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人外周血巨噬细胞培养及功能鉴定 被引量:14
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作者 林炜明 戴爱玲 +1 位作者 尹会方 杨小燕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期86-89,共4页
目的:从人外周血单个核细胞(PBMC)中分离单核细胞,诱导分化成巨噬细胞并鉴定其功能。方法:应用免疫磁珠法从人外周血单个核细胞中分选CD14^+单核细胞,分离后的细胞用流式细胞仪检测其纯度,用含有10%人AB血清和10 ng/ml人M-CSF的IMD... 目的:从人外周血单个核细胞(PBMC)中分离单核细胞,诱导分化成巨噬细胞并鉴定其功能。方法:应用免疫磁珠法从人外周血单个核细胞中分选CD14^+单核细胞,分离后的细胞用流式细胞仪检测其纯度,用含有10%人AB血清和10 ng/ml人M-CSF的IMDM培养基体外培养CD14^+单核细胞,诱导分化成巨噬细胞,并进行形态特征和吞噬功能鉴定。结果:免疫磁珠法能从外周血中分离到高纯度的CD1^4+单核细胞,分选前CD14阳性率为10%,分选后CD14阳性率为85.8%。诱导培养7天后巨噬细胞的直径最大可达40~45μm,大部分细胞呈煎蛋状,能有效地吞噬淋巴瘤Raji细胞。结论:从外周血中分离了高纯度的CD14^+单核细胞,诱导形成的巨噬细胞具有吞噬淋巴瘤细胞的功能。 展开更多
关键词 巨噬细胞 磁珠分选 培养 功能鉴定
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免疫磁珠分选系统在分离大鼠骨髓干细胞群中的应用 被引量:8
2
作者 舒赛男 魏来 +1 位作者 方峰 王宇 《标记免疫分析与临床》 CAS 2006年第1期35-37,共3页
采用免疫磁珠分选系统(MACS)分离大鼠骨髓Thy-1.1+干细胞群。收集大鼠胫骨和股骨的骨髓细胞,Percoll密度梯度离心分离单个核细胞,Thy1.1单抗标记,间接MACS分离纯化Thy-1.1+干细胞群,流式细胞仪检测其纯度和分选前后CD34+百分比,台盼兰... 采用免疫磁珠分选系统(MACS)分离大鼠骨髓Thy-1.1+干细胞群。收集大鼠胫骨和股骨的骨髓细胞,Percoll密度梯度离心分离单个核细胞,Thy1.1单抗标记,间接MACS分离纯化Thy-1.1+干细胞群,流式细胞仪检测其纯度和分选前后CD34+百分比,台盼兰拒染法检测细胞活力,计算回收率。结果表明分选后的Thy-1.1+细胞纯度达94.2%,回收率64.7%;分选后细胞活力为99.6%,与分选前99.8%无明显差异;分选前CD34+百分比为1.2%,与分选后1.3%无差异。MACS能有效分选大鼠骨髓Thy-1.1+干细胞群,所得细胞纯度高,细胞活力保持好。大鼠Thy-1.1抗原与CD34分子无明显相关性。 展开更多
关键词 骨髓干细胞 Thy-1.1抗原 CD34 免疫磁珠分选系统
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四种精液处理方法优选冷冻精子的比较 被引量:9
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作者 陈娟 耿琳琳 +3 位作者 卢文红 张蔚 高丽娜 李琳 《生殖医学杂志》 CAS 2019年第6期667-672,共6页
目的 探讨洗涤法(SW)、密度梯度离心法(DGC)、上游法(SU)、磁性活性细胞分选法(MACS)对冷冻精液的优选效果,为供精人工授精(AID)和供精体外受精(IVF-D)提供可靠的数据。方法 门诊收集健康男性精液,制备冷冻精液。冷冻精液复苏后,根据优... 目的 探讨洗涤法(SW)、密度梯度离心法(DGC)、上游法(SU)、磁性活性细胞分选法(MACS)对冷冻精液的优选效果,为供精人工授精(AID)和供精体外受精(IVF-D)提供可靠的数据。方法 门诊收集健康男性精液,制备冷冻精液。冷冻精液复苏后,根据优选处理方法不同分为4组:SW组、DGC组、SU组和MACS组,每组样本各20例。比较分析各组优选前后精子浓度、前向运动精子活率、膜完整性、正常形态率及DNA碎片率等的差异。结果 SW组,处理前后前向运动精子活率、精子膜完整性、正常形态率及DNA完整率,均无显著性差异(P>0.05);DGC和SU组中,优选后前向运动精子活率[分别为(78.19±12.13)vs.(34.17±8.61)、(82.20±7.17)vs.(42.86±16.38)]、精子膜完整率[分别为(84.62±5.84)vs.(68.17±6.74)、(81.44±4.47)vs.(65.19±6.15)]、正常形态率[(20.42±4.63)vs.(12.16±5.75)、(25.02±4.61)vs.(10.24±5.37)]及DNA完整率[(86.73±7.07)vs.(67.98±6.45)、(88.49±3.09)vs.(67.44±5.89)]均显著高于同组优选前(P<0.05);MACS组中,优选后冷冻精子的膜完整性[(84.00±5.33)vs.(69.21±7.79)]、正常形态率[(13.72±4.58)vs.(7.90±3.80)]及DNA完整率[(91.95±2.82)vs.(69.79±3.90)]亦显著高于优选前(P<0.05),但前向运动精子活率没有显著改善(P>0.05)。结论 四种方法在处理冷冻精子方面各有优缺点,临床可以根据精液标本的质量或者对于精液制备液的要求来选择不同的精子优化方法。MACS可以较好地优化DNA完整率,其在辅助生殖领域的应用具有一定前景。 展开更多
关键词 冷冻精子优选 洗涤法 非连续密度梯度法 直接上游法 磁性活性细胞分选法
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从PBMCs及CD133免疫磁珠分选获得内皮祖细胞的体外研究 被引量:8
4
作者 郑伟红 万亚峰 +3 位作者 马小鹏 李兴睿 杨志芳 易继林 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期368-373,共6页
目的:比较从外周血单个核细胞(PBMCs)和CD133免疫磁珠分选体外培养人外周血内皮祖细胞(EPCs)的表型、分化、扩增、功能特点,为EPCs细胞治疗提供临床参考。方法:健康成年人外周血,经Ficoll密度梯度离心法得PBMCs,经直接接种法或免疫磁珠... 目的:比较从外周血单个核细胞(PBMCs)和CD133免疫磁珠分选体外培养人外周血内皮祖细胞(EPCs)的表型、分化、扩增、功能特点,为EPCs细胞治疗提供临床参考。方法:健康成年人外周血,经Ficoll密度梯度离心法得PBMCs,经直接接种法或免疫磁珠分选CD133阳性细胞后置于M199培养基中培养,于第7、14d比较2组细胞表型变化及细胞因子分泌、扩增、体外血管形成及趋化能力。结果:相同血量标本PBMCs组早期集落数高于CD133+组(P<0.01),随着培养时间的推移,流式细胞检测2组细胞均显示造血干细胞标志的表达下调和内皮细胞标志表达上升,但CD133+组内皮标志CD144表达率低于PBMCs组(P<0.01),ELISA法检测到在PBMCs组早期EPCs分泌VEGF的水平高于CD133+组(P<0.01),MTT法显示PBMCs组有较强的增殖能力,基质胶及Tr-answell实验表明PBMCs组细胞参与血管形成的能力较强。结论:CD133+来源的EPCs分化、分泌、增殖及血管形成能力相对较低,推断PBMCs中CD133-细胞可能在形成功能性的EPCs中发挥更重要的作用。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 细胞培养 免疫磁珠分选法
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分选方式对细胞能量代谢的影响研究
5
作者 邢月婷 李艳伟 +6 位作者 黄莹莹 王佳佳 郭春 沈鑫 周南 沈红英 宋兴辉 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2024年第5期964-975,共12页
Seahorse XF(extracellular flux)是从能量的角度检测代谢及调控的方法,因其实时检测的优点,具有非常好的应用前景,但该技术要求目的细胞纯度高、活性好,因此需要对原代细胞的分选条件进行优化。该文通过免疫磁珠分选技术和流式细胞分... Seahorse XF(extracellular flux)是从能量的角度检测代谢及调控的方法,因其实时检测的优点,具有非常好的应用前景,但该技术要求目的细胞纯度高、活性好,因此需要对原代细胞的分选条件进行优化。该文通过免疫磁珠分选技术和流式细胞分选技术对小鼠脾脏CD4+T细胞进行研究,结果发现两种分选方式纯化的CD4+T细胞在活性氧水平上无明显差异,相较于磁珠分选,流式分选纯化的CD4+T细胞线粒体膜电位、ATP合成相关的氧耗值和线粒体储备呼吸能力均呈现下降趋势,说明磁珠分选相较于流式分选对CD4+T细胞能量代谢的损伤更小。为了进一步了解流式分选的影响,该文对分选条件进行了研究。通过Moflo AstriosEQ分选仪中不加电分选模式(SD),加电分选模式不同偏振电压(700 V、2400 V、5000 V)以及同一偏振电压下不同液滴加电(35%、70%)对HEK 293T和Jurkat进行分选,结果发现SD组相较于加电分选模式对细胞代谢干扰较小,加电分选模式中5000 V实验组对细胞代谢有显著影响。同一偏振电压条件下,不同液滴加电实验组均未对细胞产生显著干扰。综上,磁珠法更适用于小鼠原代CD4+T细胞能量代谢实验前分选预处理。流式法用于能量代谢实验预处理时建议优先选择不加电分选模式,选择加电分选模式时建议使用小于2400 V的偏振电压。该实验结果为能量代谢检测实验提供了分选方式和分选条件的数据参考。 展开更多
关键词 磁珠分选 流式分选 活性氧 线粒体膜电位 能量代谢
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人骨髓来源的多能成体祖细胞分离纯化的实验研究 被引量:4
6
作者 唐力军 高毅 +2 位作者 姜晓丹 柳晓秋 邹雨汐 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期422-424,共3页
目的 建立获取高纯度人骨髓来源的多能成体祖细胞(MAPCs)的方法。方法 取志愿者适量骨髓后采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,对单个核细胞行贴壁培养后,将获取的骨髓贴壁细胞通过CD45、Gly-A免疫做磁珠负分选,流式细胞仪鉴定分选... 目的 建立获取高纯度人骨髓来源的多能成体祖细胞(MAPCs)的方法。方法 取志愿者适量骨髓后采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,对单个核细胞行贴壁培养后,将获取的骨髓贴壁细胞通过CD45、Gly-A免疫做磁珠负分选,流式细胞仪鉴定分选后提高细胞纯度。结果 (1)通过MAPCs分选,半均每1×106/mL骨髓贴壁细胞可分选出约(5.1±2.8)×104/mL数量级的MAPCs,分选前后细胞活力分别为96.7%±1.7%和96.0%±2.4%,无明显差异;(2)流式细胞仪分析获取的CD45-、Gly-A-细胞纯度大于98%。结论 CD45、Gly-A免疫微磁珠负分选可从骨髓单个核细胞中中分选出高纯度的MAPCs。 展开更多
关键词 CD45 人骨髓 祖细胞 单个核细胞 贴壁细胞 实验研究 获取 成体 分离纯化 数量级
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大肠癌干细胞分选与鉴定的研究进展 被引量:4
7
作者 张鹏 秦环龙 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第36期4031-4035,共5页
肿瘤干细胞理论认为结肠癌的发病、转移与复发与大肠癌干细胞(colorectal cancer stem cells,CCSCs)有关,因此分离纯化大肠癌干细胞对于结肠癌的预防,诊断及治疗具有重要意义.本文就大肠癌干细胞的分选与鉴定方法作一综述.
关键词 大肠癌干细胞 流式细胞分选术 磁珠细胞分选术 侧群细胞
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自噬增强结肠癌CD133^+细胞对5-FU的化疗抵抗 被引量:3
8
作者 司晓丽 刘伟 +2 位作者 杨爱军 王晨昱 李敏 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第7期814-819,共6页
目的对5-FU诱导结肠癌CD133+细胞发生自噬的过程进行观察,初步探讨自噬对化疗的影响。方法用MTT法检测细胞增殖抑制率及IC50;用免疫磁珠分选CD133+细胞;用透射电子显微镜(TEM)观察细胞的超微结构,用MDC染色,荧光显微镜观察自噬囊泡;联... 目的对5-FU诱导结肠癌CD133+细胞发生自噬的过程进行观察,初步探讨自噬对化疗的影响。方法用MTT法检测细胞增殖抑制率及IC50;用免疫磁珠分选CD133+细胞;用透射电子显微镜(TEM)观察细胞的超微结构,用MDC染色,荧光显微镜观察自噬囊泡;联合应用细胞活性实验、集落形成实验研究自噬对化疗的影响。结果不同浓度5-FU处理后,人结肠癌SW480细胞活性明显受到抑制,其半数抑制浓度IC50为(1.09±0.18)μg/mL。CD133+胞质出现大量的自噬体及自噬囊泡;相比较单独给予5-FU,联合给予5-FU及3-MA,CD133+细胞活性由(81.8±4.6)%下降到(56.3±5.5)%(P<0.05),集落形成率由(81.1±3.4)%下降(64.4±4.8)%(P<0.05)。结论 5-FU可诱导结肠癌CD133+细胞发生自噬;自噬的抑制能够增强5-FU对结肠癌CD133+细胞的细胞毒效应。 展开更多
关键词 自噬 5-FU 结肠癌 CD133 磁珠细胞分选技术
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密度梯度离心和免疫磁珠分选相结合分离脐血中胎儿有核红细胞 被引量:4
9
作者 罗欣 杜颖颖 +1 位作者 张进 马端 《中国产前诊断杂志(电子版)》 2010年第3期4-7,共4页
目的研究密度梯度离心和免疫磁珠分选相结合方法富集脐血中胎儿有核红细胞。方法对5例脐血首先用密度梯度离心和免疫磁珠分选依次进行胎儿有核红细胞分离,用流式细胞检测和细胞染色对分选前后细胞进行分选纯度分析。结果 1.通过流式细... 目的研究密度梯度离心和免疫磁珠分选相结合方法富集脐血中胎儿有核红细胞。方法对5例脐血首先用密度梯度离心和免疫磁珠分选依次进行胎儿有核红细胞分离,用流式细胞检测和细胞染色对分选前后细胞进行分选纯度分析。结果 1.通过流式细胞仪检测发现CD71单克隆抗体磁珠用于脐血中胎儿有核红细胞分选(CD71+,CD45-),分选后的纯度可以达到81%,而分选前CD71阳性细胞只占23.2%。2.分选前脐血涂片可见大量的成熟红细胞,含少量有核红细胞;密度梯度离心后可见绝大多数细胞为单个核细胞(淋巴细胞、单核细胞和有核红细胞),含少量红细胞;CD71单克隆抗体磁珠分选后阳性细胞多为胞浆丰富略嗜碱性的有核红细胞。结论密度梯度离心和免疫磁珠分选相结合可以有效提高脐血中胎儿有核红细胞的分选纯度。 展开更多
关键词 胎儿有核红细胞 密度梯度离心 免疫磁珠分选
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乳腺癌细胞CD44^+CD24^-/low亚群化疗药物外排作用研究 被引量:4
10
作者 孙洪光 孝飞飞 +3 位作者 贾中明 王希龙 张国强 杨振林 《中国实用医药》 2020年第36期199-202,共4页
目的研究乳腺癌细胞CD44^+CD24^-/low细胞亚群对化疗药物的外排作用。方法培养多药耐药MCF-7/ADR细胞株,应用免疫磁珠法(MACS)分选CD44^+CD24^-/low亚群,流式细胞仪检测分选前后CD44^+CD24^-/low细胞比例,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色... 目的研究乳腺癌细胞CD44^+CD24^-/low细胞亚群对化疗药物的外排作用。方法培养多药耐药MCF-7/ADR细胞株,应用免疫磁珠法(MACS)分选CD44^+CD24^-/low亚群,流式细胞仪检测分选前后CD44^+CD24^-/low细胞比例,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测化疗药物敏感程度,激光共聚焦显微镜下观察胞内阿霉素蓄积,流式细胞仪检测P-糖蛋白(P-gp)表达水平。分析MACS分选CD44^+CD24^-/low亚群结果,分选前后CD44^+CD24^-/low细胞比例,CD44^+CD24^-/low亚群对化疗药物的敏感性,CD44^+CD24^-/low亚群胞内化疗药物蓄积,CD44^+CD24^-/low细胞亚群的P-gp表达水平。结果MACS分选前后分别计数细胞数量,被分选出来的CD44^+CD24^-/low细胞比例约为6%。MCF-7/ADR细胞中CD44^+CD24^-/low细胞比例为6.21%,与分选所得CD44^+CD24^-/low细胞比例相符。经流式细胞仪检测,分选所得CD44^+CD24^-/low亚群中CD44^+CD24^-/low细胞比例约为93.85%,达到进一步相关试验要求。CD44^+CD24^-/low亚群的半数杀伤浓度(IC50)为(17.37±0.46)mg/ml,MCF-7/ADR细胞的IC50为(15.84±0.66)mg/ml,比较差异具有统计学意义(P<0.05)。激光共聚焦显微镜下观察发现,MCF-7/ADR细胞及分选所得CD44^+CD24^-/low亚群均具有较强的药物外排作用,阿霉素多集中于细胞核膜表面内侧,在细胞核中心阿霉素蓄积较少。MCF-7/ADR细胞较CD44^+CD24^-/low亚群胞内蓄积更高浓度阿霉素,荧光强度分别为(571.67±11.15)和(518.67±11.93),比较差异有统计学意义(P<0.05)。CD44^+CD24^-/low细胞亚群P-gp表达荧光强度为(114906.70±2560.19),MCF-7/ADR细胞P-gp表达荧光强度为(101177.10±2171.86),比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论经MACS分选所得CD44^+CD24^-/low细胞亚群有更强的药物外排能力,高表达P-gp蛋白,可能是引起乳腺癌多药耐药的重要原因。 展开更多
关键词 乳腺癌 肿瘤干细胞 多药耐药 免疫磁珠法 化疗药物 外排作用
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小鼠骨髓造血干细胞转化为肝细胞的实验研究 被引量:3
11
作者 朱薇 邱德凯 +2 位作者 赖卓胜 王亚东 张亚历 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期221-222,共2页
为进一步明确向肝细胞分化的细胞为骨髓中的那一亚群细胞,我们将纯化后的雄性小鼠造血干细胞移植到雌性受体小鼠的体内,然后在受体小鼠的肝脏内进行检测,以确定有无供体来源的肝细胞存在。
关键词 骨髓 造血干细胞 肝细胞 免疫磁珠分离系统
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卵巢癌干细胞的分离、鉴定及初步生物学功能研究 被引量:3
12
作者 刘春生 浦春 +1 位作者 曹明刚 张鹏 《检验医学与临床》 CAS 2016年第2期166-168,共3页
目的从人卵巢上皮细胞癌建系的SKOV3细胞中分离出CD133CD117表型卵巢癌干细胞,探讨其相关生物学特性。方法利用免疫磁珠技术分选出CD133CD117癌细胞,继而进行平皿、软琼脂克隆形成试验,无血清培养试验和致瘤试验探讨其初步功能;采用反... 目的从人卵巢上皮细胞癌建系的SKOV3细胞中分离出CD133CD117表型卵巢癌干细胞,探讨其相关生物学特性。方法利用免疫磁珠技术分选出CD133CD117癌细胞,继而进行平皿、软琼脂克隆形成试验,无血清培养试验和致瘤试验探讨其初步功能;采用反转录聚合酶链反应检测癌细胞Wnt-2基因表达水平。结果表型CD133CD117癌细胞在平皿、软琼脂和无血清培养基中克隆形成能力明显强于CD133^-CD117^-癌细胞;同时表现出较强致瘤性;Wnt-2基因在不同表型癌细胞中存在差异表达。结论卵巢癌细胞中存在干细胞样癌细胞,利用磁珠分选得到的CD133CD117癌细胞具有干细胞的相关特性,为卵巢癌干细胞生物学特性的研究及靶向治疗提供依据。 展开更多
关键词 卵巢癌干细胞 免疫磁珠分选 Wnt-2基因
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磁性活性细胞分选技术在男性不育研究中的应用 被引量:3
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作者 邓雪连 林发全 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2012年第1期70-73,共4页
磁性活性细胞分选法(MACS)根据细胞表面特异的标记物,在分子水平对目的细胞进行有效分选,具有简易、快速、灵活、特异性高的特点,在临床方面有着广泛的应用。MACS也为男性不育提供了一个新的研究平台,将MACS用于精液质量优化与生殖细胞... 磁性活性细胞分选法(MACS)根据细胞表面特异的标记物,在分子水平对目的细胞进行有效分选,具有简易、快速、灵活、特异性高的特点,在临床方面有着广泛的应用。MACS也为男性不育提供了一个新的研究平台,将MACS用于精液质量优化与生殖细胞分离是男性不育研究的一个新思路。本文简要介绍了MACS的基本原理,综述了MACS在精子优选、冷冻保存、精原干细胞及生精细胞分离等男性不育研究方面的应用现状和临床应用前景。 展开更多
关键词 磁性活性细胞分选法 男性不育 精子优选 生殖细胞分离
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免疫磁珠法在分离纯化外周血CD4^+和CD8^+ T淋巴细胞亚群中的应用 被引量:3
14
作者 莫雪安 周礼圆 +2 位作者 秦超 张德敏 赵伟金 《广西医科大学学报》 CAS 2012年第5期679-681,共3页
目的:探讨免疫磁珠法(MiniMACS)在分离纯化外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群中的应用。方法:应用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(Peripheral blood mononucleate cells,PBMC),采用MiniMACS分别分离和纯化39例标本外周血PBMC中的CD4+... 目的:探讨免疫磁珠法(MiniMACS)在分离纯化外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群中的应用。方法:应用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(Peripheral blood mononucleate cells,PBMC),采用MiniMACS分别分离和纯化39例标本外周血PBMC中的CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞,并经流式细胞仪分析细胞纯度和台盼蓝染色的方法对细胞活力进行评估。结果:MiniMACS分离外周血CD4+T淋巴细胞前、后细胞纯度分别为(37.38±5.74)%、(97.75±1.03)%(P<0.001),CD8+T淋巴细胞分离纯化前后细胞纯度分别为(20.11±6.83)%、(96.85±1.86)%(P<0.001);外周血分离前PBMC细胞活力为(97.66±2.73)%,纯化为CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞后细胞活力分别为(97.44±3.08)%、(98.05±2.92)%(P>0.05)。结论:MiniMACS可以高度富集CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞且不改变细胞的活力。 展开更多
关键词 免疫磁珠法 T淋巴细胞亚群 分离纯化
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人胎盘CD133^+细胞具有高增殖潜能集落形成细胞特性 被引量:2
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作者 刘佳云 陈代雄 +5 位作者 方宁 章涛 刘祖林 祁莹 万卫红 刘金伟 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期915-918,共4页
目的通过对人胎盘CD133+细胞群中高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)检测与生物学特性的分析,证明人胎盘存在早期造血干/祖细胞(HSPC)。方法采用机械法制备人胎盘组织(PT)单细胞悬液,用Histopaque-1007分离出单个核细胞(MNC),经磁式分选(M... 目的通过对人胎盘CD133+细胞群中高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)检测与生物学特性的分析,证明人胎盘存在早期造血干/祖细胞(HSPC)。方法采用机械法制备人胎盘组织(PT)单细胞悬液,用Histopaque-1007分离出单个核细胞(MNC),经磁式分选(MACS)富集CD133+细胞,培养28d后观察HPP-CFC集落形成能力,用流式细胞仪(FCM)对分选的细胞组份和HPP-CFC进行表型分析,实验全程用脐带血(UCB)作平行比较分析。结果培养28d后,PT-CD133+与UCB-CD133+细胞组份分别扩增了266和362倍,前者低于后者(P<0.01);PT-CD133+与UCB-CD133+细胞中HPP-CFC分别为(32.4±11.2)/5×103、(17.7±5.7)/5×103,前者形成的HPP-CFC数量明显高于后者(P<0.01);PT-CD133+、UCB-CD133+细胞培养至28d时,除UCB-CD133+组的CD133+CD34-亚群比例无明显改变外,CD133+CD34+、CD133-CD34+和CD133+CD34-(PT-CD133+组)亚型均比培养前减少。结论人胎盘组织CD133+细胞中存在HPP-CFC,说明胎盘CD133+细胞群中存在早期HSPC。 展开更多
关键词 CD133^+细胞 造血干/祖细胞 高增殖潜能集落形成细胞 胎盘 磁式分选
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头颈部肿瘤干细胞的表面标志物及其分选 被引量:1
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作者 徐晓蓉 贾俊 张文峰 《国际口腔医学杂志》 CAS 2012年第5期604-607,共4页
越来越多的研究显示,头颈部肿瘤干细胞很可能是头颈部肿瘤形成、复发、转移和耐药的根源。本文就头颈部肿瘤干细胞表面特异分子标志物,头颈部肿瘤干细胞的分选等研究进展作一综述。
关键词 肿瘤干细胞 表面标志物 体外培养分选术 荧光激活细胞分选术 磁激活细胞分选术 侧群细胞分选术
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免疫磁珠分选白血病KG1a细胞中CD34^+CD38^-干细胞及其特性研究 被引量:2
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作者 王国征 李慧 +3 位作者 吴远彬 李达 贺艳杰 周雪云 《新乡医学院学报》 CAS 2013年第3期181-184,共4页
目的从白血病KG1a细胞中分选CD34+CD38-干细胞并研究其生物学特性。方法免疫磁珠法分选CD34+CD38-细胞,流式细胞术分析细胞表面膜抗原、细胞周期,甲基纤维素培养体系观察其克隆性;以HL60、K562、CD34+CD38+细胞为对照,甲基偶氮唑蓝法检... 目的从白血病KG1a细胞中分选CD34+CD38-干细胞并研究其生物学特性。方法免疫磁珠法分选CD34+CD38-细胞,流式细胞术分析细胞表面膜抗原、细胞周期,甲基纤维素培养体系观察其克隆性;以HL60、K562、CD34+CD38+细胞为对照,甲基偶氮唑蓝法检测柔红霉素对CD34+CD38-细胞的抑制作用;BALB/c裸鼠皮下接种,观察体内成瘤能力。结果分选的CD34+CD38-细胞纯度达95%以上,(69.03±3.25)%处于G0期,克隆形成率为(38.64±2.68)%,明显抵抗柔红霉素;不同浓度柔红霉素作用后,CD34+CD38-、CD34+CD38+、HL60、K562细胞的活性差异有统计学意义(F=961.136,P=0.000);CD34+CD38-在裸鼠皮下成瘤率显著高于CD34+CD38+细胞(P<0.05)。结论免疫磁珠法分选白血病干细胞简单易行,分选的细胞符合白血病干细胞生物学特性。 展开更多
关键词 细胞株KG1a 白血病干细胞 免疫磁珠细胞分选 CD34+CD38-细胞
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磁激活细胞分离术检测胃癌循环血微转移的研究 被引量:1
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作者 温玉刚 潘常青 李克 《中国现代普通外科进展》 CAS 2006年第2期102-104,共3页
目的:用磁激活细胞分离术(MACS)检测胃癌患者外周血和门静脉血中癌细胞,探讨胃癌血液徽转移情况。方法:术前抽取23例胃癌患者和7例对照者的外周血,术中取其门静脉血,经MACS富集、分离.用流式细胞仪检测癌细胞含量。结果:未经M... 目的:用磁激活细胞分离术(MACS)检测胃癌患者外周血和门静脉血中癌细胞,探讨胃癌血液徽转移情况。方法:术前抽取23例胃癌患者和7例对照者的外周血,术中取其门静脉血,经MACS富集、分离.用流式细胞仪检测癌细胞含量。结果:未经MACS的血标本中较少发现癌细胞,富集后的标本癌细胞阳性率在胃癌组与对照组(外周血:16/23 VS 1/7,门静脉血:19/23 VS 1/7,P〈0.01)以及pTNM Ⅰ~Ⅱ期与Ⅲ~Ⅳ期患者(外周血:0.19%VS 0.48%,P〈0.01,门静脉血0.42% VS 1.89%,P〈0.001)差别均有统计学意义。胃癌组门静脉血中游离癌细胞阳性率高于外周血(1.81% VS 0.42%,P〈0.01)。结论:MACS能有效地富集血中癌细胞,提高癌细胞检出率:循环血癌细胞数量与胃癌病理分期密切相关。MACS检测血中癌细胞对判断肿瘤转移及选择化疗合理途径、时机、监测疗效有指导意义。 展开更多
关键词 磁激活细胞分离术 胃肿瘤 肿瘤转移 游离癌细胞
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树状串联hTERT表位肽负载mDC疫苗体外激发抗瘤免疫应答的效应研究 被引量:2
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作者 钮柏琳 慎华平 +3 位作者 龚建平 杜慧敏 杨仕明 邹利全 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期475-481,共7页
目的通过树状串联hTERT表位肽的髓样树突状细胞(mDC)递呈,刺激同源淋巴细胞,探索一种更优的肿瘤免疫治疗方法。方法人工固相合成4分支的树状串联hTERT表位肽(MAP)及其各分支单肽,免疫荧光检测hTERT的表达情况,免疫磁珠分选mDC,尼龙毛柱... 目的通过树状串联hTERT表位肽的髓样树突状细胞(mDC)递呈,刺激同源淋巴细胞,探索一种更优的肿瘤免疫治疗方法。方法人工固相合成4分支的树状串联hTERT表位肽(MAP)及其各分支单肽,免疫荧光检测hTERT的表达情况,免疫磁珠分选mDC,尼龙毛柱纯化T细胞,ELISA检测mDC的IL-12p70和淋巴细胞的(LC)TNF-α、IFN-γ分泌量,流式细胞技术检测mDC、LC的相关表面分子以及效应性T细胞对HLA-A2型肿瘤A549、MDA-MB-231和SW480的杀伤率,并作统计学分析。结果所有肿瘤细胞都表达hTERT,且胞核大于胞浆;MAP和混合单肽对3种肿瘤细胞都有杀伤效应,且MAP的杀伤效应大于混合单肽,有统计学差异。结论人工合成hTERT的MAP肽通过mDC能足够强的激活同源淋巴细胞,在肿瘤疫苗的研发中有重要意义。 展开更多
关键词 表位肽 髓样树突状细胞 磁珠分选 肿瘤 免疫治疗
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神经生长因子受体阳性的人食管鳞癌细胞的分选及其干细胞特性 被引量:2
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作者 徐驯宇 黄盛东 +3 位作者 方超英 林兴 庄聪文 陈前顺 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期310-314,共5页
目的应用免疫磁珠分选(magnetic activated cell sorting,MACS)法分选人食管鳞癌细胞(esophagealsquamous carcinoma cell,ESCC)中的神经生长因子受体(nerve growth factor receptor,NGFR)阳性细胞,并对其肿瘤干细胞样特征进行研究。方... 目的应用免疫磁珠分选(magnetic activated cell sorting,MACS)法分选人食管鳞癌细胞(esophagealsquamous carcinoma cell,ESCC)中的神经生长因子受体(nerve growth factor receptor,NGFR)阳性细胞,并对其肿瘤干细胞样特征进行研究。方法采用MACS分选人ESCC中的NGFR阳性细胞。通过流式细胞仪法测定分选细胞的纯度及细胞周期分布,并计算细胞回收率;MTT法测定细胞数,绘制生长曲线并计算细胞群体倍增时间;平板克隆实验测定平板克隆形成率;裸鼠接种成瘤实验测定体内致瘤性,从而鉴定NGFR阳性ESCC的干细胞特性。结果 NGFR阳性细胞约占肿瘤细胞的1.89%,经过磁珠分选后纯度显著提高,达89.94%,细胞回收率为19.83%。与未分选细胞相比,分选后NGFR阳性细胞的增殖速度明显提高,生长曲线左移,细胞倍增时间缩短[(25.22±8.15)hvs.(47.41±12.69)h,P=0.01],平板克隆形成率显著增加[(16.27±8.31)%vs.(1.22±0.35)%,P=0.00],处于活跃增殖期S、G2、M期的细胞显著增加(72.7%vs.18.8%);裸鼠皮下接种的转移瘤形成率增加(8/10vs.1/10),转移瘤重量显著增加[(0.72±0.53)gvs.(0.16±0.26)g,P=0.00]。结论应用MACS技术能有效分选出人ESCC中的NGFR阳性细胞,其具有肿瘤干细胞特性。 展开更多
关键词 食管鳞癌细胞 神经生长因子受体 免疫磁珠分选 肿瘤干细胞
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