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骨髓间充质干细胞构建组织工程化小口径血管 被引量：3
1
作者 杜振宗 任华 +3 位作者 刘洪生 宋剑非 郑民 王玮 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2008年第3期166-170,共5页
目的采用在动物体外构建初级组织工程化血管、体内强化的方法，探讨构建小口径组织工程化血管的可能性。方法体外培养骨髓间充质干细胞（BMSC），用含全反式维甲酸（AT-RA）、双丁酰环磷酸腺苷（db-cAMP）的DMEM-LG培养液和含血管内皮... 目的采用在动物体外构建初级组织工程化血管、体内强化的方法，探讨构建小口径组织工程化血管的可能性。方法体外培养骨髓间充质干细胞（BMSC），用含全反式维甲酸（AT-RA）、双丁酰环磷酸腺苷（db-cAMP）的DMEM-LG培养液和含血管内皮细胞生长因子（VEGF）的培养液诱导BMSC分别向血管平滑肌样细胞和血管内皮样细胞分化。免疫荧光观察平滑肌样细胞B肌动蛋白的表达和内皮样细胞vWF的表达。电镜观察超微结构的改变。诱导的血管平滑肌样细胞和血管内皮样细胞，分层种植于胶原包埋聚乙醇酸（PGA）的复合支架表面，将细胞和支架复合体种植于动物皮下，于植入后第4、8周再次麻醉动物，取出植入皮下的组织工程化血管，行组织学检查、压力实验及免疫荧光检查。结果诱导14d后，BMSC能够分化为血管平滑肌样细胞和血管内皮样细胞：B肌动蛋白和vWF呈阳性表达，电镜证实细胞出现了相应的形态学改变。人工血管组织学观察见管壁结构清晰。单纯支架组可承受100～150mmHg（1mmHg=0．133kPa）的血管腔内压力，实验组则均可承受200mmHg的血管腔内压力不破裂。实验组皮下培养8周Brdu标记细胞的免疫荧光结果显示部分细胞核呈现明亮的黄绿色荧光。结论以动物皮下为生物反应器可构建出组织工程化血管，其大体结构和天然血管相似。 展开更多
关键词 骨髓 间质干细胞 生物反应器 组织工程 血管 种子细胞
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小鼠骨髓间充质干细胞外泌体的分离与鉴定 被引量：2
2
作者 王如岭 卫小凤 +4 位作者 齐阔 王黎明 李莹 白仲添 严祥 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第5期649-653,共5页
目的探讨骨髓间充质干细胞的外泌体的分离与鉴定方法。方法通过全骨髓贴壁法培养间充质干细胞;用新兴试剂法收集外泌体,采用电镜、粒径检测、流式细胞仪和Western blot鉴定外泌体。结果第三代骨髓间充质干细胞表面CD45呈阴性表达,CD73和... 目的探讨骨髓间充质干细胞的外泌体的分离与鉴定方法。方法通过全骨髓贴壁法培养间充质干细胞;用新兴试剂法收集外泌体,采用电镜、粒径检测、流式细胞仪和Western blot鉴定外泌体。结果第三代骨髓间充质干细胞表面CD45呈阴性表达,CD73和CD105呈阳性表达;骨髓间充质干细胞外泌体呈圆形或椭圆形,大小不均匀,直径30~100 nm,有完整的膜结构;粒径检测显示颗粒直径主峰为61.25 nm,直径为20~200 nm的颗粒占72.4%;外泌体CD63和CD81呈阳性表达;细胞培养上清液中可检测到外泌体CD9和CD63的蛋白表达。结论在培养间充质干细胞的培养基中可以收集到外泌体,可以通过透射电镜、粒径检测、流式细胞仪和Western blot对骨髓间充质干细胞的外泌体进行鉴定。 展开更多
关键词 间充质干细胞 外泌体 细胞分离 鉴定
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人类间充质干细胞来源的外泌体对猪胰岛抗缺氧能力的影响 被引量：2
3
作者 聂唯 马小倩 +3 位作者 陈则夷 杨策军 容鹏飞 王维 《实用器官移植电子杂志》 2018年第5期368-374,共7页
目的探讨来自人类脐带源间充质干细胞条件培养基(human umbilical cord-derived MSCconditioned medium,Hu-MSC-CM)中的外泌体能否增加新生猪胰岛细胞(neonatal porcine islet cell clusters,NICCs)在缺氧环境下的生存和功能。方法 NICC... 目的探讨来自人类脐带源间充质干细胞条件培养基(human umbilical cord-derived MSCconditioned medium,Hu-MSC-CM)中的外泌体能否增加新生猪胰岛细胞(neonatal porcine islet cell clusters,NICCs)在缺氧环境下的生存和功能。方法 NICCs在低氧条件下(1%O_2)分别用含外泌体的条件培养基、去除外泌体的条件培养基和常规培养基进行培养。荧光激活细胞分选仪和细胞外通量测定法分别检测外泌体对细胞活性和功能的影响,实时定量PCR检测NICCs中缺氧耐受相关基因HIF-1α、PDH2及VEGF的表达。结果与常规培养基组和去除外泌体的条件培养基组相比,含外泌体的条件培养基组培养的NICCs其存活率、活性和功能均有所提高[IEQ:7 800±210比5 894±188、4 740±273,P <0.001;β细胞存活率(%):77.2±7.0比68.8±1.8、61.5±5.1,P <0.05]。含外泌体的条件培养基组孵育的NICCs细胞中HIF-1α、PDH2及VEGF基因表达均显著高于另外两组。结论人类脐带源MSC-条件培养基可以减轻NICCs在缺氧过程中导致的功能障碍,外泌体在诱导低氧抵抗方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 间充质干细胞 新生猪胰岛细胞 低氧 功能 活性
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间充质干细胞对小鼠前列腺癌生长和血管生成促进作用的研究 被引量：1
4
作者 唐礼功 谢森 +2 位作者 潘铁军 李志雄 陈欢欢 《临床泌尿外科杂志》 2012年第9期703-706,共4页
目的:探讨间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)对RM-1小鼠前列腺癌细胞生长的影响及其可能机制。方法:从小鼠骨髓中无菌分离培养扩增MSCs。将MSCs与RM-1细胞混合后接种于Balb/c小鼠皮下,观察肿瘤生长情况;采用免疫组化法... 目的:探讨间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)对RM-1小鼠前列腺癌细胞生长的影响及其可能机制。方法:从小鼠骨髓中无菌分离培养扩增MSCs。将MSCs与RM-1细胞混合后接种于Balb/c小鼠皮下,观察肿瘤生长情况;采用免疫组化法检测肿瘤组织血管生成情况(CD34染色);采用RealtimePCR法和ELISA法检测MSCs促进血管生成相关分子的表达情况。结果:MSCs与RM-1小鼠前列腺癌细胞混合后接种于Balb/c小鼠皮下,与对照组相比,MSCs可明显促进肿瘤生长(P<0.05);前列腺癌组织中CD34免疫组化染色结果证实MSCs组较对照组微血管密度显著升高(P<0.05);Realtime PCR及ELISA结果显示MSCs条件培养上清中VEGF表达显著升高。结论:MSCs可能通过表达VEGF促进前列腺癌血管形成,从而达到促进肿瘤生长的目的。 展开更多
关键词 前列腺癌 间充质干细胞 血管生成 血管内皮生长因子
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miRNA在间充质干细胞成骨分化过程中的作用
5
作者 陈军宝 肖苒 曹谊林 《组织工程与重建外科杂志》 2016年第6期375-377,共3页
间充质干细胞作为种子细胞在组织工程和再生医学领域有极大的应用前景,尤其是在骨组织工程中的应用受到了广泛关注。间充质干细胞的成骨分化机制复杂,受到多方面因素的影响,不同种类的mi RNA可分别参与抑制或促进间充质干细胞的成骨分化... 间充质干细胞作为种子细胞在组织工程和再生医学领域有极大的应用前景,尤其是在骨组织工程中的应用受到了广泛关注。间充质干细胞的成骨分化机制复杂,受到多方面因素的影响,不同种类的mi RNA可分别参与抑制或促进间充质干细胞的成骨分化,在其分化过程中具有核心作用。本文对不同作用的mi RNA进行归类和总结,期待为未来的研究提供思路。 展开更多
关键词 间充质干细胞 微小核糖核酸 成骨分化 信号通路
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脐带源间充质干细胞治疗脑出血后遗症的临床观察 被引量：3
6
作者 李志刚 毕薇薇 杨贤瑞 《中国现代医生》 2011年第4期97-98,共2页
目的观察脐带源间充质干细胞移植对脑出血后遗症的治疗效果。方法对脑出血患者在术中血肿腔内预留置硅胶导管,1个月后自此将干细胞移植到出血部位;对于丘脑出血破入脑室的患者则脑室直接穿刺的方法做干细胞脑室内移植。观察语言、肌力... 目的观察脐带源间充质干细胞移植对脑出血后遗症的治疗效果。方法对脑出血患者在术中血肿腔内预留置硅胶导管,1个月后自此将干细胞移植到出血部位;对于丘脑出血破入脑室的患者则脑室直接穿刺的方法做干细胞脑室内移植。观察语言、肌力、肌张力、意识的改善程度。结果经干细胞移植术后,患者肌张力均有所下降,肌力提高1～2级,语言功能有所改善。结论脐带源间充质干细胞移植对脑出血后遗症有治疗效果。 展开更多
关键词 脐带源间充质干细胞 脑出血后遗症 移植
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体外诱导可分解草酸成人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的研究
7
作者 朱玮 袁坚 +2 位作者 雷鸣 李舒珏 刘向崇 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1203-1206,共4页
目的体外培养并转染了产甲酸草酸杆菌（Ox-F）草酸分解基因h℃和oxe的成人骨髓间充质干细胞（hMSCs—fre—oxe），并诱导其向肝细胞分化。方法体外培养转染了草酸分解基因的P4代hMSCs，并通过含40μg/L肝细胞生长因子（HGF）＋10μg／L... 目的体外培养并转染了产甲酸草酸杆菌（Ox-F）草酸分解基因h℃和oxe的成人骨髓间充质干细胞（hMSCs—fre—oxe），并诱导其向肝细胞分化。方法体外培养转染了草酸分解基因的P4代hMSCs，并通过含40μg/L肝细胞生长因子（HGF）＋10μg／L胰岛素样生长因子（FGF）-4所组成的培养液诱导其向肝细胞分化。在分化过程中通过显微镜观察分化细胞形态变化。以实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）、Westernblot技术和免疫细胞化学技术检测细胞内肝细胞特异标志物甲胎蛋白（AFP）、白蛋白（ALB）、细胞角蛋白-18（CK-18）和目的基因frc、OXC及其产物融合蛋白mye—FCOAT、flag—OCOAD的表达。成熟肝细胞L-02和转染了空病毒载体的hMSCs（hMSCs．vector）分别作为阳性对照组和阴性对照组。结果可分解草酸的hMSCs—frc—OXC在体外可成功培养，细胞经上述培养液诱导后，细胞形态逐渐变短，变成多角形。Real—timePCR可检测在诱导组细胞中AFP、ALB、CK—18和草酸分解基因frc、OXe表达，而未经诱导细胞组AFP、ALB、CK-18则未表达，未转染目的基因的细胞组fre、oxe未见表达。免疫细胞化学检测诱导28d后细胞可表达ALB，未经诱导细胞组ALB表达呈阴性。Westernblot技术检测诱导第14、28天细胞中AFP、CK-18表达较未诱导组明显增加（P〈0．05），与成熟肝细胞相似，并表达myc-FCOAT、flag—OCOAD，而未转染目的基因细胞组表达呈阴性。结论含有草酸分解基因的hMSCs—frc—OXC体外通过一定条件诱导可以向肝细胞方向分化，经诱导分化后细胞仍可成功表达frc和oxe基因及其产物。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 细胞分化 肝细胞 frc基因 oxc基因
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二膦酸盐对糖皮质激素诱导的骨质疏松过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的影响
8
作者 秦玉幸 张晓 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期743-745,共3页
目的 探讨二膦酸盐对糖皮质激素诱导的骨质疏松过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）表达的影响.方法 ①22例系统性红斑狼疮（SLE）患者,治疗组9例（标准剂量激素＋阿仑膦酸钠）,对照组13例（标准剂量激素）,24周后行骨髓穿刺术,检... 目的 探讨二膦酸盐对糖皮质激素诱导的骨质疏松过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）表达的影响.方法 ①22例系统性红斑狼疮（SLE）患者,治疗组9例（标准剂量激素＋阿仑膦酸钠）,对照组13例（标准剂量激素）,24周后行骨髓穿刺术,检测免疫组织化学PPARγ平均积分吸光度.②采用原代人骨髓基质干细胞（hMSCs）培养,模拟髓内骨髓基质干细胞分化为脂肪细胞的过程,在相同条件下,分为成脂诱导组、成脂诱导＋10-5mol/L二膦酸盐组（高剂量组）、成脂诱导＋10-7mol/L二膦酸盐组（中剂量组）、成脂诱导＋10-9mol/L二膦酸盐组（低剂量组）干预诱导成脂过程,6～9 d后进行油红0染色、异丙醇萃取油红染料,515 nm测定各组吸光度（A）来反映成脂程度,定量聚合酶链反应（PCR）测定各组PPARγmRNA的表达水平.采用t检验和单因素方差分析法进行数据分析.结果 二膦酸盐治疗组免疫组织化学PPARγ平均积分吸光度较对照组减少（P＜0.05）;在诱导培养7 d后,成脂诱导组的A与低剂量组差异无统计学意义（P值0.167）,高剂量组、中剂量组A与成脂诱导组之间差异有统计学意义（P值分别为0、0.041）.定量PCR结果显示：高剂量组、中剂量组PPARγ mRNA的表达低于成脂诱导组（P值分别为0、0.01）,低剂量组与成脂诱导组之间差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 有效浓度的二膦酸盐可以抑制PPARγ的表达,从而抑制hMSCs向脂肪细胞分化,抑制糖皮质激素诱导的骨质疏松症. 展开更多
关键词 免疫组织化学 人骨髓基质干细胞 二膦酸盐类 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ
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SDF-1/CXCR4轴促进慢性创伤愈合作用机制的研究进展 被引量：4
9
作者 张劼 项杰 秦映芬 《中国临床新医学》 2017年第6期596-599,共4页
基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)属于趋化因子家族,与其受体CXCR4组成SDF-1/CXCR4轴,可以调节间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)促进慢性创伤的愈合。慢性创伤包括糖尿病足溃疡、动静脉溃疡、压力性溃... 基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)属于趋化因子家族,与其受体CXCR4组成SDF-1/CXCR4轴,可以调节间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)促进慢性创伤的愈合。慢性创伤包括糖尿病足溃疡、动静脉溃疡、压力性溃疡等。利用SDF-1/CXCR4轴调节MSC向慢性创伤部位归巢促进愈合的特点,可以作为一种有潜力的治疗糖尿病足等慢性创伤的手段,该文主要对SDF-1/CXCR4轴调节MSC的作用机制和信号通路进行综述。 展开更多
关键词 SDF-1/CXCR4轴 间充质干细胞 慢性创伤愈合 糖尿病足溃疡
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