基于可重复利用免疫磁珠的抗体检测方法的建立 被引量：7

1

作者 郭慧芳 张文红 +3 位作者 温冬青 韩锋产 张虎明 阎小君 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期577-579,583,共4页

目的基于可重复利用的免疫磁珠,建立一种简捷快速的特异性抗体检测方法。方法设计人类巨细胞病毒(humancytomegaloviruses,HCMV)PP150蛋白的抗原表位,并合成8分枝多聚抗原肽PP150-8MAPs。将PP150-8MAPs以共价结合形式包被于DynabeadsM-4... 目的基于可重复利用的免疫磁珠,建立一种简捷快速的特异性抗体检测方法。方法设计人类巨细胞病毒(humancytomegaloviruses,HCMV)PP150蛋白的抗原表位,并合成8分枝多聚抗原肽PP150-8MAPs。将PP150-8MAPs以共价结合形式包被于DynabeadsM-450Tosylactivated磁珠表面,制备特异性免疫磁珠。用PP150-8MAPs免疫Balb/c小鼠制备抗此抗原表位的标准抗血清。应用免疫磁珠检测标准抗血清中的抗体,优化检测条件。在抗体检测反应结束后,洗脱抗体-二抗复合物,再生后的免疫磁珠重复用于标准抗血清样品的检测分析,并分析免疫磁珠可重复利用的次数。结果制备免疫磁珠时,PP150-8MAPs的最佳包被量为100μg/mL,包被效率为79%。用PP150-8MAPs免疫小鼠后,得到的抗血清滴度可达到112800。用免疫磁珠法检测小鼠标准抗血清,免疫磁珠可重复进行20次以上的检测分析。结论基于酶联免疫检测方法,包被抗原的免疫磁珠可重复应用于血清样品中特异性抗体的检测分析。此实验为建立一种新的可重复检测的高效清样品中特异性抗体的检测分析。此实验为建立一种新的可重复检测的高效免疫磁珠抗体分析方法奠定了基础,在基础研究与临床检测中具有广泛的应用前景。 展开更多

关键词 抗原表位 多聚抗原肽 免疫磁珠

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多靶点抗原肽自体免疫细胞治疗原发性肝细胞癌的临床安全性 被引量：7

2

作者 黄静 胡晓云 +3 位作者 陈晓薇 张明霞 陈逢生 郭亚兵 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期11-16,共6页

目的:评价多靶点抗原肽自体免疫细胞技术(multiple antigen stimulating cellular therapy,MASCT^(TM))治疗原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的临床安全性。方法:回顾性分析2012年1月至2014年12月南方医院肝病中心收治的接... 目的:评价多靶点抗原肽自体免疫细胞技术(multiple antigen stimulating cellular therapy,MASCT^(TM))治疗原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的临床安全性。方法:回顾性分析2012年1月至2014年12月南方医院肝病中心收治的接受MASCT^(TM)治疗且治疗前的末次治疗结束最少1个月以上、未接受其他免疫治疗的45例HCC患者的临床资料。第0天分离患者外周血单个核细胞,其中贴壁细胞诱导培养为成熟树突状细胞(muture dendritic cell,mDC),负载14种抗原肽,小部分mDC于第8天经患者腹股沟淋巴结周围区皮下注射;未贴壁细胞第7天与大部分mDC共培养诱导为杀伤性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL),对mDC及CTL进行质量控制检测,第26天经静脉回输患者体内,分析输注细胞后患者的不良反应和血常规、肝肾功能变化。结果:mDC中CD80^+细胞比例为(98.5±5)%、CD83^+细胞为(88.0±10)%、CD86^+细胞为(98.4±3)%、HLA-DR^+细胞为(98.8±2)%,mDC分泌高水平IL-12[(985±312)pg/ml]、低水平IL-10[(53±10)pg/ml]。CTL中CD3^+CD8^+细胞为(83.0±10)%、CD3^+CD56^+细胞为(24.0±5)%,CTL分泌高水平IFN-γ[(1 222±650)pg/ml]、低水平IL-10[(7±5)pg/ml]。MASCT^(TM)治疗后,绝大多数患者的精神、食欲、睡眠和体力较前好转,有2名(4.4%)患者在输注CTL细胞1 h后出现轻中度发热,未观察到其他严重明显不良反应。患者的血常规、肝肾功能均无明显异常变化。结论:MASCT^(TM)成功诱导培养典型mDC和CTL,行MASCT^(TM)治疗的HCC患者不良反应较少,临床应用安全性良好。 展开更多

关键词 肝细胞癌 多靶点抗原肽 免疫细胞治疗 安全性 临床试验

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多靶点抗原肽自体免疫细胞联合TACE治疗原发性肝细胞癌 被引量：4

3

作者 吴叶婷 杨愁 +2 位作者 黄静 程笑 侯金林 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期151-157,共7页

目的:观察多靶点抗原肽自体免疫细胞技术(multiple antigen stimulating cellular therapy,MASCITM)联合肝动脉栓塞化疗(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)治疗原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的临床疗效... 目的:观察多靶点抗原肽自体免疫细胞技术(multiple antigen stimulating cellular therapy,MASCITM)联合肝动脉栓塞化疗(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)治疗原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的临床疗效。方法:回顾性分析2010年8月至2015年3月南方医院感染内科暨肝病中心收治的66例接受TACE治疗的HCC患者,按是否联合MASCITM治疗分为联合治疗组(32例)和单纯TACE组(34例),主要观察指标为两组患者的无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)。结果:联合治疗组0.5、1、2年无进展生存率分别为68.8%、37.5%和25.0%,单纯TACE组分别为50%、11.8%和2.9%,两组中位PFS分别为9.5和5.5个月(P<0.01)。联合治疗组0.5、1、2年的总生存率分别为81.3%、65.6%和40.6%,单纯TACE组分别为91.2%、47.1%和23.5%,两组中位OS分别为19.5个月和10.5个月(P<0.05)。是否接受MASCITM治疗、肝门静脉侵犯、治疗前AFP水平、ECOG评分是影响HCC患者PFS的独立预后因素,而是否接受MASCITM治疗、肝门静脉侵犯、治疗前总胆红素水平是影响OS的独立预后因素。结论:MASCITM联合TACE治疗可提高HCC患者的临床疗效,明显延长PFS和OS。 展开更多

关键词 肝细胞癌 多靶点抗原肽 细胞免疫治疗 肝动脉栓塞化疗 临床疗效

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MAPs技术合成抗原肽在戊型肝炎诊断中抗原性初探 被引量：2

4

作者 盛慧明 俞炳耀 周文达 《右江医学》 2003年第5期420-421,共2页

目的　将多聚抗原肽 (MAPs)技术用于免疫测定 ,为诊断戊型肝炎寻找更好的诊断试剂盒。方法　根据戊型肝炎病毒 (HEV)开放阅读框架 2 (ORF2 )中含有的抗原表位 ,从戊型肝炎病毒中国株蛋白的氨基酸序列中选取S 30段抗原肽 ,用固相合成法... 目的　将多聚抗原肽 (MAPs)技术用于免疫测定 ,为诊断戊型肝炎寻找更好的诊断试剂盒。方法　根据戊型肝炎病毒 (HEV)开放阅读框架 2 (ORF2 )中含有的抗原表位 ,从戊型肝炎病毒中国株蛋白的氨基酸序列中选取S 30段抗原肽 ,用固相合成法分别进行化学合成普通线形抗原肽和MAPs肽段 ,并用ELISA分别检测其抗原性。结果　与国外试剂盒相比较 ,两者的符合率有差异。但MAPs肽段的符合率高于普通线形抗原肽 ,在检测灵敏度、特异性上MAPs肽段明显优于普通线形抗原肽。结论　以单一的戊型肝炎的抗原表位肽检测戊型肝炎存在漏检。在MAPs技术的基础上 ,合成多肽抗原的灵敏度得到明显提高。 展开更多

关键词 MAPs技术 抗原肽 戊型肝炎 诊断 抗原性 免疫学检验 诊断试剂盒

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用合成多肽免疫制备抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体的研究 被引量：1

5

作者 丛进阳 盖晓东 沈忠耀 《清华大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 1997年第12期55-59,共5页

介绍一种用合成的多抗原肽免疫动物来制备与天然人心肌肌钙蛋白Ⅰ特异反应的单克隆抗体新方法。从人心肌肌钙蛋白ⅠＮ端，根据多肽分子氨基酸的亲水性值选出了ＰＡＰＡＰＩＡＡＡＳＳ１１个氨基酸片段。将它用有八位点的赖氨酸核连接成... 介绍一种用合成的多抗原肽免疫动物来制备与天然人心肌肌钙蛋白Ⅰ特异反应的单克隆抗体新方法。从人心肌肌钙蛋白ⅠＮ端，根据多肽分子氨基酸的亲水性值选出了ＰＡＰＡＰＩＡＡＡＳＳ１１个氨基酸片段。将它用有八位点的赖氨酸核连接成多抗原肽后，以它为抗原用Ｒｉｂｉ佐剂进行免疫。将小鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，获１１株抗此多肽的杂交瘤细胞株。对其中７株属于ＩｇＧ亚类的细胞进行了ＥＬＩＳＡ分析，发现这７株细胞均与天然的人心肌肌钙蛋白Ⅰ呈特异性反应，而不与人骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ发生交叉反应。利用３Ａ２细胞株所分泌的单克隆抗体对急性心肌梗塞患者、手术患者和正常人的血样进行了ＥＬＩＳＡ检测，证明它只对心肌梗塞患者血清发生阳性反应。获得了较为满意的结果。此细胞株所分泌的抗体有望用于心肌梗塞临床检测。 展开更多

关键词 心肌梗塞 单克隆抗体 肌钙蛋白 ELISA检测

原文传递

hTERT多表位肽致敏mDC诱导CTL对HLA-A24^+肿瘤细胞的特异性杀伤作用 被引量：2

6

作者 慎华平 钮柏琳 +2 位作者 杜慧敏 邹利全 龚建平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期626-630,633,共6页

目的:研究人工合成人端粒酶逆转录酶(hTERT)多表位混合肽经髓样树突状细胞(mDC)提呈后,诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对HLA-A24+肿瘤细胞的免疫杀伤效应。方法:人工合成四分支的树状串联hTERT表位肽(MAPs)及其各单表位多肽。取HLA-A... 目的:研究人工合成人端粒酶逆转录酶(hTERT)多表位混合肽经髓样树突状细胞(mDC)提呈后,诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对HLA-A24+肿瘤细胞的免疫杀伤效应。方法:人工合成四分支的树状串联hTERT表位肽(MAPs)及其各单表位多肽。取HLA-A24+健康志愿者的外周血,用免疫磁珠分选并培养mDC。用尼龙毛柱纯化T淋巴细胞并培养。以各表位肽致敏mDC后,诱导特异性CTL增殖,并以表达hTERT且以HLA-A24+肿瘤细胞株SMMC-7721及HLA-A24-肿瘤细胞株SKOV3为靶细胞行杀伤实验。用ELISA法检测不同时间点培养基上清液中IL-12、TNF-α的分泌量;用流式细胞术检测CTL对肿瘤细胞的杀伤效应。结果:以源于hTERT的T淋巴细胞表位I540(ILAKFLHWL)、V461(VYGFVRACL)及L766(LTDLQPYMRQFVAHL)合成4分支MAPs多肽及各单表位混合多肽。以人工合成的hTERT多表位混合肽致敏mDC后,能刺激CTL增殖,并可诱导对HLA-A24+肿瘤细胞株SMMC-7721的特异性杀伤作用,且MAPs多肽较单表位混合多肽的致敏效果更具显著性(P<0.05)。结论:以人工合成的hTERT多表位混合肽致敏mDC能激活同源淋巴细胞(CTL),可特异性杀伤HLA-A24+的肿瘤细胞,在肿瘤免疫治疗中具有重要的意义。 展开更多

关键词 人端粒酶逆转录酶 多抗原表位肽 髓样树突状细胞 HLA-A24+肿瘤细胞 免疫治疗

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基于生殖支原体黏附蛋白模拟表位的多抗原肽免疫效果的观察 被引量：1

7

作者 曾焱华 游晓星 +4 位作者 唐双阳 朱翠明 余敏君 吴移谋 何军 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期287-292,共6页

目的制备基于生殖支原体黏附蛋白（MgPa）模拟表位的多抗原肽（MAP），检测其诱导小鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫应答的水平，为研制安全、有效的基于模拟表位的Mg表位肽疫苗奠定实验基础。方法以多聚赖氨酸为核心基质，人工合成3种... 目的制备基于生殖支原体黏附蛋白（MgPa）模拟表位的多抗原肽（MAP），检测其诱导小鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫应答的水平，为研制安全、有效的基于模拟表位的Mg表位肽疫苗奠定实验基础。方法以多聚赖氨酸为核心基质，人工合成3种含MgPa模拟表位的八分枝MAP，用反相高效液相色谱（RP—HPLC）和质谱分析对其进行纯化与鉴定。将其单独或混合免疫BALB／c小鼠。间接ELISA测定小鼠血清中的特异性IgG抗体及其亚类的水平；MTT比色法检测MAP刺激免疫小鼠脾淋巴细胞的增殖反应，并用ELISA检测其脾细胞培养上清中的IL-4和WN-γ水平。结果成功合成了较高纯度的含MgPa模拟表位的3种MAP，这3种MAP均能刺激小鼠产生IgG抗体，且以Thl型免疫应答产生的IgG2a型抗体为主；与单个MAP组相比，混合MAP免疫组小鼠产生了更多的IgG、IgGl和IgG2a抗体（P均〈0．01）；3种MAP均能特异性诱导免疫小鼠的脾淋巴细胞增殖，且能刺激其产生较多的IL-4和IFN-1，混合MAP免疫组小鼠产生的IL4和IFN-γ，与单个MAP组相比差异具有统计学意义（P均〈0．01）。结论基于MgPa模拟表位的3种MAP均能刺激小鼠产生较强的体液免疫和细胞免疫应答，且混合免疫组诱导的免疫应答效果比单个MAP组更好。 展开更多

关键词 生殖支原体 黏附蛋白 模拟表位 多抗原肽 免疫原性

原文传递

基于MgPa模拟表位的MAP的制备、纯化与鉴定 被引量：1

8

作者 曾焱华 余敏君 +2 位作者 唐双阳 游晓星 朱有葱 《中南医学科学杂志》 CAS 2014年第1期21-24,共4页

目的制备含有生殖支原体黏附蛋白(MgPa)模拟表位的多抗原肽(MAP),为研制基于模拟表位的MAP用于Mg的诊断与预防提供前期实验基础。方法以多聚赖氨酸为核心基质,采用Fmoc方法合成含有MgPa模拟表位的八分枝MAP,反向高效液相色谱(RP-HPLC)分... 目的制备含有生殖支原体黏附蛋白(MgPa)模拟表位的多抗原肽(MAP),为研制基于模拟表位的MAP用于Mg的诊断与预防提供前期实验基础。方法以多聚赖氨酸为核心基质,采用Fmoc方法合成含有MgPa模拟表位的八分枝MAP,反向高效液相色谱(RP-HPLC)分析MAP的纯度,质谱分析法测定MAP的分子量以期对其进行鉴定。结果分别制备了含有MgPa 3个模拟表位的MAP,RP-HPLC分析的结果表明合成的3个MAP的纯度都在90%以上,质谱分析的结果说明所合成的MAP的分子量与预期的理论分子量相符。结论成功制备、纯化并鉴定了3个含有MgPa模拟表位的MAP。 展开更多

关键词 生殖支原体 黏附蛋白 模拟表位 多抗原肽

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多聚抗原肽免疫磁珠在制备单表位抗体中的应用 被引量：2

9

作者 徐小洁 张文红 +3 位作者 康磊 韩锋产 颜真 阎小君 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期572-574,579,共4页

目的:建立用多聚抗原肽(multiple antigen peptides,MAP)包被磁珠制备单表位抗体的方法。方法:通过Fmoc法固相化学合成UreB的8分支单表位MAP,将其作为免疫原免疫小鼠,获得多克隆抗血清。将MAP以共价偶联的方式包被磁珠制备免疫磁珠(immu... 目的:建立用多聚抗原肽(multiple antigen peptides,MAP)包被磁珠制备单表位抗体的方法。方法:通过Fmoc法固相化学合成UreB的8分支单表位MAP,将其作为免疫原免疫小鼠,获得多克隆抗血清。将MAP以共价偶联的方式包被磁珠制备免疫磁珠(immunomagnetic beads,IB),通过IB从多克隆抗血清中纯化单表位抗体,荧光偏振(fluorescence polarization,FP)法鉴定抗体的特异性,SDS-PAGE鉴定抗体纯度,紫外分光光度法测定其回收率。结果:合成的MAP具有较强的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗体滴度高达1∶12800。MAP制备免疫磁珠的最佳包被浓度为100mg/L,包被效率最高可达79%。应用MAP免疫磁珠从抗血清中纯化得到的单表位抗体,经鉴定与其他抗原表位无反应性,其纯度为95%,抗体的回收率为5.8%。结论:MAP包被的磁珠可快速分离纯化出针对某一抗原表位的特异性抗体,其性质类似单克隆抗体。这一方案在快速制备少量高特异性抗体中具有广阔的应用前景。 展开更多

关键词 多聚抗原肽 免疫磁珠 单表位抗体

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肿瘤抗原MAGE-2多抗原肽疫苗的设计合成及免疫原性研究 被引量：3

10

作者 耿淼 吴玉章 +3 位作者 管孝鞠 贾正才 周伟 邹丽云 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第15期1330-1332,共3页

目的　采用多抗原肽 (multipleantigenpeptide ,MAP)设计方案 ,提高线性短肽的免疫原性。方法　对肿瘤抗原MAGE 2 2 2 0 2 2 8细胞毒性T细胞 (cytotoxicTlymphocyte ,CTL)表位进行分子修饰 ,设计、合成四分支多抗原肽 (MAP4)。标准Fmo... 目的　采用多抗原肽 (multipleantigenpeptide ,MAP)设计方案 ,提高线性短肽的免疫原性。方法　对肿瘤抗原MAGE 2 2 2 0 2 2 8细胞毒性T细胞 (cytotoxicTlymphocyte ,CTL)表位进行分子修饰 ,设计、合成四分支多抗原肽 (MAP4)。标准Fmoc合成方案进行合成 ,液相色谱 质谱联用 (LC MS)进行目的肽鉴定。以体外刺激人外周血单核细胞 (PBMC)诱导CTL效应及IFN γ分泌 ,标准 51 Cr释放实验与Elispot实验进行免疫原性的研究。结果　标经准 51 Cr释放实验验证 ,低浓度的MAP4可以诱导出有效的CTL效应 ,Elispot实验显示MAP4能够有效诱导的IFN γ分泌。结论　MAP的构建能够增强CTL效应和IFN γ的分泌 。 展开更多

关键词 肿瘤抗原MAGE-2 MAP 免疫原性

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人端粒酶逆转录酶表位多抗原肽疫苗的体外抗肿瘤免疫效应研究 被引量：2

11

作者 廖忠莉 汤旭东 +6 位作者 王国珍 周媛 杨武晨 周圆圆 覃勇 胡建 郭红 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1035-1039,共5页

目的检测基于人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位R540的多抗原肽(multiple antigen peptide,MAP)的体外抗肿瘤活性。方法将HLA-A2限制性hTERT CTL表位... 目的检测基于人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位R540的多抗原肽(multiple antigen peptide,MAP)的体外抗肿瘤活性。方法将HLA-A2限制性hTERT CTL表位的多抗原肽负载正常人外周血来源(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)的树突细胞,并将负载多肽的树突细胞刺激淋巴细胞产生hTERT特异性的CTL细胞,采用51Cr释放实验检测所诱导的CTL细胞体外抗肿瘤杀伤效应。结果 hTERT特异性CTL表位的多抗原肽所诱导的CTL细胞对hTERT及HLA-A2表达均阳性的肿瘤细胞杀伤作用较之其单肽疫苗杀伤活性明显增强,在最大效靶比(E/T)80∶1时,高出率均大于25%。而对HLA-A2阴性的HepG2肝癌细胞及hTERT阴性的U2OS骨肉瘤细胞不具有杀伤效应,同时其对自体淋巴细胞和树突细胞也不具有杀伤效应。结论 HLA-A2限制性hTERT CTL表位多抗原肽相较于其单肽能在体外诱导更强的抗肿瘤免疫效应。 展开更多

关键词 人端粒酶逆转录酶 多抗原肽 肿瘤疫苗

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血吸虫合成多肽抗原保护性免疫效果及小鼠外周血细胞的变化(英文)

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作者 苏崇杰 江月 +6 位作者 熊国干 石佑恩 宁长修 何昌浩 曹胜利 蔡孟深 秦致辉 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 1999年第4期297-299,共3页

根据公认的血吸虫保护性抗原候选分子Ｓｍ２８ 的氨基酸序列人工合成４ 个不同血吸虫多肽片段，对小鼠进行免疫保护实验。采用２００ μｇ／只，皮下注射共免疫３ 次，每次间隔１ 周，末次免疫后２ 周以（４０ ±２） 条日本血吸虫... 根据公认的血吸虫保护性抗原候选分子Ｓｍ２８ 的氨基酸序列人工合成４ 个不同血吸虫多肽片段，对小鼠进行免疫保护实验。采用２００ μｇ／只，皮下注射共免疫３ 次，每次间隔１ 周，末次免疫后２ 周以（４０ ±２） 条日本血吸虫正常尾蚴攻击感染。另设不免疫攻击感染日本血吸虫的小鼠为对照组。实验组小鼠分别获得２４．３ ％ ～４７ ．９ ％ 的减虫率和３５．１ ％ ～５０ ．４ ％ 的减卵率。各组小鼠免疫前和免疫后尾部取血涂片染色，观察比较外周血白细胞及Ｔ 细胞、Ｂ细胞的变化，结果免疫后较免疫前嗜酸性白细胞和Ｔ细胞升高。实验提示，血吸虫多肽抗原有一定免疫效果，值得进一步研究。 展开更多

关键词 日本血吸虫 多肽抗原 T细胞 保护性免疫

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多抗原肽免疫血清体外阻断丙型肝炎病毒感染外周血单个核细胞的研究

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作者 闵峰 王素美 黄文琪 《实用肝脏病杂志》 CAS 2011年第3期164-166,共3页

目的探讨多抗原肽(MAP)免疫兔血清体外阻断丙型肝炎病毒(HCV)感染人外周血单个核细胞。方法用兔抗MAP血清按一定比例混合后接种于HCV感染的人外周血单个核细胞,采用逆转录聚合酶链反应、免疫组化和原位杂交技术分别检测细胞内或上清中HC... 目的探讨多抗原肽(MAP)免疫兔血清体外阻断丙型肝炎病毒(HCV)感染人外周血单个核细胞。方法用兔抗MAP血清按一定比例混合后接种于HCV感染的人外周血单个核细胞,采用逆转录聚合酶链反应、免疫组化和原位杂交技术分别检测细胞内或上清中HCV RNA、细胞内HCV NS3和HCV NS5抗原的表达。结果兔抗MAP血清按1:1混合后,外周血单个核细胞仍可检出HCV RNA,细胞有HCV NS3抗原表达;而按5:1和10:1混合后,单个核细胞内未检测出HCV正负链RNA,未见特异性抗原表达,原位杂交也未检测出HCV RNA存在。结论兔抗MAP血清在体外能部分阻断HCV感染。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 细胞培养 多抗原肽 免疫血清

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间接偶联法合成Aβ_(1-15)多重抗原肽疫苗及其免疫学活性

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作者 杨学森 汪华侨 +3 位作者 姚志彬 叶小舟 吴继明 邹爱国 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期391-394,共4页

目的探索合成Aβ1-15重抗原肽疫苗的方法,并对其免疫学活性进行鉴定。方法采用间接偶联法合成8分支Aβ1-15重抗原肽（MAP）,通过高效反相液相色谱（RP-HPLC）、SDS-PAGE以及氨基酸成分分析对其进行初步鉴定。以合成的MAP Aβ1-15C57BL/... 目的探索合成Aβ1-15重抗原肽疫苗的方法,并对其免疫学活性进行鉴定。方法采用间接偶联法合成8分支Aβ1-15重抗原肽（MAP）,通过高效反相液相色谱（RP-HPLC）、SDS-PAGE以及氨基酸成分分析对其进行初步鉴定。以合成的MAP Aβ1-15C57BL/6小鼠,用ELESA法检测血清特异性抗Aβ抗体。结果间接偶联法合成的MAP Aβ1-15RP-HPLC层析后,呈现为一宽大主峰。SDS-PAGE检测显示,共有8条蛋白带,条带梯度比较均匀,分别为1～8分支的MAP Aβ1-15基酸组份及含量基本与Aβ1-15肽的序列一致。以合成的MAP Aβ1-15免疫C57BL/6小鼠后,可产生高滴度的特异性抗Aβ抗体。结论间接偶联法可成功地合成MAP Aβ1-15,且具有很好的免疫学活性,但合成的MAP产物难以纯化。 展开更多

关键词 间接偶联法 多肽合成 Aβ1-15多重抗原肽疫苗 免疫学活性

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