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微小RNA-133b对紫外线诱导的晶状体上皮细胞凋亡的抑制作用及其调控机制 被引量:12
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作者 李晓彤 秦宇 +2 位作者 赵江月 闵锐 张劲松 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期977-983,共7页
背景 研究证实紫外线B照射是白内障发生的主要原因之一,其机制与晶状体上皮细胞(LECs)凋亡有关。微小RNA-133b(miR-133b)参与氧化应激诱导的LECs凋亡的调控过程,但其是否参与紫外线诱导白内障的发病过程及其机制尚未阐明。 目... 背景 研究证实紫外线B照射是白内障发生的主要原因之一,其机制与晶状体上皮细胞(LECs)凋亡有关。微小RNA-133b(miR-133b)参与氧化应激诱导的LECs凋亡的调控过程,但其是否参与紫外线诱导白内障的发病过程及其机制尚未阐明。 目的 观察miR-133b对紫外线诱导白内障LECs凋亡的抑制作用及其调控机制。 方法 将20只8周龄SPF级C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为白内障模型组和正常对照组,其中白内障模型组小鼠用波长302 nm的紫外线直接照射眼部5 min,照射强度为300 W/cm2,每天照射1次,共照射1周;正常对照组小鼠不给于任何干预。于末次照射后24 h处死各组小鼠并摘出10只眼球以制备全眼球切片。取人LECs细胞系(SRA01/04)紫外线照射25 min,并继续培养4 h作为紫外线照射组,正常对照组细胞不作任何干预。取紫外线照射模型组细胞接种于96孔板并分为miR-133b模拟物组、模拟物阴性对照组、miR-133b抑制物组和抑制物对照组,分别用lipofectamine2000联合50 nmol/L miR-133b模拟物、miR-133b模拟物对照剂、100 nmol/L miR-133b抑制物或miR-133b抑制物对照剂瞬时转染细胞。采用实时荧光定量PCR法检测小鼠晶状体组织和不同转染组人LECs中miR-133b mRNA及其预测靶基因BCL2L2 mRNA的表达以评估转染效率;采用TUNEL凋亡检测试剂盒检测小鼠晶状体组织中LECs和不同转染组人LECs的凋亡情况。 结果 正常对照组小鼠晶状体前囊膜LECs排列规则,未发现TUNEL染色阳性细胞,白内障模型组小鼠LECs排列稀疏,可见凋亡细胞呈红色荧光。紫外线照射组细胞凋亡率为(43.90±9.30)%,明显高于正常对照组的(1.08±0.49)%,差异有统计学意义(t=-7.963,P=0.015)。白内障模型组小鼠晶状体组织和紫外线照射组细胞中miR-133b mRNA的相对表达量分别低于正常对照组小鼠和正常人LECs,差异均有统计学� 展开更多
关键词 微小RNA 紫外线/不良作用 辐射损伤/病理 白内障/防控 晶状体上皮细胞 近交系 C57bL小鼠 微小RNA-133b
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微小RNA-133b靶向基质金属蛋白酶-9抑制结直肠癌细胞增殖 被引量:7
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作者 刘亚彬 孔德贤 李秉慧 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期212-214,共3页
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-133b靶向基质金属蛋白酶-9(MMP-9)抑制结直肠癌细胞增殖的分子机制。方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测结直肠癌组织中MMP-9的表达水平;利用RNA干扰及重组质粒过表达技术在结直肠癌细胞株... 目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-133b靶向基质金属蛋白酶-9(MMP-9)抑制结直肠癌细胞增殖的分子机制。方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测结直肠癌组织中MMP-9的表达水平;利用RNA干扰及重组质粒过表达技术在结直肠癌细胞株HCT116中调节MMP-9的表达水平,并用噻唑蓝(MTT)比色法及克隆形成实验检测细胞的增殖能力;借助生物信息学预测MMP-9的上游miRNA,并用FQ-PCR及双荧光素酶实验进行验证;通过转染技术在HCT116细胞中过表达miR-133b和MMP-9,并用MTT及克隆形成实验检测细胞的增殖能力。结果 MMP-9在癌组织中表达高于癌旁组织(3.17±0.79比1.00±0.25,P<0.01);MMP-9干扰组细胞增殖活力低于对照组(MTT:1.54±0.06比1.89±0.03,P<0.01;克隆形成:6.33±1.53比13.33±0.58,P<0.01);MMP-9过表达组细胞增殖活力高于对照组(MTT:2.10±0.12比1.82±0.04,P<0.05;克隆形成:23.33±2.08比13.67±1.53,P<0.01)。miR-133b过表达组MMP-9表达低于对照组(0.42±0.06比1.00±0.12,P<0.01);野生型MMP-9 3’端非编码区(3’UTR)质粒miR-133b过表达组荧光素酶活力低于对照组(0.49±0.08比0.97±0.08,P<0.01),突变型MMP-9 3’UTR质粒miR-133b过表达组与对照组比较荧光素酶活力差异无统计学意义(0.95±0.11比1.02±0.15,P>0.05)。miR-133b过表达组细胞增殖活力低于对照组(MTT:1.34±0.04比1.54±0.06,P<0.01;克隆形成:8.67±3.06比17.67±2.52,P<0.05);miR-133b/MMP-9同时过表达组细胞增殖活力高于miR-133b过表达组(MTT:1.66±0.05比1.34±0.04,P<0.01;克隆形成:22.00±4.00比8.67±3.05,P<0.05)。结论 miR-133b可以靶向下调MMP-9的表达并抑制结直肠癌细胞增殖。 展开更多
关键词 结直肠癌 微小RNA-133b 基质金属蛋白酶-9 增殖
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子宫动脉超声多普勒血流参数联合血清微小RNA-133b预测早发型子痫前期的应用价值分析
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作者 寇佳新 李玉宏 阚辰晓 《中国妇幼保健》 CAS 2024年第4期752-755,共4页
目的探讨子宫动脉超声多普勒血流参数联合血清微小RNA-133b(miR-133b)预测早发型子痫前期的应用价值。方法选取2021年1月—2022年4月在锦州医科大学附属第一医院孕检的孕妇648例,在孕34周前诊断为早发型子痫前期纳入观察组(32例),未诊... 目的探讨子宫动脉超声多普勒血流参数联合血清微小RNA-133b(miR-133b)预测早发型子痫前期的应用价值。方法选取2021年1月—2022年4月在锦州医科大学附属第一医院孕检的孕妇648例,在孕34周前诊断为早发型子痫前期纳入观察组(32例),未诊断为早发型子痫前期则纳入对照组(616例)。在孕16~20周应用超声检测两组子宫动脉血流参数,采用实时定量PCR法检测血清miR-133b相对表达量。结果观察组的阻力指数(RI)、子宫动脉收缩期与舒张期血流速度比值(S/D)、搏动指数(PI)以及血清miR-133b相对表达量分别为(0.58±0.13)、(2.21±0.54)、(0.97±0.18)、(1.58±0.22),均高于对照组[(0.47±0.15)、(1.91±0.52)、(0.81±0.13)、(1.21±0.24)],差异均有统计学意义(t=4.069,3.176,6.644,8.536,均P<0.05)。观察组孕妇血清miR-133b与RI、S/D、PI均呈正相关(均P<0.05)。血清miR-133b、RI、S/D、PI预测早发型子痫前期的ROC曲线下面积分别为0.812、0.707、0.645、0.744,其中血清miR-133b的预测价值最高。miR-133b联合PI预测早发型子痫前期的灵敏度、特异度、约登指数分别为84.38%、82.14%、0.665。结论在孕16~20周时血清miR-133b的相对表达量异常升高,预示早发型子痫前期的发生风险增大,对早发型子痫前期有一定的预测价值,且血清miR-133b联合PI可进一步提升预测价值。 展开更多
关键词 早发型子痫前期 子宫动脉血流参数 微小RNA-133b 预测价值
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冠心病病人外周血微RNA-133b表达与预后的关系分析
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作者 刘少云 张红 +2 位作者 刘艳静 吴玮 刘志敏 《安徽医药》 CAS 2024年第3期572-576,共5页
目的 探究冠心病病人外周血微RNA-133b(miR-133b)表达水平,并分析其表达与病人预后的关系。方法 选取2019年7月至2021年1月于华北石油管理局总医院就诊的冠心病病人95例,其中稳定性冠心病(SACD)病人54例为SACD组,急性冠状动脉综合征(ACS... 目的 探究冠心病病人外周血微RNA-133b(miR-133b)表达水平,并分析其表达与病人预后的关系。方法 选取2019年7月至2021年1月于华北石油管理局总医院就诊的冠心病病人95例,其中稳定性冠心病(SACD)病人54例为SACD组,急性冠状动脉综合征(ACS)41例为ACS组,另选同期该院进行体检的健康人群60例作为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-133b水平;随访6个月,根据是否出现主要心脏不良事件,分为预后不良组(出现主要心脏不良事件,33例)和预后良好组(未出现主要心脏不良事件,62例)。采用Spearman相关性分析检验血清miR-133b水平与Gensini评分的关系;采用多因素logistic回归分析影响冠心病病人预后的危险因素;采用受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清miR-133b水平对冠心病病人预后不良的预测价值。结果 SACD组、ACS组身体质量指数、高血压、吸烟史及血脂异常者比例高于对照组(P<0.05),ACS组Gensini评分、病变支数≥3支占比高于SACD组(P<0.05)。ACS组、SACD组血清miR-133b(1.59±0.15比1.36±0.12比1.02±0.05)水平均高于对照组(P<0.05),ACS组血清miR-133b水平高于SACD组(P<0.05)。SACD组病人血清miR-133b水平与Gensini评分呈正相关(r=0.58,P<0.001),ACS组病人血清miR-133b水平与Gensini评分也呈正相关(r=0.57,P<0.001)。预后不良组病人Gensini评分、血清miR-133b水平及病变支数≥3支占比高于预后良好组(P<0.05)。Gensini评分、病变支数、miR-133b均为影响冠心病病人预后的危险因素(P<0.05)。血清miR-133b水平预测冠心病病人预后不良的曲线下面积为0.83,最佳截断值为1.55,灵敏度高达97.0%,特异度为64.5%。结论 冠心病病人血清miR-133b水平升高,对病人的预后不良有一定的预测价值。 展开更多
关键词 冠心病 微RNA-133b 相关性 受试者操作特征曲线 预后
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MicroRNA-133b调节FGFR1-ERK1/2-SOX2信号通路对裸鼠肺癌NCI-H1975细胞移植瘤生长的影响 被引量:1
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作者 褚翔鹏 万人安 +2 位作者 王鹏 韩浩 陈小波 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期48-56,共9页
目的探讨microRNA-133b(miR-133b)对裸鼠肺癌NCI-H1975细胞移植瘤生长的抑制作用以及对成纤维细胞生长因子受体1-细胞外信号调节激酶1/2-性别决定区Y-box蛋白2信号通路(FGFR1-ERK1/2-SOX2)的影响。方法q RT-PCR检测人肺成纤维细胞、肺... 目的探讨microRNA-133b(miR-133b)对裸鼠肺癌NCI-H1975细胞移植瘤生长的抑制作用以及对成纤维细胞生长因子受体1-细胞外信号调节激酶1/2-性别决定区Y-box蛋白2信号通路(FGFR1-ERK1/2-SOX2)的影响。方法q RT-PCR检测人肺成纤维细胞、肺癌细胞株miR-133b表达。miR-133b过表达NCIH1975细胞。将NCI-H1975细胞分为对照组、mimic NC组、miR-133b mimic组、miR-133b mimic+pcDNA3.1组、miR-133b mimic+pcDNA3.1 FGFR1组。CCK-8法检测NCI-H1975细胞增殖抑制率,Transwell实验观察NCI-H1975细胞侵袭、迁移情况。复制裸鼠移植瘤模型并分组,将裸鼠分为对照组、mimic NC组、miR-133b mimic组、miR-133b mimic+AZD4547组,观察各组裸鼠肿瘤体积与重量,HE染色观察各组裸鼠肿瘤组织变化,TUNEL检测肿瘤组织细胞凋亡情况,免疫组织化学法观察裸鼠肿瘤组织Ki-67、Cyclin D1、VEGF-A的表达,Western blotting检测各组肿瘤组织FGFR1、p-ERK1/2/ERK1/2、SOX2蛋白相对表达量。结果与人肺成纤维细胞HLF-α比较,肺癌细胞株NCI-H1975、A427、NGE-1、A549中miR-133b mRNA相对表达量降低(P<0.05),其中以NCI-H1975细胞中miR-133b mRNA相对表达量最低。miR-133b mimic组miR-133b mRNA相对表达量较对照组和mimic NC组升高(P<0.05)。miR-133b可通过负调控FGFR1抑制肺癌NCIH1975细胞增殖和迁移。miR-133b mimic组移植瘤重量较对照组降低、体积缩小,miR-133b mimic+AZD4547组移植瘤重量较miR-133b mimic组降低、体积缩小(P<0.05)。miR-133b mimic组空泡样变性程度较对照组、mimic NC组减轻(P<0.05),miR-133b mimic+AZD4547组空泡样变性程度较miR-133b mimic组减轻(P<0.05)。miR-133b mimic组肿瘤组织细胞凋亡率较对照组升高(P<0.05),miR-133b mimic+AZD4547组肿瘤组织细胞凋亡率较miR-133b mimic组升高(P<0.05)。miR-133b mimic组VEGF-A、Cyclin D、Ki-67阳性细胞比例较对照组降低(P<0.05),miR-133b mimic+AZD4547组VEGF-A、Cyclin D、Ki-67阳性细胞比例较miR-133b mimic组降低(P<0.05)� 展开更多
关键词 肺癌 microrna-133b 皮下移植瘤 裸鼠 成纤维细胞生长因子受体1 细胞外信号调节激酶1/2 性别决定区Y-box蛋白2
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微小RNA-133b对心肌纤维化的影响 被引量:5
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作者 张松林 范粉灵 +2 位作者 魏峰 王军 张玉顺 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期589-594,共6页
目的研究微小RNA-133b(miR-133b)对心肌纤维化的影响。方法选取人心肌成纤维细胞(CFs),采用CCK8检测过表达及敲低miR-133b时细胞增殖情况,qRT-PCR及Westernblot检测结缔组织生长因子(CTGF)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(col... 目的研究微小RNA-133b(miR-133b)对心肌纤维化的影响。方法选取人心肌成纤维细胞(CFs),采用CCK8检测过表达及敲低miR-133b时细胞增殖情况,qRT-PCR及Westernblot检测结缔组织生长因子(CTGF)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)及Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ)的表达水平;生物学软件预测miR-133b的靶基因,双荧光素酶报告实验证实miR-133b与靶基因的直接调控作用。结果qRT-PCR检测结果显示,转染miR-133bmimic后miR-133b的表达水平明显高于阴性对照组(t=26.219,P=0.000),转染miR-133binhibitor后miR-133b的表达水平明显低于阴性对照组(t=6.738,P=0.003)。转染CFs21、45、69、93和117h后,与阴性对照组相比,miR-133bmimic组CFs增殖能力明显降低,而miR-133binhibitor组CFs增殖水平明显上升(P均<0.05)。与阴性对照组相比,过表达miR-133b后,CTGF(t=9.213,P=0.001;t=8.195,P=0.001)、α-SMA(t=6.511,P=0.003;t=4.434,P=0.011)、collagenⅠ(t=3.172,P=0.034;t=4.053,P=0.015)及collagenⅢ(t=6.404,P=0.003;t=5.319,P=0.006)的mRNA和蛋白表达水平均明显下调;敲低miR-133b后,CTGF(t=9.439,P=0.001;t=14.100,P=0.000)、α-SMA(t=4.519,P=0.011;t=4.377,P=0.012)、collagenⅠ(t=5.966,P=0.004;t=5.514,P=0.005)及collagenⅢ(t=4.622,P=0.010;t=4.996,P=0.008)的mRNA和蛋白表达水平均明显上升。共转染miR-133bmimic和WT3’UTR表达载体细胞的相对荧光素酶活性明显低于共转染mimiccontrol和WT3’UTR表达载体的细胞(t=5.654,P=0.005),共转染miR-133bmimic和MUT3’UTR表达载体细胞的相对荧光素酶活性与共转染mimiccontrol和MUT3’UTR表达载体的细胞差异无统计学意义(t=0.380,P=0.724)。结论miR-133b可能是通过靶向抑制CTGF来影响CFs的活化增殖,从而改善心肌纤维化。 展开更多
关键词 心肌纤维化 微小RNA-133b 结缔组织生长因子
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抑制miR-133b通过靶向FOXP3对PD大鼠调节性T淋巴细胞、炎性反应和神经元凋亡的影响 被引量:4
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作者 颜博 岳宗伟 +3 位作者 李华坚 黄优 高唯一 王改青 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期59-66,共8页
目的探究抑制微小RNA(microRNA,miR)-133b通过靶向叉头盒蛋白3(forkhead box protein 3,FOXP3)对帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的影响。方法32只PD模型大鼠随机分为PD组和PD+miR-133b ... 目的探究抑制微小RNA(microRNA,miR)-133b通过靶向叉头盒蛋白3(forkhead box protein 3,FOXP3)对帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的影响。方法32只PD模型大鼠随机分为PD组和PD+miR-133b antagomir组(n=16),健康大鼠16只作为对照组。尾静脉注射miR-133b antagomir(300µg)来抑制miR-133b的水平。检测和比较各组大鼠神经功能、黑质损伤、细胞凋亡、炎性反应、Treg细胞水平、miR-133b、FOXP3 mRNA和蛋白表达水平;通过双荧光素酶报告验证miR-133b和FOXP3的靶向关系。结果PD组的逃避潜伏期、旋转速率、细胞凋亡情况、IL-6、miR133b水平显著高于对照组,穿越次数、IL-10、FOXP3 mRNA和蛋白表达量显著低于对照组(P<0.05)。PD+miR-133b antagomir组的逃避潜伏期、旋转速率、细胞凋亡情况、IL-6、miR-133b水平显著低于PD组,穿越次数、IL-10、FOXP3 mRNA和蛋白表达量显著高于PD组(P<0.05)。miR-133b可与FOXP3靶向结合,提高miR-133b的水平显著抑制FOXP3 mRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论抑制miR-133b的水平会促进FOXP3蛋白的表达量,恢复PD大鼠模型中Treg水平,抑制黑质组织的炎性反应,缓解细胞凋亡,保护神经功能。 展开更多
关键词 帕金森病 微小RNA-133b 叉头盒蛋白3 调节性T细胞
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miR-133b在子宫内膜癌中的表达及临床意义
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作者 党引利 罗海霞 +2 位作者 刘莹莹 刘晓莺 樊海燕 《检验医学与临床》 CAS 2023年第12期1745-1748,1754,共5页
目的探讨微小RNA-133b(miR-133b)在子宫内膜癌(EC)中的表达及临床意义。方法以该院2020年1月至2022年6月在宫腔操作中收集的EC癌变组织(EC组)、子宫内膜增生组织(增生组)和正常子宫内膜组织(对照组)各66例为研究对象。测定3组子宫内膜... 目的探讨微小RNA-133b(miR-133b)在子宫内膜癌(EC)中的表达及临床意义。方法以该院2020年1月至2022年6月在宫腔操作中收集的EC癌变组织(EC组)、子宫内膜增生组织(增生组)和正常子宫内膜组织(对照组)各66例为研究对象。测定3组子宫内膜组织标本中miR-133b表达水平,检测EC组标本中人附睾蛋白4(HE4)、糖类抗原125(CA125)和雌激素受体(ER)表达。对比3组miR-133b表达水平,分析不同临床病理特征EC患者的miR-133b表达水平,分析EC患者miR-133b水平与HE4和CA125表达的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-133b对EC、EC病理分期及淋巴结转移的诊断价值。结果EC组子宫内膜组织miR-133b表达水平显著低于增生组和对照组(P<0.05)。FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、HE4阳性、CA125阳性的EC患者子宫内膜组织miR-133b表达水平均显著低于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、HE4阴性、CA125阴性患者(P<0.05),但不同年龄、病理分型、细胞分化深度、肌层浸润程度和ER表达状况的EC患者子宫内膜组织miR-133b表达水平间差异均无统计学意义(P>0.05)。相关性分析显示,EC组子宫内膜组织miR-133b表达水平与FIGO分期、淋巴结转移、CA125表达、HE4表达呈负相关(r=-0.445、-0.405、-0.445、-0.534,P<0.05)。ROC曲线分析显示,子宫内膜组织中miR-133b表达水平对EC[曲线下面积(AUC)为0.802,95%CI:0.726~0.877]、EC FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期(AUC为0.765,95%CI:0.650~0.880)及淋巴结转移(AUC为0.826,95%CI:0.756~0.895)均具有一定诊断价值(P<0.05)。结论miR-133b在EC患者子宫内膜组织中低表达,其低表达会促进肿瘤细胞增殖、转移,且对EC、病理分期和淋巴结转移均具有一定的诊断价值。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 微小RNA-133b 诊断
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miRNA 133b、sFlt1在子痫前期孕妇胎盘及血清的表达水平和临床意义 被引量:2
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作者 戴规 黄丽慧 +1 位作者 郭慧 卢丹 《中国煤炭工业医学杂志》 2022年第1期11-15,共5页
目的探讨miRNA133b、可溶性血管内皮生长因子(sFlt1)的关系及二者对子痫前期发生发展的影响。方法 2018年2月—2020年2月于该院行剖宫产的子痫前期孕妇64例,其中34例为重度子痫前期患者,30例为轻度子痫前期者,选取同期于该院行剖宫产的... 目的探讨miRNA133b、可溶性血管内皮生长因子(sFlt1)的关系及二者对子痫前期发生发展的影响。方法 2018年2月—2020年2月于该院行剖宫产的子痫前期孕妇64例,其中34例为重度子痫前期患者,30例为轻度子痫前期者,选取同期于该院行剖宫产的健康产妇40例作为对照组。采用RT-qPCR法检测胎盘中miR-133b表达,ELISA法检测血清sFlt1含量,分析二者的关系及对病程的影响。结果轻度组、重度组孕妇血清sFlt1含量分别为(43.20±13.54)×10^(3)pg/ml、(83.16±21.07)×10^(3)pg/ml,胎盘组织miRNA133b表达量分别为(1.98±0.65)、(3.63±1.02),均高于对照组的(3.98±0.81)、(1.00±0.10),重度组又高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组与轻度组孕妇围生儿病死率、窒息率、产后出血与新生儿体重对比差异均无统计学意义(均P>0.05);重度组围生儿病死率、窒息率、产后出血高于对照组,新生儿体重低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论子痫前期孕妇血清sFlt1含量升高,胎盘组织内miRNA133b表达升高,它们可能参与子痫前期发病;临床除常规检测项目外,还及时检测患者sFlt1与miRNA133b表达,以尽早诊断,便于患者的早期治疗,改善患者预后状况。 展开更多
关键词 子痫前期 可溶性血管内皮生长因子 microrna-133b
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microRNA-133b对胶质母细胞瘤细胞迁移和侵袭的影响 被引量:3
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作者 张东智 常亮 +4 位作者 苏君 王超 谭春雷 李国夫 张学新 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2017年第5期391-394,共4页
目的探讨microRNA(miR)-133b对胶质母细胞瘤(GBM)细胞的作用,并分析其作用的分子机制。方法应用实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测20例人GBM标本及正常人脑胶质细胞系HEB中miR-133b的表达水平。Transwell侵袭实验评估miR-133b对GBM细... 目的探讨microRNA(miR)-133b对胶质母细胞瘤(GBM)细胞的作用,并分析其作用的分子机制。方法应用实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测20例人GBM标本及正常人脑胶质细胞系HEB中miR-133b的表达水平。Transwell侵袭实验评估miR-133b对GBM细胞迁移和侵袭的影响。Western blotting和荧光素酶报告实验来确定miR-133b的靶基因。结果与正常人脑胶质细胞系HEB比较,miR-133b在GBM标本中的相对表达量明显降低(1.0±0.17 vs.2.42±0.69,P<0.05);转染miR-133b mimic后GBM迁移和侵袭跨膜细胞数分别为66±17和60±14,均低于转染NC组(P<0.05);与转染NC组比较,转染miR-133b mimic后MMP-14蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。荧光素酶报告基因分析实验进一步验证mir-133b靶向调节MMP-14。结论 miR-133b通过直接靶向调节MMP-14抑制GBM的迁移和侵袭能力,可作为GBM诊断和治疗的候选靶点。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 基质金属蛋白酶14 迁移 侵袭 Glioblastoma(GbM) Matrix METALLOPROTEINASE 14(MMP-14)
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食管鳞癌中转录因子IRF4对miR-133b表达的调控作用研究 被引量:2
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作者 曾薇 刘翼 +1 位作者 李文婷 朱金峰 《中华全科医学》 2020年第11期1815-1818,1833,共5页
目的食管鳞癌中miR-133b通过调控EGFR/ITGB4/FAK信号通路,发挥抑制肿瘤增殖、侵袭、转移的作用。但目前对于miR-133b的上游调控机制尚不完全清楚,故展开探索。方法采用生信分析预测参与调控miR-133b表达的上游转录因子;采用qRT-PCR、Wes... 目的食管鳞癌中miR-133b通过调控EGFR/ITGB4/FAK信号通路,发挥抑制肿瘤增殖、侵袭、转移的作用。但目前对于miR-133b的上游调控机制尚不完全清楚,故展开探索。方法采用生信分析预测参与调控miR-133b表达的上游转录因子;采用qRT-PCR、Western blotting验证转染IRF4过表达质粒对IRF4和miR-133b在转录和蛋白水平表达的影响;采用染色质免疫共沉淀技术确认IRF4与miR-133b的相互作用;双荧光素酶报告基因实验验证IRF4对miR-133b表达的调控作用机制。结果使用ConTra V3预测发现转录因子IRF4能够与miR-133b结合;qRT-PCR、Western blotting实验证实转染IRF4过表达质粒可显著上调IRF4在mRNA(t=-18.950,P=0.010)和蛋白水平的表达(t=-4.061,P=0.042),并促进miR-133b的表达(t=-8.681,P=0.005);染色质免疫共沉淀实验(引物1:t=-17.391,P=0.003;引物2:t=-14.421,P=0.004)和双荧光素酶报告基因实验(t=-22.112,P=0.010)证实转录因子IRF4可直接靶向作用于miR-133b。结论验证IRF4对miR-133b的直接靶向调控作用,有助于构建miR-133b的信号调控网络,为食管鳞癌的诊疗提供新靶点。 展开更多
关键词 食管鳞癌 干扰素调节因子4 微小RNA-133b
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miR-133b靶向抑制SGTB对oxLDL诱导的血管内皮细胞损伤的影响 被引量:2
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作者 陈刚 陈九霖 吴俊 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期594-600,共7页
目的:探讨微小RNA-133b(miR-133b)靶向抑制富含谷氨酰胺三十四肽重复序列的小蛋白质分子(SGTB)对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管内皮细胞损伤的影响。方法:采用100μg/ml的oxLDL诱导人脐静脉血管内皮细胞(EVC-304)24 h构建血管内皮... 目的:探讨微小RNA-133b(miR-133b)靶向抑制富含谷氨酰胺三十四肽重复序列的小蛋白质分子(SGTB)对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管内皮细胞损伤的影响。方法:采用100μg/ml的oxLDL诱导人脐静脉血管内皮细胞(EVC-304)24 h构建血管内皮细胞损伤模型。将EVC-304细胞分为对照组、oxLDL组(oxLDL处理)、oxLDL+miR-NC组(转染20 nmol/L miR-NC+oxLDL处理)、oxLDL+miR-133b组(转染20 nmol/L miR-133b mimics+oxLDL处理)、oxLDL+si-NC组(转染20 nmol/L si-NC+oxLDL处理)、oxLDL+si-SGTB组(转染20 nmol/L si-SGTB+oxLDL处理)、oxLDL+miR-133b+pcDNA组(转染20 nmol/L si-SGTB和pcDNA+oxLDL处理)、oxLDL+miR-133b+pcDNA-SGTB组(转染20 nmol/L si-SGTB和pcDNA-SGTB处理)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印记(Western blot)检测miR-133b和SGTB的表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;试剂盒检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;Western blot检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。双荧光素酶报告基因实验和Western blot验证miR-133b对SGTB的靶向调控关系。结果:与对照组比较,oxLDL诱导后EVC-304细胞miR-133b、Bcl-2的表达水平显著降低(P<0.05),SGTB、Bax的表达水平显著升高(P<0.05),MDA含量和细胞凋亡率显著增加(P<0.05),SOD和GSH-Px活性显著降低(P<0.05)。过表达miR-133b或干扰SGTB均可抑制oxLDL诱导的EVC-304细胞凋亡和氧化应激损伤(P<0.05)。miR-133b与SGTB直接结合,过表达miR-133b显著下调SGTB表达(P<0.05),抑制miR-133b显著上调SGTB表达(P<0.05)。过表达SGTB可逆转过表达miR-133b对oxLDL诱导的血管内皮细胞损伤的影响(P<0.05)。结论:miR-133b通过靶向抑制SGTB的表达,可减轻oxLDL诱导的血管内皮细胞氧化应激损伤和细胞凋亡。 展开更多
关键词 微小RNA-133b 富含谷氨酰胺三十四肽重复序列的小蛋白质分子 氧化低密度脂蛋白 血管内皮细胞 凋亡 氧化应激损伤
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miR-133b在前列腺癌中的表达及其对肿瘤细胞增殖的影响 被引量:2
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作者 彭鲁 林聪 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第5期349-352,共4页
目的检测miR-133b在前列腺癌患者癌组织中的表达水平及其对前列腺癌细胞增殖的影响。方法提取30例手术切除的前列腺组织癌和配对癌旁组织中的总RNA,并逆转录为c DNA,实时荧光定量PCR检测癌组织及癌旁组织中miR-133b的表达水平,并分析其... 目的检测miR-133b在前列腺癌患者癌组织中的表达水平及其对前列腺癌细胞增殖的影响。方法提取30例手术切除的前列腺组织癌和配对癌旁组织中的总RNA,并逆转录为c DNA,实时荧光定量PCR检测癌组织及癌旁组织中miR-133b的表达水平,并分析其与患者临床病理参数之间的相关性;用脂质载体将miR-133b模拟物转染入PC-3细胞中,检测PR结构域结合因子16(PRDM16)表达情况;CCK8实验检测转染miR-133b模拟物后PC-3细胞增殖变化情况。结果前列腺癌组织中miR-133b的表达水平(16.85±0.939)×10^(-4)低于癌旁组织(22.95±1.567)×10^(-4),差异有统计学意义(t=3.335,P<0.01)。PC-3细胞转染miR-133b模拟物后,模拟物转染组中PRDM16表达水平较对照组明显降低,差异有统计学意义(0.371±0.031vs 1.000±0.022,t=12.53,P<0.01);转染miR-133b模拟物72 h后,模拟物转染组的PC-3细胞增殖能力低于阴性对照组,差异有统计学意义(t=6.811,P<0.01);而PRDM16抑制剂转染PC-3细胞72 h后的细胞增殖能力也低于阴性对照组(t=9.048,P<0.01)。结论 miR-133b在前列腺癌组织中的表达下调,其可能通过PRDM16控制前列腺肿瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 前列腺癌 微小RNA-133b PR结构域结合因子16 增殖
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miRNA-133b在胃癌组织中的表达及其对MMP-9的影响 被引量:2
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作者 马国明 左卫微 +4 位作者 贾纯亮 梁磊 姚远 李青科 刘远廷 《重庆医学》 CAS 2020年第21期3624-3629,共6页
目的探讨微小RNA-133b(miRNA-133b)在胃癌组织中的表达情况及其对基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法选取2015年12月至2018年1月于该院胃肠外科住院行胃癌根治手术的患者78例,留取胃癌组织及癌旁组织(距肿瘤边界6 cm以上),实时荧... 目的探讨微小RNA-133b(miRNA-133b)在胃癌组织中的表达情况及其对基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法选取2015年12月至2018年1月于该院胃肠外科住院行胃癌根治手术的患者78例,留取胃癌组织及癌旁组织(距肿瘤边界6 cm以上),实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miRNA-133b与MMP-9 mRNA在两组标本中的表达水平,免疫组织化学(IHC)方法检测MMP-9在两组标本中的蛋白表达,应用Spearman相关性分析法对miRNA-133b和MMP-9 mRNA的表达量进行相关性分析,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析胃癌组织中miRNA-133b表达水平对胃癌诊断的价值。结果与癌旁组织比较,胃癌组织中miRNA-133b的相对表达量明显下调,MMP-9 mRNA及蛋白表达水平明显升高,差异均有统计学意义(1.01±0.30 vs.0.45±0.19,1.06±0.44 vs.2.03±0.55,20.51%vs.65.38%,P<0.05);且胃癌组织中miRNA-133b表达水平与MMP-9 mRNA表达量呈明显负相关性(r=-0.667,P<0.05)。胃癌组织中miRNA-133b表达水平预测胃癌的ROC曲线下面积为0.942(95%CI:0.909~0.974,P<0.05),最优截断点为0.78,预测胃癌的灵敏度和特异度分别为91.02%和80.77%。结论胃癌组织中miRNA-133b表达降低可能通过靶向上调MMP-9的表达,促进胃癌细胞的浸润和转移,从而在胃癌发生、发展中起作用,且miRNA-133b表达水平对胃癌的诊断有重要价值。 展开更多
关键词 胃肿瘤 微RNA-133b 基质金属蛋白酶9 受试者工作特征曲线 曲线下面积
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MicroRNA-133b抑制人横纹肌肉瘤细胞增殖与迁移的研究 被引量:1
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作者 王丽花 陈通克 +2 位作者 姚莎莎 陈晓燕 王教 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期461-467,共7页
该研究首先通过Real-time RT-PCR检测发现,microRNA-133b在人横纹肌肉瘤细胞RD和A204中的表达量比正常肌肉组织中的表达量明显降低,再通过阳离子脂质体介导的方法将microRNA-133b转染入横纹肌肉瘤细胞RD和A204细胞中,并应用MTS法、Trans... 该研究首先通过Real-time RT-PCR检测发现,microRNA-133b在人横纹肌肉瘤细胞RD和A204中的表达量比正常肌肉组织中的表达量明显降低,再通过阳离子脂质体介导的方法将microRNA-133b转染入横纹肌肉瘤细胞RD和A204细胞中,并应用MTS法、Transwell法研究发现,microRNA-133b可明显抑制RD和A204细胞的增殖与迁移;采用Western blot法检测转染后细胞内与增殖、迁移及细胞周期相关的蛋白表达,发现microRNA-133b能下调RD和A204细胞中的LIMand SH3 protein 1(LASP1)、c-MET、p-MET、p-AKT、p-ERK1/2、p-Rb的表达水平,并降低RD和A204细胞中细胞周期蛋白CDK4和CDK6表达量。该研究表明,microRNA-133b是通过下调LASP1、c-MET和p-MET的表达水平,影响c-MET下游信号分子p-AKT、p-ERK1/2的表达水平,同时还下调细胞周期相关蛋白如CDK4、CDK6、p-Rb等的表达,从而影响RD和A204细胞的增殖与迁移。 展开更多
关键词 microrna-133b 横纹肌肉瘤 增殖 迁移 细胞周期
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Effects of moxibustion on miRNA-133b,Pitx3/TH,and neurotransmitters in the midbrain of rats with diarrhea-predominant irritable bowel syndrome
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作者 CHEN Jinyu WANG Jiaojiao +6 位作者 ZOU Ling ZHU Shanshan LI Kuiwu LIAO Lumin RUAN Jingru CHU Haoran YANG Yanping 《Journal of Acupuncture and Tuina Science》 CSCD 2022年第6期433-445,共13页
Objective:To investigate the mechanism of moxibustion in the treatment of diarrhea-predominant irritable bowel syndrome(IBS-D),by observing the effects of moxibustion at Tianshu(ST25)and Shangjuxu(ST37)on microRNA-133... Objective:To investigate the mechanism of moxibustion in the treatment of diarrhea-predominant irritable bowel syndrome(IBS-D),by observing the effects of moxibustion at Tianshu(ST25)and Shangjuxu(ST37)on microRNA-133b(miRNA-133b),pituitary homeobox family factor 3(Pitx3)/tyrosine hydroxylase(TH),and neurotransmitters in the brain tissue of IBS-D rats.Methods:Healthy Sprague-Dawley rats were randomly divided into a normal group,a model group,a moxibustion group,and a Western medicine group,with 12 rats in each group.Except for the normal group,the IBS-D rat model was established by mother-offspring separation and acetic acid enema combined with restraint stress stimulation in all the other groups.No intervention was performed in the normal and model groups.Mild moxibustion was applied to both Tianshu(ST25)and Shangjuxu(ST37)in the moxibustion group.Rifaximin was given by gavage in the Western medicine group.The physical status of rats in each group was observed at different periods.After the intervention,hematoxylineosin staining was performed to observe the histopathological morphology of rat colon;enzyme-linked immunosorbent assay was used to measure the levels of dopamine(DA),noradrenaline(NE),and 5-hydroxytryptamine(5-HT)in plasma,colon,and midbrain tissue of rats;the relative expression levels of miRNA-133b,Pitx3 mRNA,and TH mRNA in the midbrain tissue were measured by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,and the relative expression levels of Pitx3 and TH proteins in the midbrain tissue were measured by Western blotting and immunofluorescence.Results:The body weights of rats among groups and at different time points were statistically different(P<0.01).The body weight of the normal group was higher than that of the other groups over time(P<0.01).After modeling,the minimum volume threshold of abdominal withdrawal reflex(AWR)was significantly lower(P<0.01)and the loose stool rate was significantly higher(P<0.01)in the model,moxibustion,and Western medicine groups compared with the norm 展开更多
关键词 Moxibustion Therapy Mild Moxibustion Irritable bowel Syndrome DIARRHEA microrna-133b Pituitary Homeobox Family Factor 3 Tyrosine Hydroxylase NEUROTRANSMITTER
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微小RNA-133b靶向调控多聚嘧啶通道结合蛋白1对乳腺癌细胞生物学行为的影响 被引量:1
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作者 刘维 荆海红 +3 位作者 王静 王芳 陈卓 李建华 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2021年第12期2405-2409,共5页
目的探讨微小RNA(miR)-133b靶向调控多聚嘧啶通道结合蛋白1(PTBP1)调控乳腺癌细胞生物学的行为机制。方法选取乳腺癌及癌旁组织标本83例,收集患者临床病理资料,同时选取乳腺癌细胞系(MCF-7)、正常乳腺上皮细胞系(MCF-10A),实时荧光定量... 目的探讨微小RNA(miR)-133b靶向调控多聚嘧啶通道结合蛋白1(PTBP1)调控乳腺癌细胞生物学的行为机制。方法选取乳腺癌及癌旁组织标本83例,收集患者临床病理资料,同时选取乳腺癌细胞系(MCF-7)、正常乳腺上皮细胞系(MCF-10A),实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-133b和PTBP1 mRNA表达,分析与临床病理特征的关系,MCF-7细胞分为阴性对照组、miR-133b模拟物(mimic)组、miR-133b inhibitor组、miR-133b mimic+PTBP1沉默组和miR-133b inhibitor+和PTBP1沉默组,噻唑蓝(MTT)实验与流式细胞术分别检测MCF-7细胞增殖及周期的变化,划痕实验和Transwell小室检测细胞迁移及侵袭,蛋白质印迹法(Western blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)和PTBP1蛋白表达,双荧光素酶实验验证miR-133b对PTBP1的靶向调控机制。多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验,计数资料采用χ^(2)检验和Fisher精确检验进行分析。结果miR-133b和PTBP1 mRNA在乳腺癌组织(0.94±0.18、4.28±0.27)及乳腺癌细胞的表达水平(1.09±0.22、3.65±0.19)分别明显低于和高于癌旁组织(2.12±0.09、t=4.343,P<0.05;1.37±0.21、t=6.006,P<0.05)及MCF-10A细胞(1.99±0.11、t=5.223,P<0.05;1.15±0.09、t=5.774,P<0.05)。miR-133b和PTBP1均与TNM分期(1.204±0.057、3.865±0.172,χ^(2)=6.217,P<0.001)和淋巴转移(0.489±0.041、1.632±0.147,χ^(2)=7.031,P<0.001)等明显相关,而与年龄(0.601±0.052、2.008±0.187,χ^(2)=0.261,P>0.05)、分化程度(0.592±0.057、1.994±0.187,χ^(2)=0.274,P>0.05)和病理分级无关(0.587±0.059、1.921±0.172,χ^(2)=0.257,P>0.05)。与阴性对照组比较,miR-133b mimic组增殖率[(35.43±1.74)%、(8.43±0.35)%,F=166.465,P<0.05]、迁移、侵袭细胞数(109±10.562、77±5.751,t=4.663,P<0.05;128±11.624、81±7.251,t=7.453,P<0.05)、bcl-2(2.78±0.32、0.76±0.11,t=4.122,P<0.05)和PTBP1表达(3.45±0.33、0.89±0.26,t=3.154,P<0.05)明显降低,G1期阻滞明显延长(F=276.872,P<0.05), 展开更多
关键词 微小RNA-133b 调控多聚嘧啶通道结合蛋白1 乳腺癌 增殖 迁移
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Dihydroartemisinin ameliorates palmitate-induced apoptosis in cardiomyocytes via regulation on miR-133b/Sirt1 axis
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作者 LONGJU QI XIAOYING XU +6 位作者 BIN LI BO CHANG SHENGCUN WANG CHUN LIU LIUCHENG WU XIAODI ZHOU QINGHUA WANG 《BIOCELL》 SCIE 2022年第4期989-998,共10页
Excessive fat ectopically deposited in the non-adipose tissues is considered as one of the leading causes of myopathy.The aim of this study was to investigate the role of Dihydroartemisinin(DHA)in palmitate(PAL)-incub... Excessive fat ectopically deposited in the non-adipose tissues is considered as one of the leading causes of myopathy.The aim of this study was to investigate the role of Dihydroartemisinin(DHA)in palmitate(PAL)-incubated H9c2 cells(lipotoxicity-induced cell injury model).Cell viability of PAL-treated cells was determined by MTT assay,and apoptotic regulators were examined by qRT-PCR and western blot analysis,in the absence or in the presence of DHA,respectively.Expression levels of miR-133b and Sirt1 were also evaluated by qRT-PCR and western blotting examination.PAL decreased the viability of H9c2 cells and enhanced the expression of apoptotic genes.DHA reversed the effect of PAL on cell viability and lowed the level of Caspase3 and Bax.It also lowered the expression of miR-133b,while enhanced the expression of Bcl-2.Sirt1 was revealed as target of miR-133b through transcriptional regulation and the process was affected by DHA.DHA partially protected against the PAL-induced lipotoxicity by influencing the expression of miR-133b that hindered the activity of Sirt1.DHA may be used as a potential treatment in clinical management for lipotoxicity induced heart complications. 展开更多
关键词 microrna-133b Palmitate acid CARDIOMYOCYTES SIRT1 Dihydroaretemisinin
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胎盘组织中miRNA133b的表达与子痫前期的关系
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作者 刘德荣 叶元华 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2021年第6期352-353,共2页
探索miRNA133b胎盘组织表达与子痫前期发病的关系。方法 2018年12月至2020年5月期间在临沂市中医医院产科收治入院的子痫前期患者、重度子痫前期患者、正常孕妇,每组30例,实时荧光定量PCR技术检测胎盘中miR133b的表达。结果 轻度子痫前... 探索miRNA133b胎盘组织表达与子痫前期发病的关系。方法 2018年12月至2020年5月期间在临沂市中医医院产科收治入院的子痫前期患者、重度子痫前期患者、正常孕妇,每组30例,实时荧光定量PCR技术检测胎盘中miR133b的表达。结果 轻度子痫前期组及重度子痫前期组孕妇胎盘组织中miR133b表达水平分别为(0.58±0.33)、(0.35±0.17),明显低于健康对照组的(1.27±0.46),差异有统计学意义(P <0.01)。结论 miRNA133b的表达随着病情的加重降低,提示miRNA133b可能参与了子痫前期的发生发展。 展开更多
关键词 子痫前期 microrna-133b 相关性
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mir-133b对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响 被引量:4
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作者 王亚辉 王阳 +2 位作者 严云勤 张伟伟 魏瑶 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第7期14-18,228,共6页
为了探讨mir-133b对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响,试验将分离培养的牛骨骼肌卫星细胞接种在6孔板中,待细胞汇合度为70%时,用Lipofectamine 2000转染mir-133b的过表达载体进入牛骨骼肌卫星细胞,48 h后实时定量检测RNA表达水平,并用EDU试... 为了探讨mir-133b对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响,试验将分离培养的牛骨骼肌卫星细胞接种在6孔板中,待细胞汇合度为70%时,用Lipofectamine 2000转染mir-133b的过表达载体进入牛骨骼肌卫星细胞,48 h后实时定量检测RNA表达水平,并用EDU试剂盒检测细胞增殖状况,实时定量PCR检测mir-133b的靶基因sp1的RNA表达情况。结果表明:在牛骨骼肌卫星细胞中,作EDU增殖过表达mir-133b以后细胞增殖数量显著增多。说明mir-133b对牛骨骼肌卫星细胞增殖具有促进作用。 展开更多
关键词 mir-133b 牛骨骼肌卫星细胞 SP1 EDU 靶基因
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