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多肽类物质分析检测方法的研究进展 被引量:12
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作者 杜晓宁 宋明鸣 《上海化工》 CAS 2009年第11期6-11,共6页
在蛋白质组学研究中,多肽类物质的分析测定是非常重要和活跃的研究领域,从中可以发现和利用其重要的生物活性组分,是目前新药物研发的关键。近年来,随着新仪器和检测技术的开发,国内外在研究多肽的分析检测方法上取得了较大进展。就目... 在蛋白质组学研究中,多肽类物质的分析测定是非常重要和活跃的研究领域,从中可以发现和利用其重要的生物活性组分,是目前新药物研发的关键。近年来,随着新仪器和检测技术的开发,国内外在研究多肽的分析检测方法上取得了较大进展。就目前国内外多肽类物质分析测定的最新方法和进展情况加以概述。 展开更多
关键词 多肽 分析 高效液相色谱 毛细管电泳 质谱
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质谱法分析蛇毒蛋白翻译后修饰 被引量:7
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作者 刘淑清 孙明忠 赵宝昌 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第11期2194-2200,共7页
采用SDS-PAGE分离大连黑眉蝮蛇(Gloydius Shedaoensis)蛇毒蛋白组分,Pro-Q Emerald 488糖蛋白和Pro-Q Diamond磷酸化蛋白荧光染料用于糖蛋白和磷酸化蛋白泳带染色,采用高效液相色谱电喷雾电离串联质谱(HPLC-nESI-MS/MS)法鉴定蛋白.SDS-P... 采用SDS-PAGE分离大连黑眉蝮蛇(Gloydius Shedaoensis)蛇毒蛋白组分,Pro-Q Emerald 488糖蛋白和Pro-Q Diamond磷酸化蛋白荧光染料用于糖蛋白和磷酸化蛋白泳带染色,采用高效液相色谱电喷雾电离串联质谱(HPLC-nESI-MS/MS)法鉴定蛋白.SDS-PAGE胶上的8条糖蛋白带被分别鉴定为L-氨基酸氧化酶、金属蛋白酶、谷氨酰环化酶、C-端缺失L-氨基酸氧化酶、纤溶酶原激活物、磷脂酶A2(PLA2)和神经生长因子;5条磷酸化蛋白带被分别鉴定为Stejaggregin-A、PLA2、Crisp、金属蛋白酶P-Ⅲ和Acutolysin e precursor,与其它蛇毒来源蛋白具有一定的同源性.为进一步验证方法的可靠性,采用离子交换和凝胶过滤层析技术纯化得到了PLA2,Pro-Q Diamond染色结果显示PLA2被磷酸化.研究所得结果为进一步研究蛋白质翻译后修饰对蛇毒蛋白的生物活性、结构与功能提供了依据. 展开更多
关键词 蛇毒 糖基化 磷酸化 高效液相色谱串联质谱法
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电喷雾质谱法与大气压化学电离质谱法分析烟叶中植物甾醇的比较 被引量:4
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作者 段沅杏 张涛 +4 位作者 陈进雄 杨光宇 刘巍 许永 张霞 《应用化工》 CAS CSCD 2013年第5期955-957,共3页
采用超高效液相-电喷雾质谱法(UPLC-ESI/MS/MS)和超高效液相-大气压化学电离质谱法(UPLC-APCI/MS/MS),分析烟叶中的植物甾醇。使用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱,以甲醇、水为流动相梯度洗脱,甾醇和烟叶中其它成分分离良好。在ESI... 采用超高效液相-电喷雾质谱法(UPLC-ESI/MS/MS)和超高效液相-大气压化学电离质谱法(UPLC-APCI/MS/MS),分析烟叶中的植物甾醇。使用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱,以甲醇、水为流动相梯度洗脱,甾醇和烟叶中其它成分分离良好。在ESI源和APCI源正离子模式下获得了甾醇离子碎片,胡萝卜甙、胆甾醇、β-谷甾醇和豆甾醇等不饱和甾醇,脱水[M+H-H2O]+是响应最强的离子片段。通过对烟叶中甾醇的ESI/MS/MS和AP-CI/MS/MS的离子流图进行比较,发现相对于ESI来说,APCI源选择性较好,基质干扰小,说明APCI源更适合烟叶中植物甾醇的定量分析。 展开更多
关键词 烟叶 超高效液相色谱 电喷雾质谱 大气压化学电离质谱
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苹果树腐烂病菌菌丝蛋白双向电泳体系的建立 被引量:4
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作者 冯浩 王海英 +3 位作者 冯雅琼 高小宁 韩青梅 黄丽丽 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2017年第6期155-162,共8页
【目的】建立苹果树腐烂病菌菌丝蛋白双向电泳体系,鉴定不同致病力材料的差异表达蛋白,为从蛋白质组学角度揭示苹果树腐烂病菌致病机理奠定基础。【方法】以苹果树腐烂病菌野生型03-8菌丝为材料,从蛋白提取方法、IPG胶条长度及胶条的pH... 【目的】建立苹果树腐烂病菌菌丝蛋白双向电泳体系,鉴定不同致病力材料的差异表达蛋白,为从蛋白质组学角度揭示苹果树腐烂病菌致病机理奠定基础。【方法】以苹果树腐烂病菌野生型03-8菌丝为材料,从蛋白提取方法、IPG胶条长度及胶条的pH范围3个方面对双向电泳体系进行优化,并利用该优化体系对苹果树腐烂病菌野生型03-8和致病力丧失突变体X900的菌丝蛋白进行双向电泳分析和比较,对二者的差异表达蛋白进行鉴定和分析。【结果】采用TCA/丙酮法-SDS/酚蛋白抽提法及17cm pH 4.0~7.0IPG胶条,对苹果树腐烂病菌菌丝蛋白进行双向电泳可以得到理想的蛋白图谱。利用该体系对苹果树腐烂病菌野生型菌株03-8及其致病力丧失突变体菌株X900的菌丝总蛋白进行双向电泳分析发现,2个菌株共存在27个差异表达蛋白点,其中有15个显著差异表达蛋白点;质谱分析结果表明,突变体X900中缺失的2个蛋白点4633和8518分别为丝氨酸苏氨酸蛋白激酶和假想蛋白,其他13个显著差异表达蛋白点分别为1个微管蛋白、1个线粒体内膜转移酶亚基、1个丙酮酸脱羧氧化酶、1个腺苷高半胱氨酸激酶、2个压力诱导的磷蛋白、1个己糖磷酸肌醇激酶、1个热激蛋白和5个假想蛋白。GO分析表明,该差异蛋白主要参与能量代谢、胁迫应答、细胞结构组成和未知功能。【结论】建立了适合苹果树腐烂病菌菌丝蛋白的双向电泳体系,并通过该体系分析获得了不同致病力材料的一系列差异表达蛋白。 展开更多
关键词 蛋白提取 双向电泳 蛋白质组 质谱鉴定 苹果树腐烂病菌
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质谱快速鉴定血培养阳性标本的方法研究 被引量:4
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作者 宋启飞 刘敏雪 +3 位作者 李梦娇 刘雅 邓劲 谢轶 《中国现代医学杂志》 CAS 2018年第35期23-26,共4页
目的建立快速、精准的细菌质谱鉴定方法,以缩短血培养阳性的实验周转时间。方法共收集血培养阳性瓶91个(活性炭吸附瓶),采集培养液分别转种肉汤和血平板增菌培养4 h后,用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行菌种鉴定... 目的建立快速、精准的细菌质谱鉴定方法,以缩短血培养阳性的实验周转时间。方法共收集血培养阳性瓶91个(活性炭吸附瓶),采集培养液分别转种肉汤和血平板增菌培养4 h后,用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行菌种鉴定。以血平板培养24 h的质谱鉴定结果为对照,比较2种方法细菌质谱鉴定符合率。结果 91株细菌包括51株革兰阴性菌和40株革兰阳性菌。4 h肉汤增菌法和4 h血平板培养法鉴定到种的符合率分别为46.15%和89.01%,无鉴定结果率分别为47.25%和3.30%,错误鉴定率分别为3.30%和4.40%。2种方法鉴定到种的符合率比较,差异有统计学意义(P <0.05),4 h血平板培养法鉴定到种的符合率高于4 h肉汤增菌法。2种方法对革兰阴性菌鉴定到种的符合率分别为58.82%和94.12%,差异有统计学意义(P <0.05),4 h血平板培养法高于4 h肉汤增菌法。2种方法对革兰阳性菌鉴定到种的符合率分别为30.00%和82.50%,差异有统计学意义(P <0.05),4 h血平板培养法高于4 h肉汤增菌法。结论 4 h血平板培养质谱鉴定法可快速鉴定血培养阳性标本中的病原菌。 展开更多
关键词 培养 MALDI-TOFms/质谱法 生物学鉴定法 符合率
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KMnO4氧化降解雌酮反应动力学与氧化产物 被引量:2
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作者 庞素艳 鲁雪婷 +2 位作者 江进 袁立鹏 马军 《哈尔滨工业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第2期38-43,共6页
为探讨KMnO_4氧化降解雌酮(E1)的效能和反应机理,在假一级条件下,研究KMnO_4氧化降解E1的动力学规律,利用三重四级杆串联线性离子阱液相-质谱联用仪(LC-MS/MS)对KMnO_4氧化降解E1的产物进行分析.结果表明,KMnO_4氧化降解E1符合假一级动... 为探讨KMnO_4氧化降解雌酮(E1)的效能和反应机理,在假一级条件下,研究KMnO_4氧化降解E1的动力学规律,利用三重四级杆串联线性离子阱液相-质谱联用仪(LC-MS/MS)对KMnO_4氧化降解E1的产物进行分析.结果表明,KMnO_4氧化降解E1符合假一级动力学规律,且假一级动力学常数Kobs(s-1)随着KMnO_4浓度的增加呈线性增加,二级反应动力学常数k(L·mol^(-1)·s^(-1))随着pH的升高而增大.通过与HOCl和O_3氧化E1对比,在中性p H附近,KMnO_4氧化E1的二级反应动力学常数与HOCl相当,但远低于O_3.然而,实际水体中KMnO_4的除污染效能明显高于HOCl和O_3,主要是由于HOCl和O_3在实际水体中的消耗速度比较快,有效剩余浓度低,而KMnO_4在实际水体中的消耗速度比较慢.LC-MS/MS测定KMnO_4氧化降解E1产物的结果表明,KMnO_4易氧化进攻E1苯环上的活性位酚羟基,形成一系列羟基化、醌型、羧酸化芳香开环产物,并且有效降低其内分泌干扰活性. 展开更多
关键词 KMNO4 雌酮 反应动力学 LC-ms/ms 氧化产物
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油菜蜂花粉中黄酮的分离纯化及结构鉴定 被引量:7
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作者 陈莲君 徐德平 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2012年第3期119-121,共3页
研究油菜蜂花粉黄酮的组成,采用乙醇提取,石油醚萃取脱脂和柱层析分离方法对油菜蜂花粉黄酮进行研究,得3个黄酮类化合物,经1 H-NMR、13 C-NMR,分别鉴定出3个黄酮类化合物化学结构为山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β-D吡喃... 研究油菜蜂花粉黄酮的组成,采用乙醇提取,石油醚萃取脱脂和柱层析分离方法对油菜蜂花粉黄酮进行研究,得3个黄酮类化合物,经1 H-NMR、13 C-NMR,分别鉴定出3个黄酮类化合物化学结构为山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β-D吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷和槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,与HPLC-MS检测结果一致。 展开更多
关键词 油菜蜂花粉 黄酮 分离 结构鉴定 HPLC-ms 核磁共振 质谱分析
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栓皮栎和麻栎抽提物的化学成分分析 被引量:2
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作者 陈媛 晏婷婷 +3 位作者 杨昇 付宗营 李改云 任海青 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第4期191-198,共8页
【目的】分析栓皮栎和麻栎不同使用部位抽提物含量及其化学组成特点,为栎类木材加工工艺和实际生产提供应用性指导,为我国林木资源充分、合理、高附加值利用提供新的思路和科学依据。【方法】以河南地区栓皮栎和麻栎为研究对象,采用我... 【目的】分析栓皮栎和麻栎不同使用部位抽提物含量及其化学组成特点,为栎类木材加工工艺和实际生产提供应用性指导,为我国林木资源充分、合理、高附加值利用提供新的思路和科学依据。【方法】以河南地区栓皮栎和麻栎为研究对象,采用我国木材化学分析标准,结合傅里叶红外(FTIR)和气相质谱联用(GC-MS)方法,对树干不同高度上树皮、心边材冷/热水抽提物、1%NaOH抽提物、苯醇抽提物含量和组成进行详细分析。【结果】对于树干不同高度上树皮、心边材冷/热水抽提物、1%NaOH抽提物含量,栓皮栎明显高于麻栎;在同一种栎类木材中,树皮抽提物含量最高,边材次之,心材最低;抽提物含量在树干高度上呈两端高、中间低的趋势;对于苯醇抽提物含量,栓皮栎树皮远高于心边材和麻栎树皮,但2种栎类木材心边材差异较小且并未随树高呈特定变化规律。栓皮栎和麻栎树皮、心边材FTIR图谱区别明显,根据图谱吸收峰强度判断,栎类木材树皮中可能含有较多的醇类、脂肪酸、芳香族类和烷烃结构化合物,心边材中应还有较多的酸类、醇类及不饱和烃化物。GC-MS联用分析结果显示,树皮、心边材中均含有少量烷烃醇、酯类及不饱和烯类,其中,树皮中含有软木三萜酮及其同分异构体,心边材中含有γ-谷甾醇等化学物质。【结论】栓皮栎和麻栎树皮、心边材抽提物主要化学成分存在较大的含量差异和一定的成分差异;树干高度对2种栎类木材抽提物含量也有一定影响,中间部分累积较多的冷/热水、1%NaOH抽提物,但并没有发生明显成分差异。在木材实际加工和生产中,应充分考虑2种栎类木材树皮、心边材抽提物含量和性质差异,提供合理、全面、高价值的加工利用方案。 展开更多
关键词 栓皮栎 麻栎 抽提物含量 气相质谱联用 化学成分
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