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壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜的制备及其生物相容性实验研究 被引量：3
1
作者 周敏 徐淑兰 +2 位作者 钟星华 杨烁 姚中雄 《广东牙病防治》 2012年第4期193-198,共6页
目的了解制备的壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜的理化性能及其与MG63成骨样细胞的生物相容性,以初步探讨其作为引导骨再生屏障膜的可行性。方法采用提纯的牛肌腱Ⅰ型胶原和壳聚糖,经冷冻干燥,使用热交联、化学交联技术制成壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜... 目的了解制备的壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜的理化性能及其与MG63成骨样细胞的生物相容性,以初步探讨其作为引导骨再生屏障膜的可行性。方法采用提纯的牛肌腱Ⅰ型胶原和壳聚糖,经冷冻干燥,使用热交联、化学交联技术制成壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜(实验组)和Ⅰ型胶原膜(对照组)。采用氨基酸含量检测、差示量热扫描法分析牛肌腱Ⅰ型胶原性质和表征,红外光谱、扫描电镜分析2种膜的理化性能。将MG63成骨样细胞接种于2种膜上,MTS法检测细胞1 d、3 d、5 d、7 d的增殖情况。结果牛肌腱Ⅰ型胶原的胶原3股螺旋结构保持较完整,其热变性温度为99.04℃,提热吸收峰为53.54℃,与标准品指标接近,其成分比例及性质表征符合Ⅰ型胶原特征。红外光谱结果表明实验组具备胶原和壳聚糖特征峰表现,并且2种材料之间形成大量氢键,分子间结合良好。扫描电镜显示实验组和对照组膜表面和横切面为多孔结构,实验组膜孔径较大,为10～100μm。MG63成骨样细胞在2组膜上呈明显的增殖趋势,具有较好的细胞相容性。结论制备的壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜具有优良的结构及生物学性能,可应用于下一步引导骨再生膜材料的研究。 展开更多
关键词 壳聚糖 Ⅰ型胶原 复合膜 mg63成骨样细胞 生物相容性
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RNA干扰抑制雌激素受体α亚基对雌激素诱导人成骨样细胞护骨素表达的影响 被引量：2
2
作者 武兆忠 刘敏 冯鉴强 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期179-182,共4页
目的探讨RNA干扰抑制人成骨样细胞株MG63中雌激素受体α亚基(estrogenreceptorαsubunitERα)后,对17β雌二醇(E2)诱导护骨素(OPG)表达的影响。方法利用计算机辅助设计ERα特异性siRNA,体外合成siRNA基因,并将其定向克隆入真核表达载体p... 目的探讨RNA干扰抑制人成骨样细胞株MG63中雌激素受体α亚基(estrogenreceptorαsubunitERα)后,对17β雌二醇(E2)诱导护骨素(OPG)表达的影响。方法利用计算机辅助设计ERα特异性siRNA,体外合成siRNA基因,并将其定向克隆入真核表达载体pSilencer41CMV。以脂质体法转染ERαsiRNA载体至人的成骨样细胞株MG63中,鉴定后分别用不同浓度的雌激素或G蛋白抑制剂苏拉明干预经ERαsiRNA转染的MG63细胞或未经ERαsiRNA转染的MG63细胞,RTPCR法检测OPGmRNA的表达水平。结果双酶切法鉴定重组质粒后,RTPCR法鉴定ERαsiRNA载体可特异地抑制MG63细胞中ERα的表达。不同浓度的17βE2上调MG63细胞OPGmRNA的表达,其中以10-7mol/L的作用最强。但经ERαsiRNA载体抑制MG63细胞ERα亚基后,17βE2上调MG63细胞OPGmRNA表达的作用消失。结论17βE2主要经ERα亚基上调MG63细胞OPG的表达。 展开更多
关键词 mg63细胞 OPG ERα 表达 成骨样细胞 RNA干扰 护骨素 α亚基 RNA基因 定向克隆
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MT01对感染状态人成骨样细胞内ALP活性及mRNA表达的影响 被引量：1
3
作者 高涵 申玉芹 +5 位作者 刘引 胡天琦 费鸿博 顾中一 李洋洋 林崇韬 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期580-583,共4页
目的:通过检测MT01对牙龈卟啉单胞菌感染的人成骨样细胞内特异性成骨相关因子ALP活性及mRNA表达水平的改变,探讨MT01对感染状态下人成骨样细胞成骨向分化的影响。方法:选取状态良好的MG63细胞接种于6孔板内,2个MT01组加入质量浓度为1mg/... 目的:通过检测MT01对牙龈卟啉单胞菌感染的人成骨样细胞内特异性成骨相关因子ALP活性及mRNA表达水平的改变,探讨MT01对感染状态下人成骨样细胞成骨向分化的影响。方法:选取状态良好的MG63细胞接种于6孔板内,2个MT01组加入质量浓度为1mg/L的MT01,共孵育3h后,相应组加入感染复数为100∶1的Pg菌悬液。实验分为:空白对照、MT01、Pg和MT01+Pg4组,碱性磷酸酶测试盒测定24h后上清液及细胞内ALP活性。Real-time PCR检测2、4、6、8、12、24h特异性成骨相关因子ALP mRNA的表达。结果:在感染与非感染情况下,MT01均可促进ALP活性,且上调MG63细胞内成骨相关因子ALP mRNA表达,其表达上调呈时间依赖性。结论:MT01可促进感染及非感染状态下MG63内ALP基因表达水平,提高ALP活力。 展开更多
关键词 人成骨样细胞mg63 牙龈卟啉单胞菌 特定序列寡核苷酸MT01 碱性磷酸酶
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纳米抗菌复合膜的结构及作为引导骨组织再生膜的生物相容性研究 被引量：1
4
作者 刘曼 张强 +3 位作者 周立伟 莫安春 李小玉 李吉东 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期127-130,135,共5页
目的观察载银纳米羟磷灰石/二氧化钛/聚酰胺66(Ag-nHA-nTiO2/PA66)纳米抗菌复合膜的物理结构及对成骨样细胞生物相容性的影响。方法扫描电镜(SEM)和光学显微镜下观察Ag-nHA-nTiO2/PA66膜和膨体聚四氟乙烯(e-PTFE)膜的结构,在两组膜材料... 目的观察载银纳米羟磷灰石/二氧化钛/聚酰胺66(Ag-nHA-nTiO2/PA66)纳米抗菌复合膜的物理结构及对成骨样细胞生物相容性的影响。方法扫描电镜(SEM)和光学显微镜下观察Ag-nHA-nTiO2/PA66膜和膨体聚四氟乙烯(e-PTFE)膜的结构,在两组膜材料上接种成骨样细胞MG63,另设空白对照组。甲基噻唑基四唑(MTT)法检测MG63细胞的增殖曲线,酶联免疫法检测细胞内碱性磷酸酶(ALP)的表达,SEM下观察细胞在生物膜表面的增殖和黏附情况。结果 Ag-nHA-nTiO2/PA66膜正面疏松多孔,反面光滑致密。e-PTFE膜正反面结构相同,由成行排列的长椭圆形裂隙组成。与空白对照组相比,MTT检测显示,两种膜对MG63细胞增殖活力差异无统计学意义(P>0.05);ALP活性间差异也无统计学意义(P>0.05)。SEM下观察细胞在两种膜上生长良好,在Ag-nHA-nTiO2/PA66膜上细胞伸展更充分。结论 Ag-nHA-nTiO2/PA66膜对MG63细胞生长无抑制作用。与e-PTFE相比,其具有更优良的结构和生物学性能,适于用作引导骨再生膜材料。 展开更多
关键词 引导骨再生 羟磷灰石 银 成骨样细胞mg63
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舒肝健骨方对成骨样细胞增殖分化的影响及雌激素活性的检测 被引量：5
5
作者 任艳 李萍萍 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2010年第13期141-144,共4页
目的:观察舒肝健骨方对成骨样细胞增殖分化的影响,并检测舒肝健骨方是否有雌激素活性。方法:培养成骨样细胞MG-63,给予不同浓度的舒肝健骨方处理后,MTT法检测复方对MG-63细胞增殖的影响;对硝基苯酚法检测复方对MG-63细胞碱性磷酸酶(Alka... 目的:观察舒肝健骨方对成骨样细胞增殖分化的影响,并检测舒肝健骨方是否有雌激素活性。方法:培养成骨样细胞MG-63,给予不同浓度的舒肝健骨方处理后,MTT法检测复方对MG-63细胞增殖的影响;对硝基苯酚法检测复方对MG-63细胞碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性的影响。培养MCF-7细胞,转染萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶质粒,双荧光素酶报告基因检测试剂检测复方雌激素活性。结果:舒肝健骨方在处理MG-63细胞48,72 h时,0.75～12 g·L-1的剂量能促进成骨样细胞增殖,并且呈现剂量依赖性;在作用24,48,72 h时,促进成骨样细胞碱性磷酸酶活性,呈剂量依赖性。舒肝健骨方的雌激素活性与阴性对照相比无统计学差异,与阳性对照雌二醇相比有显著性差异(P<0.05)。结论:舒肝健骨方能够促进成骨样细胞的增殖分化,并且无雌激素活性。 展开更多
关键词 舒肝健骨方 成骨样细胞mg-63 碱性磷酸酶 雌激素活性
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利塞膦酸钠对人成骨样细胞MG63 OPG及TNFα表达的影响 被引量：2
6
作者 杨乃龙 张良岩 阎胜利 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2006年第4期390-392,404,共4页
目的研究利塞膦酸钠对人成骨样细胞MG63护骨素(OPG)及肿瘤坏死因子α(TNFα)表达的影响,以阐明利塞膦酸钠发挥骨保护作用的机制。方法以不同浓度(10-10molL;10-9molL;10-8molL;10-7molL)的利塞膦酸钠干预MG63细胞72h;ELISA法测定细胞条... 目的研究利塞膦酸钠对人成骨样细胞MG63护骨素(OPG)及肿瘤坏死因子α(TNFα)表达的影响,以阐明利塞膦酸钠发挥骨保护作用的机制。方法以不同浓度(10-10molL;10-9molL;10-8molL;10-7molL)的利塞膦酸钠干预MG63细胞72h;ELISA法测定细胞条件培养液中OPG及TNFα的含量。结果利塞膦酸钠可下调MG63细胞TNFα的表达;上调OPG的表达;并提高碱性磷酸酶(ALP)活性。结论利塞膦酸钠可通过调节成骨样细胞MG63OPG、TNFα的表达,从而发挥其抗骨吸收的作用。 展开更多
关键词 TNFΑ OPG 利塞膦酸钠 成骨样细胞 mg63
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硫酸钙对成骨样MG-63细胞增殖及骨保护素/核激活因子受体配体/核激活因子受体系统的影响研究 被引量：2
7
作者 李正茂 陈斌 +2 位作者 崔志 谭文甫 何敏 《中华创伤骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期707-710,共4页
目的探讨硫酸钙对成骨样MG-63细胞增殖情况及骨保护素/核激活因子受体配体/核激活因子受体(OPG/RANKL/RANK)系统的影响。方法制作硫酸钙浸提液,将含有硫酸钙浸提液的细胞培养基设为硫酸钙组,不含硫酸钙的普通细胞培养基设为空白对照组,... 目的探讨硫酸钙对成骨样MG-63细胞增殖情况及骨保护素/核激活因子受体配体/核激活因子受体(OPG/RANKL/RANK)系统的影响。方法制作硫酸钙浸提液,将含有硫酸钙浸提液的细胞培养基设为硫酸钙组,不含硫酸钙的普通细胞培养基设为空白对照组,分别培养成骨样MG-63细胞24 h。观察两组细胞的生长情况,通过细胞增殖实验(CCK-8)检测细胞的增殖活性,并检测OPG/RANKL的mRNA和蛋白表达水平。结果硫酸钙组和空白对照组成骨样MG-63细胞的生长情况均较好。在CCK-8增殖试验中,硫酸钙组与空白对照组的吸光度值分别为0.997±0.008、0.640±0.003,差异有统计学意义(P<0.001)。硫酸钙与空白对照组OPG的mRNA相对表达量分别为2.834±0.176、1.005±0.102;RANKL的mRNA相对表达量分别为0.355±0.035、1.002±0.068,差异均有统计学意义(P<0.001)。蛋白质免疫印记结果显示:与空白对照组相比,硫酸钙组中的硫酸钙能促进成骨样MG-63细胞OPG的蛋白表达,并抑制RANKL的蛋白表达。结论硫酸钙能促进成骨细胞样MG-63细胞的增殖与活性,并可调控OPG/RANKL/RANK系统,具有一定的促骨形成作用。 展开更多
关键词 硫酸钙 细胞增殖 骨生成 成骨样mg-63细胞
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甲状腺激素对成骨样MG-63细胞甲状腺激素受体不同亚型表达的影响 被引量：2
8
作者 杨宇虹 左爱军 +3 位作者 朱志峰 赵学勤 郭刚 张镜宇 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期242-245,共4页
目的 检测人类成骨样细胞MG-63中甲状腺激素受体（TR）的表达情况以及甲状腺激素（T3或T4）对其的影响.方法 用实时荧光定量PCR法对MG-63细胞中TR的主要4个亚型,α1、α1、β1、β2的mRNA表达进行了测定.结果 TRα1 mRNA的表达水平最高,... 目的 检测人类成骨样细胞MG-63中甲状腺激素受体（TR）的表达情况以及甲状腺激素（T3或T4）对其的影响.方法 用实时荧光定量PCR法对MG-63细胞中TR的主要4个亚型,α1、α1、β1、β2的mRNA表达进行了测定.结果 TRα1 mRNA的表达水平最高,为10.70±0.45;TRβ1仅及其半,为5.75±0.10;TRβ2不低,相当于TRβ1的60%,为3.34±0.08;TRα2的表达极低,仅为（3.66±0.59）×10-2.分别加入不同浓度的T3或T4,仅TRα1和TRα2对T3表现明显的降调节,且TRα1和TRα2的表达与相应T3浓度之间负相关,其他亚型无显著性变化,也无相关关系;同样浓度范围的T4作用各亚型,表达均无显著性变化.结论 在骨细胞发育分化中TRα1起关键作用. 展开更多
关键词 甲状腺激素 甲状腺激素受体 人类成骨样细胞系mg-63 基因表达
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