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健脾益气方含药血清通过Caspase-3/Vimentin促进人肝癌MHCC-97H细胞凋亡 被引量:16
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作者 卓少元 谢金玲 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第24期161-166,共6页
目的:观察健脾益气方含药血清对人MHCC-97H肝癌细胞凋亡的影响,探讨凋亡过程中波形蛋白(Vimentin)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的变化及其意义。方法:采用血清药理学方法,并结合Vimentin裂解剂和Caspase抑制剂,观察7.5%... 目的:观察健脾益气方含药血清对人MHCC-97H肝癌细胞凋亡的影响,探讨凋亡过程中波形蛋白(Vimentin)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的变化及其意义。方法:采用血清药理学方法,并结合Vimentin裂解剂和Caspase抑制剂,观察7.5%,15%,30%体积浓度健脾益气方含药血清干预对肝癌细胞增殖、侵袭、凋亡,及Vimentin,Caspase-3,聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP-1)蛋白表达的影响。结果:健脾益气方中、高剂量含药血清均可以降低MHCC-97H肝癌细胞中Vimentin蛋白表达(P<0.01),其下调程度与肝癌细胞的增殖抑制率、侵袭抑制率和凋亡率趋势一致;Vimentin裂解组细胞增殖抑制率、侵袭抑制率和凋亡率在各组中均最高;Caspase抑制组细胞的增殖抑制率、侵袭抑制率和凋亡率在各组中均最低。与空白血清组比较,健脾益气方中、高剂量组,Vimentin裂解组Caspase-3蛋白表达上调(P<0.01),Vimentin,PARP-1蛋白表达下调(P<0.01),且PARP-1蛋白出现了裂解片段;Caspase抑制组Caspase-3表达下调(P<0.01),Vimentin,PARP-1蛋白表达无统计学差异,PARP-1无蛋白裂解片段出现。结论:15%的健脾益气方含药血清对人肝癌细胞MHCC-97H的干预效果最佳,可能通过Caspase-3下调细胞中Vimentin蛋白表达,抑制肝癌细胞的增殖与侵袭;同时可能利用Caspase-3/Vimentin形成的正反馈促凋亡信号诱导肝癌细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 健脾益气方 mhcc-97h肝癌细胞 波形蛋白 半胱氨酸蛋白酶-3 凋亡 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1
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红花黄色素对人肝癌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响 被引量:7
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作者 黄玲玲 傅缨 +3 位作者 资晓飞 李媛 熊耀斌 曾志涛 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1061-1064,共4页
目的:探讨红花黄色素(safflor yellow,SY)对MHCC-97H细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。方法:选用MHCC-97H细胞体外培养至对数生长期,加入不同浓度SY(0、0.03125、0.0625、0.125、0.25、0.5 mg/L)进行体外培养,并设顺铂阳性对照组(终浓度0.... 目的:探讨红花黄色素(safflor yellow,SY)对MHCC-97H细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。方法:选用MHCC-97H细胞体外培养至对数生长期,加入不同浓度SY(0、0.03125、0.0625、0.125、0.25、0.5 mg/L)进行体外培养,并设顺铂阳性对照组(终浓度0.5μg/ml),分别干预24 h、48 h及72 h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察SY对细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪观察细胞周期及凋亡率的变化,Western–blotting检测Bax、Bcl-2蛋白表达情况。结果:MTT显示SY对人肝癌细胞MHCC-97H增殖有一定的抑制作用,与SY浓度及作用时间有相关性;流式细胞术显示,细胞凋亡率随SY浓度增加有上升趋势,细胞周期无明显变化;Western-blotting显示,随着SY浓度的增加,Bax表达增加,Bcl-2表达减少,而Bcl-2/bax比值下降。结论:SY对MHCC-97H细胞的生长有一定的抑制作用,但对细胞周期无明显阻滞作用,其可诱导该细胞凋亡,下调Bcl-2/Bax比值,可能为其促凋亡机制之一。 展开更多
关键词 红花黄色素 mhcc-97h细胞 细胞凋亡 细胞周期 BAX BCL-2
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FBXW7/MCM7信号轴介导肝癌细胞增殖的研究
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作者 李英 王兴 +3 位作者 李永宁 刘鹏 刘松柏 潘耀振 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第2期191-197,共7页
目的 探讨FBXW7靶向调控MCM7表达对肝癌细胞增殖的影响。方法 采用免疫共沉淀法(CoIP)和免疫荧光染色法(IF),分析肝癌细胞系MHCC-97H中FBXW7与MCM7的互作关系;通过慢病毒感染过表达FBXW7和(或) MCM7,小干扰RNA技术下调FBXW7和(或) MCM7... 目的 探讨FBXW7靶向调控MCM7表达对肝癌细胞增殖的影响。方法 采用免疫共沉淀法(CoIP)和免疫荧光染色法(IF),分析肝癌细胞系MHCC-97H中FBXW7与MCM7的互作关系;通过慢病毒感染过表达FBXW7和(或) MCM7,小干扰RNA技术下调FBXW7和(或) MCM7的表达;采用Western blot检测FBXW7对MCM7蛋白表达的影响,CCK-8实验检测肝癌细胞的增殖活性,EdU细胞增殖检测分析肝癌细胞的增殖能力,平板克隆实验分析肝癌细胞的集落形成能力。结果 在MHCC-97H细胞中,FBXW7与MCM7存在互作关系:过表达FBXW7抑制了MCM7的蛋白表达水平、并抑制了肝癌MHCC-97H细胞的增殖(P <0.05),在过表达FBXW7的基础上增加MCM7的表达后,细胞增殖能力提高(P <0.05);下调FBXW7后细胞中MCM7表达增加、细胞增殖能力增强(P <0.05),而下调FBXW7的同时干扰MCM7表达后,细胞增殖能力减弱(P <0.05)。结论 FBXW7能抑制肝癌细胞增殖,其机制与负向调节肝癌细胞中促癌蛋白MCM7的表达水平有关。 展开更多
关键词 肝癌 F-box和WD重复结构域蛋白7 微小染色体维持蛋白-7 细胞增殖 mhcc-97h细胞
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抑制UHRF1基因表达对肝癌细胞MHCC-97H迁移的影响及相关机制 被引量:1
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作者 杨从容 王军 +4 位作者 张萍 常靓 赵学涛 曹彦坤 边晨峰 《现代中西医结合杂志》 CAS 2017年第21期2284-2286,2301,共4页
目的探讨通过RNA干扰抑制泛素样含PHD和环指域1(UHRF1)基因表达对肝癌MHCC-97H细胞迁移的影响及可能机制。方法合成UHRF1基因特异性小发夹RNA(shRNA),构建稳定干扰UHRF1基因表达的重组慢病毒LV-sh UHRF1(以空载体慢病毒LV-sh NC作为阴... 目的探讨通过RNA干扰抑制泛素样含PHD和环指域1(UHRF1)基因表达对肝癌MHCC-97H细胞迁移的影响及可能机制。方法合成UHRF1基因特异性小发夹RNA(shRNA),构建稳定干扰UHRF1基因表达的重组慢病毒LV-sh UHRF1(以空载体慢病毒LV-sh NC作为阴性对照),并将其感染MHCC-97H细胞。实时荧光定量PCR法检测UHRF1 mRNA在MHCC-97H细胞中表达情况,蛋白质印迹法检测UHRF1、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达情况,Transwell法检测MHCC-97H细胞迁移能力。结果 LV-sh UHRF1组UHRF1mRNA和蛋白表达量及MMP-9、VEGF蛋白表达量均明显低于LV-sh NC组(P均<0.05),迁移细胞数明显少于LV-sh NC组(P<0.05)。结论通过慢病毒介导的RNA干扰技术抑制UHRF1的表达后可抑制MHCC-97H细胞的迁移能力,机制可能与影响MMP-9和VEGF的表达有关。 展开更多
关键词 RNA干扰 UhRF1基因 肝癌 细胞迁移 mhcc-97h细胞
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白花蛇舌草总黄酮对TGF-β1诱导的肝癌MHCC97-H细胞EMT的逆转作用及其机制 被引量:22
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作者 张彦兵 朱娇 +3 位作者 肖菊香 郭亚焕 廖子君 徐瑞 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期279-282,306,共5页
目的探讨白花蛇舌草总黄酮(FOD)对TGF-β1诱导肝癌细胞MHCC97-H上皮细胞间质转化(EMT)的逆转作用及其相关机制。方法用TGF-β1诱导MHCC97-H细胞建立EMT模型,再将其分为5组:正常对照组、TGF-β1组、TGF-β1+FOD组、TGF-β1+5-FU组及TGF-... 目的探讨白花蛇舌草总黄酮(FOD)对TGF-β1诱导肝癌细胞MHCC97-H上皮细胞间质转化(EMT)的逆转作用及其相关机制。方法用TGF-β1诱导MHCC97-H细胞建立EMT模型,再将其分为5组:正常对照组、TGF-β1组、TGF-β1+FOD组、TGF-β1+5-FU组及TGF-β1+FOD+5-FU组,分别干预48h,Transwell侵袭小室法检测细胞体外侵袭能力,Western blot法检测各组细胞中E-cadherin、vimentin蛋白的表达。结果与正常细胞形态相比,TGF-β1诱导后细胞呈现明显的长梭形,且侵袭能力增强(P=0.02);给予药物处理后,TGF-β1+FOD组、TGF-β1+5-FU组细胞的穿透能力较TGF-β1组减弱(P=0.03、P=0.02),且联合用药组减弱程度更加明显(P=0.01);Western blot结果显示,TGF-β1组细胞中E-cadherin蛋白表达显著降低(P=0.01),vimentin蛋白的表达显著增加(P=0.01),TGF-β1+FOD组、TGF-β1+5-FU组E-cadherin蛋白表达有所上调(P=0.03、P=0.02),vimentin蛋白的表达有所下调(P=0.04、P=0.03),且联合组变化更为显著(P=0.01)。结论 FOD能够逆转TGF-β1诱导的肝癌MHCC97-H细胞的上皮间质转化,其机制可能与其抑制TGF-β1诱导的E-cadherin蛋白下调及上皮细胞间质转化相关。 展开更多
关键词 mhcc97-h细胞 TGF-Β1 上皮间质转化 白花蛇舌草总黄酮 侵袭 E-CADhERIN VIMENTIN
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白花蛇舌草总黄酮对肝癌MHCC97-H细胞增殖的抑制作用 被引量:14
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作者 张彦兵 王天昶 +4 位作者 朱娇 郭亚焕 肖菊香 廖子君 阮之平 《现代肿瘤医学》 CAS 2015年第19期2716-2719,共4页
目的:观察白花蛇舌草总黄酮(FOD)对肝癌MHCC97-H细胞增殖和凋亡的影响。方法:将生长良好的细胞分为空白组、FOD组、5-FU组及联合组四组,分别干预48小时,观察细胞的形态,MTT法检测其对肿瘤细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测FOD对MHCC97-... 目的:观察白花蛇舌草总黄酮(FOD)对肝癌MHCC97-H细胞增殖和凋亡的影响。方法:将生长良好的细胞分为空白组、FOD组、5-FU组及联合组四组,分别干预48小时,观察细胞的形态,MTT法检测其对肿瘤细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测FOD对MHCC97-H肝癌细胞凋亡的影响。结果:FOD对肝癌MHCC97-H细胞有显著的抑制作用,并且具有剂量和时间依赖性,不但能使细胞密度减少,细胞变小,核固缩,而且能显著抑制人肝癌MHCC97-H细胞的增殖并诱导该细胞的凋亡(P<0.05)。结论:白花蛇舌草总黄酮能够通过抑制肿瘤细胞生长、促进肿瘤细胞凋亡,明显抑制肝癌MHCC97-H细胞的增殖。 展开更多
关键词 白花蛇舌草总黄酮 mhcc97 - h 细胞 细胞凋亡
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穿心莲内酯对人肝癌细胞MHCC97H增殖的影响及其机制研究 被引量:11
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作者 刘红英 王协奇 +4 位作者 袁丽娜 刘影 彭燕 罗碧怡 何青莲 《广州中医药大学学报》 CAS 2019年第3期395-402,共8页
【目的】观察穿心莲内酯(Andro)对人肝癌细胞MHCC97H增殖的影响及作用机制,探讨其体外抗肝癌作用。【方法】采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Andro不同浓度(5、10、20、30、40、50μmol/L)及不同处理时间(24、48、72 h)对MHCC97H细胞增殖... 【目的】观察穿心莲内酯(Andro)对人肝癌细胞MHCC97H增殖的影响及作用机制,探讨其体外抗肝癌作用。【方法】采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Andro不同浓度(5、10、20、30、40、50μmol/L)及不同处理时间(24、48、72 h)对MHCC97H细胞增殖的影响;采用Annexin V—碘化丙啶(PI)双染法、Hoechst 33342染色法观察细胞凋亡;采用流式细胞术检测细胞周期分布;采用蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测凋亡相关蛋白如Bax、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、裂解型胱天蛋白酶3(cleaved-caspase-3)、剪切型聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved-PAPR),周期相关蛋白如周期素B1(cyclin B1)、周期素依赖性激酶1(CDK1)及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白如m TOR、p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)的表达。【结果】穿心莲内酯5、10、20、30、40、50μmol/L组24、48、72 h MHCC97H细胞增殖率下降,且随着Andro浓度、处理时间的增加而逐渐降低。Andro 25、50μmol/L组12、24、48 h MHCC97H细胞凋亡率均升高,呈浓度和时间依赖性。Andro 50μmol/L组48 h MHCC97H细胞发生G2/M期阻滞。与溶剂对照组比较,Andro 50μmol/L组中促凋亡蛋白Bax、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP表达升高(P<0.05或P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低(P<0.01),周期蛋白cyclin B1和CDK1表达及mTOR信号通路蛋白mTOR、p70S6K的磷酸化水平均下降(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。【结论】Andro可能通过调控MHCC97H细胞凋亡相关蛋白Bax、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP、Bcl-2及周期相关蛋白cyclin B1、CDK1的表达及抑制mTOR-p70S6K信号通路的激活,促进细胞凋亡及细胞周期阻滞,从而发挥体外抗肝癌作用。 展开更多
关键词 穿心莲内酯 肝癌 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡 MTOR信号通路 mhcc97h细胞
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猫爪草皂苷对高转移肝癌细胞株HCCLM3及MHCC97-H增殖的影响 被引量:10
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作者 刘帅 梁铁军 +1 位作者 王爱武 高桂新 《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第6期8-10,共3页
目的观察猫爪草皂苷(RRTS)对人高转移肝癌细胞株HCCLM3、MHCC97-H增殖的影响。方法将对数生长期HCCLM3、MHCC97-H细胞分为两组。RRTS组分别采用50、100、200、400μg/m L浓度的RRTS干预,每浓度5个复孔;5-FU组采用50μg/m L的5-FU干预,... 目的观察猫爪草皂苷(RRTS)对人高转移肝癌细胞株HCCLM3、MHCC97-H增殖的影响。方法将对数生长期HCCLM3、MHCC97-H细胞分为两组。RRTS组分别采用50、100、200、400μg/m L浓度的RRTS干预,每浓度5个复孔;5-FU组采用50μg/m L的5-FU干预,作用后72 h采用MTT法测定两组细胞增殖情况,倒置显微镜下观察细胞形态变化。结果 RRTS组各浓度对HCCLM3、MHCC97-H肿瘤细胞株的生长均有不同程度的抑制作用,随RRTS浓度增加,抑制作用明显增强,呈量—效依赖关系(P均<0.05);400μg/m L对两种细胞的生长抑制率与5-FU组比较差异无统计学意义。倒置显微镜下观察,两种细胞株经RRTS处理后,细胞密度降低,细胞相互分离,贴壁脱落,出现片状无细胞生长区,并见细胞碎片,细胞变圆,体积减小,核固缩,核颜色加深,折光性增强,随着RRTS剂量增加,这种变化更加明显。400μg/m L浓度的RRTS对肿瘤细胞的生长抑制作用与5-FU组相似。结论RRTS对HCCLM3、MHCC97-H细胞生长均有抑制作用。 展开更多
关键词 猫爪草 皂苷 肝细胞癌 hCCLM3细胞 mhcc97-h细胞 细胞增殖
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联苯双酯抗人高转移肝癌细胞株MHCC97-H侵袭转移的作用及其机制研究 被引量:8
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作者 孙华 刘耕陶 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1464-1469,共6页
背景与目的:侵袭转移是肝细胞肝癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)预后差,死亡率高的重要原因之一。抑制肝癌细胞的侵袭转移是降低HCC发展和死亡率的重要策略。联苯双酯(dimethyldicarboxylatebiphenyl,DDB)是临床用于治疗肝炎的老药,本... 背景与目的:侵袭转移是肝细胞肝癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)预后差,死亡率高的重要原因之一。抑制肝癌细胞的侵袭转移是降低HCC发展和死亡率的重要策略。联苯双酯(dimethyldicarboxylatebiphenyl,DDB)是临床用于治疗肝炎的老药,本研究旨在观察DDB对人肝癌细胞的粘附和侵袭是否具有抑制潜力,并分析其可能的作用机制。方法:以人高转移肝癌细胞株MHCC97-H细胞为研究对象,MTT法检测DDB对MHCC97-H细胞的细胞毒作用及其对细胞与层粘连蛋白(laminin,LN)、纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)粘附的影响;Transwell细胞培养小室观察DDB对细胞侵袭能力的影响;逆转录聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)分析DDB对血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)、尿激酶型纤溶酶原激活物受体(urokinase-typeplasminogenactivatorreceptor,uPAR)、nm23-H1mRNA表达的影响;ELISA法分析DDB对甲胎蛋白(alphafetoprotein,AFP)分泌的影响;流式细胞仪观察DDB对AFP表达的影响。结果:DDB在对细胞无明显毒性的浓度下(10、50和100μmol/L),能够明显抑制高转移人肝癌细胞MHCC97-H与FN、LN的粘附;50和100μmol/LDDB能够抑制MHCC97-H细胞穿透人工基底膜的侵袭能力,抑制率分别为25.8%和32.3%,并能降低MHCC97-H细胞VEGF、nm23-H1及uPARmRNA的表达,50、100和200μmol/LDDB对MHCC97-H细胞AFP的分泌有明显抑制作用,抑制率分别为16.5%、17.5%和48.5%,DDB亦能降低AFP的表达。结论:DDB在无毒浓度下,对人高转移肝癌细胞株MHCC97-H细胞的侵袭转移有明显的抑制作用,该作用可能与其抑制VEGF和uPAR基因表达有关。 展开更多
关键词 联苯双酯(DDB) 肝肿瘤 mhcc97-h细胞 侵袭 转移
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紫花牡荆素通过miR-148a-3p/Wnt1信号通路抑制肝癌MHCC97H细胞的迁移和侵袭 被引量:2
10
作者 娄磊 王靓厚 +1 位作者 王智 李翔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期868-875,共8页
目的用紫花牡荆素(casticin,CAS)处理MHCC97H细胞,观察其迁移和侵袭能力的变化,并初步探讨CAS的分子作用机制。方法CCK-8试剂盒检测不同浓度CAS对MHCC97H细胞活力的影响;分组开展细胞迁移和侵袭实验,评估MHCC97H细胞的迁移和侵袭能力;... 目的用紫花牡荆素(casticin,CAS)处理MHCC97H细胞,观察其迁移和侵袭能力的变化,并初步探讨CAS的分子作用机制。方法CCK-8试剂盒检测不同浓度CAS对MHCC97H细胞活力的影响;分组开展细胞迁移和侵袭实验,评估MHCC97H细胞的迁移和侵袭能力;逆转录荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CAS处理后,MHCC97H细胞的miR-148a-3p和Wnt1 mRNA表达变化;迁移侵袭相关蛋白(MMP2、MMP9)和Wnt1蛋白表达量采用Western blot检测;Dual-Luciferase报告基因检测miR-148a-3p与Wnt13′-UTR的结合情况。结果CAS明显抑制MHCC97H细胞的生存活力,其对这种细胞的IC_(50)约为10.0μmol·L^(-1),亚细胞毒浓度的CAS(3.0μmol·L^(-1))可减弱这种细胞的迁移和侵袭能力;miR-148a-3p mimic或CAS均能抑制MHCC97H细胞迁移和侵袭能力,且两者联合处理后的抑制作用强于单独使用;过表达Wnt1能有效减弱CAS的抑制作用;CAS能明显上调MHCC97H细胞miR-148a-3p表达,同时Wnt1、MMP2和MMP9的表达呈现下降;Dual-Luciferase报告基因发现,miR-148a-3p可以直接靶向Wnt13′-UTR。结论CAS可通过miR-148a-3p/Wnt1信号通路减弱肝癌细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 紫花牡荆素 肝癌 mhcc97h细胞 miR-148a-3p/Wnt1信号通路 细胞迁移 细胞侵袭
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臭牡丹含药血清抑制人肝癌MHCC97-H细胞侵袭与迁移的作用及其机制研究 被引量:6
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作者 胡琦 朱定耀 +3 位作者 谭小宁 李勇敏 蒋佳红 朱克俭 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第21期2691-2694,共4页
目的探讨臭牡丹含药血清对人肝癌细胞(MHCC97-H细胞)迁移与侵袭能力的影响及其机制。方法按照体重将SD大鼠随机分成4组:模型组和低、中、高3个剂量实验组,每组5只。低、中、高3个剂量实验组给予臭牡丹提取物0.55,1.09,2.18 g·kg^-1... 目的探讨臭牡丹含药血清对人肝癌细胞(MHCC97-H细胞)迁移与侵袭能力的影响及其机制。方法按照体重将SD大鼠随机分成4组:模型组和低、中、高3个剂量实验组,每组5只。低、中、高3个剂量实验组给予臭牡丹提取物0.55,1.09,2.18 g·kg^-1;模型组给予0.9%Na Cl,每日灌胃2次,连续3 d。腹主动脉取血后分离血清,制备各组含药血清,体外培养MHCC97-H细胞。Transwell实验检测细胞的迁移能力;免疫印迹法检测磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路中的磷酸Akt(p-Akt)和PI3K相关蛋白表达的影响。结果模型组和低、中、高3个剂量实验组的迁移细胞数分别为(256.0±28.6),(181.0±15.7),(118.0±14.7)和(66.0±12.4)个,3个实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。模型组和低、中、高3个剂量实验组的PI3K蛋白相对表达量(灰度值)分别为0.68±0.03,0.65±0.02,0.48±0.01和0.15±0.01;上述这4组的p-Akt蛋白相对表达量(灰度值)分别为0.37±0.04,0.33±0.02,0.25±0.01和0.09±0.01,中、高2个剂量实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论臭牡丹含药血清具有抑制肝癌MHCC97-H细胞迁移和侵袭的作用,其作用机制可能与PI3K/Akt信号通路相关。 展开更多
关键词 臭牡丹 人肝癌细胞mhcc97-h 侵袭 迁移 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路
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柯里拉京对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量:5
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作者 张志杨 朱磊 +1 位作者 贾平 朱海杭 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第21期153-160,共8页
目的:研究柯里拉京对转移性人肝癌细胞SMMC7721,MHCC97H增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其作用机制。方法:分别通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,划痕实验,transwell实验检测不同浓度的柯里拉京对肝癌细胞SMMC7721,MHCC97H的增殖、迁移和... 目的:研究柯里拉京对转移性人肝癌细胞SMMC7721,MHCC97H增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其作用机制。方法:分别通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,划痕实验,transwell实验检测不同浓度的柯里拉京对肝癌细胞SMMC7721,MHCC97H的增殖、迁移和侵袭的作用;通过细胞免疫荧光法观察不同浓度柯里拉京对肝癌细胞SMMC7721,MHCC97H肌动蛋白纤维的分布、丝状和片状伪足形成等的影响;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)研究柯里拉京抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用机制。结果:MTT实验显示,柯里拉京抑制人肝癌细胞SMMC7721,MHCC97H增殖的半数抑制浓度(IC50)分别为388.67,314.42μmol·L^(-1)。划痕实验显示,200μmol·L^(-1)柯里拉京对SMMC7721细胞迁移的抑制作用最强,迁移率为12.16%;120μmol·L^(-1)柯里拉京对MHCC97H细胞迁移的抑制作用最强,迁移率为9.84%。Transwell实验显示,200μmol·L^(-1)柯里拉京对SMMC7721细胞和MHCC97H细胞侵袭的抑制作用最强,侵袭的细胞数分别为(40.44±3.01),(36.69±3.36)个。细胞免疫荧光显示,柯里拉京可使SMCC7771,MHCC97H中F-肌动蛋白(F-actin)骨架发生重塑,浓度增高,细胞边缘的丝状伪足和片状伪足形成逐渐减少、张力纤维数目逐渐增多,这种影响在SMMC7721为200μmol·L^(-1)时最显著,MHCC97H为120μmol·L^(-1)最明显。Western blot显示,柯里拉京能明显下调肝癌细胞SMMC7721和MHCC97H上皮-间充质转分化(EMT)的钙黏附蛋白-N(N-Cad)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达(P<0.05),下调有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的磷酸化-细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白表达(P<0.05),上调磷酸化-p38(p-p38)蛋白表达(P<0.05)。结论:柯里拉京能抑制2种人肝癌细胞SMMC7721,MHCC97H的增殖、迁移及侵袭,其作用机制可能是通过抑制EMT通路中的N-Cad,Vimentin,MAPK信号通路p-ERK蛋白表达和上调p-p38蛋白表达,从而调控细胞骨架重塑来实现的。 展开更多
关键词 柯里拉京 肝癌细胞SMMC7721 肝癌细胞mhcc97h 增殖 迁移 侵袭
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靶向整合于MHCC97-H细胞的HBx基因shRNA表达载体的构建和鉴定 被引量:4
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作者 王文龙 孙会卿 +3 位作者 杨旭 贺兴鄂 雷建华 童明 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期445-447,451,共4页
目的构建靶向整合于人肝癌MHCC97-H细胞乙型肝炎病毒x基因(HBxgene)基因的shRNA真核载体。方法依据从人肝癌细胞株MHCC97-H中克隆的HBx基因序列,设计合成X169、X220及MOCK(无关对照)3对寡核酸,经退火成互补双链并克隆至pGenesil-Ⅰ载体... 目的构建靶向整合于人肝癌MHCC97-H细胞乙型肝炎病毒x基因(HBxgene)基因的shRNA真核载体。方法依据从人肝癌细胞株MHCC97-H中克隆的HBx基因序列,设计合成X169、X220及MOCK(无关对照)3对寡核酸,经退火成互补双链并克隆至pGenesil-Ⅰ载体;经酶切、PCR和测序鉴定;将鉴定的shRNA质粒脂质体转染MHCC97-H细胞,流式细胞分析转染效率。结果酶切、PCR及测序证实pshRNA-X169/X220/MOCK质粒构建符合设计,转染48h后MHCC97-H细胞可激发绿色荧光,pshRNA-X220转染效率最低。结论成功构建靶向整合于人肝癌细胞HBVx基因特异性shRNA表达载体,并成功转染人肝癌细胞株MHCC97-H细胞,为沉默HBx基因实验性肝癌基因治疗奠定基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 短发夹RNA 乙型肝炎病毒X基因 mhcc97-h细胞 整合
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狼毒大戟提取物对人肝癌细胞上皮间质化的影响 被引量:3
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作者 杨勤 杨德全 龚伟 《现代医药卫生》 2018年第17期2625-2628,共4页
目的探讨不同提取部位的狼毒大戟对人肝癌细胞MHCC97H上皮间质化(EMT)的影响。方法采用乙醇回流提取法对狼毒大戟进行萃取,获得乙酸乙酯、正丁醇、石油醚、氯仿等4个提取部位。采用四甲基偶氮唑盐法筛选抗肿瘤有效部位。利用划痕试验和T... 目的探讨不同提取部位的狼毒大戟对人肝癌细胞MHCC97H上皮间质化(EMT)的影响。方法采用乙醇回流提取法对狼毒大戟进行萃取,获得乙酸乙酯、正丁醇、石油醚、氯仿等4个提取部位。采用四甲基偶氮唑盐法筛选抗肿瘤有效部位。利用划痕试验和Transwell小室试验检测有效提取部位对人高转移肝癌细胞MHCC97H迁移和侵袭能力的影响。利用蛋白质印迹法检测狼毒大戟提取物对MHCC97H肝癌细胞中E-cadherin和Vimentin蛋白表达水平的影响。结果狼毒大戟乙酸乙酯、正丁醇提取部位对MHCC97H均有抑制作用,且呈现一定的时间和剂量依赖性。乙酸乙酯提取部位对细胞的抑制作用强于正丁醇。而石油醚和氯仿提取部位对MHCC97H无明显的抑制作用。划痕试验和Transwell小室试验显示,狼毒大戟乙酸乙酯和正丁醇提取部位能够有效抑制MHCC97H肝癌细胞的迁移和侵袭能力;两者的抑制能力随着浓度升高而逐渐增强;两者能提高MHCC97H肝癌细胞中E-cadherin蛋白的表达,抑制细胞中Vimentin蛋白的表达。结论狼毒大戟乙酸乙酯提取部位是抗肝癌增殖和侵袭转移作用的主要活性部位,其作用可能与调节E-cadherin和Vimentin表达有关。 展开更多
关键词 狼毒大戟 mhcc97h细胞 上皮间质化 E-钙黏蛋白 波形蛋白
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卵泡抑素样蛋白5对HCCLM3细胞迁移和侵袭的影响 被引量:2
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作者 谭鸿霞 黄健云 +1 位作者 向蓉 石永杰 《中华实用诊断与治疗杂志》 2018年第11期1056-1058,共3页
目的探讨卵泡抑素样蛋白5(follistatin-like 5,FSTL5)在不同肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞株中的表达及在HCCLM3细胞迁移、侵袭中的作用。方法取对数生长期HCC细胞(SMMC-7721、HepG2、HCCLM3、MHCC97H、PLC)和永生化正常... 目的探讨卵泡抑素样蛋白5(follistatin-like 5,FSTL5)在不同肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞株中的表达及在HCCLM3细胞迁移、侵袭中的作用。方法取对数生长期HCC细胞(SMMC-7721、HepG2、HCCLM3、MHCC97H、PLC)和永生化正常肝上皮细胞LO2,采用实时荧光定量PCR法检测FSTL5mRNA相对表达量。将对数生长期HCCLM3细胞随机分为转染组和对照组,转染组转染FSTL5的表达质粒,对照组转染空白质粒;转染24h,采用实时荧光定量PCR法检测2组HCCLM3细胞FSTL5mRNA相对表达量,划痕愈合试验检测HCCLM3细胞迁移能力,Transwell小室法检测HCCLM3细胞侵袭能力,三维培养实验检测HCCLM3细胞伪足生长情况。结果FSTL5mRNA相对表达量在SMMC-7721(0.37±0.03)、HepG2(0.43±0.03)、HCCLM3(0.19±0.02)、MHCC97H(0.28±0.02)、PLC细胞(0.35±0.01)均低于LO2细胞(1.04±0.04)(P<0.05),且在HCCLM3细胞表达量最低(P<0.05);转染24h,转染组HCCLM3细胞FSTL5mRNA相对表达量(12.04±1.42)明显高于对照组(1.00±0.25)(P<0.05),划痕愈合率[(24.7±2.4)%]、侵袭细胞数目[(11.7±2.3)%]均明显低于对照组[(86.7±3.7)%、(34.7±5.9)%](P<0.05);三维培养实验结果显示,转染组HCCLM3细胞克隆球未见伪足生成,对照组可见少量伪足生成且延展性较好。结论 HCC细胞(SMMC-7721、HepG2、HCCLM3、MHCC97H、PLC)中FSTL5表达明显降低,过表达FSTL5可抑制HCCLM3细胞迁移和侵袭。 展开更多
关键词 肝细胞癌 卵泡抑素样蛋白5 细胞迁移 细胞侵袭 SMMC-7721 hEPG2 hCCLM3 mhcc97h PLC LO2
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CCDC137基因在肝细胞癌组织中表达的临床意义及其对MHCC97H细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量:1
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作者 王芊文 李文华 +4 位作者 王小芳 耿玉庆 赵彬 吴向未 陈雪玲 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期904-910,共7页
目的:分析卷曲螺旋结构域蛋白137(CCDC137)基因在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系,探讨敲低CCDC137基因对肝癌MHCC97H细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载HCC数据集,获得C... 目的:分析卷曲螺旋结构域蛋白137(CCDC137)基因在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系,探讨敲低CCDC137基因对肝癌MHCC97H细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载HCC数据集,获得CCDC137基因表达谱和临床资料信息,利用生物信息学方法分析CCDC137基因在HCC组织中的表达水平与患者临床病理指标的相关性以及对预后的影响;用基因集富集分析(GSEA)预测CCDC137基因在HCC中可能调控的信号通路,用Kaplan-Meier法及Log-Rank检验进行生存分析,并运用Cox比例风险回归模型分析影响患者预后的危险因素。采用小干扰RNA技术抑制肝癌MHCC97H细胞中CCDC137基因的表达,用qPCR法、WB法、CCK-8法及Transwell实验分别检测干扰后细胞CCDC137 mRNA和蛋白表达及其对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:在TCGA数据库检索到的371例HCC患者中,CCDC137 mRNA表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01),其高表达与肿瘤组织学分级、癌组织分期、T分期等存在显著关联(OR=0.014、0.007、0.047,均P<0.05),CCDC137高表达的患者OS明显低于CCDC137基因低表达的患者(P<0.05),多因素Cox回归分析提示CCDC137基因可作为HCC患者的独立预后因子。GSEA结果发现,CCDC137基因高表达的样本存在碱基切除修复和剪接体等多个通路基因集的富集(P<0.01,FDR<0.05)。敲低CCDC137基因后,MHCC97H细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著降低(均P<0.01)。结论:CCDC137基因在HCC组织中高表达,其高表达与HCC的发生发展及预后不良有关。敲低CCDC137基因表达抑制MHCC97H细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 肝细胞癌 卷曲螺旋结构域蛋白137 mhcc97h细胞 增殖 迁移 侵袭 预后
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17-β-雌二醇对人肝细胞癌细胞MHCC97H侵袭转移的作用及其机制 被引量:1
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作者 邹三鹏 沙焕臣 《山西医科大学学报》 CAS 2016年第1期14-18,共5页
目的观察17-β-雌二醇对人MHCC97H肝癌细胞侵袭转移的作用,探讨其相应机制。方法用不同浓度17-β-雌二醇(0,0.1,1,10μmol/L)干预MHCC97H肝癌细胞24 h。Transwell小室法检测17-β-雌二醇干预后MHCC97H肝癌细胞侵袭能力的改变。利用real-... 目的观察17-β-雌二醇对人MHCC97H肝癌细胞侵袭转移的作用,探讨其相应机制。方法用不同浓度17-β-雌二醇(0,0.1,1,10μmol/L)干预MHCC97H肝癌细胞24 h。Transwell小室法检测17-β-雌二醇干预后MHCC97H肝癌细胞侵袭能力的改变。利用real-time PCR和Western blot法检测17-β-雌二醇干预对MHCC97H肝癌细胞中E-cadherin和Vimentin RNA和蛋白表达水平的改变。Western blot检测17-β-雌二醇对MHCC97H细胞中Smad2和p-Smad2蛋白表达水平的影响。结果 17-β-雌二醇能够有效抑制MHCC97H肝癌细胞的侵袭能力,随着浓度的升高抑制能力逐渐增强(P<0.05)。当浓度超过0.1μmol/L时,17-β-雌二醇能够有效抑提高MHCC97H肝癌细胞中E-cadherin的转录和蛋白表达,并同时抑制细胞中Vimentin蛋白的表达(P<0.05);当浓度超过0.2μmol/L时,17-β-雌二醇能够有效抑制Vimentin的转录(P<0.05)。进一步的检测发现当浓度超过0.1μmol/L时,17-β-雌二醇能够有效抑制MHCC97H细胞中Smad2的磷酸化水平(P<0.05)。结论 17-β-雌二醇能够有效抑制MHCC97H肝癌细胞的侵袭,这种作用可能与其通过抑制Smad2的磷酸化进一步调节E-cadherin和Vimentin的表达有关。 展开更多
关键词 17-Β-雌二醇 肝细胞癌 mhcc97h细胞 细胞侵袭 SMAD 2 E-CADhERIN VIMENTIN
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The study of anti-hepatitis drug dimethyl dicarboxylate biphenyl on invasion of human hepatocellular carcinoma MHCC97-H cells and its active mechanisms 被引量:1
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作者 Hua Sun Gengtao Liu 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2008年第1期2-6,共5页
Objective: To assess the anti-invasive effect of DDB and its possible active mechanism in human hepatocellular carcinoma MHCC97-H with high metastasis potential. Methods: MTT assay was used to evaluate the cytotoxic... Objective: To assess the anti-invasive effect of DDB and its possible active mechanism in human hepatocellular carcinoma MHCC97-H with high metastasis potential. Methods: MTT assay was used to evaluate the cytotoxicity of DDB to MHCC97-H cells and the anti-adhesion of DDB on MHCC97-H cells to laminin (LN) and fibronectin (FN). The anti-invasive effect of DDB was detected by the transwell chamber experiment. VEGF, nm23-H1 and uPAR mRNA transcriptions were determined by RT-PCR assay. The secretion and expression of a-fetal protein (AFP) were analyzed by ELISA and flow cytometry, respectively. Results: DDB at non-cytotoxic concentrations (10, 50 and 100 μmol/L) obviously inhibited the adhesion of MHCC97-H on LN and FN. In the transwell chamber experiment, the inhibition rates of the invasion of DDB 50 and 100 μmol/L on MHCC97-H cells were 25.8% and 32.3%, respectively. By RT-PCR assay, DDB 50 and 100 μmol/L decreased VEGF, nm23-H1 and uPAR mRNA expressions in MHCC97-H cells. The ELISA assay showed that 50, 100 and 200 μmol/L DDB decreased the AFP secretion of MHCC97-H cells, the inhibitory rates were 16.5%, 17.5% and 48.5%, respectively. DDB also decreased the expression of AFP in MHCC97-H cells by flow cytometry assay. Conclusion: DDB, an anti-hepatitis drug, at non-cytotoxic concentrations showed significant anti-invasion effect in human hepatocellular carcinoma MHCC97-H cells, and the inhibition of VEGF, nm23-H1 and uPAR expression should contribute to the anti-invasion property of DDB. 展开更多
关键词 dimethyl dicarboxylate biphenyl human hepatocellular carcinoma mhcc97-h cell INVASION METASTASIS
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氯化钴诱导缺氧环境对肝癌MHCC97-H细胞的影响
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作者 苏晓茹 贵志芳 +2 位作者 柯强 郑高明 潘峰 《中国现代医生》 2022年第9期26-29,37,共5页
目的探讨CoCl_(2)诱导缺氧环境对肝癌MHCC97-H细胞产生的影响,研究CoCl_(2)处理下MHCC97-H细胞中相关蛋白质表达水平变化及细胞活力和细胞凋亡情况。方法分别在对照组(21%O_(2))和实验组(20μmol/L CoCl_(2))处理下培养MHCC97-H细胞,用W... 目的探讨CoCl_(2)诱导缺氧环境对肝癌MHCC97-H细胞产生的影响,研究CoCl_(2)处理下MHCC97-H细胞中相关蛋白质表达水平变化及细胞活力和细胞凋亡情况。方法分别在对照组(21%O_(2))和实验组(20μmol/L CoCl_(2))处理下培养MHCC97-H细胞,用Western-blot法检测细胞中蛋白质表达(HIF2α、G9a、Reptin),于0 h、6 h、24 h、48 h、72 h用CCK8法检测细胞增殖,于6 h、24 h时用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果与对照组相比,CoCl_(2)处理的MHCC97-H细胞中HIF2α、G9a、Reptin蛋白质表达显著升高(P<0.05),细胞活力降低,72 h细胞活力显著低于对照组(P<0.05),24 h后细胞凋亡显著增加(P<0.05)。结论CoCl_(2)处理可对肝癌MHCC97-H细胞产生明显影响,20μmol/L CoCl_(2)即可导致细胞内相关蛋白质表达水平显著变化,影响细胞的活力和凋亡。 展开更多
关键词 氯化钴 肝癌mhcc97-h细胞 细胞活力 细胞凋亡
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siRNA沉默Livin基因表达在抑制裸鼠肝癌生长中的作用研究 被引量:1
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作者 李庆 《中国肿瘤外科杂志》 CAS 2015年第6期351-355,共5页
目的目的应用RNA干扰技术抑制人肝癌细胞株MHCC97H中凋亡抑制因子Livin的表达,研究Livin基因在抑制裸鼠肝癌细胞移植瘤生长中的作用。方法设计针对Livin基因目标序列的siRNA,将其经脂质体Lipofectamine^(TM)2000转染至肝癌细胞株MHCC97... 目的目的应用RNA干扰技术抑制人肝癌细胞株MHCC97H中凋亡抑制因子Livin的表达,研究Livin基因在抑制裸鼠肝癌细胞移植瘤生长中的作用。方法设计针对Livin基因目标序列的siRNA,将其经脂质体Lipofectamine^(TM)2000转染至肝癌细胞株MHCC97H细胞,采用RT-PCR、Westernblot方法检测转染后的MHCC97H细胞中Livin基因的mRNA和蛋白质表达。通过建立裸鼠的荧光素酶(Luciferase)标记的MHCC97H肝癌细胞移植瘤模型,监测肿瘤体积、重量,通过活体成像技术观察siRNA注射治疗移植瘤的效果。结果在Livin-siRNA转染后的MHCC97H细胞中,Livin基因的mRNA和蛋白质表达显著下降(P<0.05),siRNA注射治疗移植瘤后,肿瘤重量、体积及荧光素酶信号均显著性下降(P<0.05)。结论通过RNA干扰技术阻断MHCC97H细胞中Livin的表达,可抑制裸鼠肝癌移植瘤的生长,提示Livin基因在肝癌的发生、发展过程中起重要作用。 展开更多
关键词 肝癌 mhcc97h细胞 LIVIN RNA干扰 裸鼠
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