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Wortmannin通过抑制癫痫大鼠海马自噬活性发挥神经保护作用 被引量：16
1
作者 曹丽丽 董艳 +3 位作者 徐婧婧 林幽町 迟令懿 迟兆富 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1584-1588,共5页
目的:探讨癫痫大鼠海马自噬活性的变化及自噬抑制剂wortmannin(WM)对致痫大鼠海马神经元的保护作用。方法:实验大鼠分为对照组、致痫2 h、8 h、16 h、24 h、72 h组和WM干预组。应用HE染色和Nissl染色观察癫痫大鼠海马神经元损伤的变化... 目的:探讨癫痫大鼠海马自噬活性的变化及自噬抑制剂wortmannin(WM)对致痫大鼠海马神经元的保护作用。方法:实验大鼠分为对照组、致痫2 h、8 h、16 h、24 h、72 h组和WM干预组。应用HE染色和Nissl染色观察癫痫大鼠海马神经元损伤的变化。免疫印迹检测海马组织微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ的比值作为自噬活性的指标。结果:LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值在大鼠癫痫发作2 h时开始升高,24 h达到高峰,持续升高至少72 h。致痫24 h时海马CA1区出现明显神经元损伤和丢失。WM干预组CA1区存活神经元数目(100.88±18.73)显著高于癫痫组(70.16±5.09)(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值低于癫痫组(P<0.05)。结论:癫痫发作导致的海马损伤时存在自噬激活现象;WM通过抑制自噬活性减轻癫痫发作所致的海马损伤,具有神经保护作用。 展开更多
关键词 癫痫 自吞噬作用 微管相关蛋白1轻链3 海马 WORTMANNiN
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系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞微管相关蛋白1轻链3 mRNA表达水平及其意义 被引量：7
2
作者 罗雄燕 杨明辉 +3 位作者 夏艳辉 向阳 刘毅 袁国华 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期134-138,共5页
目的 通过检测系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMCs）中微管相关蛋白1轻链3 （LC3）表达,探讨其与SLE发病的关系.方法 选56例SLE患者（SLE组）和45例健康体检者（对照组）,应用实时定量PCR检测2组受试者PBMCs中LC3 mRNA... 目的 通过检测系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMCs）中微管相关蛋白1轻链3 （LC3）表达,探讨其与SLE发病的关系.方法 选56例SLE患者（SLE组）和45例健康体检者（对照组）,应用实时定量PCR检测2组受试者PBMCs中LC3 mRNA表达水平,同时采用流式细胞术检测2组受试者PBMCs自噬发生情况,进一步分析LC3 mRNA表达水平与自噬发生、SLE患者临床特点及病情活动度的相关性.结果 SLE患者PBMCs中LC3 mRNA表达水平为1.30±0.10,低于对照组（1.35 ±0.09;P =0.029）.SLE患者PBMCs自噬发生率为（2.21±1.07）％,显著低于对照组[（9.91±4.01）％;P=0.047].PBMCs中LC3 mRNA表达水平与PBMCs自噬发生率存在相关性（r=0.735,P=0.003）.PBMCs中LC3 mRNA表达水平＜1.351者SLE疾病活动指数为10.7±2.8,85.2％（23/27）的患者出现肾脏受累,而关节炎、浆膜炎和血液系统损害发生率虽有增高趋势,但差异无统计学意义.结论 SLE患者PBMCs中LC3 mRNA表达减少,导致自噬形成障碍,致使不能有效清除衰老、变性的生物分子,提示自噬在SLE发病及病情进展中发挥重要作用. 展开更多
关键词 微管相关蛋白1轻链3 红斑狼疮 系统性 自噬
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BISAP评分联合血清TG、MAP1-LC3检测对急性重症胰腺炎患者病情及预后的评估价值 被引量：21
3
作者 陈莹 李越 《山东医药》 CAS 2020年第1期21-24,共4页
目的探讨严重程度床边指数(BISAP)评分联合血清甘油三酯(TG)、微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)检测对急性重症胰腺炎(SAP)患者病情及预后的评估价值。方法选择169例急性胰腺炎(AP)患者,根据病情将其分为轻症AP(MAP组,n=97)和重症AP(SAP组,... 目的探讨严重程度床边指数(BISAP)评分联合血清甘油三酯(TG)、微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)检测对急性重症胰腺炎(SAP)患者病情及预后的评估价值。方法选择169例急性胰腺炎(AP)患者,根据病情将其分为轻症AP(MAP组,n=97)和重症AP(SAP组,n=72),并于同期选取60例体检健康者为对照组。采用BISAP评分评估各组病情,用酶联免疫吸附法检测血清TG、MAP1-LC3水平,用Pearson积矩相关分析BISAP评分与血清TG、MAP1-LC3的关系。随访3个月,记录SAP患者预后,包括多器官功能障碍综合征(MODS)、胰腺坏死、死亡。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估BISAP评分及血清TG、MAP1-LC3对SAP患者预后的预测价值。结果SAP组BISAP评分高于MAP组(P<0.05)。MAP、SAP组血清TG、MAP1-LC3水平高于对照组,且SAP组血清TG、MAP1-LC3水平高于MAP组,比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。MAP患者BISAP评分与血清TG、MAP1-LC3水平呈正相关(r分别为0.529、0.617,P均<0.05);SAP患者BISAP评分与血清TG、MAP1-LC3呈正相关(r分别为0.683、0.725,P均<0.05)。不同预后SAP患者BISAP评分及血清TG、MAP1-LC3水平比较差异有统计学意义(P均<0.05)。BISAP评分及血清TG、MAP1-LC3对SAP患者MODS、胰腺坏死、死亡均有一定的预测价值,三指标联合检测对SAP患者预后的预测价值优于单一指标检测(P均<0.05)。结论BISAP评分联合血清TG、MAP1-LC3检测可评估SAP患者病情严重程度,预测其预后。 展开更多
关键词 急性重症胰腺炎 急性胰腺炎严重程度床边指数 甘油三酯 微管相关蛋白1轻链3
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针刺对出血性中风大鼠脑组织自噬相关蛋白表达的影响 被引量：20
4
作者 刘昊 张菶 +6 位作者 李新伟 冯培培 杜嘉 楼柯浪 阮晨 周驰 孙晓伟 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期637-642,共6页
目的:观察针刺'百会'透'曲鬓'穴对出血性中风大鼠自噬相关蛋白的影响,探讨针刺促进脑出血后大鼠神经功能恢复的机制。方法:120只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、非穴位组、针刺组、雷帕霉素组,每组按脑出血后不同时间... 目的:观察针刺'百会'透'曲鬓'穴对出血性中风大鼠自噬相关蛋白的影响,探讨针刺促进脑出血后大鼠神经功能恢复的机制。方法:120只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、非穴位组、针刺组、雷帕霉素组,每组按脑出血后不同时间点(造模后第3、7天)分2个亚组。将50μL自体血注入到大鼠尾状核制备出血性中风模型。各干预组分别给予针刺'百会'透患侧'曲鬓'、非穴位针刺、侧脑室注射雷帕霉素进行干预。于各时间点对大鼠进行神经功能行为学评分(悬线测试、平衡行走测试)。评分结束后取各组大鼠出血半暗带区脑组织,免疫组织化学法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白的阳性表达,Western blot法检测LC3-Ⅱ/Ⅰ的变化。结果:与假手术组比较,模型组造模后第3、7天的神经功能行为学评分(悬线测试、平衡行走测试)显著降低(P<0. 05);与模型组比较,针刺组、雷帕霉素组大鼠神经功能行为学评分明显升高(P<0. 05),且针刺组高于雷帕霉素组(P<0. 05)。与同时间点假手术组比较,造模后第3、7天模型组大鼠脑组织LC3蛋白阳性表达、LC3-Ⅱ/Ⅰ明显升高(P<0. 05);与同时间点的模型组比较,针刺组大鼠脑组织LC3蛋白阳性表达、LC3-Ⅱ/Ⅰ明显升高(P<0. 05);与针刺组比较,雷帕霉素组大鼠脑组织LC3蛋白阳性表达、LC3-Ⅱ/Ⅰ明显升高(P<0. 05)。结论:针刺能上调出血性中风大鼠脑组织LC3-Ⅱ/Ⅰ,良性激活自噬水平,进而改善大鼠神经功能缺损。 展开更多
关键词 针刺 出血性中风 自噬 微管相关蛋白1轻链3 雷帕霉素
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芪玉三龙汤调节mTOR/Beclin1/LC3信号轴相关分子的表达诱导肺癌A549细胞自噬 被引量：18
5
作者 高雅婷 王心恒 +4 位作者 王小乐 程建超 张星星 童佳兵 李泽庚 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期98-104,共7页
目的:从细胞水平探讨芪玉三龙汤干预肺癌A549细胞对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1)/微管相关蛋白1轻链3(LC3)信号轴关键分子表达的影响。方法:选择肺癌人A549细胞作为研究对象,采用细胞增殖检测试剂... 目的:从细胞水平探讨芪玉三龙汤干预肺癌A549细胞对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1)/微管相关蛋白1轻链3(LC3)信号轴关键分子表达的影响。方法:选择肺癌人A549细胞作为研究对象,采用细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)法检测芪玉三龙汤含药血清对A549细胞活性的影响;原位末端标记法(TUNEL),透射电镜(TEM)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(WB)分别检测芪玉三龙汤对A549细胞凋亡、自噬体形成及自噬标记分子表达的影响。结果:芪玉三龙汤血清能以浓度依赖性的方式抑制细胞活性;与空白血清组比较,芪玉三龙汤血清组A549细胞的凋亡数量显著增多(P<0.01),自噬体形成增加;与空白血清组比较,芪玉三龙汤血清组A549细胞的mTOR mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01),Beclin1,自噬相关基因5(Atg5),自噬相关基因13(Atg13)mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。结论:芪玉三龙汤能够诱导肺癌A549细胞发生自噬,其具体作用机制可能与其下调mTOR的表达,上调Beclin1,Atg5,Atg13,LC3的表达,促进LC3Ⅰ转化为LC3Ⅱ有关。 展开更多
关键词 芪玉三龙汤 A549细胞 细胞自噬 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR) 自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1) 微管相关蛋白1轻链3(LC3)
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电针预处理通过调控皮层区自噬改善大鼠脑缺血再灌注损伤 被引量：18
6
作者 黄亚光 杨松柏 +3 位作者 杜利鹏 蔡三金 冯知涛 梅志刚 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期867-872,共6页
目的:观察电针"百会""曲池""足三里"对脑缺血再灌注损伤大鼠大脑皮层区自噬的影响,探讨电针预处理改善大鼠脑缺血再灌注损伤的机制。方法:SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组,每组11只。电针组... 目的:观察电针"百会""曲池""足三里"对脑缺血再灌注损伤大鼠大脑皮层区自噬的影响,探讨电针预处理改善大鼠脑缺血再灌注损伤的机制。方法:SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组,每组11只。电针组电针"曲池""百会""足三里",每次30 min,每天1次,连续5 d。模型组和电针组大鼠末次电针结束30 min后,采用线栓法制备大脑中动脉栓塞模型,使大鼠脑缺血1.5 h,拔栓再灌注24 h后进行神经功能缺损评分,2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色法检测脑梗死体积,高尔基染色法检测神经元树突棘密度,电镜观察大脑皮层缺血区神经元结构及自噬小体形成情况,Western blot法检测大脑皮层缺血区中微管相关蛋白1轻链3(LC3)和选择性自噬接头蛋白sequestosome-1(SQSTM1/p62)的表达水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠神经功能缺损评分明显升高(P<0.01),脑梗死体积显著增大(P<0.01),自噬小体增多,皮层缺血区LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ显著增加(P<0.01),p62的表达显著下调(P<0.01)。与模型组相比,电针组大鼠神经功能缺损评分明显降低(P<0.01),脑梗死体积显著减小(P<0.01),自噬小体减少,皮层缺血区LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ显著降低(P<0.01),p62的表达显著上调(P<0.01)。结论:电针预处理可能通过抑制自噬改善脑缺血再灌注损伤。 展开更多
关键词 针刺 自噬 脑缺血再灌注损伤 微管相关蛋白1轻链3 选择性自噬接头蛋白
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当归拈痛汤对风湿热痹型佐剂性关节炎大鼠自噬蛋白LC3,Beclin1,p62表达的影响 被引量：17
7
作者 陆麒瑾 李佳钰 +4 位作者 蔡义思 赵帆 林鸿鑫 刘刚 袁立霞 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期41-49,共9页
目的:研究当归拈痛汤对风湿热痹型佐剂性关节炎大鼠的防治作用及对自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3),自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1),p62表达的影响。方法:将6周龄SD雄性大鼠随机分为正常组,风湿热痹模型组,当归拈痛汤低、中、高... 目的:研究当归拈痛汤对风湿热痹型佐剂性关节炎大鼠的防治作用及对自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3),自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1),p62表达的影响。方法:将6周龄SD雄性大鼠随机分为正常组,风湿热痹模型组,当归拈痛汤低、中、高剂量组(5.67,11.34,22.68 g·kg^(-1)),甲氨蝶呤(MTX)组(1.35 mg·kg^(-1)),每组10只,通过对大鼠尾根部皮下注射灭活结核分支杆菌佐剂建立佐剂性关节炎大鼠模型,用人工气候箱进行风湿热痹证模型造模16 d,于免疫当天灌胃给药,持续28 d。进行大鼠一般情况观察及足趾肿胀度、关节炎指数(AI)检测,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠膝关节滑膜组织病理形态学改变,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠滑膜组织LC3,Beclin1,p62的mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)及免疫组化法分别检测大鼠滑膜组织LC3,Beclin1,p62的蛋白表达。结果:与正常组比较,风湿热痹模型组大鼠给药16,20,24,28 d时足趾肿胀度显著升高(P<0.01),AI显著升高(P<0.01),滑膜细胞增生显著,自噬蛋白LC3,Beclin1蛋白及mRNA表达显著上调(P<0.01),p62蛋白及mRNA表达显著下调(P<0.01);与风湿热痹模型组比较,各给药组大鼠足趾肿胀度减轻,滑膜增生情况有不同程度改善,LC3,Beclin1的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01),p62的mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),且当归拈痛汤中剂量组防治效果最佳。结论:当归拈痛汤对风湿热痹型佐剂性关节炎大鼠有明显的防治作用,且这种防治作用可能与调控滑膜组织中自噬相关因子LC3,Beclin1,p62的表达,抑制自噬有关。 展开更多
关键词 当归拈痛汤 风湿热痹 类风湿关节炎 微管相关蛋白1轻链3(LC3) 自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1) P62 自噬
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四妙散调节软骨细胞凋亡与自噬治疗膝骨关节炎大鼠的实验研究 被引量：17
8
作者 沈金明 封蕾 +2 位作者 陈杰 吴煜 于建农 《新中医》 CAS 2017年第9期12-15,共4页
目的:通过膝骨关节炎大鼠模型研究四妙散调节软骨细胞凋亡与自噬治疗膝骨关节炎(KOA)大鼠的作用机制。方法:8周龄SD大鼠27只,随机分为正常对照组、KOA模型组、四妙散组,KOA模型组和四妙散组采用前交叉韧带切除法制作KOA模型,手术6周后... 目的:通过膝骨关节炎大鼠模型研究四妙散调节软骨细胞凋亡与自噬治疗膝骨关节炎(KOA)大鼠的作用机制。方法:8周龄SD大鼠27只,随机分为正常对照组、KOA模型组、四妙散组,KOA模型组和四妙散组采用前交叉韧带切除法制作KOA模型,手术6周后四妙散组以四妙散药液灌胃,正常对照组和KOA模型组以生理盐水灌胃。连续灌胃4周后取膝关节软骨组织,采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术测定凋亡细胞所占比例,采用荧光定量PCR检测关节软骨组织中凋亡和自噬相关基因表达水平。结果:与正常对照组比较,KOA模型组大鼠关节软骨细胞凋亡率显著升高,关节软骨细胞中凋亡相关蛋白Fadd、Casp3的表达显著升高,自噬相关蛋白LC3的表达显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与KOA模型组比较,四妙散组大鼠关节软骨细胞凋亡率显著降低,关节软骨细胞中凋亡相关蛋白Fadd、Casp3的表达显著降低,自噬相关蛋白LC3的表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:软骨细胞凋亡是KOA发病中的重要因素,该凋亡可能通过FADD-CASP3途径发挥作用。软骨细胞自噬作用的激活可抑制细胞凋亡,可能是延缓及控制KOA进展的一个新机制,四妙散可能通过该机制发挥治疗作用。 展开更多
关键词 四妙散 膝骨关节炎 细胞凋亡 FAS相关死亡结构域蛋白(Fadd) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Casp3) 自噬相关基因Beclin 1(Becn 1) 微管相关蛋白1轻链3(LC3) 动物实验 大鼠
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自噬及自噬相关蛋白在帕金森病模型大鼠黑质纹状体中的表达及意义 被引量：16
9
作者 刘斌 孙静 +5 位作者 张晋霞 毛文静 马原源 吕超男 成晓华 毕树立 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 北大核心 2014年第3期187-191,共5页
目的观察自噬及自噬相关蛋白Beclin1及微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1light chain 3,MAPlLC3,简称LC3)在帕金森病(Parkinson disease,PD)模型大鼠黑质纹状体中的表达及变化,探讨自噬在PD发病中的作用。方法将90... 目的观察自噬及自噬相关蛋白Beclin1及微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1light chain 3,MAPlLC3,简称LC3)在帕金森病(Parkinson disease,PD)模型大鼠黑质纹状体中的表达及变化,探讨自噬在PD发病中的作用。方法将90只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、PD模型组(模型组),每组又分为模型制备后4d、8d两个亚组,每个亚组各15只。采用颈背部皮下注射鱼藤酮制作PD模型,透射电镜观察自噬体的形成,免疫组化法和Western blotting法检测黑质纹状体自噬相关蛋白Beclin1和LC3的表达水平。结果 (1)电子显微镜下PD模型组黑质纹状体中出现自噬体,呈圆形,大多位于细胞核旁,溶酶体数量增多。8d时,自噬体、溶酶体数量显著增多。(2)与正常组比较,假手术组黑质纹状体中Beclin1和LC3表达略增多,但差异无统计学意义(均P>0.05);与假手术组比较,模型组黑质纹状体Beclin1和LC3的表达明显增多(均P<0.01),8d高于4d,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论 PD模型大鼠黑质纹状体中自噬活性被激活,自噬可能参与了PD的发病过程。 展开更多
关键词 帕金森病 自噬 BECLiN 1 微管相关蛋白类 微管相关蛋白1轻链3
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艾灸对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞自噬功能的影响 被引量：15
10
作者 刘娜娜 贾学昭 +4 位作者 王茎 朱国旗 李丹 李庆羚 马强 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期25-30,共6页
目的:观察艾灸对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能及自噬相关蛋白LC3、p62表达的影响,探讨艾灸防治CHF的可能机制。方法:SD大鼠随机分为正常组12只与造模组48只,采用腹腔注射盐酸多柔比星复制CHF模型,将建模成功的大鼠随机均分为模型组、艾... 目的:观察艾灸对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能及自噬相关蛋白LC3、p62表达的影响,探讨艾灸防治CHF的可能机制。方法:SD大鼠随机分为正常组12只与造模组48只,采用腹腔注射盐酸多柔比星复制CHF模型,将建模成功的大鼠随机均分为模型组、艾灸组、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、自噬激动剂雷帕霉素(RAPA)组。艾灸组用艾条温和灸双侧"肺俞""心俞"穴,每日1次,每次20min,治疗3周。3-MA组按15 mg/kg给予3-MA混悬液腹腔注射,每日1次,共3周。RAPA组按2mg/kg给予RAPA混悬液灌胃,每日1次,共3周。观察大鼠的一般情况及行为体征;心功能测量仪检测大鼠心率(HR)、心输出量(CO)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升或下降速率(±dp/dtmax);HE染色法观察心肌病理变化;Western blot法检测心肌细胞自噬相关蛋白LC3及p62表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠心肌细胞出现肿胀、空泡,肌纤维断裂、溶解,排列紊乱;与模型组比较,艾灸组和3-MA组大鼠心肌细胞的数量正常,心肌纤维排列相对整齐,RAPA组心肌细胞出现肿胀、空泡,心肌纤维断裂、溶解,排列紊乱等状况。与正常组比较,模型组HR和LVEDP明显升高(P<0.01),CO、LVSP及±dp/dtmax明显下降(P<0.01),LC3-Ⅱ表达、LC3-Ⅱ/Ⅰ明显升高(P<0.01),而p62表达明显下降(P<0.01)。与模型组比较,艾灸组和3-MA组HR和LVEDP明显下降(P<0.05),CO、LVSP及±dp/dtmax明显升高(P<0.05),LC3-Ⅱ表达、LC3-Ⅱ/Ⅰ明显降低(P<0.01),p62表达明显升高(P<0.01),而RAPA组LC3-Ⅱ/Ⅰ明显升高(P<0.01),p62表达明显降低(P<0.01)。结论:艾灸可以改善CHF大鼠心肌损伤,其作用可能与降低心肌细胞LC3-Ⅱ/Ⅰ、升高p62蛋白表达水平,发挥类似于3-MA的自噬抑制作用,抑制心肌细胞过度自噬、减轻心肌损伤有关。 展开更多
关键词 艾灸 慢性心力衰竭 心肌细胞自噬 微管相关蛋白1轻链3 选择性自噬接头蛋白p62
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自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白轻链3在胃癌组织中的表达及临床意义 被引量：13
11
作者 李良庆 潘敦 林振孟 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期508-510,共3页
目的 检测自噬相关基因Beelin 1和微管相关蛋白轻链3（LC3）在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌临床病理参数及患者预后的关系.方法 应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法分别检测96例胃癌石蜡组织和癌旁组织中Beclin 1... 目的 检测自噬相关基因Beelin 1和微管相关蛋白轻链3（LC3）在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌临床病理参数及患者预后的关系.方法 应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法分别检测96例胃癌石蜡组织和癌旁组织中Beclin 1和LC3的蛋白表达水平.应用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和Western blot检测27例新鲜胃癌组织和相应癌旁组织中mRNA和蛋白的表达.结果 新鲜胃癌组织中Beclin l mRNA（ΔCt：5.90±1.52）及蛋白（1.060±0.112）的表达水平较癌旁组织（ΔCt：7.50±1.22;0.964±0.130）高,两者之间差异有统计学意义（=4.87,t=4.643,P＜0.05）.新鲜胃癌组织中LC3 mRNA（ΔCt：5.00±1.34）及蛋白（1.115±0.111）的表达水平较癌旁组织（ΔCt：6.62±1.51;1.002±0.134）高,两者之间差异有统计学意义（t=5.90,t=5.653,P＜ 0.05）.在胃癌石蜡组织中,Beclin l蛋白和LC3表达阳性率（67.7％、64.6％）均高于癌旁组织（45.8％、40.6％）,差异有统计学意义（P＜0.01）.Beclin 1蛋白和LC3均与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移以及临床分期有关（P＜0.05）.Beclin 1和LC3蛋白阳性表达患者的5年生存率明显低于阴性表达者（P＜0.01）.结论 Beclin 1和LC3蛋白表达增高与胃癌的发生、发展相关,提示其发挥着癌基因的作用. 展开更多
关键词 BECLiN 1 微管相关蛋白轻链3 胃癌
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内质网应激及自噬相关蛋白在矽肺患者肺泡巨噬细胞中表达研究 被引量：12
12
作者 韩亚凤 孙海霞 +7 位作者 王忠艳 范丽英 苗益辉 郭骏 陈适 陈刚 姚三巧 袁聚祥 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2015年第1期23-28,共6页
目的研究矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)内质网应激(ERS)和自噬相关蛋白的表达规律。方法采用单纯随机抽样方法,选择矽肺壹期、贰期、叁期男性患者20、28、22例分别设为矽肺壹期、贰期和叁期组,以6例诊断为观察对象的男性矽尘作业工人为对照... 目的研究矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)内质网应激(ERS)和自噬相关蛋白的表达规律。方法采用单纯随机抽样方法,选择矽肺壹期、贰期、叁期男性患者20、28、22例分别设为矽肺壹期、贰期和叁期组,以6例诊断为观察对象的男性矽尘作业工人为对照组。收集研究对象的支气管肺泡灌洗液,分离、纯化和培养AM,经裂解后提取蛋白,采用免疫印迹法检测AM中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、Beclin1和微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白的相对表达水平。结果矽肺壹期、贰期和叁期患者AM中GRP78、Beclin1和LC3的蛋白相对表达水平均高于对照组(P<0.05),矽肺贰期和叁期组患者上述3个指标均高于矽肺壹期组(P<0.05),矽肺叁期组患者AM中GRP78蛋白相对表达水平低于矽肺贰期组(P<0.05);矽肺叁期组患者AM中Beclin1和LC3的蛋白相对表达水平均高于矽肺贰期组,但差异均无统计学意义(P>0.05)。多重逐步线性回归分析结果显示,矽肺患者AM中GRP78、Beclin1和LC3的蛋白相对表达水平均与矽肺期别呈正相关(P<0.01)。结论不同期别矽肺患者AM中ERS和自噬的相关蛋白表达程度不同,AM的ERS和自噬在矽肺纤维化发生发展中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 矽肺 肺泡巨噬细胞 内质网应激 自噬 葡萄糖调节蛋白78 Beclin1 微管相关蛋白1轻链3
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急性胰腺炎患者血清IL-6、IL-10水平变化及其与淋巴细胞自噬凋亡的相关性 被引量：12
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作者 潘静 覃月秋 +6 位作者 徐晨阳 梁云轩 宋嗣恩 季科 杨复锵 周喜汉 黄赞松 《山东医药》 CAS 2019年第27期21-24,共4页
目的观察急性胰腺炎(AP)患者血清白细胞介素6(IL-6)、IL-10水平变化,探讨其与淋巴细胞自噬、凋亡的关系.方法73例AP患者中轻症急性胰腺炎(MAP,MAP组)25例、中度重症急性胰腺炎(MSAP,MSAP组)25例、重症急性胰腺炎(SAP,SAP组)23例,选择同... 目的观察急性胰腺炎(AP)患者血清白细胞介素6(IL-6)、IL-10水平变化,探讨其与淋巴细胞自噬、凋亡的关系.方法73例AP患者中轻症急性胰腺炎(MAP,MAP组)25例、中度重症急性胰腺炎(MSAP,MSAP组)25例、重症急性胰腺炎(SAP,SAP组)23例,选择同期健康体检者25例为对照组.AP患者入院24 h内采集外周血,对照组体检时采集外周血,ELISA法检测各组血清IL-6、IL-10、细胞自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)及凋亡相关因子半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3),流式细胞术测算各组淋巴细胞自噬率、凋亡率,Pearson相关分析法分析AP患者血清IL-6、IL-10水平与血清LC3、Caspase-3水平的相关性.结果①血清IL-6、IL-10水平:与对照组比较,MAP、MSAP、SAP组血清IL-6、IL-10水平升高(P均<0.05);与MAP组比较,MSAP组血清IL-6水平升高、IL-10水平降低(P均<0.05);与MSAP、MAP组比较,SAP组血清IL-6水平升高、IL-10水平降低(P均<0.05).②淋巴细胞自噬情况:与MSAP、MAP及对照组比较,SAP组血清LC3水平、淋巴细胞自噬率升高(P均<0.05);与MAP组、对照组比较,MSAP组血清LC3水平、淋巴细胞自噬率升高(P均<0.05).③淋巴细胞凋亡情况:与MSAP、MAP及对照组比较,SAP组血清Caspase-3水平、淋巴细胞凋亡率升高(P均<0.05);与MAP组及对照组比较,MSAP组血清Caspase-3水平、淋巴细胞凋亡率升高(P均<0.05).④AP患者血清IL-6、IL-10水平与血清LC3、Caspase-3水平的相关性:MSAP、SAP组患者血清IL-6水平与血清LC3、Caspase-3水平呈正相关(r分别为0.9904,0.9813,P均<0.05;r分别为0.9785,0.9870,P均<0.05),血清IL-10水平与血清LC3、Caspase-3水平呈正相关(r分别为0.9331,0.9732,P均<0.05;r=0.9878,0.8663,P均<0.05).结论AP患者血清IL-6、IL-10、LC3、Caspase-3水平均升高,MSAP、SAP患者淋巴细胞自噬、凋亡水平均升高.血清IL-6、IL-10水平与血清LC3、Caspase-3水平呈正相关.血清IL-6、IL-10可能通过促进AP患者淋巴细胞的自 展开更多
关键词 白细胞介素6 白细胞介素10 急性胰腺炎 微管相关蛋白1轻链3 半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3
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Beclin 1、LC3-II及P62蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及意义 被引量：12
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作者 王丽华 张競 +1 位作者 王亮亮 王蓓蓓 《中华解剖与临床杂志》 2014年第1期58-61,共4页
目的探讨上皮性卵巢癌中Beclin、LC3-Ⅱ及P62蛋白的表达及临床意义。方法选取2011年6月—2013年3月我院手术切除并经病理学检查确诊的上皮性卵巢癌标本50例为实验组，同期手术切除正常卵巢组织20例作为对照，通过免疫组织化学sP法，检... 目的探讨上皮性卵巢癌中Beclin、LC3-Ⅱ及P62蛋白的表达及临床意义。方法选取2011年6月—2013年3月我院手术切除并经病理学检查确诊的上皮性卵巢癌标本50例为实验组，同期手术切除正常卵巢组织20例作为对照，通过免疫组织化学sP法，检测标本中Beclin1、LC3．Ⅱ及P62蛋白的表达情况，并结合临床病理资料进行分析。结果在上皮性卵巢癌组织中，Beclin 1、LC3-Ⅱ蛋白的阳性表达率分别为46．00％（23／50）和42．00％（21／50），低于正常卵巢组织的95．00％（19／20）和85．00％（17／20）；而P62蛋白的阳性表达率为72．00％（36／50），高于正常卵巢组织的10．00％（2／20），差异均具有统计学意义（P值均〈0．05）。在上皮性卵巢癌组织中，Beclin1、LC3-Ⅱ蛋白的表达与FIGO分期、病理分级具有相关性（P〈0．05），而P62蛋白的表达与FIGO分期具有相关性（P〈0．05）。Beclinl蛋白和LC3-Ⅱ蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达呈正相关（P〈0．01），P62蛋白的表达与Beclin1、LC3-Ⅱ蛋白均呈负相关（P〈0．01）。结论在上皮性卵巢癌组织中，Beclin1、LC3-Ⅱ和P62蛋白的异常表达，可导致自噬体形成减少和自噬功能减弱；可能与卵巢癌的发生、发展和预后不良有关。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 BECLiN1 LC3-Ⅱ P62 免疫组织化学
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基于自噬途径探讨当归饮子缓解CU模型小鼠过敏反应的效应机制 被引量：12
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作者 徐风 李代乾 +4 位作者 张美恒 张晓桐 魏芹 郭静 曾进浩 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期56-63,共8页
目的:探讨当归饮子对慢性荨麻疹(CU)小鼠模型过敏反应的影响及自噬干预机制。方法:选用SPF级BALB/c小鼠,腹腔注射卵白蛋白与氢氧化铝悬液复制CU小鼠模型,设立分组并灌胃给药:空白组(生理盐水20 mL·kg^-1·d^-1),模型组(生理盐... 目的:探讨当归饮子对慢性荨麻疹(CU)小鼠模型过敏反应的影响及自噬干预机制。方法:选用SPF级BALB/c小鼠,腹腔注射卵白蛋白与氢氧化铝悬液复制CU小鼠模型,设立分组并灌胃给药:空白组(生理盐水20 mL·kg^-1·d^-1),模型组(生理盐水20 mL·kg^-1·d^-1),开瑞坦组(0.0013 g·kg^-1·d^-1),当归饮子高、中、低剂量组(39.3,19.6,9.8 g·kg^-1·d^-1)。苏木素-伊红(HE)染色观察CU小鼠皮肤组织病理学改变;透射电镜观察皮肤组织细胞的自噬形态学;免疫组化(IHC)检测皮肤组织微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)和p62蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测皮肤组织LC3B,p62mRNA转录水平。结果:当归饮子可显著改善CU小鼠皮肤真皮水肿、胶原束分离、毛细血管扩张等病理表现;并促进自噬小体形成,改善胞核染色质浓聚、线粒体肿胀、内质网扩张等异常细胞超微结构;与空白组比较,模型组CU小鼠皮肤组织中LC3B蛋白表达显著增加(P<0.01),LC3B mRNA水平有升高趋势,p62 mRNA水平及蛋白表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,当归饮子各剂量组小鼠皮肤组织LC3B mRNA水平及蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),小鼠皮肤组织的p62mRNA水平及蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.01),以高剂量组疗效最佳。结论:当归饮子可调节LC3B,p62 mRNA及蛋白表达,增强细胞自噬水平,进而改善CU小鼠皮肤病理状态。 展开更多
关键词 慢性荨麻疹 自噬 当归饮子 微管相关蛋白1轻链3B(LC3B) 泛素结合蛋白p62(p62)
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血管性痴呆大鼠海马CA1区自噬及微管相关蛋白1轻链3的表达 被引量：11
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作者 刘斌 唐静 +1 位作者 袁敏 李世英 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期940-945,共6页
目的观察血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠海马CA1区自噬及微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1light chain 3,MAP1LC3,LC3)的表达,探讨自噬在血管性痴呆发病中的可能作用。方法大鼠随机分为假手术组(sham组... 目的观察血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠海马CA1区自噬及微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1light chain 3,MAP1LC3,LC3)的表达,探讨自噬在血管性痴呆发病中的可能作用。方法大鼠随机分为假手术组(sham组)、血管性痴呆模型组(VD组)和Wortmannin自噬抑制剂组(WM组),每组又随机分为模型制备后1、2、4、8、12周5个亚组。采用四血管阻断法制作血管性痴呆模型,Morris水迷宫法检测学习记忆能力,透射电镜观察自噬体的形成,蛋白质印迹法检测LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值作为自噬活性的指标。结果与假手术组相比,VD组大鼠平均逃避潜伏期延长(P<0.05或0.01),穿越平台次数减少(P<0.05或0.01);与VD组比较,WM组大鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05或0.01),穿越平台次数增加(P<0.05或0.01)。VD组大鼠海马CA1区1周时神经细胞核膜凹陷,胞核浓缩,线粒体肿胀,可见自噬体、溶酶体;4周时自噬体、溶酶体数量显著增多;12周时仍可见自噬体。WM组神经元损伤较VD组减轻,自噬体数量减少。VD组大鼠海马CA1区LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值在1周时升高,4周时达到高峰,8周时开始下降,12周时仍较高。WM组各时间点LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值较VD组低,差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。结论血管性痴呆大鼠海马CA1区自噬活性被激活,可能参与了血管性痴呆的发生发展。 展开更多
关键词 血管性痴呆 海马 自噬 微管相关蛋白1轻链3
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自噬相关基因LC3和ATG5在胃癌中的表达及临床意义 被引量：11
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作者 许祥云 陈书昌 +3 位作者 孔德九 侯欣欣 陈强 陈静 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第14期1939-1945,共7页
目的探讨自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)和自噬相关基因-5(autophagy related gene-5,ATG5)在胃癌细胞发生发展不同阶段的表达情况并分析其临床意义。方法选取胃黏膜正常细胞、... 目的探讨自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)和自噬相关基因-5(autophagy related gene-5,ATG5)在胃癌细胞发生发展不同阶段的表达情况并分析其临床意义。方法选取胃黏膜正常细胞、胃黏膜不典型增生细胞、胃癌细胞共58例,分别记为正常组(17例)、不典型组(19例)、胃癌组(22例),采用qRT-PCR、Western Blot、免疫组织化学法检测每组中自噬相关基因LC3和ATG5的mRNA及蛋白表达水平,应用SPSS 23.0软件分析正常组、不典型组、胃癌组3组间LC3和ATG5的mRNA及蛋白表达情况,并分析LC3和ATG5蛋白表达的相关性以及LC3和ATG5蛋白表达与胃癌患者临床病理学参数的关系。结果正常组、不典型组、胃癌组中LC3和ATG5 mRNA及蛋白表达水平逐渐升高,各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。LC3蛋白表达情况与性别、年龄、浸润深度、分化程度及淋巴结状态均不存在相关性。ATG5蛋白表达情况与浸润深度、分化程度及淋巴结状态均有相关性。LC3和ATG5蛋白在3组中均呈正相关(P<0.05)。结论细胞自噬可促进胃癌的发生发展,其机制可能与LC3、ATG5过度表达有关。LC3、ATG5在促进胃癌的发生发展中起相互协同的作用。 展开更多
关键词 胃癌 自噬 微管相关蛋白1轻链3(LC3) 自噬相关基因-5(ATG5)
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白芍总苷通过增加糖尿病大鼠肾组织自噬活性减轻肾损伤的研究 被引量：5
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作者 常保超 潘艳 +2 位作者 郭亚玲 刘磊 陈卫东 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期984-988,共5页
目的 探讨白芍总苷(TGP)对糖尿病大鼠肾组织自噬蛋白Beclin1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达的影响及肾保护作用。方法 将50只SD大鼠分为正常组10只和造模组40只。造模组用腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,最终有36只大鼠建模成功... 目的 探讨白芍总苷(TGP)对糖尿病大鼠肾组织自噬蛋白Beclin1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达的影响及肾保护作用。方法 将50只SD大鼠分为正常组10只和造模组40只。造模组用腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,最终有36只大鼠建模成功,并随机分为模型组和低、高剂量实验组,每组12只。低、高剂量实验组分别灌胃给予100和200 mg·kg^(-1)·d^(-1)TGP;模型组和正常组均灌胃给予同体积0.9%NaCl。4组大鼠每天给药1次,连续给药8周。实验结束时,检测4组大鼠的24 h尿蛋白量、血尿素氮、肌酸酐。用蛋白质印迹法检测大鼠肾组织中Beclin1、LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ蛋白的表达情况。结果 低、高剂量实验组和模型组、正常组的肌酸酐分别为(80.78±7.92)、(73.21±7.54)、(93.05±8.69)和(59.17±6.97)μmol·L^(-1),血尿素氮分别为(9.48±1.70)、(8.63±1.38)、(12.20±2.10)和(6.06±0.55)mmol·L^(-1),24 h尿蛋白量分别为(49.05±7.20)、(42.30±6.44)、(78.73±7.53)和(10.10±2.25)mg·24 h^(-1),肾质量指数分别为(5.45±0.68)×10^(-3)、(5.14±0.51)×10^(-3)、(6.33±0.62)×10^(-3)和(3.69±0.29)×10^(-3)g·g^(-1),平均肾小球面积分别为(6.88±0.35)×10^(3)、(6.55±0.27)×10^(3)、(7.61±0.26)×10^(3)和(5.41±0.16)×10^(3)μm2,平均肾小球体积分别为(7.13±0.53)×10^(5)、(6.63±0.41)×10^(5)、(8.30±0.42)×10^(5)和(4.98±0.22)×10^(5)μm^(3),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白比值分别为0.25±0.03、0.29±0.03、0.12±0.01和0.43±0.04,Beclin1蛋白相对表达水平分别为0.31±0.03、0.38±0.03、0.23±0.02和0.50±0.04。低、高剂量实验组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。相关性分析显示:Beclin1蛋白表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白比值与肾质量指数、平均肾小球面积、平均肾小球体积和24 h尿蛋白定量呈负相关。结论 TGP对糖尿病大鼠肾损害具有保护作用,部分机制与激活自噬活性有关。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 白芍总苷 自噬 BECLiN1 微管相关蛋白1轻链3
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自噬相关基因Beclin1和LC3与子宫内膜异位症的研究进展 被引量：9
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作者 孔志伟 姚婷婷 《医学综述》 2019年第21期4166-4173,共8页
子宫内膜异位症(EMs)是具有类似恶性肿瘤临床行为学特征的常见妇科良性病变,治疗较困难,复发率高。目前,EMs的发病机制尚不清楚,可能与机体自噬异常以及多种疾病的发生发展相关。自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白1轻链3(LC3)可对哺乳... 子宫内膜异位症(EMs)是具有类似恶性肿瘤临床行为学特征的常见妇科良性病变,治疗较困难,复发率高。目前,EMs的发病机制尚不清楚,可能与机体自噬异常以及多种疾病的发生发展相关。自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白1轻链3(LC3)可对哺乳动物细胞自噬的调节发挥重要作用,EMs中存在自噬异常,异位子宫内膜可能存在自噬活性改变或特定自噬基因的减少、缺失、变异以及蛋白质表达异常,但目前关于EMs中Beclin1和LC3表达的研究较少,且研究结果尚不统一。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 自噬 BECLiN1 微管相关蛋白1轻链3
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大黄素抑制HBSS诱导的肾小管上皮细胞自噬的分子机制 被引量：9
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作者 胡浩 孙伟 +2 位作者 顾刘宝 涂玥 刘红 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1965-1970,共6页
目的:探讨大黄素(emodin)对饥饿诱导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)自噬的调节作用及其可能机制。方法:首先,用Western blot检测大黄素对Hank's平衡盐溶液(Hank's balanced salt solution,HBSS)饥饿诱导的细胞自噬标志性蛋白—... 目的:探讨大黄素(emodin)对饥饿诱导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)自噬的调节作用及其可能机制。方法:首先,用Western blot检测大黄素对Hank's平衡盐溶液(Hank's balanced salt solution,HBSS)饥饿诱导的细胞自噬标志性蛋白——哺乳动物同族物微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)Ⅰ/Ⅱ表达水平的影响;其次,用红色荧光蛋白-微管相关蛋白1轻链3(redfluorescent protein-microtubule associated protein light chain3,RFP-LC3)质粒瞬时转染NRK-52E细胞,以HBSS(1 m L)联合巴弗洛霉素A1(10 nmol·L-1)处理,予大黄素(10μmol·L-1)干预后,荧光显微镜下观察RFP-LC3荧光颗粒的变化;然后,以哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)抑制剂雷帕霉素(100 nmol·L-1)干预,观察阻断m TOR信号通路对大黄素抑制细胞自噬作用的影响;最后,通过诱导内源性m TOR抑制蛋白DEPTOR(DEP domain-containing m TOR-interacting protein)过表达,进一步评估m TOR信号通路对大黄素抑制细胞自噬的影响。结果:HBSS饥饿可诱导NRK-52E细胞LC3Ⅱ蛋白高表达,大黄素干预后可逆转HBSS诱导的LC3Ⅱ蛋白表达增加;HBSS联合巴弗洛霉素A1处理后可引起RFP-LC3荧光颗粒数目增多,大黄素干预后可抑制其数目的增加;雷帕霉素与大黄素、HBSS联合干预后,雷帕霉素可以恢复HBSS诱导的NRK-52E细胞LC3Ⅱ蛋白表达水平;而过表达内源性m TOR抑制蛋白DEPTOR同样可以阻断大黄素对LC3Ⅱ蛋白表达的抑制作用。结论:大黄素可以抑制HBSS诱导的肾小管上皮细胞LC3Ⅱ蛋白表达和自噬活化,其阻断自噬的作用可能是通过m TOR信号通路介导的。 展开更多
关键词 大黄素 自噬 肾小管上皮细胞 微管相关蛋白1轻链3 雷帕霉素
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