于新型的荧光染料——二氧化硅的核壳荧光纳米颗粒的纳米 p H传感器 ,以异硫氰酸荧光素 ( FITC)标记的羊抗人免疫球蛋白 Ig G为核材料 ,采用实验条件简单的油包水的微乳液方法制备荧光纳米颗粒 ,该方法有效地防止了荧光染料在二氧化硅壳层中的泄露 .这种 FITC的核壳荧光纳米颗粒对 p H敏感 ,在 p H值 5 .5~ 7之间呈线性响应 ,且能被单个小鼠巨噬细胞吞噬 ,借此用于单细胞中 p 展开更多
关键词 油包水微乳液 核壳荧光纳米颗粒 PH传感器 小鼠巨噬细胞
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鳞柄小奥德蘑多糖对巨噬细胞免疫功能的调节作用 被引量:5
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作者 王晶 史琪 +3 位作者 随晶晶 常世民 杜娟 闫训友 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期845-850,892,共7页
研究鳞柄小奥德蘑多糖对小鼠巨噬细胞的免疫调节作用。采用灌洗腹腔法收集小鼠巨噬细胞,建立其体外培养体系;采用鸡血红细胞法、荧光探针标记、总一氧化氮检测和酶联免疫吸附试验等方法分别检测巨噬细胞吞噬能力、NO合成量、肿瘤坏死因... 研究鳞柄小奥德蘑多糖对小鼠巨噬细胞的免疫调节作用。采用灌洗腹腔法收集小鼠巨噬细胞,建立其体外培养体系;采用鸡血红细胞法、荧光探针标记、总一氧化氮检测和酶联免疫吸附试验等方法分别检测巨噬细胞吞噬能力、NO合成量、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1、白细胞介素-6和白细胞介素-12等的分泌量。结果显示,与空白对照组相比,鳞柄小奥德蘑多糖能显著增强体外培养和腹腔内巨噬细胞的吞噬能力和NO合成量,增加体外培养的小鼠巨噬细胞对肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1、白细胞介素-6和白细胞介素-12等细胞因子的分泌量。因此,鳞柄小奥德蘑多糖可能通过提高细胞对NO和多种免疫相关信号分子的分泌量,增强细胞的吞噬能力,进而调节小鼠巨噬细胞的免疫功能。 展开更多
关键词 鳞柄小奥德蘑 多糖 巨噬细胞 细胞因子 免疫调节
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芹菜素抑制脂多糖诱导小鼠巨噬细胞分泌炎症介质的分子机制 被引量:5
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作者 吴广 符平 +1 位作者 周玉生 周润梅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期753-757,共5页
目的:观察芹菜素对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞分泌炎症介质的影响,并探讨其分子机制。方法:体外培养小鼠巨噬细胞RAW 264.7,用不同浓度的芹菜素处理后,加入LPS刺激。Western blot检测血红素氧合酶-1(HO-1)、环氧化酶-2(COX-2)、诱导... 目的:观察芹菜素对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞分泌炎症介质的影响,并探讨其分子机制。方法:体外培养小鼠巨噬细胞RAW 264.7,用不同浓度的芹菜素处理后,加入LPS刺激。Western blot检测血红素氧合酶-1(HO-1)、环氧化酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合成酶(i NOS)的表达以及p38和IκB的磷酸化;比色法检测亚硝酸盐和硝酸盐(NOx)的含量;ELISA检测PGE2的产生;报告基因分析芹菜素对NF-κB激活的影响。结果:芹菜素可显著诱导RAW 264.7细胞表达HO-1,采用p38抑制剂SB203580预处理细胞后,可抑制芹菜素诱导的HO-1表达;同时,芹菜素能降低胞浆内核转录因子Nrf2含量,并增高其在细胞核内水平;采用si RNA干扰Nrf2表达后,HO-1表达量降低。此外,芹菜素也能抑制LPS诱导RAW264.7细胞产生NOx和PGE2,下调COX-2和i NOS表达,以及抑制IκB磷酸化和NF-κB激活。而用HO-1 si RNA转染后,能在一定程度上抑制芹菜素的上述效应。结论:芹菜素可能通过诱导HO-1表达、抑制NF-κB的激活而发挥抗炎症作用。 展开更多
关键词 芹菜素 血红素氧合酶-1 小鼠巨噬细胞
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牙周炎患者自身组织核酸刺激小鼠巨噬细胞后对破骨相关因子mRNA表达的影响 被引量:2
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作者 丁子清 申玉芹 +4 位作者 周岳 刘引 高涵 于海蛟 林崇韬 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期192-196,共5页
目的检测牙周炎患者自身组织核酸刺激巨噬细胞后破骨相关因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-12(IL-12)p35、IL-12p40、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、活化T细胞核因子1(NFATc1)、核激活因子κB受体(RANK)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的... 目的检测牙周炎患者自身组织核酸刺激巨噬细胞后破骨相关因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-12(IL-12)p35、IL-12p40、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、活化T细胞核因子1(NFATc1)、核激活因子κB受体(RANK)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达,观察牙周炎患者自身组织核酸对巨噬细胞向破骨细胞分化的影响作用。方法采集翻瓣术中慢性牙周炎患者炎症牙周组织及正畸患者健康牙拔除术获取的健康牙周组织,提取组织总RNA逆转录cDNA。培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,加入质量浓度1μg·mL-1的特定序列寡核苷酸MT01共孵育3 h后(以1μg·mL-1的PBS作为对照),加入已提取的炎症牙周组织及健康牙周组织cDNA(质量浓度为1μg·mL-1)。实验分4组:健康组织cDNA,炎症组织cDNA,MT01+健康组织cDNA,MT01+炎症组织cDNA。4组细胞分别孵育3、6、12、24 h,采用实时定量聚合酶链反应法检测破骨相关因子IL-6、IL-12p35、IL-12p40、MMP-9、NFATc1、RANK及TNF-αmRNA的表达,进行两两组间比较。结果牙周炎患者自身组织核酸可上调RAW264.7破骨相关因子IL-6、IL-12p35、IL-12p40、MMP-9、NFATc1、RANK及TNF-αmRNA的表达;在免疫抑制剂MT01的作用下,牙周炎患者自身组织核酸上调RAW264.7内破骨相关因子mRNA的表达状况受到抑制。结论牙周炎患者自身组织核酸可以影响小鼠巨噬细胞向破骨细胞的分化。 展开更多
关键词 特定序列寡核苷酸MT01 牙周炎患者自身组织核酸 破骨相关因子 小鼠巨噬细胞
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虫草素诱导巨噬细胞表达血红素氧合酶-1负向调控细胞因子分泌 被引量:2
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作者 李旎 刘玮 +2 位作者 赵兰华 阳帆 李冉辉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第8期1250-1254,共5页
目的:研究虫草素(cordycepin)负向调控脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞分泌细胞因子的分子机制。方法:体外培养小鼠巨噬细胞RAW 264.7,用不同浓度的虫草素处理后,加入LPS刺激8 h。ELISA检测TNF-α、IL-6和IL-12的产生及细胞核内p65的含量;W... 目的:研究虫草素(cordycepin)负向调控脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞分泌细胞因子的分子机制。方法:体外培养小鼠巨噬细胞RAW 264.7,用不同浓度的虫草素处理后,加入LPS刺激8 h。ELISA检测TNF-α、IL-6和IL-12的产生及细胞核内p65的含量;Western blot检测血红素氧合酶-1(HO-1)的表达以及IκB和p38的磷酸化;免疫荧光检测核转录因子Nrf2的核转位。结果:1~30μg/m L虫草素预处理RAW 264.7细胞后,可明显减少LPS处理后TNF-α、IL-6和IL-12的分泌,同时也能降低细胞核内NF-κB亚基p65含量以及IκB的磷酸化。此外,不同浓度的虫草素也能诱导RAW264.7细胞表达HO-1,并能诱导p38磷酸化以及Nrf2核转位。采用p38抑制剂SB203580预处理,或采用Nrf2 si RNA沉默其表达后,HO-1表达水平明显降低。而采用HO-1抑制剂处理后可逆转虫草素对细胞因子的抑制效应。结论:虫草素可能通过下调NF-κB的活性、激活p38和Nrf2诱导HO-1表达,最终发挥其抗炎效应。 展开更多
关键词 虫草素 血红素氧合酶-1 小鼠巨噬细胞
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布鲁氏菌侵染对类泛素SUMO-1表达的影响及类泛素SUMO-1慢病毒表达载体的构建 被引量:1
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作者 李启峰 丁金花 +2 位作者 窦文静 张辉 陈创夫 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第6期1422-1429,共8页
研究布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7后类泛素SUMO-1的表达变化,并构建小鼠类泛素SUMO-1基因过表达的慢病毒载体。本试验分别利用布鲁氏菌16M、M5-90侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7,利用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测细胞中... 研究布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7后类泛素SUMO-1的表达变化,并构建小鼠类泛素SUMO-1基因过表达的慢病毒载体。本试验分别利用布鲁氏菌16M、M5-90侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7,利用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测细胞中类泛素SUMO-1的表达;利用DNA重组技术将类泛素SUMO-1基因片段插入到慢病毒表达载体pLEX-MCS中,获得重组慢病毒质粒pLEX-SUMO-1,测序鉴定成功后转染293T细胞,包装好的慢病毒感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,并利用实时荧光定量PCR、Western blotting方法分别检测细胞中类泛素SUMO-1mRNA及蛋白表达水平。结果表明,布鲁氏菌16M、M5-90侵染细胞后,在感染早期类泛素SUMO-1的表达受到抑制,12h内呈现下降趋势,在12h后开始上升,极显著高于正常水平(P<0.01);测序结果证明,类泛素SUMO-1基因正确插入到pLEX-MCS质粒中;实时荧光定量PCR方法检测表明,类泛素SUMO-1mRNA转录水平上调。由此可见,布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7能够引起细胞内类泛素SUMO-1表达的改变;成功构建了类泛素SUMO-1慢病毒过表达载体,为进一步研究类泛素SUMO-1的功能奠定基础。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 类泛素SUMO-1 慢病毒载体 小鼠巨噬细胞
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芹菜素激活c-Src/NADPH氧化酶/ROS通路诱导HO-1表达从而抑制小鼠巨噬细胞过度分泌细胞因子 被引量:1
7
作者 曾赛丽 吴广 +6 位作者 谢莉 张秀峰 谭小武 何振华 游晓星 赵兰华 曾焱华 《中南医学科学杂志》 CAS 2015年第4期369-373,共5页
目的观察芹菜素对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞分泌细胞因子的影响,并探讨其分子机制。方法体外培养小鼠巨噬细胞RAW 264.7,用不同浓度的芹菜素处理后,加入LPS刺激0~16 h。Western blot检测血红素氧合酶-1(HO-1)的表达以及c-Src和NA... 目的观察芹菜素对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞分泌细胞因子的影响,并探讨其分子机制。方法体外培养小鼠巨噬细胞RAW 264.7,用不同浓度的芹菜素处理后,加入LPS刺激0~16 h。Western blot检测血红素氧合酶-1(HO-1)的表达以及c-Src和NADPH氧化酶p47phox亚基的磷酸化;荧光探针H2DCFDA检测活性氧(ROS)的产生;ELISA检测TNF-α和IL-6的产生。结果芹菜素作用RAW 264.7细胞30 min即可诱导c-Src和NADPH氧化酶亚基p47phox磷酸化。采用50μmol/L c-Src抑制剂PP1预处理细胞后,p47phox磷酸化水平明显降低。同时,芹菜素能上调RAW264.7细胞内ROS的含量,而NADPH氧化酶抑制剂DPI可抑制其产生。芹菜素也能诱导RAW264.7细胞表达HO-1,而采用PP1、DPI或ROS抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理细胞后,HO-1表达水平明显降低。此外,芹菜素处理能下调LPS诱导RAW264.7细胞分泌TNF-α和IL-6,而采用siRNA沉默HO-1表达后,能在一定程度上降低芹菜素对细胞因子的抑制效应。结论芹菜素可能通过激活c-Src/NADPH氧化酶/ROS通路诱导HO-1表达,从而抑制小鼠巨噬细胞过度分泌细胞因子。 展开更多
关键词 芹菜素 血红素氧合酶-1 小鼠巨噬细胞
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MAPK信号通路在瘦素诱导小鼠巨噬细胞IL-1α表达中的作用
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作者 赵婷 黄小丹 《仲恺农业工程学院学报》 CAS 2010年第1期6-11,共6页
通过体外培养小鼠腹腔巨噬细胞(Peritoneal macrophages,PM),按瘦素(leptin)不同质量浓度和/或丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases,MAPK)特异性抑制剂PD98059、U0126、SB203580、SP600125进行分组,分别收集培养细胞... 通过体外培养小鼠腹腔巨噬细胞(Peritoneal macrophages,PM),按瘦素(leptin)不同质量浓度和/或丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases,MAPK)特异性抑制剂PD98059、U0126、SB203580、SP600125进行分组,分别收集培养细胞和上清液,用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定了上清液中的白介素1α(Interleukin-1α,IL-1α)水平,用免疫印迹(Western blot)方法测定细胞内磷酸化细胞外调节蛋白激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated kinase,p-ERK)1/2、p-p38以及磷酸化Jun氨基末端激酶(phosphorylated Jun N-terminal kinases,p-JNK)的表达水平,用逆转录-聚合酶链式反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)测定IL-1α mRNA的表达.结果发现,瘦素能够剂量依赖性地诱导小鼠PM产生IL-1α,在瘦素质量浓度为75 ng/mL时,IL-1α表达至峰值,且为对照组的12.2倍.瘦素可以活化ERK1/2和p38 MAPK信号转导通路,瘦素处理组的p-ERK1、p-ERK2、p-p38表达水平分别是对照组的2.3、2.4和2.6倍.ERK1/2的特异性抑制剂PD98059、U0126和p38的特异抑制剂SB203580能够分别抑制瘦素引起的ERK1/2、p38蛋白磷酸化以及IL-1α mRNA增加,两者的联合作用可以强烈抑制IL-1α mRNA的表达.瘦素在小鼠PM中通过同时活化ERK1/2、p38 MAPK信号转导通路而诱导细胞产生IL-1α. 展开更多
关键词 瘦素 小鼠巨噬细胞 白介素1Α 丝裂原活化蛋白激酶 细胞外调节蛋白激酶
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A549细胞对单硬脂酸甘油酯固体脂质纳米粒的摄取作用 被引量:9
9
作者 丁建潮 胡富强 袁弘 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期876-880,共5页
目的 考察单硬脂酸甘油酯固体脂质纳米粒 (monostearinsolidlipidnanoparticles ,MSLN)经PEG2 0 0 0修饰后 ,对A5 4 9细胞摄取MSLN及J774A1细胞吞噬MSLN的影响。方法 采用溶剂扩散法制备MSLN ,测定其粒径和zeta电位 ;以罗丹明B(Rhodam... 目的 考察单硬脂酸甘油酯固体脂质纳米粒 (monostearinsolidlipidnanoparticles ,MSLN)经PEG2 0 0 0修饰后 ,对A5 4 9细胞摄取MSLN及J774A1细胞吞噬MSLN的影响。方法 采用溶剂扩散法制备MSLN ,测定其粒径和zeta电位 ;以罗丹明B(RhodamineB)为荧光标记物 ,研究A5 4 9细胞对MSLN的摄取作用和J774A1细胞对MSLN的吞噬作用。结果 MSLN的细胞毒性较低 ,A5 4 9细胞对MSLN的摄取可快速接近饱和 ,其摄取百分率与MSLN在细胞外的浓度呈负相关。结论 MSLN经PEG2 0 0 0修饰 ,可显著抑制J774A1细胞对MSLN的吞噬 ,但可增加A5 4 9细胞对MSLN的摄取。 展开更多
关键词 固体脂质纳米粒 A549人Ⅱ型肺上皮细胞 J774A1巨噬细胞 细胞摄取 细胞吞噬
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青蒿乙素对脂多糖诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7炎症反应的抑制及机制 被引量:7
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作者 王晶 徐颖 张庆 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2021年第1期39-43,共5页
目的探讨青蒿乙素的抗炎活性及其作用机制。方法采用细菌脂多糖(LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7建立炎症反应模型,经青蒿乙素处理后,采用Griess试剂检测NO的含量;采用酶联免疫法(ELISA)检测促炎症因子的水平;采用Western Blot检测炎... 目的探讨青蒿乙素的抗炎活性及其作用机制。方法采用细菌脂多糖(LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7建立炎症反应模型,经青蒿乙素处理后,采用Griess试剂检测NO的含量;采用酶联免疫法(ELISA)检测促炎症因子的水平;采用Western Blot检测炎症相关蛋白及激酶的表达水平。结果青蒿乙素能明显抑制RAW264.7细胞中LPS诱导的NO生成,且呈现剂量依赖性,半数抑制浓度(IC50)为4.72μmol·L^(-1)。同时,青蒿乙素也能明显抑制LPS刺激的RAW264.7细胞中诱导性一氧化氮合酶和环氧化酶2的蛋白表达,并降低肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的释放。青蒿乙素还能明显抑制LPS所致的IκBα蛋白降解,但是对LPS诱导的ERK、JNK、p38 MAPK活化无明显抑制作用。结论青蒿乙素对LPS所致的RAW264.7细胞炎症反应具有明显的抑制作用,其抗炎机制可能与减少IκBα蛋白降解,进而抑制核转录因子κB炎症信号通路有关。 展开更多
关键词 青蒿乙素 小鼠单核巨噬细胞RAW264.7 脂多糖 抗炎作用 核转录因子-κB信号通路
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荔枝果肉乙酸乙酯提取物对巨噬细胞分泌促炎递质前列腺素E_2和一氧化氮的影响 被引量:2
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作者 杨瑞丽 高虹 +3 位作者 黄卉 周杨 王弘 孙远明 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期261-264,269,共5页
目的研究荔枝果肉乙酸乙酯提取物对巨噬细胞J774分泌促炎递质前列腺素E(2PGE2)和一氧化氮(NO)的影响,初步探讨其诱导炎症性"上火"反应的机制。方法用不同浓度的荔枝乙酸乙酯提取物处理巨噬细胞J774,分别采用紫外分光光度法和G... 目的研究荔枝果肉乙酸乙酯提取物对巨噬细胞J774分泌促炎递质前列腺素E(2PGE2)和一氧化氮(NO)的影响,初步探讨其诱导炎症性"上火"反应的机制。方法用不同浓度的荔枝乙酸乙酯提取物处理巨噬细胞J774,分别采用紫外分光光度法和Griess试剂法检测PGE2和NO含量;半定量RT-PCR检测环加氧酶(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。结果与空白对照组相比,荔枝乙酸乙酯提取物在100-900μg/ml的浓度范围内可显著提高巨噬细胞J774上清PGE2、NO的含量(P<0.05),900μg/ml提取物能显著提高COX-2和iNOS的mRNA表达水平(P<0.05)。结论荔枝果肉乙酸乙酯提取物能够诱导巨噬细胞J774分泌促炎介质,从而引起炎症性"上火"反应。 展开更多
关键词 荔枝果肉 活性部位 巨噬细胞J774 前列腺素 一氧化氮
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Stir-Fry Chicken with Green Curry Suppresses Inflammatory Gene Expression by Lipopolysaccharide-Induced Murine Macrophages
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作者 Somsri Charoenkiatkul Channarong Muangnoi +3 位作者 Pimjai Chingsuwanrote Phawachaya Praengamthanachoti Siriporn Tuntipopipat Saovaros Svasti 《Food and Nutrition Sciences》 2011年第7期770-779,共10页
Inflammatory mediators produced during inflammatory response play an important role on pathological development of several chronic diseases. Although several dietary plants exhibited anti-inflammatory property, their ... Inflammatory mediators produced during inflammatory response play an important role on pathological development of several chronic diseases. Although several dietary plants exhibited anti-inflammatory property, their impacts as a whole food has been rarely reported. The aim of the present study is to assess anti-inflammatory activity of an ethanol extract from a whole food namely “ready to eat stir-fry chicken with green curry” consisting of green curry paste, big egg plant, pea egg plant, red chili, kaffer lime and sweet basil as plant-based ingredients. The food extract at 55 - 220 μg/ml was incubated with RAW264.7 murine macrophage cells prior to stimulation with lipopolysaccharide (LPS) for 24 h. Inflammatory mediators [(inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2), tumor necrosis factor (TNF-α) and interleukine-6 (IL-6)] mRNA and protein were determined by RT-PCR, immunoblot and ELISA respectively. The modulation mechanism by the food extract was observed by measuring the phosphorylated form of mitogen activated protein kinases (MAPKs) and inhibitor kappa B alpha (IκB-α). The ready to eat stir-fry chicken with green curry extract significantly suppressed LPS-induced iNOS, COX-2, IL-6 and TNF-α gene expression in a dose-depend- ent manner without cytotoxicity. The suppressive effect was modulated partly by inhibiting phosphorylation of MAPKs and IκB-α. These results indicate that spices and vegetables in a complex diet still possess strong anti-inflammatory activities which warrant confirming such activities to ameliorate the pathogenesis of inflammatory-associated chronic diseases in vivo. 展开更多
关键词 Stir-Fry CHICKEN with Green CURRY ANTI-INFLAMMATION LIPOPOLYSACCHARIDE RAW264.7 murine macrophages
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HPLC法检测细胞培养上清液中前列腺素E2的含量 被引量:1
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作者 高虹 周杨 +2 位作者 孙远明 吴青 杨瑞丽 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期326-328,共3页
建立了检测巨噬细胞培养上清液前列腺素E2(PGE2)含量的高效液相色谱法,为检测体外细胞培养液PGE2提供快速定量的方法。色谱条件为:Ultimate XB-C18反相柱(250mm×4.6mm,5μm);以乙腈和0.02mol/L磷酸二氢钾水溶液(60∶40,v/v)作为流... 建立了检测巨噬细胞培养上清液前列腺素E2(PGE2)含量的高效液相色谱法,为检测体外细胞培养液PGE2提供快速定量的方法。色谱条件为:Ultimate XB-C18反相柱(250mm×4.6mm,5μm);以乙腈和0.02mol/L磷酸二氢钾水溶液(60∶40,v/v)作为流动相;流量为1mL/min;检测波长为196nm。结果表明:该方法标准曲线良好,线性范围为0.5625~90μg/mL,相关系数为R2=0.999,出峰时间为3.988min,最低检测限为0.1448μg/mL,平均回收率为100.71%。本方法简单快速,适用于样品数目较多的PGE2的快速定量检测。 展开更多
关键词 HPLC 巨噬细胞RAW264.7 前列腺素E2
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Immunomodulatory Effects of Esculetin(6,7-Dihydroxycoumarin)on Murine Lymphocytes and Peritoneal Macrophages 被引量:11
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作者 Kwok-nam Leung Dr.Kwok-nam Leung +2 位作者 Pui-yinLeung Lai-pingKong Po-kiLeung 《Cellular & Molecular Immunology》 SCIE CAS CSCD 2005年第3期181-188,共8页
Coumarins belong to a diverse group of naturally occurring non-nutrient phytochemicals known as benzo-α- pyrones. In this study, esculetin, a 6,7-dihydroxy derivative of coumarin with pleiotropic biological activitie... Coumarins belong to a diverse group of naturally occurring non-nutrient phytochemicals known as benzo-α- pyrones. In this study, esculetin, a 6,7-dihydroxy derivative of coumarin with pleiotropic biological activities, was found to have no significant cytotoxic effect on normal murine macrophages, but it could increase the in vivo migration of the thioglycollate-elicited macrophages in a dose-dependent manner. Moreover, esculetin significantly increased the endocytic activity, and augmented the nitric oxide production and iNOS gene expression in LPS-treated macrophages. In addition, in vivo administration of esculetin into mice was shown to increase the mitogenesis of splenic lymphocytes towards Con A and LPS stimulations, and induced the LAK activity of splenic lymphocytes. Collectively, our results indicate that esculetin could exert immunomodulatory effects on murine macrophages and lymphocytes, both in vitro and in vivo, and this might be one of the possible mechanisms by which coumarins can exert their chemopreventive and anti-tumor activities in vivo. Cellular & Molecular Immunology. 2005;2(3): 181-188. 展开更多
关键词 IMMUNOMODULATORY ESCULETIN COUMARIN murine macrophage LAK cell
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巨噬细胞RAW264.7不同转染方法的比较 被引量:7
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作者 李亚 付强 +2 位作者 张俊波 张辉 陈创夫 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期44-48,共5页
目的:采用不同的转染方法介导siRNA片段转染小鼠巨噬细胞,对不同细胞转染方法进行比较。方法:分别采用脂质体转染、罗氏转染试剂转染、电穿孔法和慢病毒介导siRNA片段转染小鼠巨噬细胞,然后通过流式细胞仪分析不同转染方法的转染效率,... 目的:采用不同的转染方法介导siRNA片段转染小鼠巨噬细胞,对不同细胞转染方法进行比较。方法:分别采用脂质体转染、罗氏转染试剂转染、电穿孔法和慢病毒介导siRNA片段转染小鼠巨噬细胞,然后通过流式细胞仪分析不同转染方法的转染效率,并测定对细胞活性的影响以及目的基因的表达水平。结果:慢病毒介导siRNA转染小鼠巨噬细胞效率最高,可达34.75±5.30%,且RNA干扰效果最好;其次为罗氏转染试剂转染和电穿孔法,但电穿孔法细胞活力最低;脂质体转染效率最低,仅为12.17±1.53%,但细胞活力最好。结论:通过对4种小鼠巨噬细胞转染方法的比较,明确了4种转染方法的优缺点,为小鼠巨噬细胞转染提供了实验依据。 展开更多
关键词 小鼠巨噬细胞 慢病毒 转染效率 细胞活力
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雷公藤内酯醇抑制小鼠巨噬细胞血管内皮生长因子的表达 被引量:3
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作者 潘建青 曾叶 +2 位作者 杨业金 程静 欧阳曙明 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期142-145,共4页
目的:探讨雷公藤内酯醇(TP)对小鼠巨噬细胞表达血管内皮生长因子(VEGF)的抑制作用。方法:以脂多糖(LPS)激活的小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,利用RT-PCR、免疫组化检测不同剂量雷公藤对激活巨噬细胞VEGFmRNA表达及VEGF合成的影响。结果:T... 目的:探讨雷公藤内酯醇(TP)对小鼠巨噬细胞表达血管内皮生长因子(VEGF)的抑制作用。方法:以脂多糖(LPS)激活的小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,利用RT-PCR、免疫组化检测不同剂量雷公藤对激活巨噬细胞VEGFmRNA表达及VEGF合成的影响。结果:TP可以抑制LPS诱导的巨噬细胞VEGFmRNA表达及VEGF合成,并呈剂量依赖性。结论:TP抑制巨噬细胞VEGFmRNA转录及VEGF合成可能是其治疗子宫内膜异位症的作用机理之一。 展开更多
关键词 雷公藤内酯醇(TP) 小鼠巨噬细胞 血管内皮生长因子(VEGF)
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脂多糖刺激RAW264.7和Ana-1形态改变及细胞因子表达的差异 被引量:2
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作者 石榴 方怡 +2 位作者 袁伟锋 李理 黄文杰 《国际呼吸杂志》 2009年第13期772-776,共5页
目的比较两株小鼠来源的巨噬细胞株RAW264.7和Ana-1经脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导后在形态及细胞因子表达等方面的差异。方法MTT法检测不同终浓度(0.1mg/L、1mg/L、10mg/L、100mg/L)LPS作用后两株细胞增殖活力,确... 目的比较两株小鼠来源的巨噬细胞株RAW264.7和Ana-1经脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导后在形态及细胞因子表达等方面的差异。方法MTT法检测不同终浓度(0.1mg/L、1mg/L、10mg/L、100mg/L)LPS作用后两株细胞增殖活力,确定最佳作用浓度。选择1mg/L.LPS刺激RAw264.7和Ana-1细胞,ELISA法分别于0h、4h、8h、12h、24h检测两株细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、IL-6和IL-10的表达量。结果LPS终浓度为1mg/L时两株细胞存活率分别为(162.05±28.14)%、(159.92±20.43)%,显著大于同细胞其他浓度组别(P〈0.01);1mg/L LPS刺激后,两株细胞各细胞因子表达均为随时间呈先增多后减少趋势,峰值出现时间RAW264.7细胞早于Ana-1细胞。TNF—α的表达4h时RAW264.7细胞高于Ana-1(P〈0.01),8h、12h时低于后者(P〈0.05);IL-18的表达各时间点比较RAW264.7均高于Ana-1(P〈0.05);IL-6的表达各时间点比较RAW264.7均低于Ana-1(P〈0.05);IL-10的表达于刺激后4h,RAW264.7细胞高于Ana-1细胞(P〈0.05)。结论当LPS浓度为1mg/L时,Ana-1与RAW264.7细胞存活率均最强;经LPS刺激后,RAW264.7细胞TNF-α、IL-6、IL—1β、IL-10表达高峰早于Ana-1细胞,各细胞因子表达量各有侧重。研究者进行炎症相关实验时对Ana-1和RAW264.7的选择需考虑两者之间的差异。 展开更多
关键词 脂多糖 小鼠巨噬细胞 RAW264.7 Ana- 1 细胞因子
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肝X受体激动剂抑制NLRP3炎性体活化 被引量:1
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作者 胡啸竹 李宁 +4 位作者 杜崇涛 崔治华 韩文瑜 杨勇军 陈巍 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期259-263,共5页
为探讨肝X受体激动剂对NLRP3配体ATP诱导小鼠巨噬细胞炎性复合体活化的影响,应用荧光定量PCR方法测定肝X受体激动剂对LPS诱导的Pro-IL-1β、NLRP3等基因表达的影响,并用免疫蛋白印迹的方法检测Caspase-1的活化片段。结果证明,肝X受体(LX... 为探讨肝X受体激动剂对NLRP3配体ATP诱导小鼠巨噬细胞炎性复合体活化的影响,应用荧光定量PCR方法测定肝X受体激动剂对LPS诱导的Pro-IL-1β、NLRP3等基因表达的影响,并用免疫蛋白印迹的方法检测Caspase-1的活化片段。结果证明,肝X受体(LXRs)激动剂能抑制NLRP3炎性体的活化。LXRs激动剂T0901317和GW3965显著抑制LPS联合ATP诱导的Caspase-1剪切成熟和IL-1β分泌,并且LXRs激动剂对NLRP3炎性体的抑制作用,部分源于其抑制NLRP3和IL-1β的基因转录。 展开更多
关键词 肝X受体激动剂 小鼠巨噬细胞 NLRP3炎性体
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A类Ⅰ型清道夫受体调节小鼠腹腔巨噬细胞抗肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌感染
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作者 肖海涵 范霞 +3 位作者 郭明权 罗婷婷 夏碧丽 何平 《微生物与感染》 2016年第4期222-227,共6页
本研究旨在探讨A类Ⅰ型清道夫受体(scavenger receptor class A type Ⅰ,SR-AI)在呼吸道感染常见病原体肺炎克雷伯菌及铜绿假单胞菌感染过程中的免疫调节功能。以肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌临床分离株与野生型小鼠和SR-AI^(-/-)小鼠腹... 本研究旨在探讨A类Ⅰ型清道夫受体(scavenger receptor class A type Ⅰ,SR-AI)在呼吸道感染常见病原体肺炎克雷伯菌及铜绿假单胞菌感染过程中的免疫调节功能。以肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌临床分离株与野生型小鼠和SR-AI^(-/-)小鼠腹腔原代巨噬细胞互作,研究SR-AI在吞噬和炎症反应中的作用。荧光染料染色菌体及检测胞内荧光强度,数据显示SR-AI敲除后巨噬细胞对肺炎克雷伯菌的吞噬能力下降,但对铜绿假单胞菌的吞噬能力升高。采用实时定量荧光聚合酶链反应检测相关炎症因子mRNA水平,发现SRAI敲除后肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌刺激巨噬细胞引发的炎症反应均增强。结果表明,SR-AI参与巨噬细胞对肺炎克雷伯菌的吞噬,但不参与对铜绿假单胞菌的吞噬,且可能抑制了肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌引发的炎症反应。 展开更多
关键词 小鼠巨噬细胞 A类Ⅰ型清道夫受体 肺炎克雷伯菌 铜绿假单胞菌 吞噬 炎症反应
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黄芩苷对尿酸钠诱导RAW264.7细胞NLRP3及炎症因子表达的影响 被引量:13
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作者 文学平 刘德俊 +1 位作者 裴忆雪 徐凌云 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期190-194,共5页
目的:研究黄芩苷对尿酸钠诱导RAW264.7细胞NLRP3炎性小体及炎症因子表达的影响。方法:取RAW264.7细胞分为对照组、模型组和药物组,模型组用尿酸钠(终浓度2 mg·m L^(-1))刺激,药物组先加入不同浓度黄芩苷(终浓度为2.5,5,10和20μg&#... 目的:研究黄芩苷对尿酸钠诱导RAW264.7细胞NLRP3炎性小体及炎症因子表达的影响。方法:取RAW264.7细胞分为对照组、模型组和药物组,模型组用尿酸钠(终浓度2 mg·m L^(-1))刺激,药物组先加入不同浓度黄芩苷(终浓度为2.5,5,10和20μg·m L^(-1))预处理1 h后再加入尿酸钠。24 h后收集细胞,用qRT-PCR法检测TNF-α,IL-1β,IL-18和NLRP3的mRNA表达水平;收集细胞培养上清液,用ELISA法检测TNF-α,IL-1β和IL-18的浓度。结果:与对照组比较,模型组巨噬细胞NLRP3及炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-18的基因表达显著上调,巨噬细胞分泌TNF-α,IL-1β和IL-18显著增加;与模型组比较,黄芩苷组显著抑制上述指标。结论:NLRP3炎性小体参与尿酸钠诱导的炎性反应,黄芩苷可抑制NLRP3的mRNA表达,减少炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-18的分泌而发挥抗炎作用。 展开更多
关键词 黄芩苷 RAW264.7细胞 尿酸钠 NLRP3炎性小体 IL-1β IL-18 TNF-α
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