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丝氨酸生产菌的筛选及静息细胞培养系统中L-丝氨酸的合成 被引量:6
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作者 欧倩 韦东 武波 《氨基酸和生物资源》 CAS 2006年第3期41-44,48,共5页
从广西隆安县沼气池里的残渣中筛选到一株能以甲醇为唯一碳源生长的MB200菌株。根据常规形态特征、生理生化性状及16S rDNA基因序列分析将其鉴定为甲基杆菌属(M ethylobacteriumsp.)。其最佳生长条件为:温度32℃、pH值8.0、甲醇体积分数... 从广西隆安县沼气池里的残渣中筛选到一株能以甲醇为唯一碳源生长的MB200菌株。根据常规形态特征、生理生化性状及16S rDNA基因序列分析将其鉴定为甲基杆菌属(M ethylobacteriumsp.)。其最佳生长条件为:温度32℃、pH值8.0、甲醇体积分数1.25%。建立了MB200生成L-丝氨酸的静息细胞培养系统。确定静息细胞培养的条件为:甘氨酸质量浓度为10 g.L-1,甲醇50 g.L-1,菌体质量浓度为30 g.L-1,pH8.9,于摇床250 r.m in-1,32℃静息培养48 h,L-丝氨酸产量为7.2 g.L-1。 展开更多
关键词 L-丝氨酸 甲醇 甲基杆菌属 静息细胞培养系统
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Methylobacterium sp. TP-1好氧降解四溴双酚A机理及其功能酶研究 被引量:4
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作者 刘莉莉 汪烯烯 +3 位作者 陈鑫 周纯淳 唐周 林森 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期4250-4258,共9页
四溴双酚A(Tetrabromobisphenol A,TBBPA)是目前使用最广泛的溴代阻燃剂之一,在各种环境介质中普遍存在,对人体健康具有潜在危害.本研究从沉积物中筛选得到一株可降解TBBPA的菌株,命名为TP-1,经16S rDNA序列分析鉴定为甲基杆菌(Methylob... 四溴双酚A(Tetrabromobisphenol A,TBBPA)是目前使用最广泛的溴代阻燃剂之一,在各种环境介质中普遍存在,对人体健康具有潜在危害.本研究从沉积物中筛选得到一株可降解TBBPA的菌株,命名为TP-1,经16S rDNA序列分析鉴定为甲基杆菌(Methylobacterium sp.).在pH=7的条件下反应60 h,菌株TP-1对初始浓度为10 mg·L^(-1)的TBBPA降解率为74.87%.采用HPLC-MS测定TBBPA的降解产物,发现主要产物为二溴双酚A、双酚A、4-对羟基苯乙酮和二溴化芳香族化合物,其降解方式主要为β断裂、还原脱溴和氧化,进而初步推测出其降解途径.在此基础上,基于KEGG数据库分析菌株TP-1降解TBBPA的分子生物学机制,依据模拟降解途径和KEGG注释结果推测菌株TP-1降解TBBPA的功能酶为过氧化氢酶(EC:1.11.1.6)、卤代烷脱卤酶(EC:3.8.1.5)、卤乙酸脱卤酶(EC:3.8.1.3)和单加氧酶(EC:1.14.13.7).对这4种酶同源性和编码基因进行对比分析表明,这4种酶与甲基杆菌属菌株的相应功能酶均具有较高的同源性,且相应的基因簇在甲基杆菌属菌株中均具有较好的同线性,据此推测甲基杆菌属的多数菌株具有TBBPA降解能力.本研究可从分子水平阐述TBBPA的微生物降解机制,为相关研究提供有益参考. 展开更多
关键词 四溴双酚A methylobacterium sp. 降解特性 功能酶
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Cytotoxic (A549) and antimicrobial effects of Methylobacterium sp.isolate (ERI-135) from Nilgiris forest soil,India 被引量:2
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作者 Balachandran C Duraipandiyan V Ignacimuthu S 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2012年第9期712-716,共5页
Objective:To assess the antimicrobial and cytotoxic effects of Methylobacterium sp.isolated from soil sample of Doddabetta forest,Nilgiris,Western Ghats of Tamil Nadu.Methods:Isolation of Methylobacterium was performe... Objective:To assess the antimicrobial and cytotoxic effects of Methylobacterium sp.isolated from soil sample of Doddabetta forest,Nilgiris,Western Ghats of Tamil Nadu.Methods:Isolation of Methylobacterium was performed from soils by serial dilution plate technique.The strain was grown in modified nutrient gulucose agar(MNGA)medium to study the morphology and biochemical characteristics.Methylobacterium sp.was screened for its antimicrobial activity against pathogenic bacteria and fungi.The strain was subjected to 16S rRNA analysis and was identified as Methylohacterium sp.The nucleotide sequence of the 16S rRNA gene of the isolate exhibited close similarity with other Methylobacterium sp.and has been submitted to Genbank.The antibacterial substances were extracted using chloroform and ethyl acetate from MNGA medium in which ERI-135 had grown for 5 d at 30℃.Cytotoxic effect was also studied.GC-MS analysis was carried out.The antimicrobial activity was assessed using broth micro dilution technique.Results:Ethyl acetate extract showed activity against bacteria such as Bacillus subtilis,Klebsiella pneumoniae(K.pneumoniae),Pseudomonas aeruginosa,Salmonella typkimurium,Shigella flexneri,Enterobacter aerogenes,Staphylococcus aureu and Staphylococcus epidermidis(S.epidermidis)and fungi such as,Candida albicans and Trichophyton rubrum.The lowest minimum inhibitory concentrations were:250μg/mL against 5.epidermidis and 250μg/mL against K.pneumonia.The isolate had the ability to produce enzymes such as protease.The exyract showed cytotoxic effect in human adenocarcinoma cancer cell line(A549).GC-MS analysis showed the presence of isovaleric acid(3.64%),2-Methylbulanoic acid(5.03%),isobutyramide(5.05%),N,Noimethylformamide-di-t-butylacetal(9.79%),benzeneacetamide(15.56%),octyl butyl phthalate(3.59%)and diisooctyl phthalate(5.79)in the extract.Conclusions:Methylobaeterium sp.(ERI-135)showed promising antibacterial and cytotoxic activity.This is the first report in the antimicrobial and cytotoxic effect of Methylobaeterium 展开更多
关键词 methylobacterium sp l6S rRNA ANTIMICROBIAL Cytotoxicity GC-MS Soil sample Western Ghats
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一株甲醇降解菌Methylobacterium sp.SDM11的筛选鉴定及生长条件优化 被引量:4
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作者 孔庆胜 王亚莉 +2 位作者 吴福国 张向阳 孔令斌 《化学与生物工程》 CAS 2009年第1期42-44,共3页
从活性污泥中筛选到一株可利用甲醇为唯一碳源和能源生长的细菌SDM11,该菌革兰氏染色阴性,短杆状。经16S rDNA序列比对分析发现,与Methylobacterium sp.的部分16S rDNA同源性达98%。结合其形态特征和生理生化特性,该菌被初步鉴定为甲基... 从活性污泥中筛选到一株可利用甲醇为唯一碳源和能源生长的细菌SDM11,该菌革兰氏染色阴性,短杆状。经16S rDNA序列比对分析发现,与Methylobacterium sp.的部分16S rDNA同源性达98%。结合其形态特征和生理生化特性,该菌被初步鉴定为甲基营养菌属。在培养温度为30℃、甲醇含量为0.6%、pH值为7.0的最适生长条件下,菌体对甲醇的降解率可达82.5%。 展开更多
关键词 甲基营养菌属 SDM11 筛选 甲醇 降解
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利用纸层析-分光光度法检测甲基营养菌5222产L-丝氨酸 被引量:3
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作者 张建云 谷立坤 +3 位作者 崔芽芽 韩梦霞 彭更 史永胜 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第11期114-118,共5页
该研究旨在建立一种准确、简便的检测L-丝氨酸含量的方法。当纸层析-分光光度法展开剂为丙酮∶正丁醇∶二乙胺∶水(10∶10∶2∶5,V/V),pH值为12.7,波长为510 nm,洗脱时间为30 min时,能很好的对L-丝氨酸进行定性、定量检测。当L-丝氨酸... 该研究旨在建立一种准确、简便的检测L-丝氨酸含量的方法。当纸层析-分光光度法展开剂为丙酮∶正丁醇∶二乙胺∶水(10∶10∶2∶5,V/V),pH值为12.7,波长为510 nm,洗脱时间为30 min时,能很好的对L-丝氨酸进行定性、定量检测。当L-丝氨酸标准溶液质量浓度在1~6μg/mL时,L-丝氨酸的含量(x)与吸光度值(y)之间有良好的线性相关关系(回归方程y=0.0088x+0.0089,R2=0.9962);精密度实验结果显示相对标准偏差(RSD)为2.3%;回收率实验结果显示平均加标回收率95.3%,RSD为2.6%。说明该方法具有较高的精密度和准确度。以甲基营养型菌(Methylobacterium sp.)5222为出发菌株,以甘氨酸为前体物质发酵生产L-丝氨酸,应用该研究建立的纸层析-分光光度法,检测到发酵液中L-丝氨酸含量为0.90 g/L,说明菌株5222具有产L-丝氨酸的能力。 展开更多
关键词 纸层析-分光光度法 L-丝氨酸 甲基营养菌 检测
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邻苯二甲酸二丁酯降解菌的筛选及降解条件研究 被引量:3
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作者 吕沈聪 管健 +1 位作者 高薇薇 葛淼华 《预防医学》 2018年第7期667-670,675,共5页
目的筛选并鉴定一株能以邻苯二甲酸二丁酯(DBP)为唯一碳源生长的菌株,探索利用该菌株降解DBP的最优条件。方法在基础无机盐培养基中加入DBP,将土壤浸出液接种于该培养基,筛选得到目标菌株。通过菌落表型、透射电镜、PCR等方法对该菌株... 目的筛选并鉴定一株能以邻苯二甲酸二丁酯(DBP)为唯一碳源生长的菌株,探索利用该菌株降解DBP的最优条件。方法在基础无机盐培养基中加入DBP,将土壤浸出液接种于该培养基,筛选得到目标菌株。通过菌落表型、透射电镜、PCR等方法对该菌株进行形态、生理生化特征鉴定及16Sr DNA序列分析。将目标菌株接种至p H值不同的上述培养基,于不同温度下进行培养,通过测定DBP残留和细菌含量确定最佳p H值和温度。结果通过只添加DBP作为微生物的碳源,富集培养得到一株菌株L6。通过形态、生理生化及16Sr DNA序列分析,将其鉴定为甲基杆菌属(Methylobacterium sp.)。通过优化得到DBP最佳降解条件为p H=7,温度=30℃。在最佳降解条件下,菌株L6在120 h内对含800 mg/L DBP的降解率达到85.0%。结论菌株L6对DBP有较强的降解能力,最佳降解条件为p H=7、温度=30℃,可考虑应用于DBP污染的生物修复试验。 展开更多
关键词 邻苯二甲酸二丁酯 甲基杆菌属 生物降解 条件优化
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一株地衣内生细菌的代谢产物 被引量:2
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作者 范琳 魏晓华 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期520-523,共4页
目的对分离自地衣植物猫耳衣的一株内生细菌进行分子鉴定,分离鉴定其代谢产物,并对代谢产物进行抗菌活性测试。方法采用形态观察和16SrRNA基因序列同源性分析,在GenBank数据库中比对,并采用构建系统进化树的方法,对菌株进行分类学... 目的对分离自地衣植物猫耳衣的一株内生细菌进行分子鉴定,分离鉴定其代谢产物,并对代谢产物进行抗菌活性测试。方法采用形态观察和16SrRNA基因序列同源性分析,在GenBank数据库中比对,并采用构建系统进化树的方法,对菌株进行分类学鉴定;采用硅胶柱色谱,凝胶柱色谱和高效液相色谱方法进行成分分离;根据理化性质和波谱数据对代谢产物进行结构鉴定;采用96孔板倍比稀释法进行抑菌活性测定。结果鉴定出供试菌株为一种甲基杆菌,从其大米发酵培养基中共分离得到6个化合物,鉴定为苯乙酸(1),对羟基苯甲酸(2),3-吲哚甲酸(3),吲唑(4),尿嘧啶(5),5-甲基尿嘧啶(6)。结论6种化合物均为首次从该菌中分离;体外抗大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌实验表明,化合物1~6对两种供试菌株抑制活性(MIC值)均大于512μg/mL。 展开更多
关键词 地衣内生细菌 甲基杆菌 抗菌活性
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Methylobacterium sp. YAL-2对乙酰甲胺磷的降解特性 被引量:4
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作者 王莉 凌琪 +2 位作者 汤利华 李顺鹏 蒋建东 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期438-443,共6页
从有机磷生产厂家的下水道污泥中分离出一株对高浓度和低浓度乙酰甲胺磷都具有高效降解能力的寡营养菌YAL-2,根据形态、生理生化和16S rRNA基因系统发育分析,将菌株YAL-2鉴定为Methylobacterium sp.降解特性实验表明,菌株YAL-2能利用乙... 从有机磷生产厂家的下水道污泥中分离出一株对高浓度和低浓度乙酰甲胺磷都具有高效降解能力的寡营养菌YAL-2,根据形态、生理生化和16S rRNA基因系统发育分析,将菌株YAL-2鉴定为Methylobacterium sp.降解特性实验表明,菌株YAL-2能利用乙酰甲胺磷为唯一碳源生长和降解;在添加了甲醇的无机盐培养基中,84 h可完全降解300mg L-1乙酰甲胺磷,24 h将50 mg L-1和10 mg L-1乙酰甲胺磷降至非检测水平;4 d能完全去除100 mg L-1甲胺磷,5 d分别降解58.4%和40.6%的100 mg L-1乐果、敌敌畏.小青菜农药残留去除实验显示,菌株YAL-2可在7 d内将乙酰甲胺磷和甲胺磷将至限量水平.结果表明,将菌株YAL-2应用于保证果蔬等食品的食用安全是可行的. 展开更多
关键词 乙酰甲胺磷 methylobacterium sp. YAL-2 降解特性 系统发育分析 农药残留去除
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甲基营养菌Methylobacterium sp.MB200中与L-丝氨酸耐受性相关基因的克隆与分析 被引量:1
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作者 周侃 唐咸来 +4 位作者 蒋承建 宋修鹏 李俊芳 田丹丹 申佩弘 《工业微生物》 CAS CSCD 2011年第6期38-42,共5页
甲基营养菌MB200,能利用非C-C键低碳化合物生长并合成L-丝氨酸,对L-丝氨酸耐受浓度低,提高其在静息细胞反应系统中对L-丝氨酸的耐受能力可更好的提高L-丝氨酸的产量。利用质粒转座子pTnMod-RKm'构建了甲基营养菌MB200的突变体库,往... 甲基营养菌MB200,能利用非C-C键低碳化合物生长并合成L-丝氨酸,对L-丝氨酸耐受浓度低,提高其在静息细胞反应系统中对L-丝氨酸的耐受能力可更好的提高L-丝氨酸的产量。利用质粒转座子pTnMod-RKm'构建了甲基营养菌MB200的突变体库,往培养基中添加20 mg/mLL-丝氨酸对突变体库中的突变体进行平板筛选,共筛选到177株耐受L-丝氨酸的突变体,以10mg/mL的浓度梯度复筛,发现某些突变体能最高耐受40 mg/mL L-丝氨酸。分别提取突变体总DNA,用BamHI酶随机酶切后连接到克隆载体pMD18-T上,导入到大肠杆菌感受态细胞DH5α中,利用双抗性在(转座子抗性与T载体上的抗性)平板上挑取转化子,并提取质粒,酶切验证后进一步测序。共克隆到了17个基因,为提高甲基营养菌对L-丝氨酸的耐受能力提供了可研究的基因资源。 展开更多
关键词 methylobacterium sp.MB200 突变体 L-丝氨酸 耐受性 基因克隆
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