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血清ALDH2和NLRP3活性水平在冠心病不同血管病变程度中的变化 被引量：10
1
作者 康品方 戎李 +6 位作者 孙硕 张冰 赵懿 张恒 高琴 唐碧 王洪巨 《蚌埠医学院学报》 CAS 2020年第7期854-858,共5页
目的:通过检测血清线粒体乙醛脱氢酶2(ALDH2)及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)活性水平,分析血清ALDH2和NLRP3与冠心病(CHD)不同病变程度之间的相关性,... 目的:通过检测血清线粒体乙醛脱氢酶2(ALDH2)及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)活性水平,分析血清ALDH2和NLRP3与冠心病(CHD)不同病变程度之间的相关性,探讨二者在CHD发生、发展中的变化规律。方法:选择因胸痛入院并行冠脉造影检查的病人170例,其中冠状动脉(冠脉)造影明确诊断为CHD病人133例,同期冠脉造影正常者37例(对照组)。133例CHD病人按照冠脉狭窄严重程度分成轻度狭窄组(<50%,is-CHD组)19例、中度狭窄组(50%~75%,ms-CHD组)41例和严重狭窄组(≥75%,ss-CHD组)73例。应用酶联免疫吸附实验检测血清中ALDH2及NLRP3活性水平,分析在有无CHD及冠脉不同病变程度下ALDH2和NLRP3活性差异,探讨ALDH2及NLRP3活性水平与CHD发生、发展的关系,采用Pearson相关性分析ALDH2和NLRP3的血清学影响因素。结果:CHD组血肌酐水平高于对照组和ms-CHD组(P<0.05),高密度脂蛋白在ss-CHD组中明显低于对照组(P<0.01),ms-CHD和ss-CHD组淋巴/单核细胞低于is-CHD组(P<0.05)。is-CHD组、ms-CHD组和ss-CHD组血清ALDH2水平均较对照组减低(P<0.05~P<0.01),并且随着冠脉狭窄严重程度的加重而逐渐减低(P<0.01);而血清NLRP3水平随着冠脉病变程度加重其含量逐渐升高(P<0.01),且两者之间呈正相关关系(P<0.05)。随着CHD病变支数的增加ALDH2逐渐下降(P<0.01),而NLRP3水平逐渐增加(P<0.05),以NLRP3变化为显著。血清ALDH2水平与Gensini评分呈明显负相关关系(r=-0.247,P<0.01),而NLRP3水平与Gensini评分呈明显正相关关系(r=0.477,P<0.01)。血清ALDH2与LDL呈负相关关系(r=-0.220,P<0.05);而血清NLRP3与ALDH2呈负相关关系(r=-0.201,P<0.05)。结论:随着冠脉病变程度加重,血清ALDH2水平逐渐降低,血清NLRP3水平逐渐升高,两者间存在一定的线性相关。 展开更多
关键词 冠状动脉疾病 病变狭窄程度 线粒体乙醛脱氢酶2
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激动线粒体ALDH2抑制脓毒症小鼠肝损伤铁死亡机制的研究
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作者 李璐 李玉萍 +4 位作者 陆娜 杜若丽 李文韬 叶红伟 高琴 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期684-689,共6页
目的观察盲肠结扎穿孔术(CLP)诱导的脓毒症小鼠肝损伤时不同途径铁死亡的发生,探讨线粒体乙醛脱氢酶2(ALDH2)是否通过抑制铁死亡减轻脓毒症肝损伤。方法选取60只8周龄雄性C57BL/6J小鼠,按随机数字表法分为假手术(Sham)组、CLP组、铁死... 目的观察盲肠结扎穿孔术(CLP)诱导的脓毒症小鼠肝损伤时不同途径铁死亡的发生,探讨线粒体乙醛脱氢酶2(ALDH2)是否通过抑制铁死亡减轻脓毒症肝损伤。方法选取60只8周龄雄性C57BL/6J小鼠,按随机数字表法分为假手术(Sham)组、CLP组、铁死亡抑制剂铁抑素-1(Fer-1)组、ALDH2特异性激动剂Alda-1组、铁螯合剂右雷佐生(DXZ)组、二甲基亚砜(DMSO)组,每组10只。采用CLP法建立小鼠脓毒症肝损伤模型;Sham组仅开腹不结扎和穿刺盲肠。DMSO组、Fer-1组、DXZ组和Alda-1组分别于CLP术前1 h腹腔注射10 mL/kg 5%DMSO、5 mg/kg Fer-1、50 mg/kg DXZ和10 mg/kg Alda-1。术后24 h,麻醉小鼠取眼球血及肝组织。苏木素-伊红(HE)染色,镜下观察肝脏结构和炎症浸润情况;检测各组血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平及肝组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)水平;蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测肝组织ALDH2、铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁死亡抑制蛋白1(FSP1)和转铁蛋白受体1(TFR1)的蛋白表达。结果与Sham组相比,CLP组小鼠术后24 h肝脏可见不同程度淤血、肝细胞排列紊乱及炎症细胞浸润;与CLP组相比,Fer-1组、DXZ组和Alda-1组小鼠肝脏形态学有改善,损伤减轻,炎症细胞浸润减少。与Sham组相比,CLP组血清ALT、AST水平及肝组织MDA、ROS含量和TFR1蛋白表达显著升高,肝组织SOD活性及ALDH2、GPX4和FSP1蛋白表达显著降低。与CLP组相比,Fer-1组、DXZ组和Alda-1组血清ALT、AST水平显著降低〔ALT(U/L):45.76±10.81、37.30±2.98、36.40±12.75比73.06±12.20,AST(U/L):61.57±2.69、52.41±6.92、56.05±8.29比81.59±5.46,均P<0.05〕,肝组织MDA、ROS含量及TFR1蛋白表达显著降低〔MDA(μmol/L):0.60±0.10、0.57±0.18、0.83±0.39比1.61±0.30,ROS(荧光强度):270.34±9.64、276.02±62.33、262.05±18.55比455.38±36.07,TFR1/GAPDH:0.90±0.04、1.01±0.09、0.55±0.08比1.18±0.0 展开更多
关键词 线粒体乙醛脱氢酶2 脓毒症肝损伤 铁死亡
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口腔黏膜脱落细胞用于稳定型心绞痛硝酸甘油治疗患者基因突变快速检测的效果观察
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作者 高必贞 余将丽 +4 位作者 党书毅 许海军 陈佳娟 熊健 董晓 《山东医药》 CAS 2023年第17期29-32,37,共5页
目的探讨口腔黏膜脱落细胞用于稳定型心绞痛硝酸甘油治疗患者线粒体乙醛脱氢酶2(ALDH2)*2基因突变快速检测的准确率和安全性。方法收集稳定型心绞痛患者346例,同时采集患者口腔黏膜脱落细胞及全血标本,应用荧光探针法检测口腔黏膜脱落... 目的探讨口腔黏膜脱落细胞用于稳定型心绞痛硝酸甘油治疗患者线粒体乙醛脱氢酶2(ALDH2)*2基因突变快速检测的准确率和安全性。方法收集稳定型心绞痛患者346例,同时采集患者口腔黏膜脱落细胞及全血标本,应用荧光探针法检测口腔黏膜脱落细胞标本ALDH2*2基因型,应用对比试剂检测全血标本ALDH2*2基因型,将两种方法检测结果进行对比,结果不相符的标本使用Sanger测序法检测全血标本ALDH2*2基因型,判定检测结果;对比两种方法检测结果和检测过程中的不良事件发生率。结果346例稳定型心绞痛患者均成功采集口腔黏膜脱落细胞标本和全血标本,采样过程均无明显不良事件发生。荧光探针法和对比试剂检测ALDH2*2基因总突变率分别为33.82%(117/346)及34.68%(120/346),两种方法检测出的ALDH2*2总基因突变率比较差异无统计学意义(P>0.05)。两种方法共3例检测结果不一致,采用Sanger法测序进行复核显示,测序复核结果均与口腔黏膜脱落细胞荧光探针法检测结果一致。两种方法检测结果的ALDH2基因GG型符合率为100.00%(95%CI 98.33%~100.00%),GA型符合率为97.20%(95%CI92.08%~99.04%),AA型符合率为100.00%(95%CI77.19%~100.00%),ALDH2基因型总符合率为99.13%(95%CI 97.48%~99.70%)。一致性分析结果显示,两种方法检测结果的ALDH2基因AA型Kappa值为1.00,GA型Kappa值为0.97,GG型Kappa值为0.98,ALDH2基因型总Kappa值为0.98。结论口腔黏膜脱落细胞用于稳定型心绞痛硝酸甘油治疗患者ALDH2*2基因突变快速检测的准确率及安全性良好,可有效简化标本提取过程,提高患者依从性。 展开更多
关键词 口腔黏膜脱落细胞 线粒体乙醛脱氢酶2 基因突变 硝酸甘油 稳定型心绞痛
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线粒体ALDH2对高糖处理的乳鼠心肌成纤维细胞中自噬相关蛋白影响 被引量：3
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作者 唐碧 康品方 +5 位作者 郭建路 朱磊 徐庆梅 高琴 张恒 王洪巨 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期523-527,共5页
目的探讨自噬是否介导乙醛脱氢酶(ALDH)2对高糖处理的乳鼠心肌成纤维细胞的作用。方法无菌条件下取出生3d内SD大鼠乳鼠心脏,剪碎并用胰蛋白酶和胶原酶2混合酶消化成单个细胞,经差速贴壁后并传代培养,当传至3代时进行处理。应用免疫荧光... 目的探讨自噬是否介导乙醛脱氢酶(ALDH)2对高糖处理的乳鼠心肌成纤维细胞的作用。方法无菌条件下取出生3d内SD大鼠乳鼠心脏,剪碎并用胰蛋白酶和胶原酶2混合酶消化成单个细胞,经差速贴壁后并传代培养,当传至3代时进行处理。应用免疫荧光检测培养的乳鼠心肌成纤维细胞内波形蛋白以此鉴定原代培养心肌成纤维细胞纯度;实验涉及如下分组:5.5 mmol/L糖对照组(F)、30 mmol/L高糖组(FH)、30 mmol/L高糖加乙醛脱氢酶2激动剂(Alda-1)组(FHA)、30 mmol/L高糖加乙醛脱氢酶2抑制剂(Daidzin)组(FHD)、30 mmol/L高糖加乙醛脱氢酶2激动剂(Alda-1)和乙醛脱氢酶2抑制剂(Daidzin)(FHAD);Western blot检测ALDH2、微管相关蛋白1轻链3B亚基(LC3B)、Beclin-1的蛋白表达;羟脯胺酸试剂盒测定细胞培养液中羟脯胺酸含量;CCK-8试剂盒测定心肌成纤维细胞增殖能力。结果与F组相比,FH组ALDH2蛋白表达降低,Beclin-1、LC3B蛋白表达降低,细胞培养上清液内羟脯胺酸含量、细胞数目增高;与FH组相比,FHA组Beclin-1、LC3B蛋白表达、ALDH2蛋白表达增加,细胞数目、细胞内羟脯胺酸含量降低,与此同时FHD组ALDH2蛋白及Beclin-1、LC3B表达降低,细胞数目、细胞内羟脯胺酸含量增高。结论线粒体ALDH2抑制高糖诱导的乳鼠心肌成纤维细胞增殖作用,其机制可能与ALDH2对自噬相关蛋白Beclin-1、LC3B的上调作用有关。 展开更多
关键词 线粒体乙醛脱氢酶2 高糖 自噬
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线粒体乙醛脱氢酶2通过下调拮抗高糖引起的乳鼠心肌细胞损伤 被引量：2
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作者 郭建路 康品方 +4 位作者 朱磊 孙硕 陶敏 张恒 唐碧 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1288-1293,共6页
目的探讨钙调神经磷酸酶(CaN)-活化的T细胞核因子(NFAT)3通路是否介导乙醛脱氢酶(ALDH)2对高糖处理的乳鼠心室肌细胞的作用。方法无菌条件下取出生3 d内SD大鼠乳鼠心脏,心尖部剪碎并用胰蛋白酶和胶原酶2混合酶消化成单个细胞,经差速贴... 目的探讨钙调神经磷酸酶(CaN)-活化的T细胞核因子(NFAT)3通路是否介导乙醛脱氢酶(ALDH)2对高糖处理的乳鼠心室肌细胞的作用。方法无菌条件下取出生3 d内SD大鼠乳鼠心脏,心尖部剪碎并用胰蛋白酶和胶原酶2混合酶消化成单个细胞,经差速贴壁后并在培养液中加入5-Brdu进行培养,当其生长呈融合状态时对心室肌细胞进行处理。应用免疫荧光检测培养的乳鼠心肌细胞内α-SA蛋白以此鉴定原代培养心室肌细胞纯度;实验涉及如下分组:5.5 mmol/L糖对照组(M)、30 mmol/L高糖组(MH)、30 mmol/L高糖加乙醛脱氢酶2激动剂(Alda-1)组(MHA)、30 mmol/L高糖加乙醛脱氢酶2抑制剂(Daidzin)组(MHD)、30 mmol/L高糖加乙醛脱氢酶2激动剂(Alda-1)和NFAT3抑制剂(11R-VIVIT)组(MHAV);荧光探针检测细胞内钙离子浓度;ELISA测定细胞内CaN含量;Western blot检测ALDH2、CaN、NFAT3蛋白表达。结果与M组相比,MH组ALDH2蛋白表达降低(P<0.05),CaN蛋白表达增高(P<0.05)、NFAT3蛋白表达以及细胞内CaN含量、Ca^(2+)浓度均增高(P<0.01);与MH组相比,MHA组Ca^(2+)浓度降低(P<0.05)、细胞内CaN含量降低(P<0.01)、CaN蛋白和NFAT3蛋白表达降低(P<0.05)、ALDH2蛋白表达增加(P<0.05),MHD组Ca^(2+)浓度升高(P<0.01)、细胞内CaN含量升高(P<0.05);与MHA组相比,MHAV组的ALDH2蛋白表达量无明显变化(P>0.05),NFAT3蛋白表达量降低(P<0.05)。结论线粒体ALDH2对高糖诱导的乳鼠心肌细胞起保护作用,其机制可能与ALDH2对Ca^(2+)-CaN-NFAT3信号通路的负调节作用有关。 展开更多
关键词 线粒体乙醛脱氢酶2 高糖 钙调神经磷酸酶 活化T细胞核因子3
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不同浓度硝酸甘油对心脏缺血/再灌注的作用及ALDH2的作用 被引量：1
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作者 王晓梅 李正红 +3 位作者 夏满莉 胡杰 姜翠荣 高琴 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第23期4597-4599,共3页
目的探讨不同浓度硝酸甘油(GTN)对离体大鼠心脏缺血/再灌注损伤的作用,进一步分析线粒体乙醛脱氢酶2(ALDH2)在其中的作用。方法采用离体大鼠心脏Langendorff灌流方法,局部结扎冠状动脉左前降支30 min,复灌30 min复制缺血/再灌注模型。... 目的探讨不同浓度硝酸甘油(GTN)对离体大鼠心脏缺血/再灌注损伤的作用,进一步分析线粒体乙醛脱氢酶2(ALDH2)在其中的作用。方法采用离体大鼠心脏Langendorff灌流方法,局部结扎冠状动脉左前降支30 min,复灌30 min复制缺血/再灌注模型。实验分五组,正常对照组,单纯缺血/再灌注组,GTN低浓度组(10-8mol/L GTN),中浓度组(10-7mol/L GTN)及高浓度组(2×10-6mol/L GTN)。测定心室动力学指标和复灌期间冠脉流出液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量,RT-PCR测定左心室前壁心尖组织线粒体ALDH2基因mRNA表达水平。结果与单纯缺血/再灌注组相比,GTN低浓度组左心室发展压(LVDP)、室内压最大上升/下降速率(±dp/dtmax)均增高,左心室舒张末压(LVEDP)降低,中浓度组无明显差异,高浓度组LVDP和±dp/dtmax均降低;LVEDP增高。与缺血/再灌注组相比,正常对照组和低浓度GTN组心肌组织ALDH2mRNA表达增高,中浓度无明显差异,高浓度组大鼠心肌ALDH2 mRNA表达降低。结论低浓度GTN可对抗心肌缺血/再灌注损伤,高浓度GTN加重损伤,中浓度GTN对损伤影响不大,此现象可能与不同浓度GTN引起心肌ALDH2的释放量不同有关。 展开更多
关键词 硝酸甘油 缺血/再灌注 线粒体乙醛脱氢酶2
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