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应用实时荧光定量RT-PCR法建立肝癌分子诊断指数 被引量:4
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作者 王伟丽 高英堂 +5 位作者 杜智 王毅军 景丽 郭华 杨斌 白同 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第10期985-991,共7页
目的:筛选肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中表达水平较正常肝细胞差异大、特异性好的基因,建立肝癌分子诊断指数,以期从分子病因学角度实现对肝癌的早期诊断.方法:随机选择38例手术切除组织标本,其中正常肝5例、肝炎4例、肝硬... 目的:筛选肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中表达水平较正常肝细胞差异大、特异性好的基因,建立肝癌分子诊断指数,以期从分子病因学角度实现对肝癌的早期诊断.方法:随机选择38例手术切除组织标本,其中正常肝5例、肝炎4例、肝硬化(LC)12例、HCC和癌旁组织17例,实时荧光定量RT-PCR检测9个基因的表达,以管家基因G3PDH为对照,2-△△CT法计算目的基因相对表达量,依据表达异常的基因个数建立分子诊断指数.结果:GPC3等6个基因在正常肝、肝炎、LC与HCC组的两组或多组间存在差异(P<0.05);GPC3、E2F1从肝炎组到LC、HCC组呈递增趋势,HGF、CLDN10在LC组表达量升高,而在HCC组明显下降,PTEN、PRDM2、MGMT从肝炎组到LC、HCC组呈递减趋势;9个基因在LC组分子诊断指数平均值为1.58,在HCC组平均值为5.24,二者差异显著;GPC3、E2F1、MMP2从癌旁到癌呈递增趋势,CLDN10、HGF、PTEN、DLC1、PRDM2、MGMT从癌旁到癌呈递减趋势.结论:通过筛选更多基因的组合分析,分子诊断指数有望成为鉴别诊断早期肝癌的一种有效方法. 展开更多
关键词 肝细胞癌 基因 表达 实时荧光定量RT—PCR 分子诊断指数
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肝癌相关基因表达的荧光定量PCR检测及分子诊断指数的建立 被引量:1
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作者 余俊 王毅军 +6 位作者 高英堂 石文霞 王瞿辉 刘彤 许彦杰 杨斌 杜智 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第6期588-595,共8页
目的:研究肝细胞癌相关基因表达,建立肝癌分子诊断指数,以期能更准确的诊断肝癌.方法:采用实时荧光定量PCR检测40例肝细胞癌患者癌组织和配对的癌旁2cm及手术切缘组织、10例肝硬化组织、10例正常肝脏组织中11个基因的表达,以管家基因G3... 目的:研究肝细胞癌相关基因表达,建立肝癌分子诊断指数,以期能更准确的诊断肝癌.方法:采用实时荧光定量PCR检测40例肝细胞癌患者癌组织和配对的癌旁2cm及手术切缘组织、10例肝硬化组织、10例正常肝脏组织中11个基因的表达,以管家基因G3PDH为对照,2-△△CT法计算目的基因相对表达量,挑选出特异性好且与正常肝、肝硬化组织表达差异大的肝癌相关基因,依据这些基因在组织中表达异常的个数建立分子诊断指数.结果:在40例癌组织中,抑癌基因PRDM2、IGFBP3、DLC-1分别有65.0%、75.0%、67.5%的标本表达<3倍正常肝组织,癌基因GPC3、STMN、CCNA2、BIRC5、AFP分别有87.5%、77.5%、82.5%、85.0%、67.5%的标本表达>3倍正常肝组织,并且与肝硬化组织表达差异显著(0.45±0.69vs0.50±0.20;0.17±0.20vs0.67±0.47;0.29±0.48vs0.58±0.60;677.57±999.30vs4.41±3.99;17.56±28.28vs1.17±1.08;53.17±103.64vs2.09±1.50;16.53±16.39vs1.82±1.39;4445.70±11642.87vs0.86±0.43,均P<0.05).以此8个基因建立分子诊断指数,其在肝硬化、手术切缘、癌旁2cm、癌组织中分别为2.2±1.5、3.0±1.6、2.9±1.5、6.3±1.2,癌组与肝硬化组、切缘组、癌旁2cm组差异显著.以肝硬化组作为对照组,当分子诊断指数≥4诊断为肝癌时,ROC曲线的敏感性为100%,特异性为90%,AUC=0.995.结论:利用荧光定量PCR检测肝癌相关基因表达,成功建立分子诊断指数,提高了肝癌诊断的敏感性及特异性. 展开更多
关键词 肝细胞癌 基因 表达 实时荧光定量PCR 分子诊断指数
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荧光实时定量PCR对肺癌相关基因检测及其临床意义
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作者 王明贤 杨华 杨志强 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期635-636,639,共3页
目的采用荧光实时定量PCR对肺癌相关基因检测并建立辅助诊断指数。方法采用荧光实时定量PCR对肺癌患者手术标本LUNX、CK19、CEA、MUC1及Survivin等肺癌相关基因mRNA进行检测,运用2-△△CT算法计算相对表达量,并以此建立辅助诊断指数。结... 目的采用荧光实时定量PCR对肺癌相关基因检测并建立辅助诊断指数。方法采用荧光实时定量PCR对肺癌患者手术标本LUNX、CK19、CEA、MUC1及Survivin等肺癌相关基因mRNA进行检测,运用2-△△CT算法计算相对表达量,并以此建立辅助诊断指数。结果 LUNX、CK19、CEA、MUC1及Survivin在正常肺组织、手术切缘、癌旁与肿瘤组织间的表达比较差异有统计学意义(P<0.05),且呈现递增趋势;设定辅助诊断指数大于或等于3.5为肺癌时,其敏感度95%,特异度为92%,阳性结果预示值(PPV)为95.33%,阴性结果预示值(NPV)为98.00%。结论利用荧光实时定量PCR对肺癌相关基因进行检测并建立辅助诊断指数,能有助提高肺癌诊断的敏感度与特异度。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 肺肿瘤 分子辅助诊断指数
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