微小RNA-96对结直肠癌细胞迁移及侵袭的影响 被引量：11

1

作者 胡思锋 王庆光 +2 位作者 李耀锋 孟凡美 姜超 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期83-85,共3页

目的观察微小RNA(miRNA,miR)-96对SW620结直肠癌细胞迁移及侵袭的影响。方法实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测SW620、SW480、HT-29、HCT116、LoVo、CaCo-2结直肠癌细胞,NCM-460正常结肠上皮细胞中miR-96的表达,应用Lipofectam... 目的观察微小RNA(miRNA,miR)-96对SW620结直肠癌细胞迁移及侵袭的影响。方法实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测SW620、SW480、HT-29、HCT116、LoVo、CaCo-2结直肠癌细胞,NCM-460正常结肠上皮细胞中miR-96的表达,应用Lipofectamine?3000将miR-96抑制物、miR-96阴性对照(NC)转染到SW620细胞,Real-time PCR检测miR-96表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞活力,Transwell法检测细胞迁移及侵袭能力,Western blot检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、p-Smad4蛋白表达。结果Real-time PCR结果表明miR-96在SW620(2.42±0.20)、SW480(1.75±0.12)、HT-29(1.43±0.11)、HCT116(1.52±0.12)、LoVo(1.73±0.14)、CaCo-2(1.36±0.13)结直肠癌细胞中的表达量显著高于NCM-460(0.39±0.02)细胞(P均<0.01),miR-96抑制物组(0.45±0.03)miR-96表达量较miR-96 NC组(2.35±0.32)降低(P<0.01)。CCK-8实验结果表明miR-96抑制物组(0.389±0.034)细胞活力较miR-96 NC组(0.586±0.058)降低(P<0.01)。Transwell实验结果表明miR-96抑制物组[(28.37±2.84)个]细胞迁移数目较miR-96 NC组[(128.45±12.84)个]减少(P<0.01),miR-96抑制物组侵袭数目[(23.60±2.30)个]较miR-96 NC组[(133.57±13.36)个]减少(P<0.01)。Western blot结果表明miR-96抑制物组中MMP-2、MMP-9、Vimentin、TGF-β1、p-Smad4表达量较miR-96 NC组下调(P均<0.01),miR-96抑制物组中E-cadherin表达量较miR-96 NC组上调(P<0.01)。结论 下调miR-96表达能显著抑制SW620结肠癌细胞迁移及侵袭,与抑制TGF-β1/Smad4信号通路有关。 展开更多

关键词 微小RNA-96 结肠癌 迁移 侵袭 转化生长因子-β1/Smad4信号通路

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肝细胞肝癌患者miR-495、miR-96表达水平及其与新型转录抑制因子锌指和同源框2的相关性 被引量：4

2

作者 张国强 张伟忠 +3 位作者 张玉惠 董金良 竺王玉 梁金荣 《中国卫生检验杂志》 CAS 2017年第8期1143-1145,共3页

目的研究舟山海岛地区肝细胞肝癌(HCC)组织与相应癌旁肝组织新型转录抑制因子锌指和同源框2(ZHX2)、miR-495、miR-96的表达差异及其与临床病理特征的关系。方法收集17例原发性肝癌患者手术切除肿瘤组织及相应癌旁肝组织,逆转录实时荧光... 目的研究舟山海岛地区肝细胞肝癌(HCC)组织与相应癌旁肝组织新型转录抑制因子锌指和同源框2(ZHX2)、miR-495、miR-96的表达差异及其与临床病理特征的关系。方法收集17例原发性肝癌患者手术切除肿瘤组织及相应癌旁肝组织,逆转录实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ZHX2和miR-495、miR-96表达,分析其与临床病理特征的关系。结果 miR-495、miR-96和ZHX2 mRNA相对表达量(RQ)值≥2的比例分别为58.8%(10/17)、52.9%(9/17)、17.6%(3/17)。Spearman相关性检验显示HCC患者ZHX2 mRNA表达与miR-495、miR-96均呈负相关,(r=-0.553 3,r=-0.491 0,P<0.05)。结论 miR-495、miR-96可能调控ZHX2参与肝细胞肝癌的发生发展。 展开更多

关键词 肝细胞肝癌 新型转录抑制因子锌指和同源框2 microrna-495 microrna-96

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微小RNA-96通过抑制胰岛素样生长因子1受体调控七氟醚诱导新生大鼠认知功能障碍 被引量：6

3

作者 徐畅 牛姣姣 +1 位作者 周俊飞 艾艳秋 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期265-267,共3页

目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-96如何通过胰岛素样生长因子1类受体(IGF1R)调控七氟醚诱导新生大鼠认知功能障碍。方法将大鼠(购自上海斯莱克实验动物有限公司)随机分为6组,对照组大鼠吸入浓度为40%的O2,实验组小鼠吸入不同浓度的七氟烷麻... 目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-96如何通过胰岛素样生长因子1类受体(IGF1R)调控七氟醚诱导新生大鼠认知功能障碍。方法将大鼠(购自上海斯莱克实验动物有限公司)随机分为6组,对照组大鼠吸入浓度为40%的O2,实验组小鼠吸入不同浓度的七氟烷麻醉(购自上海雅培上海有限公司),包括1%七氟醚组,2%七氟醚组,4%七氟醚组,4%七氟醚+miR-96过表达组和4%七氟醚+miR-96抑制组。通过给予不同浓度的七氟醚(1%、2%和4%)联合miR-96激动或抑制剂,在mRNA和蛋白水平检测IGF1R、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3的表达,测定海马神经元凋亡情况。通过测定荧光素酶活性,验证miR-96是否靶向作用于IGF1R。采用Morris水迷宫测验评价学习记忆能力。测量数据用均值±标准差(Mean±SD)表示,采用t检验对正态分布和均方差的数据进行分析,在双因素相关分析中,则采用Spearman秩相关。结果对照组、4%七氟醚组、4%七氟醚+miR-96过表达组和4%七氟醚+miR-96抑制组miR-96相对表达量分别为0.37±0.01、2.09±0.06、2.84±0.12、1.71±0.03,IGF1R相对表达量分别为2.64±0.08、0.51±0.06、0.29±0.02、1.25±0.03,吸入七氟醚后miR-96表达显著增加(t=63.230、45.870、94.750,P<0.05),IGF1R表达显著降低(t=47.630、63.720、36.380,P<0.05),差异有统计学意义。与4%七氟醚组比较,4%七氟醚+miR-96过表达组miR-96表达增强(t=12.500,P<0.05),IGF1R表达降低(t=7.780,P<0.05);而在4%七氟醚+miR-96抑制剂组中则相反(t=12.670、24.670,P<0.05),差异有统计学意义。结论七氟醚麻醉诱导新生大鼠发生认知功能障碍的潜在机制与miR-96通过抑制IGF1R调控有关。 展开更多

关键词 七氟醚 微小RNA-96 胰岛素样生长因子1受体 认知功能障碍

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慢性缺氧通过激活缺氧诱导因子1α/microRNA-96通路诱导小管上皮细胞自噬异常参与肾间质纤维化

4

作者 魏琪 王菊宁 刘利敏 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 2024年第1期22-28,共7页

目的:研究慢性缺氧诱导肾脏纤维化的机制。方法:缺氧诱导人近端肾小管上皮细胞(HK-2),Western Blot检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、微管相关蛋白轻链3Ⅰ/Ⅱ(LC3Ⅰ/Ⅱ)和p62的表达及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测microRNA-96(miR-96)的... 目的:研究慢性缺氧诱导肾脏纤维化的机制。方法:缺氧诱导人近端肾小管上皮细胞(HK-2),Western Blot检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、微管相关蛋白轻链3Ⅰ/Ⅱ(LC3Ⅰ/Ⅱ)和p62的表达及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测microRNA-96(miR-96)的表达。采用siRNA-HIF-1α(siHIF-1α)和pcDNA-HIF-1α处理缺氧诱导的肾小管上皮细胞,利用RT-qPCR检测miR-96的表达,探讨过表达和干扰HIF-1α对miR-96表达的影响。miR-96mimic处理常氧肾小管上皮细胞,Western Blot检测促纤维化因子α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原蛋白1(COL4A1)蛋白的变化,RT-qPCR检测自噬关键分子LC3Ⅰ/Ⅱ和p62的表达。小鼠腹腔注射miR-96 inhibitor的病毒载体,通过Masson染色检测各模型肾脏纤维化的程度及纤维化因子COL4A1的表达。结果:在缺氧诱导的肾小管上皮细胞中HIF-1α和miR-96表达均增加(P<0.05),与纤维化程度呈正相关性,自噬关键分子LC3Ⅰ/Ⅱ水平升高p62水平降低(P<0.05),表明缺氧诱导HK-2细胞自噬。pcDNA-HIF-1α处理常氧培养的HK-2,发现HIF-1α促进miR-96的表达,siHIF-1α处理缺氧诱导的HK-2细胞,发现沉默HIF-1α可降低由缺氧引起的miR-96的增加,常氧条件下过表达miR-96诱导HK-2的纤维化因子α-SMA和COL4A1的增加,同时自噬关键分子LC3Ⅰ/Ⅱ水平升高p62水平降低(P<0.05)。缺氧条件下抑制miR-96可降低自噬关键分子的LC3Ⅰ/Ⅱ表达水平,恢复p62的表达(P<0.05)。小鼠腹腔注射miR-96 inhibitor的病毒载体,与注射了对照病毒的小鼠相比可以抑制单侧输尿管梗阻(UUO)引起的肾脏纤维化,减低纤维化因子COL4A1的表达。结论:缺氧通过激活HIF-1α/miR-96信号通路诱导肾小管上皮细胞自噬异常、促纤维化因子增加,促进了肾脏纤维化。 展开更多

关键词 缺氧 缺氧诱导因子1Α 微小RNA-96 自噬 肾脏纤维化

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脑卒中后认知功能障碍与血清胰岛素样生长因子1、微小RNA-96的关系 被引量：1

5

作者 赵静雅 《国际精神病学杂志》 2023年第1期89-92,共4页

目的探讨脑卒中后认知功能障碍(PSCI)与血清胰岛素样生长因子1(IGF-1)、微小RNA-96的相关性。方法选择2019年4月~2022年1月我院94例脑卒中患者为研究对象,采用蒙特利尔认知量表(MoCA)评估患者认知功能,并设为PSCI组以及非PSCI组,调查两... 目的探讨脑卒中后认知功能障碍(PSCI)与血清胰岛素样生长因子1(IGF-1)、微小RNA-96的相关性。方法选择2019年4月~2022年1月我院94例脑卒中患者为研究对象,采用蒙特利尔认知量表(MoCA)评估患者认知功能,并设为PSCI组以及非PSCI组,调查两组患者性别、年龄等一般资料,比较两组患者的血清IGF-1、微小RNA-96水平,分析血清IGF-1、微小RNA-96水平与MoCA评分的相关性,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IGF-1、微小RNA-96水平对PSCI的诊断价值。结果94例脑卒中发生PSCI 42例,PSCI组年龄、血清微小RNA-96水平显著高于非PSCI组,受教育年限、美国国立卫生院神经功能缺损评分、血清IGF-1水平显著低于非PSCI组(P<0.05),两组性别、居住地、卒中类型差异无统计学意义(P>0.05);血清微小RNA-96表达水平与MoCA评分呈正相关,血清IGF-1水平与MoCA评分呈负相关;ROC曲线提示血清IGF-1、微小RNA-96表达水平对PSCI具有较高的预测价值。结论脑卒中患者中PSCI具有较高的发生率,血清IGF-1、微小RNA-96表达水平对其具有一定的辅助诊断价值。 展开更多

关键词 脑卒中 认知功能障碍 胰岛素样生长因子1 微小RNA-96

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微小RNA通过SIRT1调控小鼠耳蜗老化HEI-OC1细胞凋亡的研究

6

作者 袁佳添 谢奇伟 +2 位作者 王玥 程鹏 王耀文 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2023年第2期84-88,共5页

目的构建小鼠耳蜗毛细胞株HEI-OC1(house ear institute-organ of Corti 1)老化模型,探索微小RNA-96(miR-96)可否通过SIRT1调控老化HEI-OC1凋亡。方法CCK-8筛选D-半乳糖浓度。流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测p53、p38、caspas... 目的构建小鼠耳蜗毛细胞株HEI-OC1(house ear institute-organ of Corti 1)老化模型,探索微小RNA-96(miR-96)可否通过SIRT1调控老化HEI-OC1凋亡。方法CCK-8筛选D-半乳糖浓度。流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测p53、p38、caspase-3蛋白表达。q RT-PCR检测miR-96、SIRT1 mRNA表达,Western blot检测SIRT1蛋白表达。miR-96模拟物转染HEI-OC1细胞,qRT-PCR检测miR-96、SIRT1 mRNA表达,Western blot检测SIRT1、caspase-3蛋白表达。结果HEI-OC1细胞在15 mg/ml D-半乳糖条件下培养72 h后,凋亡较对照组显著增加(P<0.01),且p53、p38(P<0.05)及caspase-3(P<0.0001)蛋白表达明显增加。老化组miR-96与SIRT1 mRNA和蛋白表达均明显减低(P<0.05)。miR-96过表达后,SIRT1 mRNA及蛋白较对照组表达升高,caspase-3蛋白表达降低(P<0.05)。结论老化HEI-OC1细胞中miR-96、SIRT1 mRNA与蛋白的表达均下降。miR-96可通过上调SIRT1抑制HEI-OC1细胞的凋亡。miR-96、SIRT1可能成为保护老年性聋耳蜗毛细胞的作用靶点。 展开更多

关键词 老年性聋 细胞凋亡 miR-96 SIRT1 HEI-OC1

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宫颈鳞状细胞癌化疗前后小分子RNA-96的表达变化及其与化疗敏感性的关系 被引量：4

7

作者 周雯 关婷 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期140-144,共5页

目的探讨新辅助化疗对宫颈鳞状细胞癌小分子RNA-96（miR-96）表达的影响及其与化疗疗效、敏感性及临床病理特征之间的关系。方法采用茎环实时荧光逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测28例（Ⅰb2期-Ⅱa期）宫颈鳞状细胞癌患者新辅助化疗前... 目的探讨新辅助化疗对宫颈鳞状细胞癌小分子RNA-96（miR-96）表达的影响及其与化疗疗效、敏感性及临床病理特征之间的关系。方法采用茎环实时荧光逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测28例（Ⅰb2期-Ⅱa期）宫颈鳞状细胞癌患者新辅助化疗前、后癌组织中miR-96的表达，分析miR-96表达变化与新辅助化疗的疗效、敏感性及其与临床病理特征的关系。结果RT—PCR检测miR-96表达的敏感性和特异性良好；新辅助化疗前宫颈癌组织中miR-96的相对表达量是化疗后宫颈癌组织中的（5．330±5．069）倍，差异具有统计学有意义（P=0．000）。化疗前后miR-96的表达变化：中、低分化者（2．345±1．153）低于高分化者（9．941±5．359）（P=0．000）；间质浸润深度〈1／2间质者（8．236±5．399）高于≥1／2间质者（1．978±1．030）（P=0．000）；有淋巴结转移者（1．848±0．959）明显低于无淋巴结转移者（7．942±5．348）（P=0．000）；而年龄≤45岁、〉45岁，临床分期为Ⅰb2期、Ⅱa期者化疗前后miR-96的表达变化差异无统计学意义（P〉0．05）。结论新辅助化疗能有效降低宫颈鳞状细胞癌组织中miR-96的表达水平，因此测定化疗前宫颈癌组织中miR-96的表达水平对新辅助化疗疗效及敏感性预测具有一定参考价值。 展开更多

关键词 宫颈鳞状细胞癌 小分子RNA-96 新辅助化疗 化疗敏感性

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血清外泌体miR-96表达与老年糖尿病患者骨质疏松的相关性

8

作者 吴丽明 宋成福 +1 位作者 金鹿 杨紫姣 《海南医学》 CAS 2023年第8期1139-1143,共5页

目的检测血清外泌体miR-96在老年糖尿病患者中的表达水平,并分析其与骨质疏松(OP)的相关性。方法回顾性分析2019年1月至2021年5月杨浦区中心医院老年科收治的171例年龄≥60岁的2型糖尿病患者,根据骨质疏松诊断标准分为OP组(82例)和非OP... 目的检测血清外泌体miR-96在老年糖尿病患者中的表达水平,并分析其与骨质疏松(OP)的相关性。方法回顾性分析2019年1月至2021年5月杨浦区中心医院老年科收治的171例年龄≥60岁的2型糖尿病患者,根据骨质疏松诊断标准分为OP组(82例)和非OP组(89例);检测并比较两组患者血清外泌体miR-96表达水平、血清25-羟维生素D_(3)[25(OH)D_(3)]、I型胶原羧基端肽交联(β-CTX)、甲状旁腺激素(PTH)、骨钙素(BGP)和I型前胶原氨基末端前肽(PINP)水平;多因素Logistic回归分析老年糖尿病患者发生骨质疏松的相关因素;采用Pearson系数分析miR-96表达水平与各指标的相关性;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析miR-96对老年糖尿病合并骨质疏松的诊断效能。结果OP组患者的β-CTX、HbA1c、PINP、PTH水平明显高于非OP组,而BMI、25(OH)D3、BGP明显低于非OP组,差异均有统计学意义(P<0.05);OP组患者的血清外泌体miR-96表达水平为1.42±0.31,高于非OP组的1.01±0.25,差异有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关分析结果显示,miR-96与BMI、BGP、25(OH)D3呈负相关(r=-0.504、-0.425、-0.541,P<0.05),miR-96与β-CTX、PTH、Hb A1c、PINP呈正相关性(r=0.463、0.479、0.447、0.392,P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,miR-96、BMI、HbA1c、BGP、25(OH)D_(3)、β-CTX、PTH、PINP是老年糖尿病患者发生骨质疏松的影响因素(P<0.05);ROC结果显示,miR-96诊断老年糖尿病患者合并骨质疏松的曲线下面积为0.878(95%CI:0.828~0.927)。结论老年糖尿病合并骨质疏松患者血清外泌体中miR-96表达水平升高,miR-96表达水平与骨质疏松密切相关,并对骨质疏松有较高的诊断效能。 展开更多

关键词 老年 2型糖尿病 骨质疏松 外泌体 微小RNA-96 相关性

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微小RNA-96对宫颈癌细胞HeLa增殖凋亡及Spindlin1表达的影响 被引量：3

9

作者 赵靓 夏春军 +2 位作者 吴堂兵 谷文龙 肖艳华 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2017年第10期869-873,共5页

目的探讨微小RNA-96(miR-96)对宫颈癌细胞HeLa增殖凋亡及Spindlin1(SPIN1)表达的影响。方法采用脂质体法将miR-96模拟物(mimics)及阴性对照分别转染至宫颈癌HeLa细胞(miR-96转染组和miR-96对照组),以未行转染的HeLa细胞为未转染组,实时... 目的探讨微小RNA-96(miR-96)对宫颈癌细胞HeLa增殖凋亡及Spindlin1(SPIN1)表达的影响。方法采用脂质体法将miR-96模拟物(mimics)及阴性对照分别转染至宫颈癌HeLa细胞(miR-96转染组和miR-96对照组),以未行转染的HeLa细胞为未转染组,实时定量PCR(QPCR)检测各组转染48 h后细胞中miR-96的表达情况,MTT及流式细胞仪分别检测各组转染48 h后的增殖及凋亡情况,分别采用QPCR和Western blotting检测转染48 h后各组细胞的SPIN1 mRNA和蛋白水平,通过双荧光素酶靶标实验验证miR-96与SPIN1之间的关系。结果转染48 h后未转染组、miR-96对照组和miR-96转染组的miR-96水平依次为1.068±0.053、1.175±0.084和2.434±0.088,miR-96转染组的miR-96水平高于其余两组,差异有统计学意义(P<0.05);未转染组、miR-96对照组和miR-96转染组的增殖率依次为(99.633±5.059)%、(97.727±3.079)%和(62.023±5.425)%,凋亡率依次为(7.515±0.924)%、(8.123±1.247)%和(26.845±4.126)%,与其余两组相比,miR-96转染组的增殖率降低而凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05);未转染组、miR-96对照组和miR-96转染组的SPIN1 mRNA水平依次为0.965±0.046、0.917±0.044和0.549±0.039,SPIN1蛋白水平依次为0.667±0.042、0.715±0.045和0.384±0.038,miR-96转染组的SPIN1 mRNA和蛋白水平均低于其余两组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-96抑制含有野生型SPIN1-3’UTR质粒细胞的荧光素酶活性,却对含有突变型质粒细胞的荧光素酶活性无影响。结论过表达miR-96可抑制宫颈癌细胞的增殖凋亡并降低SPIN1表达水平,miR-96对SPIN1有靶向调控作用,可作为治疗宫颈癌的有效靶点。 展开更多

关键词 宫颈癌 微小RNA-96 增殖 凋亡 Spindlin1

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七氟醚通过上调MicroRNA-96影响大鼠认知障碍的效果与机制研究 被引量：2

10

作者 袁东 吴滨阳 张东 《临床和实验医学杂志》 2019年第6期565-568,共4页

目的探讨七氟醚通过上调MicroRNA-96(miR-96)影响大鼠认知障碍的效果与机制。方法健康清洁级雄性SD大鼠15只随机数字表法分为3组,每组5只,分别为对照组、七氟醚暴露4 h组(实验1组)、七氟醚暴露8h组(实验2组),对照组在相同的环境下吸入2 ... 目的探讨七氟醚通过上调MicroRNA-96(miR-96)影响大鼠认知障碍的效果与机制。方法健康清洁级雄性SD大鼠15只随机数字表法分为3组,每组5只,分别为对照组、七氟醚暴露4 h组(实验1组)、七氟醚暴露8h组(实验2组),对照组在相同的环境下吸入2 L/min氧气8 h,实验1组停止吸入七氟醚后吸入2 L/min氧气4 h。采用水迷宫实验测定大鼠认知功能,检测不同时间点的认知功能、血气指标、体温、血清IGF-1水平和miR-96表达情况。结果实验1组与实验2组麻醉后3 d、7 d与14 d的逃避潜伏期显著高于对照组,目标象限累计时间低于对照组,比较差异有统计学意义(P <0. 05),实验1组与实验2组比较差异也有统计学意义(P <0. 05)。三组大鼠PaO_2与体温在麻醉前、麻醉4 h与麻醉8 h的组内与组间比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。实验1组与实验2组麻醉后3 d、7d与14 d的血清IGF-1含量均显著低于对照组(P <0. 05),实验2组显著低于实验1组(P <0. 05)。实验1组与实验2组麻醉后7 d海马组织的miR-96相对表达量显著低于对照组(P <0. 05),实验2组显著低于实验1组(P <0. 05)。结论七氟醚能通过上调大鼠海马组织miR-96的表达,抑制血清IGF-1的表达,从而损伤大鼠的认知功能,且七氟醚暴露8 h较暴露4 h对其损伤更明显。 展开更多

关键词 大鼠 认知障碍 七氟醚 microrna-96 水迷宫实验

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MicroRNA-96对人视网膜色素上皮细胞增殖与迁移的影响 被引量：2

11

作者 王丽花 赵云萍 +3 位作者 金珊珊 王教 陈晓燕 闫东升 《中华眼视光学与视觉科学杂志》 CAS CSCD 2020年第3期184-190,共7页

目的:探讨MicroRNA-96(miR-96)对人视网膜色素上皮(RPE)细胞增殖和迁移的影响。方法:实验研究。通过RNA原位杂交检测人胚胎眼(20周)石蜡切片中RPE层miR-96的表达情况。将miR-96和随机序列寡核苷酸链[阴性对照(NC)]通过阳离子脂质体介导... 目的:探讨MicroRNA-96(miR-96)对人视网膜色素上皮(RPE)细胞增殖和迁移的影响。方法:实验研究。通过RNA原位杂交检测人胚胎眼(20周)石蜡切片中RPE层miR-96的表达情况。将miR-96和随机序列寡核苷酸链[阴性对照(NC)]通过阳离子脂质体介导转染人眼RPE细胞,采用细胞增殖实验(MTS)、流式细胞术和Transwell实验分别检测细胞增殖、细胞周期以及细胞迁移能力。通过生物信息学及Western blot法确定miR-96作用的靶基因。应用Western blot检测miR-96对细胞增殖迁移相关信号通路蛋白(Akt、ERK)及细胞周期相关蛋白(p-Cdc2、CyclinD2、p-Rb)表达的影响。组间数据比较采用独立样本t检验。结果:miR-96在人眼RPE细胞中有表达。MTS结果显示,转染NC、miR-96后,人眼RPE细胞的相对增殖速率分别为100%、74%±2%,差异有统计学意义(t=42.174,P=0.002)。流式细胞术检测结果显示,转染miR-96后阻滞在G1期的RPE细胞明显多于转染NC后,且差异有统计学意义(t=-18.444,P=0.003)。Transwell实验结果显示,与转染NC相比,转染miR-96能显著抑制RPE细胞的迁移,差异具有统计学意义(t=6.754,P=0.002)。进而,明确了MITF是miR-96作用的靶基因。Western blot检测结果显示,转染miR-96后细胞中细胞周期相关蛋白p-Rb(t=11.211,P=0.002)、p-Cdc2(t=9.133,P=0.003)、CyclinD2(t=7.542,P=0.005)以及迁移相关信号通路蛋白p-ERK(t=16.699,P<0.001)、p-Akt(t=23.552,P<0.001)的表达水平均降低。结论:miR-96通过作用于靶基因MITF,调控细胞周期和迁移相关蛋白的表达从而抑制人RPE细胞的增殖和迁移。 展开更多

关键词 视网膜色素上皮 microrna-96 细胞增殖 细胞迁移 MITF

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miR-96对胃癌细胞侵袭迁移的影响 被引量：2

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作者 毛盛勋 周智勇 +2 位作者 何楠 尹成龙 曹家庆 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2013年第34期3775-3782,共8页

目的:分析MicroRNA-96(miR-96)在胃癌组织中的表达情况;体外研究miR-96反义寡核酸技术(antisense oligonucleotide,ASO)对胃癌细胞侵袭和迁移的影响.方法:运用荧光定量PCR检测122例胃癌组织及对应正常组织中miR-96的表达;通过miR-96 AS... 目的:分析MicroRNA-96(miR-96)在胃癌组织中的表达情况;体外研究miR-96反义寡核酸技术(antisense oligonucleotide,ASO)对胃癌细胞侵袭和迁移的影响.方法:运用荧光定量PCR检测122例胃癌组织及对应正常组织中miR-96的表达;通过miR-96 ASO降低胃癌细胞中miR-96的表达,采用Transwell实验和划痕实验观察miR-96ASO对胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响,同时运用Western blot的方法检测侵袭相关蛋白的表达变化.结果:在122例胃癌病例中,62.30%(76/122)的胃癌组织miR-96表达明显高于对应正常组织(P<0.05);与空白对照组和转染无义ASO组相比,miR-96 ASO可以显著降低miR-96的表达(P<0.05);Transwell实验和划痕实验结果显示转染miR-96 ASO后,胃癌细胞的侵袭迁移能力明显下降,同时相关侵袭蛋白基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)和MMP9表达下降(P<0.05).结论:miR-96在胃癌组织中表达上调,降低miR-96的表达可有效抑制胃癌细胞的侵袭和迁移.miR-96有可能成为胃癌侵袭转移调控的新靶点. 展开更多

关键词 miR-96 胃癌 侵袭 迁移 反义单核苷酸

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微小RNA-96靶向叉头框转录因子O1促进肺癌细胞增殖和迁移 被引量：2

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作者 何剑营 黄燕燕 +2 位作者 陈志军 方可欣 竺王玉 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期2259-2261,共3页

目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-96通过靶向叉头框转录因子O1(FOXO1)促进肺癌细胞增殖和迁移的作用。方法应用茎环反转录荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测miR-96在肺癌细胞株中的表达;干扰慢病毒感染抑制miR-96表达后,分别利用细胞增... 目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-96通过靶向叉头框转录因子O1(FOXO1)促进肺癌细胞增殖和迁移的作用。方法应用茎环反转录荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测miR-96在肺癌细胞株中的表达;干扰慢病毒感染抑制miR-96表达后,分别利用细胞增殖试验(CCK-8)和划痕试验检测其对肺癌细胞增殖和迁移的影响;蛋白质印迹法(Western blot)和双荧光素酶活性试验验证miR-96靶基因FOXO1。应用GraphPad Prism 5统计学软件进行分析,计量资料比较采用t检验。结果CCK-8实验显示抑制H1299细胞miR-96表达后,实验组24、48、72 h吸光度值分别为1.293±0.019、1.684±0.038、2.180±0.034,明显低于对照组的1.655±0.056、1.880±0.020、2.493±0.060,差异有统计学意义(t=5.646、4.426、14.670,P<0.01);划痕试验显示对照组4 h和10 h细胞迁移率为(29.21±3.96)%、(47.49±3.33)%,明显高于实验组[(5.80±2.94)%、(13.63±3.18)%],差异有统计学意义(t=4.748、7.352,P<0.01);筛选miR-96靶基因FOXO1,将miR-96过表达后,肺癌细胞FOXO1表达明显降低;反之,抑制miR-96表达后,FOXO1表达明显增高。荧光素酶活性试验显示miR-96和FOXO13’非翻译区(3’UTR)野生型质粒共转染后,野生型为(22.5±7.6)%,与对照组的(97.2±13.2)%及突变型的(115.6±13.5)%比较,荧火虫/海肾荧光素酶比值明显降低(t=14.750、12.040,P值均<0.01)。结论miR-96通过靶向调控FOXO1促进肺癌细胞增殖和迁移。 展开更多

关键词 肺癌 微小RNA-96 叉头框转录因子O1 增殖 迁移

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子宫内膜癌组织中miR-96、FOXO1表达变化及意义 被引量：2

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作者 田秀芳 陈红晓 +1 位作者 栾雅静 郭景霞 《山东医药》 CAS 2021年第31期1-4,共4页

目的探讨子宫内膜癌(EC)组织中微小RNA96(miR-96)、叉头框基因O1(FOXO1)的表达变化及意义。方法收集120例EC患者癌组织及其癌旁组织(距癌组织边缘>5 cm),用荧光定量PCR法检测组织中miR-96、FOXO1 mRNA表达,Pearson相关分析二者表达... 目的探讨子宫内膜癌(EC)组织中微小RNA96(miR-96)、叉头框基因O1(FOXO1)的表达变化及意义。方法收集120例EC患者癌组织及其癌旁组织(距癌组织边缘>5 cm),用荧光定量PCR法检测组织中miR-96、FOXO1 mRNA表达,Pearson相关分析二者表达的关系,用在线软件TargetScan预测miR-96与FOXO1相互作用的位点,分析miR-96、FOXO1 mRNA表达与患者临床病理特征的关系;对患者随访至2021年4月,用Kaplan-Meier生存曲线法分析miR-96与FOXO1表达对EC患者预后的影响;多因素Cox回归分析EC患者预后的危险因素。结果与癌旁组织比较,EC组织中miR-96相对表达量高、FOXO1 mRNA相对表达量低(P均<0.05)。EC组织中miR-96与FOXO1 mRNA的表达呈负相关(r=-0.611,P<0.05)。FOXO1 mRNA的3'UTR区第232~266碱基位置处存在与miR-96相互结合的潜在位点。miR-96、FOXO1 mRNA表达与EC的国际妇产科联盟(FIGO)分期、伴淋巴结转移有关(P均<0.05)。随访5~36(27.7±6.3)个月,随访期间死亡26例。以miR-96相对表达量的均数4.118为临界值,分为miR-96高表达组65例,miR-96低表达组55例。miR-96高表达组3年总体生存率低于低表达组(P<0.05)。以FOXO1 mRNA相对表达量的均数0.918为临界值,分为FOXO1高表达组62例,FOXO1低表达组58例。FOXO1高表达组3年总体生存率高于低表达组(P<0.05)。miR-96高表达、FOXO1低表达、高FIGO分期及淋巴结转移是EC患者预后不良的危险因素(P均<0.05)。结论EC组织中miR-96高表达、FOXO1 mRNA低表达,二者表达变化与肿瘤FIGO分期、淋巴结转移有关;miR-96高表达、FOXO1低表达的EC患者预后不良。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 微小RNA96 叉头框基因O1

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LncRNA TP53TG1通过miR-96/TPM1轴调控胃癌细胞对5-FU的耐药性研究 被引量：2

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作者 文俏程 卢善政 +1 位作者 张蔚林 肖志刚 《临床和实验医学杂志》 2021年第23期2492-2496,共5页

目的探究长链非编码RNA(LncRNA)肿瘤蛋白P53靶基因1(TP53TG1)/微小RNA-96(miR-96)/原肌球蛋白1(TPM1)对胃癌细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药性的影响及其可能机制。方法体外培养SGC7901、SGC7901/5-FU细胞,将SGC7901/5-FU细胞分为对照组、TP53... 目的探究长链非编码RNA(LncRNA)肿瘤蛋白P53靶基因1(TP53TG1)/微小RNA-96(miR-96)/原肌球蛋白1(TPM1)对胃癌细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药性的影响及其可能机制。方法体外培养SGC7901、SGC7901/5-FU细胞,将SGC7901/5-FU细胞分为对照组、TP53TG1 NC组(转染TP53TG1 NC)、TP53TG1 mimic组(转染TP53TG1 mimic)、miR-96 NC组(转染TP53TG1 mimic、miR-96 NC)和miR-96 mimic组(转染TP53TG1 mimic、miR-96 mimic)。UALCAN数据库分析胃腺癌组织、正常胃组织中TP53TG1表达差异;qRT-PCR法检测LncRNA TP53TG1、miR-96、TPM1 mRNA表达;CCK-8法、流式细胞术、蛋白质印迹法分别检测细胞增殖、凋亡及TPM1、Bcl-2、Bax蛋白表达;双荧光素酶实验检测miR-96、TPM1的靶向关系。结果胃腺癌组织中TP53TG1水平显著低于正常胃组织,差异有统计学意义(P<0.05)。与SGC7901细胞相比,SGC7901/5-FU细胞中LncRNA TP53TG1表达显著降低,miR-96表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与TP53TG1 NC组相比,TP53TG1 mimic组SGC7901/5-FU细胞中LncRNA TP53TG1、TPM1 mRNA、TPM1蛋白、Bax蛋白水平及细胞凋亡率显著升高,miR-96、Bcl-2蛋白水平及细胞吸光度(A)值显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与miR-96 NC组相比,miR-96 mimic组SGC7901/5-FU细胞中LncRNA TP53TG1、TPM1 mRNA、TPM1蛋白、Bax蛋白水平及细胞凋亡率显著降低,miR-96、Bcl-2蛋白水平及细胞A值显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-96与TPM1在SGC7901/5-FU细胞中存在靶向关系。结论LncRNA TP53TG1可通过miR-96/TPM1轴降低胃癌细胞对5-FU的耐药性。 展开更多

关键词 胃癌 长链非编码RNA肿瘤蛋白P53靶基因1 微小RNA-96 原肌球蛋白1 5-氟尿嘧啶 耐药性

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子宫内膜癌患者miR-30b和miR-96水平及与预后的关系 被引量：1

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作者 林一禾 庄晓苹 金纬纬 《中华全科医学》 2021年第1期73-76,107,共5页

目的检测子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)miR-30b、miR-96水平,探究其与临床病理及预后的关系。方法选择2012年10月—2014年8月温州市中西医结合医院收治的EC患者及门... 目的检测子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)miR-30b、miR-96水平,探究其与临床病理及预后的关系。方法选择2012年10月—2014年8月温州市中西医结合医院收治的EC患者及门诊健康体检者(对照组)各76例,荧光定量PCR检测PBMC中miR-30b、miR-96水平,Pearson法分析二者相关性,Kaplan-Meier法分析二者与5年生存率的关系;Cox分析不良预后的危险因素。结果EC患者PBMC中miR-30b、miR-96水平均高于对照组(t=21.913、24.188,均P<0.05),二者呈正相关(r=0.553,P<0.05),均与病理分级、FIGO分期、肌层浸润及淋巴结转移有关(均P<0.05)。miR-30b高表达者5年总生存率(16.13%)低于低表达者(66.67%,χ^(2)=16.890,P<0.05);miR-96高表达者5年总生存率(18.18%)低于低表达者(67.44%,χ^(2)=16.307,P<0.05)。miR-30b、miR-96、FIGO分期、淋巴结转移是预后的影响因素(HR=2.861,95%CI:1.427~5.736;HR=1.973,95%CI:1.462~2.663;HR=2.235,95%CI:1.491~3.350;HR=2.439,95%CI:1.365~4.358;均P<0.05)。结论PMBC中miR-30b、miR-96高表达,与EC患者病理分级、FIGO分期、肌层浸润、淋巴结转移及5年生存率有关,是影响预后的独立危险因素。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 微小RNA-30b 微小RNA-96

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microRNA-96与脓毒症新生儿炎症反应的关系研究

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作者 张春磊 李秀婷 +1 位作者 刘娜 张成元 《国际检验医学杂志》 CAS 2022年第17期2131-2134,2140,共5页

目的分析微小RNA-96(miR-96)与新生儿脓毒症(NS)炎症反应的关系。方法将2018年6月至2020年4月在该院治疗的65例NS患儿作为NS组,将同期65例非感染性全身炎症反应综合征(SIRS)患儿作为非感染性SIRS组,另选50例健康体检儿童作为健康组。采... 目的分析微小RNA-96(miR-96)与新生儿脓毒症(NS)炎症反应的关系。方法将2018年6月至2020年4月在该院治疗的65例NS患儿作为NS组,将同期65例非感染性全身炎症反应综合征(SIRS)患儿作为非感染性SIRS组,另选50例健康体检儿童作为健康组。采用实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定miR-96水平,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清炎性因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平,采用Pearson相关分析miR-96与炎症反应指标的相关性;随访后,将NS组分为存活组、死亡组,对比不同预后患儿血清各指标差异,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析miR-96对NS患儿预后的预测价值。结果NS组序贯器官衰竭评估评分、急性生理学和慢性健康评价Ⅱ(APACHEⅡ)评分比非感染性SIRS组高,差异均有统计学意义(P<0.05);NS组miR-96水平比非感染性SIRS组、健康组低,IL-1β、IL-6、TNF-α水平比非感染性SIRS组、健康组高,差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson相关分析结果显示,miR-96水平与IL-1β、IL-6、TNF-α均呈负相关(r<0,P<0.05);死亡组miR-96水平比存活组低,IL-1β、IL-6、TNF-α水平比存活组高,差异均有统计学意义(P<0.05);ROC曲线结果显示,miR-96预测NS患儿病死的AUC为0.903(95%CI:0.846~0.978),以0.75为临界值,其灵敏度、特异度分别为0.894、0.855,约登指数为0.749。结论NS患儿miR-96水平下调,炎性因子水平上调,二者呈负相关;且miR-96水平对NS预后有一定的预测价值。 展开更多

关键词 微小RNA-96 新生儿脓毒症 炎症反应 预后

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稳定过表达microRNA-96前列腺癌细胞株的建立及其对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响

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作者 李勇波 张孝斌 +2 位作者 程帆 饶婷 余伟民 《中国医药导报》 CAS 2016年第2期24-28,共5页

目的构建稳定过表达micro RNA-96(mi R-96)的前列腺癌DU-145细胞株并研究其对DU-145细胞增殖和迁移的影响。方法构建mi R-96慢病毒表达载体并转染前列腺癌细胞DU-145,嘌呤霉素筛选出稳定表达mi R-96(实验组)及阴性对照(对照组)的细胞株... 目的构建稳定过表达micro RNA-96(mi R-96)的前列腺癌DU-145细胞株并研究其对DU-145细胞增殖和迁移的影响。方法构建mi R-96慢病毒表达载体并转染前列腺癌细胞DU-145,嘌呤霉素筛选出稳定表达mi R-96(实验组)及阴性对照(对照组)的细胞株;通过实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测转染后两组细胞mi R-96的表达;克隆形成实验和MTT实验检测两组的细胞增殖情况。transwell迁移实验检测两组细胞的迁移能力。结果经过筛选后各组转染细胞发光效率均>90%;q RT-PCR结果显示实验组mi R-96表达水平明显高于对照组(P<0.05);克隆形成实验显示实验组克隆形成率明显低于对照组(P<0.05);MTT实验显示实验组各个时间点吸光度值均低于对照组(P<0.05);transwell迁移实验表明实验组穿膜细胞数明显少于对照组(P<0.05)。结论 mi R-96可抑制前列腺细胞的增殖和迁移能力,可能参与前列腺癌的发生、发展。 展开更多

关键词 前列腺癌 microrna-96 增殖 迁移

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microRNA-96在泌尿系三大肿瘤中的表达及对临床诊疗作用的研究进展 被引量：1

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作者 唐建 罗红梅 +2 位作者 黄果 谭华俊 汪翼 《西南军医》 2018年第2期141-143,共3页

microRNA也称为微小RNA,是广泛存在于生物细胞体内的内源性非编码小分子RNA,其通过与靶基因3,UTR结合,抑制靶mRNA或降解靶mRNA,从而在转录后水平调节蛋白质的合成,发挥其生物学作用。现已发现多种具有调控细胞凋亡、增殖等生物学功能的m... microRNA也称为微小RNA,是广泛存在于生物细胞体内的内源性非编码小分子RNA,其通过与靶基因3,UTR结合,抑制靶mRNA或降解靶mRNA,从而在转录后水平调节蛋白质的合成,发挥其生物学作用。现已发现多种具有调控细胞凋亡、增殖等生物学功能的miRNAs,并且与疾病的发生发展有着密切联系。近期许多研究表明,microRNA-96在泌尿系三大肿瘤中表达异常,且与肿瘤细胞的转移、侵袭有着密切关系,本文就microRNA-96在肾癌、膀胱癌及前列腺癌中的表达情况及对临床诊断作用的研究现状做一简要综述。 展开更多

关键词 microrna-96 膀胱癌 前列腺癌 肾癌

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血清miR-96-5p、miR-486-5p水平与创伤后脓毒症患者机体炎症反应及预后的关系分析

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作者 董焕祥 龚焕楷 +2 位作者 吕传柱 黎建康 张宏 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第13期1564-1569,共6页

目的 分析血清微小RNA(miR)-96-5p、miR-486-5p水平与创伤后脓毒症患者机体炎症反应及预后的关系。方法 选取2019年3月至2022年10月海南医学院第一附属医院收治的205例创伤患者,根据治疗期间是否进展为脓毒症将患者分为脓毒症组(77例)... 目的 分析血清微小RNA(miR)-96-5p、miR-486-5p水平与创伤后脓毒症患者机体炎症反应及预后的关系。方法 选取2019年3月至2022年10月海南医学院第一附属医院收治的205例创伤患者,根据治疗期间是否进展为脓毒症将患者分为脓毒症组(77例)与非脓毒症组(128例)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测两组血清miR-96-5p、miR-486-5p相对表达水平,检测血清炎症细胞因子[C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白细胞介素6(IL-6)]水平,采用Pearson相关性分析脓毒症组血清miR-96-5p、miR-486-5p表达与炎症细胞因子的相关性。进一步分析创伤后脓毒症患者的预后,根据住院期间的存活结局分为存活组与死亡组;采用多因素Logistic回归模型分析创伤后脓毒症患者死亡的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-96-5p、miR-486-5p对创伤后脓毒症患者死亡的预测价值。结果 脓毒症组血清miR-96-5p相对表达水平低于非脓毒症组(P<0.05),miR-486-5p相对表达水平高于非脓毒症组(P<0.05)。脓毒症组血清CRP、PCT、IL-6水平高于非脓毒症组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,脓毒症组miR-96-5p相对表达水平与CRP、PCT、IL-6水平呈负相关(P<0.05),miR-486-5p相对表达水平与CRP、PCT、IL-6水平呈正相关(P<0.05)。77例创伤后脓毒症患者生存67例,死亡10例。多因素Logistic回归分析显示,miR-96-5p相对表达水平升高为创伤后脓毒症患者死亡的保护因素(P<0.05),损伤严重度评分(ISS)升高、miR-486-5p相对表达水平升高为创伤后脓毒症患者死亡的危险因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,ISS、miR-96-5p、miR-486-5p三者联合预测创伤后脓毒症患者死亡的曲线下面积为0.860,灵敏度和特异度分别为0.900、0.821,联合检测的预测效能高于单独检测。结论 创伤后脓毒症患者血清miR-96-5p低表达、miR-486-5p高表达,且机体炎症细胞因子水平上升;miR-96-5p、miR-486-5p表达与炎症反应� 展开更多

关键词 创伤后脓毒症 微小RNA-96-5p 微小RNA-486-5p 炎症反应 预后

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