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佛波脂对体外培养Th细胞表面CD4分子表达的影响 被引量：9
1
作者 叶卫东 张循善 +3 位作者 孙小梅 连莉 徐建华 李庆 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期104-106,共3页
目的　探索佛波脂(PMA)对Th细胞表面CD4分子表达的影响。方法　用荧光标记的抗CD3 4 8抗体同经10、15、2 0、2 5ng mL的PMA和1μg mL的Ionomycin刺激培养2、3、4h的正常人外周全血细胞中的Th细胞上的CD4分子结合,溶血后用流式细胞仪检... 目的　探索佛波脂(PMA)对Th细胞表面CD4分子表达的影响。方法　用荧光标记的抗CD3 4 8抗体同经10、15、2 0、2 5ng mL的PMA和1μg mL的Ionomycin刺激培养2、3、4h的正常人外周全血细胞中的Th细胞上的CD4分子结合,溶血后用流式细胞仪检测CD4通道的荧光强度(MFI)。结果　CD4通道的MFI随PMA质量浓度的升高和刺激时间的延长而降低。结论　Th细胞表面CD4分子在刺激培养过程中随PMA质量浓度的升高和刺激时间的延长而减少。 展开更多
关键词 佛波脂 CD4 平均荧光强度
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流式免疫微球技术定量检测人血清胰岛素方法学研究和评价 被引量：3
2
作者 王占科 何丹 +3 位作者 祝仲珍 胡晓璐 潘小清 常津 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期341-343,348,共4页
目的建立流式免疫微球定量检测人血清胰岛素的方法并对其重复性实验和线性实验以及最低检测限进行评价。方法将兔抗人胰岛素单克隆抗体标记在微球表面制备免疫诊断微球,与血清中胰岛素结合后,加入荧光标记的鼠抗人胰岛素单克隆抗体,使... 目的建立流式免疫微球定量检测人血清胰岛素的方法并对其重复性实验和线性实验以及最低检测限进行评价。方法将兔抗人胰岛素单克隆抗体标记在微球表面制备免疫诊断微球,与血清中胰岛素结合后,加入荧光标记的鼠抗人胰岛素单克隆抗体,使微球表面呈现荧光,并通过流式细胞仪检测其平均荧光强度(mean fluorescent intensity,MFI)并记录。结果微球表面MFI与人血清胰岛素浓度呈正比,流式免疫微球技术检测同一标本的重复性实验变异系数以及最低检测限均低于酶联免疫吸附试验,流式免疫微球技术线性范围大于酶联免疫吸附实验。结论流式免疫诊断微球技术可用于人血清胰岛素定量检测,其测定重复性,线性范围和灵敏度均优于酶联免疫吸附试验。 展开更多
关键词 流式免疫微球技术 平均荧光强度 定量测定 胰岛素
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体外应用MCMV与PMA/Ionomycin联合诱导Th17细胞的研究 被引量：2
3
作者 李旭芳 舒赛男 +5 位作者 刘兴楼 刘玲玲 郭珊 王慧 李革 方峰 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期234-237,共4页
探讨体外联合应用小鼠巨细胞病毒(MCMV)和佛波酯(PMA)/离子霉素(Ionomycin)诱导Th17细胞产生。分别使用MCMV、PMA/Ionomycin或联合MCMV、PMA/Ionomycin体外刺激BALB/c小鼠脾细胞,利用流式细胞仪检测脾细胞中CD4+IL-17+细胞的比例及平均... 探讨体外联合应用小鼠巨细胞病毒(MCMV)和佛波酯(PMA)/离子霉素(Ionomycin)诱导Th17细胞产生。分别使用MCMV、PMA/Ionomycin或联合MCMV、PMA/Ionomycin体外刺激BALB/c小鼠脾细胞,利用流式细胞仪检测脾细胞中CD4+IL-17+细胞的比例及平均荧光强度,同时应用ELISA技术检测培养液上清中IL-17蛋白浓度。结果显示:单独使用MCMV或PMA/Ionomycin均不能有效刺激Th17细胞增殖,CD4+IL-17+细胞比例较低;而联合应用MCMV和PMA/Ionomycin可以有效诱导脾细胞向Th17细胞分化,CD4+IL-17+细胞比例达到2.6%,且应用联合诱导方案后可见CD4+IL-17+细胞平均荧光强度(MFI)明显升高。此外,联合应用MCMV和PMA/Ionomycin刺激脾细胞后明显增加培养液上清中IL-17蛋白浓度。我们的研究结果可以为进一步探讨Th17细胞在CMV感染免疫中的作用奠定实验基础。 展开更多
关键词 CMV PMA/Ionomycin IL-17 平均荧光强度
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NOD小鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞功能变化研究 被引量：2
4
作者 李卫鹏 申勇 +2 位作者 胡永全 史桂英 王福庆 《蚌埠医学院学报》 CAS 2008年第6期743-746,共4页
目的:观察NOD小鼠CD4+CD25+调节性T细胞的功能变化。方法:流式细胞仪分析NOD小鼠胰腺引流淋巴结(PLN)CD4+CD25+T细胞频率,CD4+CD25+T细胞中FoxP3+细胞的比例,CD4+CD25+FoxP3+T细胞的FoxP3平均荧光强度(MFI);检测CD4+CD25+调节性T细胞的... 目的:观察NOD小鼠CD4+CD25+调节性T细胞的功能变化。方法:流式细胞仪分析NOD小鼠胰腺引流淋巴结(PLN)CD4+CD25+T细胞频率,CD4+CD25+T细胞中FoxP3+细胞的比例,CD4+CD25+FoxP3+T细胞的FoxP3平均荧光强度(MFI);检测CD4+CD25+调节性T细胞的抑制功能。结果:在不同的年龄阶段,CD4+CD25+调节性T细胞数量未发生明显变化,而随时间的推移,CD4+CD25+调节性T细胞中FoxP3表达水平降低,CD4+CD25+调节性T细胞的功能也下降。结论:CD4+CD25+调节性T细胞的抑制功能降低可能是NOD小鼠糖尿病发作的根本原因。 展开更多
关键词 糖尿病 实验性 免疫 细胞 平均荧光强度 转录因子FOXP3 小鼠
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量子点荧光探针流式技术定量检测血清降钙素原的方法学及临床应用 被引量：2
5
作者 胡晓璐 王浈 +1 位作者 祝仲珍 王占科 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1828-1831,共4页
目的将量子点探针与流式技术结合,建立定量检测血清降钙素原(PCT)的新方法并对检测性能及临床应用进行评价。方法将羊抗PCT抗体与微球偶联制备诊断微球,与血清或标准品中的PCT结合,加入鼠抗PCT抗体,最后加入生物素化的羊抗鼠IgG抗体和... 目的将量子点探针与流式技术结合,建立定量检测血清降钙素原(PCT)的新方法并对检测性能及临床应用进行评价。方法将羊抗PCT抗体与微球偶联制备诊断微球,与血清或标准品中的PCT结合,加入鼠抗PCT抗体,最后加入生物素化的羊抗鼠IgG抗体和链霉亲和素化量子点,流式细胞仪检测平均荧光强度(MFI)。选择2012年1月至2012年8月入住本院重症监护病房(ICU)77例老年创伤患者,通过本实验创建的定量检测PCT方法对77例老年创伤患者入院第1、3、5、7、10 d进行血清PCT检测,并记录当日急性生理学与慢性健康状况评分系统(APACHEⅡ)、C-反应蛋白(CRP)等,比较PCT水平、APACHEⅡ评分及CRP水平,分析各指标之间的相关性。结果自创法检测PCT的灵敏度为5.42 pg/ml、线性范围为45.42 pg/ml～10 ng/ml,针对老年群体阳性下限值为0.56 ng/ml。采用自创法检测PCT水平预测老年创伤患者发生感染的灵敏度为100%,特异度为24.5%,准确度为84.4%,PCT水平监测老年创伤病情和感染预测方面优于CRP且与APACHEⅡ评分相关性好。结论本实验创建的定量检测血清PCT的方法可作为临床检测血清PCT的方法,早期诊断及监测老年创伤患者合并感染的灵敏度、特异度较高,适用于临床诊断。 展开更多
关键词 量子点 流式技术 降钙素原 平均荧光强度
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CD4^+CD25^+调节性T细胞在α-GalCer预防T1D中的作用机制探讨
6
作者 李卫鹏 袁超 +1 位作者 陶新全 王福庆 《放射免疫学杂志》 CAS 2009年第5期513-516,共4页
目的:研究CD4+CD25+调节性T细胞在α-GalCer预防NOD小鼠T1D中的作用机制。方法:流式细胞仪分析反复注射α-GalCer的NOD小鼠胰腺引流淋巴结(PLN)CD4+CD25+T细胞频率,CD4+CD25+T细胞中FoxP3+细胞的比例,CD4+CD25+FoxP3+T细胞的FoxP3平均... 目的:研究CD4+CD25+调节性T细胞在α-GalCer预防NOD小鼠T1D中的作用机制。方法:流式细胞仪分析反复注射α-GalCer的NOD小鼠胰腺引流淋巴结(PLN)CD4+CD25+T细胞频率,CD4+CD25+T细胞中FoxP3+细胞的比例,CD4+CD25+FoxP3+T细胞的FoxP3平均荧光强度(MFI);检测CD4+CD25+调节性T细胞的抑制功能。用Anti-CD25阻断CD4+CD25+调节性T细胞的功能。结果:α-GalCer处理过的小鼠的CD4+CD25+T细胞中FoxP3+细胞的比例增加,CD4+CD25+FoxP3+T细胞的FoxP3平均荧光强度(MFI)增强,CD4+CD25+Treg细胞的抑制功能增强。采用CD4+CD25+调节性T细胞功能阻断剂后,α-GalCer不能预防T1D的发生。结论:CD4+CD25+调节性T细胞在α-GalCer预防NOD小鼠T1D中数量增加、功能增强,且是必需的。 展开更多
关键词 CD4+CD25+调节性T细胞 平均荧光强度 转录因子FOXP3 环磷酰胺 Α-GALCER
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