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利用动物乳腺生物反应器生产药用蛋白 被引量:23
1
作者 刘森 梁国栋 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期421-424,共4页
动物乳腺生物反应器是利用动物乳腺特异性启动子调控元件指导外源基因在乳腺中特异性表达 ,并从转基因动物奶液中获取重组蛋白。应用动物乳腺生物反应器生产药用蛋白具有生产方式简单 ,产量大 ,蛋白能进行翻译后修饰等优点 ,是具有广阔... 动物乳腺生物反应器是利用动物乳腺特异性启动子调控元件指导外源基因在乳腺中特异性表达 ,并从转基因动物奶液中获取重组蛋白。应用动物乳腺生物反应器生产药用蛋白具有生产方式简单 ,产量大 ,蛋白能进行翻译后修饰等优点 ,是具有广阔前景的生物医药产业。本文仅就动物乳腺生物反应器的建立、检测、目的蛋白的分离纯化以及存在的问题等作一综述。 展开更多
关键词 动物乳腺生物反应器 转基因动物 药用蛋白
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乳腺生物反应器的研究现状和产业化前景 被引量:14
2
作者 王庆忠 李国荣 +2 位作者 尹昆 张会亮 李云龙 《生命科学》 CSCD 2005年第1期76-81,共6页
转基因动物乳腺生物反应器是伴随转基因动物技术而发展起来的一项高新生物技术。利用这项技术,我们可以从动物乳汁中源源不断地获取用于医疗或保健目的的有生物活性的基因产物。这是一种全新的蛋白质生产模式,它将成为许多国家的重要支... 转基因动物乳腺生物反应器是伴随转基因动物技术而发展起来的一项高新生物技术。利用这项技术,我们可以从动物乳汁中源源不断地获取用于医疗或保健目的的有生物活性的基因产物。这是一种全新的蛋白质生产模式,它将成为许多国家的重要支柱产业之一。本文介绍了乳腺生物反应器的基本概念和基本原理;概述了制备过程中的目的基因选择、载体构建、转基因等技术环节的研究现状;分析了乳腺生物反应器的优势及存在的问题,并就其产业化前景进行了展望。 展开更多
关键词 转基因动物 乳腺生物反应器 表达载体 转基因技术
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乳腺生物反应器制备中表达载体的发展 被引量:8
3
作者 陈红星 杨晓 黄培堂 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期136-139,共4页
乳腺生物反应器拥有巨大的开发价值 ,但开发成功的例子却寥寥可数 ,主要的原因是外源基因的表达量较低 ,达不到开发生产的要求。提高外源基因表达量的关键在于乳腺生物反应器表达载体的构建。近年来 ,这方面的新思路、新方法不断出现 。
关键词 乳腺生物反应器 表达载体 转基因动物
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体细胞基因打靶制备动物乳腺生物反应器的策略与应用 被引量:13
4
作者 沈伟 2.杨正田 邓继先 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期767-770,共4页
在转基因动物研究中 ,由于基因表达调控元件的人工拼接和外源基因在动物基因组中随机整合所带来的“位置效应” ,致使转基因动物外源基因的表达水平不高并且差异较大。为此 ,利用定位整合优势 ,对以基因同源重组为基础的基因打靶技术进... 在转基因动物研究中 ,由于基因表达调控元件的人工拼接和外源基因在动物基因组中随机整合所带来的“位置效应” ,致使转基因动物外源基因的表达水平不高并且差异较大。为此 ,利用定位整合优势 ,对以基因同源重组为基础的基因打靶技术进行了大量研究。介绍了就利用体细胞基因打靶和核移植技术制备动物乳腺生物反应器的策略和应用情况做一综述 ,并对提高基因打靶效率的各种策略 ,打靶细胞的选择 ,转基因细胞核移植的低融合事件以及基因打靶制备乳腺生物反应器的优越性进行分析。 展开更多
关键词 基因打靶 核移植 转基因动物 乳腺生物反应器
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乳腺生物反应器的研究和产业化进展 被引量:11
5
作者 付玉华 周秀梅 钱其军 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第8期45-51,共7页
随着转基因技术的发展,利用乳腺生物反应器生产珍贵药用蛋白已成为一种极具潜力的生物技术,它为商业化前景广阔的药用蛋白提供了高产量、低成本的生产方式,开创了基因工程制药的新途径。目前,应用乳腺生物反应器已表达百余种药用蛋白,... 随着转基因技术的发展,利用乳腺生物反应器生产珍贵药用蛋白已成为一种极具潜力的生物技术,它为商业化前景广阔的药用蛋白提供了高产量、低成本的生产方式,开创了基因工程制药的新途径。目前,应用乳腺生物反应器已表达百余种药用蛋白,其中近30种进入临床试验不同阶段,用于治疗抗凝血酶缺乏症的抗凝血酶Ⅲ(ATryn)已上市,乳腺生物反应器生产重组蛋白显示出广阔的产业化前景。作者概述了乳腺生物反应器的原理、优点、国内外研究进展和产业化进程,讨论了其目前存在问题和应对策略。 展开更多
关键词 转基因动物 乳腺生物反应器 重组蛋白 多潜能干细胞
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哺乳动物乳腺生物反应器的研究现状及存在问题 被引量:10
6
作者 孙国杰 桑润滋 +1 位作者 李俊杰 韩建永 《黄牛杂志》 2002年第3期28-31,共4页
本文在阐述乳腺生物反应器概念的基础上,介绍了乳腺生物反应器的原理及应用现状,指出乳腺生物反应器将在生产新型牛奶和药用珍稀蛋白等方面为人类做出巨大的贡献,最后指出存在的问题并展望了乳腺生物反应器前景。
关键词 哺乳动物 乳腺生物反应器 研究现状 存在问题
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人凝血Ⅸ因子乳腺生物反应器的研制 被引量:8
7
作者 邱信芳 张克忠 +1 位作者 卢大儒 薛京伦 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期365-371,共7页
为了建立人凝血Ⅸ因子乳腺生物反应器,以MCK增强子,β-actin启动于控制hFIX小基因(minigene)表达顺序,反向插入G1Na框架,构建复制缺陷反转录病毒载体,并制备重组反转录病毒颗粒;以CMV启动子,hFIXcDNA和腺病毒框架构建腺病毒载... 为了建立人凝血Ⅸ因子乳腺生物反应器,以MCK增强子,β-actin启动于控制hFIX小基因(minigene)表达顺序,反向插入G1Na框架,构建复制缺陷反转录病毒载体,并制备重组反转录病毒颗粒;以CMV启动子,hFIXcDNA和腺病毒框架构建腺病毒载体pAdCMVhFIX,与质粒pJM17共转染包装细胞制备合hFIX基因的重组腺病毒颗粒.两种病毒颗粒分别通过直接转染活体奶山羊乳腺组织,建立了hFIX蛋白的乳腺表达系统和快速检测系统.另外,利用小鼠MAR(matrixattachmentregion)元件,牛β-Casein基因,人凝血Ⅸ因子小基因和cDNA构建了乳腺组织特异性表达载体.以Stearylamine(SA)阳离子脂质体介导、尾静脉注射的方法转染哺乳期雌性小鼠的活体组织,建立Ⅸ因子表达的快速检测系统,并研究了β-casein基因,hFIX基因intron1对hFIX基因在乳腺组织中表达调控的作用.在此基础上将筛选得到的pMCIXm表达载体通过显微注射技术注人小鼠和奶山羊受精卵细胞,制备6只转基因小鼠和5只转基因奶山羊.其中在2只转基因小鼠和1头奶山羊乳汁中测得hFIX蛋白的表达并具有凝血活性. 展开更多
关键词 人凝血因子Ⅸ 乳腺生物反应器 转基因动物
原文传递
动物乳腺生物反应器研究进展 被引量:7
8
作者 袁建民 胡建宏 +2 位作者 李青旺 贾永红 王立强 《中国农学通报》 CSCD 2006年第3期20-24,共5页
动物乳腺生物反应器拥有巨大的开发价值,利用转基因家畜的乳腺生产人类重组蛋白,可以获得安全而有效的药用蛋白。在此,在阐述乳腺生物反应器概念的基础上,探讨了乳腺生物反应器医用蛋白产品、载体构建以及转基因技术等方面的研究现状,... 动物乳腺生物反应器拥有巨大的开发价值,利用转基因家畜的乳腺生产人类重组蛋白,可以获得安全而有效的药用蛋白。在此,在阐述乳腺生物反应器概念的基础上,探讨了乳腺生物反应器医用蛋白产品、载体构建以及转基因技术等方面的研究现状,并指出了乳腺生物反应器存在的主要问题,展望了发展前景,特别是指出了利用体细胞克隆技术生产乳腺生物反应器的优势及可能性。 展开更多
关键词 转基因动物 乳腺生物反应器 体细胞克隆 研究进展
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转基因动物研究进展 被引量:7
9
作者 胡建宏 李青旺 +3 位作者 王立强 江中良 于永生 解广勤 《家畜生态》 2004年第2期50-53,共4页
 转基因动物是现代生物技术中一个极其重要的研究领域,目前已经有转基因小鼠、兔、绵羊、山羊、猪、牛、鸡和鱼等多种转基因动物问世。本文综述了转基因动物的制作方法、转基因动物的应用研究以及所取得的重要成就,并指出了转基因动物...  转基因动物是现代生物技术中一个极其重要的研究领域,目前已经有转基因小鼠、兔、绵羊、山羊、猪、牛、鸡和鱼等多种转基因动物问世。本文综述了转基因动物的制作方法、转基因动物的应用研究以及所取得的重要成就,并指出了转基因动物存在的主要问题,展望了其发展前景。 展开更多
关键词 转基因动物 生物技术 制作方法 显微注射法
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转基因技术在制备动物乳腺生物反应器中的应用和发展 被引量:7
10
作者 熊继红 江黎明 《生物技术通讯》 CAS 2006年第4期647-650,共4页
利用乳腺生物反应器可以高效获得安全、足量的药用蛋白,在制药工业中具有广阔的应用前景。但是,目前采用的转基因技术由于其各自固有的局限性,未能使乳腺生物反应器的研究取得长足的进步。基因打靶技术和核移植技术的发展为乳腺生物反... 利用乳腺生物反应器可以高效获得安全、足量的药用蛋白,在制药工业中具有广阔的应用前景。但是,目前采用的转基因技术由于其各自固有的局限性,未能使乳腺生物反应器的研究取得长足的进步。基因打靶技术和核移植技术的发展为乳腺生物反应器的开发注入了新的活力。本文综合近年来国内外文献,阐述了各种转基因技术的优点与缺陷,同时说明了构建“体细胞打靶-克隆技术体系”在制备大动物的乳腺生物反应器中的必要性。 展开更多
关键词 转基因 动物乳腺反应器 核移植 基因打靶
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牛α-sl酪蛋白基因序列指导htPA突变体小基因在小鼠乳腺中的表达 被引量:5
11
作者 谭晓红 程萱 +5 位作者 周江 陈红星 林福玉 邓继先 杨晓 黄培堂 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第5期405-410,共6页
将包括α-sl酪蛋白基因的启动子、LAtPA小基因、α-sl酪蛋白基因下游调控序列的融合基 因经显微注射至小鼠的受精卵中,获得了5只转基因阳性鼠,其中1只转基因阳性雌鼠乳清中 LAtPA的含量为0.18μg/ml,说明... 将包括α-sl酪蛋白基因的启动子、LAtPA小基因、α-sl酪蛋白基因下游调控序列的融合基 因经显微注射至小鼠的受精卵中,获得了5只转基因阳性鼠,其中1只转基因阳性雌鼠乳清中 LAtPA的含量为0.18μg/ml,说明构建的LAtPA小基因能够正确表达出有生物活性的LAtPA, 并且可在酪蛋白基因调控序列的指导下在小鼠的乳汁中表达。 展开更多
关键词 组织型纤溶酶原激活剂 酪蛋白基因 转基因小鼠 乳腺生物反应器 TPA
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ht-PAm基因在山羊β-酪蛋白基因座定位整合的研究 被引量:6
12
作者 沈伟 杨正田 +4 位作者 田利源 吴晓洁 陈宏 黄培堂 邓继先 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期361-365,共5页
利用体细胞基因打靶与核移植技术制备动物乳腺生物反应器是当今转基因定位整合表达的一种新技术。分别克隆山羊的 β_酪蛋白基因 5′调控区的 6 3kb片段 ,外显子 7、外显子 8和 9三个基因片段 ,并与克隆的人tPA突变体cDNA一起构建了含... 利用体细胞基因打靶与核移植技术制备动物乳腺生物反应器是当今转基因定位整合表达的一种新技术。分别克隆山羊的 β_酪蛋白基因 5′调控区的 6 3kb片段 ,外显子 7、外显子 8和 9三个基因片段 ,并与克隆的人tPA突变体cDNA一起构建了含有neo和tk正负筛选标记基因的 β_酪蛋白基因打靶载体PGBC4tPA,并验证了neo基因、tk基因以及Cre_LoxP系统的有效性。将线性化的PGBC4tPA通过电转染整合到山羊胎儿成纤维细胞基因组中 ,利用G4 18和GANC进行抗性细胞克隆的药物筛选 ,初步获得抗性细胞克隆 2 4 4个 ,PCR检测后获得阳性细胞克隆 31个 ,其中初步验证 2个细胞克隆转植基因整合位点重组后的基因序列正确 ,并且该细胞克隆能够有效扩增。这为下一步基因打靶体细胞核移植制备山羊乳腺生物反应器奠定了基础。 展开更多
关键词 山羊 基因打靶 乳腺生物反应器 Β-酪蛋白基因 ht-PAm基因
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利用多重筛选机制提高山羊乳腺上皮细胞基因打靶的效率 被引量:4
13
作者 沈伟 闵令江 +4 位作者 李兰 潘庆杰 吴晓洁 周艳荣 邓继先 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第4期366-371,共6页
构建了山羊β 酪蛋白基因座基因打靶载体pGBC GFP neo,载体包含了正负筛选标记基因neo和tk,以及无启动子的GFP基因。打靶载体线性化后用脂质体包裹转染山羊乳腺上皮细胞,利用G418和GANC进行抗性细胞克隆的药物筛选,共得到抗性细胞克隆 5... 构建了山羊β 酪蛋白基因座基因打靶载体pGBC GFP neo,载体包含了正负筛选标记基因neo和tk,以及无启动子的GFP基因。打靶载体线性化后用脂质体包裹转染山羊乳腺上皮细胞,利用G418和GANC进行抗性细胞克隆的药物筛选,共得到抗性细胞克隆 51个,对抗性克隆利用激素诱导β 酪蛋白基因启动子指导GFP表达,得到GFP表达阳性细胞克隆 17个,对其中 4个生长状态良好的克隆PCR检测验证后用于核移植,克隆胚发育率为 59 5%,部分发育到桑椹胚或囊胚。 展开更多
关键词 山羊 基因打靶 乳腺生物反应器 Β-酪蛋白基因
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中国转基因家畜最新研究进展 被引量:8
14
作者 李光鹏 张立 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2017年第4期346-355,共10页
转基因家畜研究始于20世纪80年代,在2010年以后出现爆发式发展,尤其是中国科学家在转基因猪、牛和羊研究中取得了若干突破性进展.分别在提高繁殖力、提高抗病能力、促进肌肉生长、改良肉质与奶质、建立人类疾病模型、构建乳腺生物反应... 转基因家畜研究始于20世纪80年代,在2010年以后出现爆发式发展,尤其是中国科学家在转基因猪、牛和羊研究中取得了若干突破性进展.分别在提高繁殖力、提高抗病能力、促进肌肉生长、改良肉质与奶质、建立人类疾病模型、构建乳腺生物反应器及提高羊毛或羊绒质量等方面,取得了国际先进水平的研究成果.本文就上述成果进行简要综述,旨在为深入开展转基因家畜研究提供借鉴. 展开更多
关键词 转基因猪 转基因牛 转基因羊 生物反应器 抗病转基因
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核移植技术生产乳腺生物反应器的研究进展 被引量:3
15
作者 谭晓红 杨晓 +1 位作者 程萱 邓继先 《生物工程进展》 CSCD 2000年第6期46-49,共4页
乳腺生物反应器的研制带来了转基因制药业的兴起。但十几年来 ,显微注射技术一直是生产乳腺生物反应器的唯一实用手段 ,由于它本身固有的缺点 ,使得乳腺生物反应器未能有长足的进步。基因打靶与核移植相结合很可能成为生产乳腺生物反应... 乳腺生物反应器的研制带来了转基因制药业的兴起。但十几年来 ,显微注射技术一直是生产乳腺生物反应器的唯一实用手段 ,由于它本身固有的缺点 ,使得乳腺生物反应器未能有长足的进步。基因打靶与核移植相结合很可能成为生产乳腺生物反应器更有效的途径 ,它在外源基因定点整合 ,消除位点效应、降低生产成本、节省时间方面具有明显的优势。 展开更多
关键词 核移植 乳腺生物反应器 转基因动物 基因打靶
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动物乳腺生物反应器的应用及研究进展 被引量:6
16
作者 张颖琦 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期309-312,共4页
动物乳腺生物反应器是利用转基因技术获得药物蛋白的动物个体表达系统,其利用乳腺特异性调控元件指导外源基因在乳腺中特异地表达,以转基因动物的乳腺组织生产药用重组蛋白。本文就动物乳腺生物反应器的操作流程、应用、优点、存在的问... 动物乳腺生物反应器是利用转基因技术获得药物蛋白的动物个体表达系统,其利用乳腺特异性调控元件指导外源基因在乳腺中特异地表达,以转基因动物的乳腺组织生产药用重组蛋白。本文就动物乳腺生物反应器的操作流程、应用、优点、存在的问题及其国内外研究进展和产业化现状作一综述。 展开更多
关键词 转基因动物 乳腺生物反应器
原文传递
乳腺生物反应器的产业化进展与展望 被引量:4
17
作者 周小慧 胡翔 +1 位作者 鲁纪鸣 张健 《激光生物学报》 CAS CSCD 2003年第1期76-80,共5页
进入21世纪,伴随着转基因技术的快速发展,转基因动物的研究已经从方法学研究步入了应用性研究阶段。外源基因在转基因动物的特异性表达,尤其是在乳腺的表达,可将转基因动物用作生物反应器进行生物活性蛋白的生产而应用于商业生产。生产... 进入21世纪,伴随着转基因技术的快速发展,转基因动物的研究已经从方法学研究步入了应用性研究阶段。外源基因在转基因动物的特异性表达,尤其是在乳腺的表达,可将转基因动物用作生物反应器进行生物活性蛋白的生产而应用于商业生产。生产出来的药用蛋白具有纯化简单,投资少,成本低,对环境没有任何污染等优点。用转基因动物生产药用蛋白可获得巨大的经济利益,因此成为国内外研究的热点。 展开更多
关键词 乳腺生物反应器 转基因动物 基因药物
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转基因动物乳腺生物反应器的发展概况及人工染色体在其中的应用 被引量:1
18
作者 辛艳丽 邓继先 《生物技术通讯》 CAS 2005年第5期556-559,共4页
转基因动物乳腺生物反应器位点效应的影响是制备转基因动物乳腺生物反应器过程中的主要问题。酵母人工染色体(YAC)和细菌人工染色体(BAC)具有容量大的特性,可以将乳蛋白的整个基因座包括所有调控序列全部装载进去,有可能克服位点效应的... 转基因动物乳腺生物反应器位点效应的影响是制备转基因动物乳腺生物反应器过程中的主要问题。酵母人工染色体(YAC)和细菌人工染色体(BAC)具有容量大的特性,可以将乳蛋白的整个基因座包括所有调控序列全部装载进去,有可能克服位点效应的影响,是一种理想的载体。YAC和BAC载体转基因技术可能成为避开基因打靶获得高效表达的转基因动物乳腺生物反应器的另一途径。 展开更多
关键词 转基因动物 乳腺生物反应器 位置效应 酵母人工染色体 细菌人工染色体
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乳腺生物反应器在生物制药领域的研究进展 被引量:5
19
作者 谢晶莹 张勇 冯若飞 《西北民族大学学报(自然科学版)》 2018年第2期57-62,共6页
乳腺生物反应器是利用转基因动物生产功能蛋白质的技术.这项技术开创了基因工程制药的新途径.而其具有的低成本、高质量,稳定的生物学活性、较短的生产周期、较高的经济效益等一系列研发特点,使得这一生产方式成为医药产业的主要手段.
关键词 乳腺生物反应器 转基因动物 生物制药
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动物乳腺生物反应器研究进展 被引量:3
20
作者 舒建洪 刘津 +2 位作者 胡先春 杨瑞锋 张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2004年第12期149-153,共5页
 针对利用动物乳腺生物反应器技术生产重组蛋白,具有生产效率高和经济效益明显的特点。综述了制备乳腺生物反应器时表达载体构建和基因转移两个关键环节的研究现状,并就基因打靶和体细胞克隆技术的结合探讨了乳腺生物反应器的发展趋势。
关键词 乳腺生物反应器 表达载体 转基因 基因打靶 体细胞克隆
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