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大鼠肾脏缺血再灌注损伤后自噬的初步研究 被引量:3
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作者 蔡彦 叶朝阳 +5 位作者 高翔 付莉莉 刘晔 李楠 王文苓 梅长林 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期190-193,I0001,共5页
目的研究大鼠肾脏缺血再灌注(I/R)损伤后自噬溶酶体相关蛋白随损伤时间表达的规律,检测自噬体、溶酶体的变化。方法采用肾动脉夹闭法制作大鼠肾脏I/R损伤模型,将实验动物随机分入I/R组和对照组,每组在各时间点各6只。分别于I/R后2、6、1... 目的研究大鼠肾脏缺血再灌注(I/R)损伤后自噬溶酶体相关蛋白随损伤时间表达的规律,检测自噬体、溶酶体的变化。方法采用肾动脉夹闭法制作大鼠肾脏I/R损伤模型,将实验动物随机分入I/R组和对照组,每组在各时间点各6只。分别于I/R后2、6、12和24h,采用Western印迹法检测肾组织中自噬相关蛋白Belinl和微管相关蛋白1轻链3(LC)的表达情况,在透射电子显微镜下观察I/R后肾组织内自噬小体的形成情况。结果 I/R组大鼠肾组织内Beclin1和LC3蛋白表达水平均自I/R后2h起开始升高,至I/R后24h达到高峰(P值均<0.05)。透射电子显微镜下见,对照组大鼠近端小管上皮细胞核膜完整,染色质结构正常,细胞质中细胞器形态正常,未见自噬小体;I/R组大鼠I/R后2h可见到损伤区域有自噬体形成,溶酶体增多,I/R后24h最为明显。结论大鼠肾I/R损伤后肾组织的自噬活性升高。 展开更多
关键词 自噬 肾缺血再灌注损伤 BECLIN 1 微管相关蛋白1轻链3
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子痫前期患者胎盘中微小RNA-34a的表达及相关机制 被引量:3
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作者 曾带娣 李仲均 +1 位作者 萧丽娟 黄素然 《发育医学电子杂志》 2020年第4期329-332,共4页
目的探讨子痫前期孕妇胎盘组织中微小RNA-34a(microRNA-34a,miR-34a)表达改变的临床意义。方法选取东莞市人民医院2017年9月至2018年6月诊治的子痫前期产妇30例,另取正常行剖宫产的产妇30例作为对照。实时荧光定量PCR检测miR-34a和髓细... 目的探讨子痫前期孕妇胎盘组织中微小RNA-34a(microRNA-34a,miR-34a)表达改变的临床意义。方法选取东莞市人民医院2017年9月至2018年6月诊治的子痫前期产妇30例,另取正常行剖宫产的产妇30例作为对照。实时荧光定量PCR检测miR-34a和髓细胞白血病因子-1(myeloid cell leukemia-1,MCL-1)的表达,蛋白质印迹(Western blot)检测MCL-1蛋白和自噬相关蛋白微管相关蛋白I轻链3Ⅱ(microtubule associated protein 1 lightchain 3Ⅱ,LC3Ⅱ)的表达。计量资料采用t检验,相关性比较采用Spearman相关分析。结果子痫前期组胎盘组织中,其miR-34a的2-△△Ct值为0.217±0.035,高于对照组的0.126±0.028(P<0.01);MCL-1的2-△△Ct值为0.208±0.037,低于对照组的0.316±0.054(P<0.01);miR-34a表达与MCL-1表达呈负相关(r=-0.412,P<0.05);MCL-1蛋白表达灰度值为0.413±0.072,低于对照组的0.826±0.142(P<0.01);LC3Ⅱ蛋白表达灰度值为0.316±0.048,高于对照组的0.152±0.024(P<0.01)。Spearman相关分析显示子痫前期组胎盘组织中LC3Ⅱ蛋白表达与MCL-1蛋白表达呈负相关(r=-0.607,P<0.05),与miR-34a表达呈正相关(r=0.582,P<0.05)。结论miR-34a在子痫前期患者胎盘组织中高表达,可能抑制MCL-1基因,激活自噬,参与子痫前期的致病过程。 展开更多
关键词 微小RNA-34a 子痫前期 髓细胞白血病因子-1 微管相关蛋白Ⅰ轻链3 自噬
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脓毒症相关性脑病大鼠海马区神经细胞自噬 被引量:6
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作者 李雅斐 苏云洁 +2 位作者 屈艺 母得志 李熙鸿 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期571-577,共7页
目的:探讨脓毒症相关性脑病(sepsis-associated encephalopathy,SAE)大鼠海马区神经细胞自噬现象及微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达。方法:盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)建立脓毒症大鼠模型。60只30日龄健康雄性Wista... 目的:探讨脓毒症相关性脑病(sepsis-associated encephalopathy,SAE)大鼠海马区神经细胞自噬现象及微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达。方法:盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)建立脓毒症大鼠模型。60只30日龄健康雄性Wistar大鼠被随机分为假手术组(10只)和CLP组(50只)。CLP后12 h监测大鼠脑电图(electroencephalogram,EEG)及体感诱发电位(somatosensory evoked potential,SEP),并进行神经生物学评分。根据大鼠是否发生SAE将CLP组大鼠再分为SAE(+)组和SAE(–)组。HE染色观察大鼠海马区病理学改变;电子显微镜观察大鼠海马区神经细胞自噬的超微结构;Western印迹检测LC3-I和LC3-II蛋白的表达。结果:50只大鼠在CLP后12 h内死亡5只,存活45只大鼠中有16只出现神经行为学、EEG及SEP改变,诊断为SAE,其发病率为35.56%(16/45)。与假手术组和SAE(–)组比较,SAE(+)组大鼠在CLP后12 h时α波的频率明显减少,δ波增加,P1振幅下降,P1波和N1波潜伏期延长(P<0.05)。CLP后12 h时SAE(+)组大鼠海马区细胞明显水肿,锥体细胞明显减少,甚至溶解,细胞排列紊乱,而假手术组和SAE(–)组大鼠海马区细胞形态正常、层次清楚。透射电子显微镜观察表明:SAE(+)组大鼠海马区细胞结构紊乱,可见自噬泡、颗粒状基质和方形或长方形晶体,自噬泡内含有溶酶体等细胞器,假手术组和SAE(–)组大鼠海马区组织细胞无自噬泡形成。SAE(+)组大鼠在CLP后12 h,海马区神经细胞LC3-II/LC3-I值明显高于假手术组和SAE(–)组(P<0.05)。结论:SAE大鼠海马区神经细胞存在细胞自噬现象,LC3-II/LC3-I值明显升高。 展开更多
关键词 脓毒症相关性脑病 海马 自噬 微管相关蛋白1轻链3
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带状疱疹病毒感染患者血清NF-κB和CXCL10与LC3B水平及其诊断价值 被引量:2
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作者 杨春艳 柳研 +2 位作者 杨文信 程美 张剑 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期489-493,共5页
目的分析带状疱疹病毒感染患者核因子-κB(NF-κB)、趋化因子10(CXCL10)、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)及其诊断价值.方法选取2020年4月-2021年4月西南医科大学附属中医医院收治的113例带状疱疹病毒感染患者为研究组,另选取同期于医院体检... 目的分析带状疱疹病毒感染患者核因子-κB(NF-κB)、趋化因子10(CXCL10)、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)及其诊断价值.方法选取2020年4月-2021年4月西南医科大学附属中医医院收治的113例带状疱疹病毒感染患者为研究组,另选取同期于医院体检的80名健康者为对照组;采用酶联免疫吸附法检测NF-κB、CXCL10、LC3B表达水平,分析其对带状疱疹病毒感染的诊断价值.结果研究组数字(NRS)评分、疼痛视觉模拟(VAS)评分、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)高于对照组(P<0.05),卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)低于对照组(P<0.05);与对照组相比,研究组NF-κB、CXCL10表达量高于对照组,LC3B表达量低于对照组(P<0.05);Logistic回归分析NF-κB、CXCL10、TNF-α,LC3B、FSH、LH、E2与带状疱疹病毒感染具有相关性(P<0.05);受试者工作特征(ROC)曲线分析NF-κB、CXCL10、LC3B及三项联合预测带状疱疹病毒感染的曲线下面积(AUC)分别为0.850、0.825、0.816、0.937.结论带状疱疹患者血清NF-κB、CXCL10,LC3B对带状疱疹病毒感染具有较高预测价值. 展开更多
关键词 带状疱疹病毒 感染 核因子-ΚB 趋化因子10 微管相关蛋白1轻链3B 诊断价值
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肠道病毒71型诱导人恶性胶质瘤细胞U251自噬的研究 被引量:1
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作者 王静 刘忠强 +1 位作者 苏云洁 李熙鸿 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期693-695,共3页
目的初步研究肠道病毒71型(EV71)诱导人恶性胶质瘤细胞U251的自噬现象及其对微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达的影响。方法RPMI1640培养U251细胞24h后随机分为实验组和对照组,实验组按感染复数(MOI)值为1加入EV71,EV71感染12h后采... 目的初步研究肠道病毒71型(EV71)诱导人恶性胶质瘤细胞U251的自噬现象及其对微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达的影响。方法RPMI1640培养U251细胞24h后随机分为实验组和对照组,实验组按感染复数(MOI)值为1加入EV71,EV71感染12h后采用单丹磺酰戊二胺(MDC)染色标志细胞自噬泡,荧光显微镜观察自噬泡的形成。EV71感染24h后细胞免疫荧光检测LC3,荧光显微镜观察LC3在U251细胞内的分布。EV71感染2、4、8、12、24、48h采用Westernblot检On.0LC3-I和LC3-II蛋白的表达,并对LC3-II蛋白进行半定量分析。结果白噬泡经过MDC染色后,荧光显微镜观察发现自噬泡呈点状结构。与对照组比较,实验组在EV71感染12h,U251细胞内自噬泡明显增多;EV71感染24h,U251细胞皱缩、变小、形态不规则,LC3蛋白表达明显增多,主要分布在细胞质和细胞核周围;EV71感染4h后,LC3-II蛋白表达开始增加,明显高于对照组(P〈0.01)。结论EV71能有效诱导U251细胞自噬,发挥其溶瘤作用。 展开更多
关键词 自噬 微管相关蛋白1轻链3 肠道病毒71 人恶性胶质瘤 U251细胞
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自噬在血管性痴呆发病中的作用研究 被引量:14
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作者 刘斌 唐静 +2 位作者 袁敏 毕树立 李世英 《临床神经病学杂志》 CAS 北大核心 2013年第6期424-429,共6页
目的研究自噬在血管性痴呆(VD)发病中的作用及自噬抑制剂对其的影响。方法 180只SD大鼠随机分为假手术组、VD组和自噬抑制剂干预组(自噬抑制剂组),每组又分为术后1、2、4、8、12周亚组。采用四血管阻断法制作VD大鼠模型,自噬抑制剂组大... 目的研究自噬在血管性痴呆(VD)发病中的作用及自噬抑制剂对其的影响。方法 180只SD大鼠随机分为假手术组、VD组和自噬抑制剂干预组(自噬抑制剂组),每组又分为术后1、2、4、8、12周亚组。采用四血管阻断法制作VD大鼠模型,自噬抑制剂组大鼠在术前1 h给予渥曼青霉素0.5 mg/kg腹腔注射。用Morris水迷宫试验检测大鼠的学习记忆能力;免疫组化SP法检测大鼠海马CA1区自噬相关蛋白Beclin-1、Cathepsin B的表达,Western-blotting法检测自噬活性微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ与Ⅰ的比值。结果与假手术组比较,VD组和自噬抑制剂组各亚组大鼠的学习、记忆能力明显降低;海马CA1区Beclin-1、Cathepsin B蛋白表达水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显升高(P<0.05~0.01),并均以术后第4周为最高。而自噬抑制剂组各亚组大鼠的学习、记忆能力明显好于,海马CA1区Beclin-1、Cathepsin B蛋白表达水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显低于VD组(P<0.05~0.01)。结论 VD大鼠的认知功能减退,海马自噬相关蛋白表达及自噬活性明显增高;自噬抑制剂对其有改善及抑制的效果。自噬在VD发病中起了重要的作用。 展开更多
关键词 血管性痴呆 自噬 自噬相关蛋白 微管相关蛋白1轻链3 自噬抑制剂
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