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微载体规模化培养MDCK细胞增殖H9N2亚型禽流感病毒的研究
被引量：
24
1
作者
李春艳
肖晶
+1 位作者
李曦
刘娣
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第12期1149-1153,共5页
目的探索H9N2亚型禽流感病毒株(A/Chiken/NX/9/99)在微载体大规模培养的MDCK细胞中的增殖规律,确定最佳增殖条件。方法将H9N2亚型禽流感病毒株接种到生长在24孔培养板上的MDCK细胞中进行增殖试验,检测接种不同感染剂量病毒、添加不同浓...
目的探索H9N2亚型禽流感病毒株(A/Chiken/NX/9/99)在微载体大规模培养的MDCK细胞中的增殖规律,确定最佳增殖条件。方法将H9N2亚型禽流感病毒株接种到生长在24孔培养板上的MDCK细胞中进行增殖试验,检测接种不同感染剂量病毒、添加不同浓度TPCK-胰酶、在不同pH值的培养液中培养,接毒后不同时间的病毒血凝素滴度(HA)。根据最佳增殖条件将病毒接种至生长在微载体上的MDCK细胞中,利用250 mL和5L转瓶逐级进行大规模增殖。结果最佳病毒增殖条件为TPCK-胰酶终浓度为10μg/mL,接毒剂量为MOI=0.025,培养液pH值为7.4,在此条件下,H9N2亚型禽流感病毒株(A/Chiken/NX/9/99)适应在250 mL和5L转瓶中微载体培养的MDCK细胞内大量增殖,病毒的最高血凝价均可达到9log2(1∶512)。结论本研究为以哺乳动物细胞为基质规模化生产禽流感疫苗奠定了基础。
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关键词
关键词:微载体
H9N2亚型禽流感病毒
mdck
细胞
规模化培养
下载PDF
职称材料
重组H5N3禽流感疫苗株在MDCK细胞中大规模增殖条件研究
被引量：
14
2
作者
杨涛
刘明
+3 位作者
张云
刘春国
王洪峰
蔡雪辉
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期199-203,共5页
为研究通过反义遗传学技术构建的重组禽流感病毒rH5N3疫苗株在MDCK细胞中大规模增殖规律,确定最佳增殖条件,将rH5N3疫苗株分别在500mL和10L转瓶培养的MDCK细胞中进行增殖试验,检测不同接毒量以及接毒后不同时间里的血凝价,以确定病毒的...
为研究通过反义遗传学技术构建的重组禽流感病毒rH5N3疫苗株在MDCK细胞中大规模增殖规律,确定最佳增殖条件,将rH5N3疫苗株分别在500mL和10L转瓶培养的MDCK细胞中进行增殖试验,检测不同接毒量以及接毒后不同时间里的血凝价,以确定病毒的增殖情况。结果表明,在确定的最佳病毒增殖条件下,该重组rH5N3疫苗株在500mL转瓶和10L转瓶中可获得大量增殖,病毒的最高血凝价均可达到1∶1024。rH5N3疫苗株可以在MDCK细胞中大规模增殖,操作方法简便,成本低廉,该方法为禽流感细胞培养型疫苗的大规模生产奠定了基础。
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关键词
禽流感
细胞培养
mdck
细胞
下载PDF
职称材料
MDCK细胞微载体悬浮培养放大工艺研究
被引量：
8
3
作者
龚迪
易小萍
张元兴
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期55-60,共6页
MDCK细胞对各种流感病毒具有高度敏感性,广泛应用于流感病毒的分离和疫苗制备。通过探索培养基中促进细胞贴壁的关键组分,并筛选水解物,开发了适合MDCK细胞生长的低血清培养基。发现钙、镁离子是细胞贴壁不可缺少的物质,麦麸水解物可以...
MDCK细胞对各种流感病毒具有高度敏感性,广泛应用于流感病毒的分离和疫苗制备。通过探索培养基中促进细胞贴壁的关键组分,并筛选水解物,开发了适合MDCK细胞生长的低血清培养基。发现钙、镁离子是细胞贴壁不可缺少的物质,麦麸水解物可以部分代替培养基中的血清。利用该低血清培养基,经过消化转移将MDCK细胞从5 L反应器放大至25 L反应器,微载体上细胞贴附均匀、生长旺盛,25 L反应器中培养48 h细胞密度可达30.5×105cells/ml。研究结果为工业规模反应器微载体悬浮培养MDCK细胞生产流感病毒奠定了基础。
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关键词
mdck
细胞
微载体
低血清培养基
消化放大
原文传递
H5N1亚型禽流感病毒在MDCK细胞中增殖条件的研究
被引量：
3
4
作者
孙德君
梁婉楠
+3 位作者
丁国杰
刘鑫莹
袁明霞
闫妍
《中国动物保健》
2014年第3期17-19,共3页
目的:探索H5N1亚型禽流感病毒在MDCK中增殖规律,确定最佳增殖条件。方法将H5N1亚型禽流感病毒接种到6孔板培养的MDCK细胞进行增殖试验,检测不同病毒感染量、不同浓度TPCK-胰酶,接毒后不同时间病毒的HA滴度。根据确定的最佳增殖条件将病...
目的:探索H5N1亚型禽流感病毒在MDCK中增殖规律,确定最佳增殖条件。方法将H5N1亚型禽流感病毒接种到6孔板培养的MDCK细胞进行增殖试验,检测不同病毒感染量、不同浓度TPCK-胰酶,接毒后不同时间病毒的HA滴度。根据确定的最佳增殖条件将病毒接种到微载体培养的MDCK细胞中进行大规模增殖。结果:最佳病毒增殖条件接毒量MOI为5×10-4、TPCK-胰酶浓度为4μg/mL,在5 L生物反应器中重复验证,获得稳定的试验结果,病毒血凝价最高为8 log2。结论:本研究为禽流感疫苗的生物反应器规模化生产奠定了基础。
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关键词
H5N1亚型禽流感病毒
mdck
细胞
规模化培养
下载PDF
职称材料
题名
微载体规模化培养MDCK细胞增殖H9N2亚型禽流感病毒的研究
被引量：
24
1
作者
李春艳
肖晶
李曦
刘娣
机构
东北林业大学博士后流动站
东北农业大学
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第12期1149-1153,共5页
基金
中国博士后基金(20070410923)
黑龙江省青年科学基金(QC06C014)
+1 种基金
黑龙江省博士后基金(LBH-Z06240)
东北农业大学博士启动基金资助
文摘
目的探索H9N2亚型禽流感病毒株(A/Chiken/NX/9/99)在微载体大规模培养的MDCK细胞中的增殖规律,确定最佳增殖条件。方法将H9N2亚型禽流感病毒株接种到生长在24孔培养板上的MDCK细胞中进行增殖试验,检测接种不同感染剂量病毒、添加不同浓度TPCK-胰酶、在不同pH值的培养液中培养,接毒后不同时间的病毒血凝素滴度(HA)。根据最佳增殖条件将病毒接种至生长在微载体上的MDCK细胞中,利用250 mL和5L转瓶逐级进行大规模增殖。结果最佳病毒增殖条件为TPCK-胰酶终浓度为10μg/mL,接毒剂量为MOI=0.025,培养液pH值为7.4,在此条件下,H9N2亚型禽流感病毒株(A/Chiken/NX/9/99)适应在250 mL和5L转瓶中微载体培养的MDCK细胞内大量增殖,病毒的最高血凝价均可达到9log2(1∶512)。结论本研究为以哺乳动物细胞为基质规模化生产禽流感疫苗奠定了基础。
关键词
关键词:微载体
H9N2亚型禽流感病毒
mdck
细胞
规模化培养
Keywords
microcarriers
H9N2
subtype
avian
influenza
madin
-
darbin
canine
kidney
（
mdck
）
cell
large-scale
culture
分类号
Q939.91 [生物学—微生物学]
下载PDF
职称材料
题名
重组H5N3禽流感疫苗株在MDCK细胞中大规模增殖条件研究
被引量：
14
2
作者
杨涛
刘明
张云
刘春国
王洪峰
蔡雪辉
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期199-203,共5页
基金
国家重点科技攻关计划项目(2004BA519A19)
黑龙江省科技攻关计划项目
文摘
为研究通过反义遗传学技术构建的重组禽流感病毒rH5N3疫苗株在MDCK细胞中大规模增殖规律,确定最佳增殖条件,将rH5N3疫苗株分别在500mL和10L转瓶培养的MDCK细胞中进行增殖试验,检测不同接毒量以及接毒后不同时间里的血凝价,以确定病毒的增殖情况。结果表明,在确定的最佳病毒增殖条件下,该重组rH5N3疫苗株在500mL转瓶和10L转瓶中可获得大量增殖,病毒的最高血凝价均可达到1∶1024。rH5N3疫苗株可以在MDCK细胞中大规模增殖,操作方法简便,成本低廉,该方法为禽流感细胞培养型疫苗的大规模生产奠定了基础。
关键词
禽流感
细胞培养
mdck
细胞
Keywords
avian
influenza
cell
culture
madin
-
darbin
canine
kidney
（
mdck
）
cell
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
MDCK细胞微载体悬浮培养放大工艺研究
被引量：
8
3
作者
龚迪
易小萍
张元兴
机构
华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期55-60,共6页
文摘
MDCK细胞对各种流感病毒具有高度敏感性,广泛应用于流感病毒的分离和疫苗制备。通过探索培养基中促进细胞贴壁的关键组分,并筛选水解物,开发了适合MDCK细胞生长的低血清培养基。发现钙、镁离子是细胞贴壁不可缺少的物质,麦麸水解物可以部分代替培养基中的血清。利用该低血清培养基,经过消化转移将MDCK细胞从5 L反应器放大至25 L反应器,微载体上细胞贴附均匀、生长旺盛,25 L反应器中培养48 h细胞密度可达30.5×105cells/ml。研究结果为工业规模反应器微载体悬浮培养MDCK细胞生产流感病毒奠定了基础。
关键词
mdck
细胞
微载体
低血清培养基
消化放大
Keywords
madin
-
darbin
canine
kidney
（
mdck
）
cell
Microcarrier
Low
serum
medium
Scale
up
by
digestion
分类号
Q813 [生物学—生物工程]
原文传递
题名
H5N1亚型禽流感病毒在MDCK细胞中增殖条件的研究
被引量：
3
4
作者
孙德君
梁婉楠
丁国杰
刘鑫莹
袁明霞
闫妍
机构
哈药集团生物疫苗有限公司
出处
《中国动物保健》
2014年第3期17-19,共3页
文摘
目的:探索H5N1亚型禽流感病毒在MDCK中增殖规律,确定最佳增殖条件。方法将H5N1亚型禽流感病毒接种到6孔板培养的MDCK细胞进行增殖试验,检测不同病毒感染量、不同浓度TPCK-胰酶,接毒后不同时间病毒的HA滴度。根据确定的最佳增殖条件将病毒接种到微载体培养的MDCK细胞中进行大规模增殖。结果:最佳病毒增殖条件接毒量MOI为5×10-4、TPCK-胰酶浓度为4μg/mL,在5 L生物反应器中重复验证,获得稳定的试验结果,病毒血凝价最高为8 log2。结论:本研究为禽流感疫苗的生物反应器规模化生产奠定了基础。
关键词
H5N1亚型禽流感病毒
mdck
细胞
规模化培养
Keywords
H5N1
subtype
avian
influenza
madin
-
darbin
canine
kidney
（
mdck
）
cell
large-scale
culture
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
微载体规模化培养MDCK细胞增殖H9N2亚型禽流感病毒的研究
李春艳
肖晶
李曦
刘娣
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
24
下载PDF
职称材料
2
重组H5N3禽流感疫苗株在MDCK细胞中大规模增殖条件研究
杨涛
刘明
张云
刘春国
王洪峰
蔡雪辉
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
14
下载PDF
职称材料
3
MDCK细胞微载体悬浮培养放大工艺研究
龚迪
易小萍
张元兴
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
8
原文传递
4
H5N1亚型禽流感病毒在MDCK细胞中增殖条件的研究
孙德君
梁婉楠
丁国杰
刘鑫莹
袁明霞
闫妍
《中国动物保健》
2014
3
下载PDF
职称材料
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