骨肉瘤外泌体中miRNA促侵袭及血管化机制研究 被引量：5

1

作者 邢江浩 郝吉庆 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第9期1396-1400,共5页

目的研究骨肉瘤分泌外泌体中的miR-301a-3p对骨肉瘤U2-OS细胞侵袭能力以及对血管内皮细胞成血管能力的作用及机制。方法免疫荧光染色用以检测外泌体能否进入人血管内皮细胞(HUVEC)中发挥作用,Western blot法检测miR-301a-3p对于血管相... 目的研究骨肉瘤分泌外泌体中的miR-301a-3p对骨肉瘤U2-OS细胞侵袭能力以及对血管内皮细胞成血管能力的作用及机制。方法免疫荧光染色用以检测外泌体能否进入人血管内皮细胞(HUVEC)中发挥作用,Western blot法检测miR-301a-3p对于血管相关蛋白CD31及a-SMA以及信号通路蛋白表达的影响,侵袭实验检测miR-301a-3p对骨肉瘤细胞侵袭性的影响。结果骨肉瘤细胞分泌的外泌体成功进入HUVEC中发挥作用,血管相关蛋白CD31及a-SMA含量高表达,PI3K/Akt、Mek/Erk通路蛋白高表达,血管生长能力较未处理组增强;miR-301a-3p处理后骨肉瘤细胞侵袭能力增强。结论骨肉瘤来源外泌体中的miR-301a-3p可能通过PI3K/Akt、Mek/Erk信号通路促进骨肉瘤U2-OS细胞侵袭能力以及HUVEC的成血管能力。 展开更多

关键词 miR-301a-3p 血管生成 肿瘤细胞侵袭 PI3K/AKT信号通路 mek/erk信号通路

下载PDF 职称材料

BRAF及其信号通路相关蛋白在甲状腺乳头状癌中表达及意义 被引量：5

2

作者 彭思丹 邹琼燕 易文君 《实用预防医学》 CAS 2011年第8期1397-1399,共3页

目的研究BRAF基因及其信号通路MEK/ERK与甲状腺乳头状癌发生的相关性及其部分作用机制。方法收集73例散发的甲状腺乳头状癌患者及16例同期甲状腺瘤患者(对照组)的临床资料及标本,采用免疫组织化学法检测两组标本组织中的RAS、BRAF、MEK... 目的研究BRAF基因及其信号通路MEK/ERK与甲状腺乳头状癌发生的相关性及其部分作用机制。方法收集73例散发的甲状腺乳头状癌患者及16例同期甲状腺瘤患者(对照组)的临床资料及标本,采用免疫组织化学法检测两组标本组织中的RAS、BRAF、MEK和ERK蛋白表达状况。结果 RAS、BRAF、pMEK和pERK表达水平在甲状腺乳头状癌组都明显高于甲状腺瘤组(P<0.05或P<0.01)。结论 RAS、BRAF、pMEK及pERK可能与甲状腺乳头状癌发生相关。BRAF可能通过激活MEK/ERK信号通路而发挥其生物作用。 展开更多

关键词 BRAF RAS mek/erk通路 甲状腺乳头状癌

原文传递

BRAF及其细胞外信号调节激酶1/2信号通路蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及意义 被引量：4

3

作者 易文君 钟德玝 邹琼燕 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期889-894,共6页

目的:研究B F基因及其丝裂原活化蛋白/胞外信号调节激酶的激酶(mitogen-activated protein/extracellular signal-regulated kinase kinase,MEK)/细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号通路与甲状腺乳头... 目的:研究B F基因及其丝裂原活化蛋白/胞外信号调节激酶的激酶(mitogen-activated protein/extracellular signal-regulated kinase kinase,MEK)/细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号通路与甲状腺乳头状癌发生的相关性及部分作用机制。方法:收集73例散发的甲状腺乳头状癌患者及16例同期甲状腺瘤患者(对照组)的临床资料及标本。采用免疫组织化学和免疫印迹法检测两组标本组织中的大鼠肉瘤蛋白(ratsarcoma,S),B F,MEK1/2和ERK1/2表达状况。结果:甲状腺乳头状癌组S,B F,pMEK1/2和pERK1/2表达水平明显高于甲状腺瘤组(P<0.05或P<0.01);甲状腺乳头状癌患者S,B F,pMEK1/2和pERK1/2表达与肿块大小、淋巴结转移以及临床分期相关(P<0.05或P<0.01)。结论:S,B F,pMEK1/2及pERK1/2可能与甲状腺乳头状癌发生及其淋巴结转移、临床分期相关;B F可能通过激活MEK/ERK信号通路而发挥其生物作用。 展开更多

关键词 BRAF 大鼠肉瘤蛋白 mek1/2/erk1/2通路 甲状腺乳头状癌

下载PDF 职称材料

ERK1/2、MEK1/2在盆腔器官脱垂患者子宫骶韧带组织中的表达

4

作者 洪莹 李蕾 +4 位作者 刘冬霞 李岩阁 肖婷伟 奈嫚嫚 耿建芳 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2023年第5期651-656,共6页

目的:研究ERK1/2、MEK1/2在盆腔器官脱垂(POP)患者子宫骶韧带组织中的表达及意义。方法:选择30例因POP行子宫切除术或盆底重建术的患者为POP组,POP定量分期评分均为Ⅲ~Ⅳ度;选择同时期33例因非盆底功能障碍性疾病行子宫切除术的患者为... 目的:研究ERK1/2、MEK1/2在盆腔器官脱垂(POP)患者子宫骶韧带组织中的表达及意义。方法:选择30例因POP行子宫切除术或盆底重建术的患者为POP组,POP定量分期评分均为Ⅲ~Ⅳ度;选择同时期33例因非盆底功能障碍性疾病行子宫切除术的患者为对照组,POP定量分期评分均为0~Ⅰ度。收集患者术中废弃的近宫颈处子宫骶韧带组织,采用HE及Masson染色评估其组织学表现,采用免疫组化法和Western blot法检测ERK1/2、p-ERK1/2、MEK1/2、p-MEK1/2的表达情况。结果:POP组子宫骶韧带组织学结构明显区别于对照组,且ERK1/2、p-ERK1/2、MEK1/2、p-MEK1/2的相对表达量及p-ERK/ERK、p-MEK/MEK比值均低于对照组(P<0.05)。结论:ERK1/2与MEK1/2在POP患者子宫骶韧带组织中表达减少以及p-ERK/ERK和p-MEK/MEK比值降低可能与POP的发生有关。 展开更多

关键词 盆腔器官脱垂 子宫骶韧带 erk1/2 mek1/2 mek/erk信号通路

下载PDF 职称材料

木犀草素对糖尿病性白内障大鼠的晶状体保护作用及对MEK/ERK信号通路的影响研究 被引量：3

5

作者 燕洁静 乔瑛 王芬芬 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第3期537-543,共7页

目的:研究木犀草素对糖尿病性白内障大鼠的晶状体保护作用及对MEK/ERK信号通路的调节作用。方法:将60只大鼠随机分为正常对照组、白内障组以及木犀草素低、中、高剂量组,每组12只,采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)溶液(60 mg/kg)方法建立糖... 目的:研究木犀草素对糖尿病性白内障大鼠的晶状体保护作用及对MEK/ERK信号通路的调节作用。方法:将60只大鼠随机分为正常对照组、白内障组以及木犀草素低、中、高剂量组,每组12只,采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)溶液(60 mg/kg)方法建立糖尿病性白内障模型大鼠,木犀草素低、中、高剂量组分别按照20 mg/kg、40 mg/kg、80 mg/kg灌胃给予大鼠木犀草素,正常对照组及白内障组给予生理盐水,1次/d,连续12周,测定给药前后大鼠血糖水平、晶状体浑浊度、晶状体过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,苏木精-伊红(HE)染色法检查大鼠晶状体病理学改变,实时荧光定量PCR(qPCR)测定晶状体MEK mRNA和ERK mRNA水平,蛋白质免疫印迹(Western blot)测定晶状体MEK及ERK蛋白水平。结果:与正常对照组比较,白内障组大鼠血糖水平、晶状体浑浊度、晶状体MEK mRNA和ERKmRNA以及晶状体MEK和ERK蛋白水平显著升高(P<0.05),晶状体CAT、GSH-Px、SOD水平显著降低(P<0.05);与白内障组大鼠比较,木犀草素低、中、高剂量组大鼠血糖水平、晶状体浑浊度、晶状体MEK mRNA和ERK mRNA以及MEK和ERK蛋白水平显著降低(P<0.05),晶状体CAT、GSH-Px、SOD水平显著升高(P<0.05),晶状体病理学明显改善,且各指标变化与木犀草素的剂量呈依赖性。结论:木犀草素能够改善糖尿病性白内障大鼠的晶状体病理学变化,抑制晶状体氧化损伤,其机制可能与调节MEK/ERK信号通路有关。 展开更多

关键词 糖尿病性白内障 木犀草素 mek/erk信号通路

下载PDF 职称材料

褐藻素诱导人宫颈癌HeLa细胞的自噬作用机制研究 被引量：2

6

作者 廖政邦 于五辈 赵辉 《中国药房》 CAS 北大核心 2015年第19期2657-2660,共4页

目的:研究褐藻素诱导人宫颈癌He La细胞的自噬作用机制。方法:1、10、20、40、80μmol/L褐藻素培养He La细胞48 h后,MTT法测定细胞活力并计算抑制率。0(空白对照)、10、20、40μmol/L褐藻素培养He La细胞48 h后,流式细胞仪测定细胞周期... 目的:研究褐藻素诱导人宫颈癌He La细胞的自噬作用机制。方法:1、10、20、40、80μmol/L褐藻素培养He La细胞48 h后,MTT法测定细胞活力并计算抑制率。0(空白对照)、10、20、40μmol/L褐藻素培养He La细胞48 h后,流式细胞仪测定细胞周期与凋亡率;通过吖啶橙染色与Lyso-Tracker Red染色、He La-GFP-LC3细胞测试法在荧光显微镜下观察细胞自噬状态;Western blot法检测细胞自噬流量与相关蛋白的表达。结果:10、20、40、80μmol/L褐藻素培养细胞48 h后对细胞生长有明显抑制作用。10、20、40μmol/L褐藻素培养细胞48 h后可将细胞阻滞于G0/G1期,但对细胞凋亡无明显影响;40μmol/L褐藻素培养细胞48 h后细胞自噬程度加重;与空白对照比较,40μmol/L褐藻素可促进LC3Ⅰ转化为LC3Ⅱ以及Beclin-1、PTEN、p21的表达,但抑制p-Akt、p-p70S6K、p-m TOR、Cyclin D1、CDKZ表达。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA,5 mmol/L)预处理可逆转褐藻素诱导的He La细胞自噬作用;U0126可部分逆转褐藻素诱导的He La细胞自噬作用。结论:褐藻素可通过抑制Akt信号通路以及激活MEK/ERK信号通路诱导He La细胞自噬。 展开更多

关键词 褐藻素 细胞周期 自噬 蛋白激酶B mek/erk信号通路 人宫颈癌He La细胞

原文传递

MEK/ERK通路在高脂饮食诱导NAFLD大鼠SREBP-1表达中的作用 被引量：2

7

作者 何卫美 宋育林 +1 位作者 方芳 许建明 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2010年第5期427-431,共5页

目的探讨MEK/ERK通路在高脂饮食诱导NAFLD大鼠固醇调控元件结合蛋白-1(SREBP-1)表达中的作用。方法应用高脂饮食复制大鼠非酒精性脂肪性肝病NAFLD模型。32只雄性Wister大鼠随机分成正常对照组(N组)、PD98059+普通饲料组(P组)、高脂模型... 目的探讨MEK/ERK通路在高脂饮食诱导NAFLD大鼠固醇调控元件结合蛋白-1(SREBP-1)表达中的作用。方法应用高脂饮食复制大鼠非酒精性脂肪性肝病NAFLD模型。32只雄性Wister大鼠随机分成正常对照组(N组)、PD98059+普通饲料组(P组)、高脂模型组(M组)和PD98059+高脂组(PM组),每组8只。于分组喂养的第4、6、8周末分别给予P组和PM组大鼠鼠尾静脉注射MEK抑制剂PD98059干预。第10周末结束实验,检测血清丙氨酸转移酶(ALT)、门冬氨酸转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),肝组织TG、TC;光镜观察大鼠肝脏的病理改变,免疫组化法检测肝脏磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)和SREBP-1表达。结果与N组比较,M组所有大鼠肝细胞脂肪变性范围均超过30%并伴有不同程度的炎性细胞浸润和坏死,p-ERK1/2和SREBP-1表达增强,ALT、AST、TC、TG、肝组织TG、TC显著升高(P<0.01或0.05)。与M组比较,PM组p-ERK1/2和SREBP-1表达减少(P<0.01),ALT、TC、TG、肝组织TG、TC显著降低(P<0.01或0.05),同时大鼠的肝脏病理学得到了改善。结论 MEK/ERK通路在高脂饮食诱导NAFLD大鼠固醇调控元件结合蛋白-1(SREBP-1)表达中起重要作用。 展开更多

关键词 非酒精性脂肪性肝病 固醇调控元件结合蛋白-1 mek/erk通路

下载PDF 职称材料

溃结灵含药血清对大鼠结肠上皮细胞损伤的影响 被引量：2

8

作者 祁燕 王汝俊 +2 位作者 李燕舞 米红 唐立海 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期132-135,共4页

目的:探讨溃结灵含药血清对TNF-α引起的大鼠结肠上皮细胞损伤模型的影响。方法:采用本实验室建立的方法进行大鼠结肠上皮细胞(CEC)的分离及原代培养,MTT法观察含药血清(10%,5%,2.5%)对CEC增殖的影响,分别以25,50,100,150,200ng/ml的TNF... 目的:探讨溃结灵含药血清对TNF-α引起的大鼠结肠上皮细胞损伤模型的影响。方法:采用本实验室建立的方法进行大鼠结肠上皮细胞(CEC)的分离及原代培养,MTT法观察含药血清(10%,5%,2.5%)对CEC增殖的影响,分别以25,50,100,150,200ng/ml的TNF-α干预CEC,测定不同干预时间(3h,6h,24h)细胞的增殖情况,WesternBlot法检测50ng/ml TNF-α干预6h后结肠上皮细胞pMEK1/2,pERK1/2蛋白表达水平。结果:空白大鼠血清对CEC生长无影响,柳氮磺(10%含药血清)及溃结灵中剂量(5%含药血清)作用24h、48h均明显促进CEC增殖(P<0.05)。50ng/ml TNF-α干预CEC 6h后可明显抑制细胞增殖,造成细胞损伤模型,含药血清各组对细胞损伤有一定的促增殖作用。50ng/ml TNF-α作用于CEC6h后细胞内pMEK1/2、pERK1/2蛋白表达均有增加,溃结灵高剂量(10%含药血清)、中剂量(5%含药血清)明显促进pMEK1/2蛋白表达(P<0.05),溃结灵中剂量(5%含药血清)及柳氮磺(10%含药血清)明显促进pERK1/2蛋白表达(P<0.05)。结论:溃结灵含药血清可促进CEC增殖,上调TNF-ɑ引起的损伤细胞模型pMEK1/2,pERK1/2表达,可能进一步激发细胞内MEK/ERK信号通路,进而促进细胞增殖效应。 展开更多

关键词 溃结灵 含药血清 大鼠结肠上皮细胞 增殖 mek erk信号通路

原文传递

螺旋藻营养补充通过MEK/ERK信号途径改善运动疲劳大鼠海马损伤 被引量：1

9

作者 朱洪竹 左铃 +3 位作者 邱萃珍 朱梅菊 丁孝民 曾志刚 《井冈山大学学报（自然科学版）》 2021年第1期82-88,共7页

目的探讨螺旋藻(SP)营养补充对MEK/ERK信号通路活性的调控及其在运动疲劳大鼠海马损伤中的作用。方法90只清洁级健康SD大鼠随机分为正常对照组(NC组)、运动模型组(EM组)、运动+SP组(ES组)、运动+MEK阻滞剂组(EPD组)、运动+SP+MEK阻滞剂... 目的探讨螺旋藻(SP)营养补充对MEK/ERK信号通路活性的调控及其在运动疲劳大鼠海马损伤中的作用。方法90只清洁级健康SD大鼠随机分为正常对照组(NC组)、运动模型组(EM组)、运动+SP组(ES组)、运动+MEK阻滞剂组(EPD组)、运动+SP+MEK阻滞剂组(ESPD组)、阳性对照组(PC组),共6组,每组均为15只。实验末,用免疫组化和免疫印迹法检测各组大鼠海马p-MEK、p-ERK和Actived Caspase-3蛋白的表达含量,生化法观察血清BUN和BLA含量的变化,同时行尼氏染色法观察海马神经元的病理形态学改变。结果(1)与NC组相比,其余组海马CA1区细胞结构呈不同程度的病理改变;与EM组、EPD组、ESPD相比,ES组损伤程度要轻,其细胞整体形态渐趋于PC组;ESPD组细胞整体形态要好于EM组,EM组要好于EPD组。(2)ES组血清BUN和BLA含量均显著低于EM组,且较PC组无明显区别。(3)ES组海马p-MEK和p-ERK表达均显著高于EM组、ESPD和EPD组,但显著低于PC组;而Actived Caspase-3表达则相反,显著低于EM组、EPD组和ESPD组,但稍高于PC组,两者无明显差别。结论螺旋藻营养补充能降低运动疲劳大鼠血清BUN和BLA含量,减轻海马形态损伤;其原因可能与其上调MEK和ERK的磷酸化水平和抑制Caspase-3活化而抑制细胞凋亡的神经保护作用有关。 展开更多

关键词 运动疲劳 海马损伤 螺旋藻 mek/erk信号通路 Activated Caspase-3

下载PDF 职称材料

大豆皂苷Bb对牙槽骨成骨细胞增殖、凋亡及MEK/ERK通路的影响

10

作者 管琴 刘姣 +1 位作者 阳刘康 任伟伟 《中国药业》 CAS 2023年第5期46-50,共5页

目的探讨大豆皂苷Bb经丝裂原细胞外信号调节激酶/细胞外信号调节激酶(MEK/ERK)信号通路对牙槽骨成骨细胞增殖、凋亡的影响。方法培养人牙槽骨成骨细胞,Dulbecco改良的Eagle培养基(DMEM)培养的细胞作为对照组(A组),以含400μg/mL雌二醇、... 目的探讨大豆皂苷Bb经丝裂原细胞外信号调节激酶/细胞外信号调节激酶(MEK/ERK)信号通路对牙槽骨成骨细胞增殖、凋亡的影响。方法培养人牙槽骨成骨细胞,Dulbecco改良的Eagle培养基(DMEM)培养的细胞作为对照组(A组),以含400μg/mL雌二醇、400μg/mL和800μg/mL大豆皂苷Bb的DMEM培养的细胞分别作为雌二醇组(B组),大豆皂苷Bb低、高剂量组(C_(1)组和C2组)。采用MTT法测定细胞活力和计数细胞菌落数,采用流式细胞术测定细胞凋亡水平,采用逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法及蛋白印迹法测定细胞中MEK,ERK mRNA和蛋白表达水平。结果与A组比较,B组、C_(1)组、C2组光密度(OD)、细胞存活率、菌落数、MEK及ERK mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),且呈剂量依赖性;与B组比较,C_(1)组上述指标均明显降低(P<0.05),而C2组无明显差异(P>0.05)。与A组比较,B组、C_(1)组、C2组细胞凋亡率均明显降低(P<0.05),且呈剂量依赖性;与B组比较,C_(1)组细胞凋亡率明显升高(P<0.05),C2组细胞凋亡率无明显差异(P>0.05)。结论大豆皂苷Bb能促进牙槽骨成骨细胞增殖,抑制凋亡。其作用机制可能与大豆皂苷Bb促进牙槽骨成骨细胞MEK,ERK mRNA和蛋白表达,以及激活MEK/ERK信号通路传导有关。 展开更多

关键词 大豆皂苷Bb 丝裂原细胞外信号调节激酶/细胞外信号调节激酶信号通路 成骨细胞 细胞增殖 细胞凋亡

下载PDF 职称材料

白细胞介素-6信号通路在银屑病发病机制中的研究进展 被引量：11

11

作者 张颖 周婧 《国际免疫学杂志》 CAS 2016年第6期608-611,共4页

银屑病是一种病因不明的自身免疫性炎症性多基因遗传的皮肤疾病,其病理变化的形成需要多种信号通路和细胞因子的共同参与.近年来关于银屑病相关细胞因子信号转导通路及细胞调控信号的研究受到广泛关注,其中IL-6触发的三条途径,包括Ras/R... 银屑病是一种病因不明的自身免疫性炎症性多基因遗传的皮肤疾病,其病理变化的形成需要多种信号通路和细胞因子的共同参与.近年来关于银屑病相关细胞因子信号转导通路及细胞调控信号的研究受到广泛关注,其中IL-6触发的三条途径,包括Ras/Raf/MEK/ERK途径、PI3K/AKt途径和JAK/STAT途径,共同促进银屑病角质形成细胞增殖、炎症反应及血管生成等病理变化;下面针对IL-6信号通路在银屑病发病机制中的研究进展做一综述. 展开更多

关键词 银屑病 白细胞介素-6 Ras/Raf/mek/erk途径 PI3K/AKT途径 JAK/STAT途径

原文传递

眼针对脑缺血再灌注大鼠半暗带脑组织中Raf/MEK/Erk通路调控机制的实验研究 被引量：7

12

作者 赵阳阳 张威 王哲 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2022年第8期71-75,I0029,I0030,共7页

目的 观察眼针疗法对脑缺血再灌注(CIRI)大鼠半暗带脑组织中细胞凋亡和Bcl-2蛋白表达水平的影响,同时检测眼针对CIRI大鼠半暗带脑组织中Raf、p-MEK1/2、p-Erk1/2、p-p90RSK、p-CREB表达的影响,探讨眼针抑制CIRI大鼠半暗带脑神经元凋亡... 目的 观察眼针疗法对脑缺血再灌注(CIRI)大鼠半暗带脑组织中细胞凋亡和Bcl-2蛋白表达水平的影响,同时检测眼针对CIRI大鼠半暗带脑组织中Raf、p-MEK1/2、p-Erk1/2、p-p90RSK、p-CREB表达的影响,探讨眼针抑制CIRI大鼠半暗带脑神经元凋亡的作用机制。方法 SPF级SD大鼠60只,首先分为两组:假手术组(15只),造模组(45只),采用线栓法对造模组45只大鼠制备CIRI模型,模型评价后,将模型复制成功的大鼠随机分为3组:模型对照组、眼针组、穴区外对照组。模型复制后即刻开始进行干预:假手术组不做处理;模型对照组大鼠进行捆绑固定,但不进行针刺干预;眼针组大鼠分别在眼周肝胆区、肾膀胱区、上焦区、下焦区进行针刺干预;穴区外对照组大鼠分别在眼周相应穴区外的2 mm处进行针刺干预,连续干预1周。末次针刺后1 h,采用Zea Longa法评价各组大鼠神经功能缺损评分。然后过量麻醉法处死大鼠,每组大鼠随机选取6只,取全脑,4%多聚甲醛溶液固定;剩余大鼠,取全脑,并分离半暗带脑组织,冻存于-80℃冰箱,备用。采用免疫印迹(Western blot)法检测各组大鼠半暗带脑组织中Bcl-2、Raf、p-MEK1/2、p-Erk1/2、p-p90RSK、p-CREB的表达水平;采用TUNEL法及免疫组织化学法检测各组大鼠半暗带脑脑组织中细胞凋亡及Bcl-2表达的水平。结果 与假手术组比较,模型对照组、眼针组、穴区外对照组大鼠神经功能缺损评分及半暗带脑组织中细胞凋亡数、Raf、p-MEK1/2、p-Erk1/2、p-p90RSK、p-CREB蛋白表达水平显著升高(P<0.01),半暗带脑组织中bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与模型对照组比较,眼针组大鼠神经功能缺损评分及半暗带脑组织中细胞凋亡数、Raf、p-MEK1/2、p-Erk1/2、p-p90RSK、p-CREB蛋白表达水平显著降低(P<0.01),半暗带脑组织中Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.01);模型对照组与穴区外对照组大鼠神经功能缺损评分、细胞� 展开更多

关键词 眼针 脑缺血再灌注 凋亡 Raf/mek/erk信号通路

下载PDF 职称材料

清肝九味散对肝纤维化大鼠Raf/MEK/ERK信号通路的影响 被引量：3

13

作者 戈宏焱 王安庆 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期848-854,共7页

目的观察清肝九味散对肝纤维化大鼠的干预作用及其潜机制。方法采用随机数字表法将50只SD大鼠分为正常组、模型组、阳性对照组、蒙药低剂量组及蒙药高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠均通过腹腔注射四氯化碳(CCl_(4))建立肝... 目的观察清肝九味散对肝纤维化大鼠的干预作用及其潜机制。方法采用随机数字表法将50只SD大鼠分为正常组、模型组、阳性对照组、蒙药低剂量组及蒙药高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠均通过腹腔注射四氯化碳(CCl_(4))建立肝纤维化模型。造模成功后,正常组大鼠给予蒸馏水灌胃,阳性对照组灌服水飞蓟素(SIL)10 mg/kg;蒙药低、高剂量组每日分别灌服清肝九味散水煎液0.525、4.725 g/kg。各组均每天灌胃1次,连续8周。采用全自动生化仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性水平;HE染色法观察肝组织病理变化;免疫组化法检测肝组织平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测基质金属蛋白酶2(MMP2)、Ⅰ型胶原α(COL1α)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)mRNA水平;蛋白免疫印迹(Western Blot)检测肝组织MMP2、TIMP1蛋白表达及Raf蛋白激酶1(Raf-1)、丝裂原活化细胞外信号调节激酶(MEK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)磷酸化水平的变化。结果与正常组比较,模型组大鼠明显消瘦、暴躁,肝脏经HE染色后可见典型纤维化病理表现;阳性对照组和蒙药低、高剂量组大鼠一般状态有明显改善,肝脏病理损伤减轻,血清ALT、AST水平较模型组显著下降(P<0.01);RT-PCR结果显示:与正常组比较,模型组MMP2、COL1α、TIMP1 mRNA表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,阳性对照组、蒙药低、高剂量组MMP2 mRNA表达明显升高,TIMP1、COL1αmRNA表达明显降低(P<0.01)。免疫组化结果显示:与正常组比较,模型组α-SMA蛋白阳性面积显著升高(P<0.01);与模型组比较,蒙药低、高剂量组α-SMA蛋白表达均显著降低(P<0.01)。Western Blot结果显示:与正常组比较,模型组MMP2、TIMP1、p-Raf、p-MEK、p-ERK蛋白表达均显著升高(P<0.05):与模型组比较,阳性对照组及蒙药高剂量组MMP2蛋白表达明显升高,阳性� 展开更多

关键词 清肝九味散 肝纤维化 Raf/mek/erk信号通路 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶抑制剂

原文传递

大鼠增殖抑制基因通过Ras-Raf-MEK-ERK信号通路抑制C6胶质瘤细胞增殖 被引量：2

14

作者 蒋树财 邹有瑞 +5 位作者 高鹏 郭晖 霍国进 王军成 赵巍 沈冰 《中风与神经疾病杂志》 CAS 北大核心 2015年第10期884-888,共5页

目的探讨Ras-Raf-MEK-ERK通路在大鼠增殖抑制基因(r HSG)抑制C6大鼠胶质瘤细胞增殖中的作用。方法用r HSG过表达腺病毒载体(Adv-r HSG-GFP)转染C6细胞后,流式细胞仪分析腺病毒转染效率;Western blot检测r HSG蛋白表达变化;流式细胞仪分... 目的探讨Ras-Raf-MEK-ERK通路在大鼠增殖抑制基因(r HSG)抑制C6大鼠胶质瘤细胞增殖中的作用。方法用r HSG过表达腺病毒载体(Adv-r HSG-GFP)转染C6细胞后,流式细胞仪分析腺病毒转染效率;Western blot检测r HSG蛋白表达变化;流式细胞仪分析细胞周期;qRT-PCR检测H-ras、N-ras、K-ras、Erk1、Erk2基因mRNA表达变化;Western blot检测H-ras、N-ras、K-ras、p-Erk1/2、Erk1/2、p-Rb、Rb蛋白表达变化。结果腺病毒载体能高效的转染C6细胞并表达GFP蛋白,Adv-r HSG-GFP组r HSG蛋白表达显著高于未转染组(PBS)和AdvGFP组,C6细胞被阻滞于G0/G1期(P<0.01);经IGF-1刺激后,Adv-r HSG-GFP组细胞H-ras、N-ras、K-ras、Erk1、Erk2基因的mRNA和蛋白表达水平与PBS组和Adv-GFP组无明显差异(P>0.05);Adv-r HSG-GFP组细胞过表达r HSG能显著抑制IGF-1诱导的Erk1/2的活化,p-Erk1/2蛋白表达量显著低于其余两组(P<0.01);同时其p-Rb蛋白的表达量显著低于其余两组(P<0.01),而Rb蛋白表达量3组无明显差异(P>0.05)。结论 r HSG可能通过抑制Ras-Raf-MEK-ERK信号通路的激活抗C6恶性胶质瘤细胞增殖。 展开更多

关键词 大鼠增殖抑制基因 rHSG Ras-Raf-mek-erk信号通路 RAS erk1/2 胶质瘤

下载PDF 职称材料

MEK/ERK信号转导通路在大鼠糖尿病白内障中的作用 被引量：2

15

作者 黄亚琳 张颖 +2 位作者 王应飞 吴众 史平玲 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第5期424-427,共4页

目的分析丝裂原细胞外信号调节激酶(mitogen extracellular signal-regulated kinase,MEK)/细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)信号转导通路在大鼠糖尿病白内障中的发病机制,为相关药物研发及临床治疗提... 目的分析丝裂原细胞外信号调节激酶(mitogen extracellular signal-regulated kinase,MEK)/细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)信号转导通路在大鼠糖尿病白内障中的发病机制,为相关药物研发及临床治疗提供参考。方法 60只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和PD98059处理组,后两组大鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导糖尿病模型,PD98059处理组于造模前1 d前房内注射2.5μg(5μL)的PD98059,正常对照组与模型组大鼠前房内仅注射PBS。注射STZ后每日观察大鼠晶状体透明度,并于注射STZ后8周时取大鼠尾血检测血糖、总胆固醇,Western blot检测晶状体内MEK/ERK信号转导通路相关蛋白Ras、Raf、MEK和ERK1/2的表达。结果模型组大鼠注射STZ后4周晶状体开始出现周边空泡增多、絮状混浊,8周后整个晶状体明显混浊,而PD98059处理组大鼠晶状体的混浊程度较模型组有所减轻。与正常对照组相比,模型组大鼠的血糖[(28.70±3.33)mmol·L^(-1)]、总胆固醇[(2.53±0.74)mmol·L^(-1)]及Ras(0.67±0.12)、Raf(0.50±0.13)、MEK(0.48±0.10)和ERK1/2(0.59±0.15)蛋白相对表达量均明显升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);PD98059处理组大鼠的血糖[(20.60±4.18)mmol·L^(-1)]、总胆固醇[(2.30±0.64)mmol·L^(-1)]及Ras(0.49±0.11)、Raf(0.44±0.09)、MEK(0.35±0.08)和ERK1/2(0.48±0.14)蛋白相对表达量均较模型组显著降低,但仍高于正常对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 MEK/ERK信号转导通路的激活参与了糖尿病大鼠白内障的发病过程。 展开更多

关键词 mek/erk信号转导通路 糖尿病白内障 PD98059

下载PDF 职称材料

基于Raf-MEK-ERK信号通路探究梓醇对蛛网膜下腔出血大鼠脑组织损伤的影响 被引量：1

16

作者 孟艳举 王路 +1 位作者 王献清 郝志勇 《天津中医药》 CAS 2023年第8期1059-1064,共6页

[目的]通过考察梓醇对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠脑组织丝/苏氨酸蛋白激酶(Raf)-丝裂原活化蛋白激酶(MEK)-细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路的影响,探讨其抗SAH脑损伤的作用机制。[方法]将大鼠随机分为假手术组、SAH组、梓醇组、梓醇+U012... [目的]通过考察梓醇对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠脑组织丝/苏氨酸蛋白激酶(Raf)-丝裂原活化蛋白激酶(MEK)-细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路的影响,探讨其抗SAH脑损伤的作用机制。[方法]将大鼠随机分为假手术组、SAH组、梓醇组、梓醇+U0126组(梓醇+Raf-MEK-ERK信号通路抑制剂U0126)。采用血管内穿孔法构建大鼠SAH模型,评估大鼠神经功能和SAH分级,伊文思蓝(EB)检测血脑屏障通透性,苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织病理变化,免疫荧光染色检测神经元细胞凋亡及微管连接蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、p-ERK阳性细胞表达,蛋白免疫印迹(Western blot)检测脑组织Raf、MEK、磷酸化(p)-MEK、ERK1/2、p-ERK1/2、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、自噬基因Beclin-1、LC3-Ⅱ表达。[结果]与假手术组相比,SAH组神经元细胞排列松散,数目减少,SAH分级、脑组织含水量、EB渗出量、原位末端标(TUNEL)阳性细胞数显著增加,凋亡率、LC3-Ⅱ、p-ERK阳性表达、Bax、Beclin-1、LC3-Ⅱ、Raf、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2表达显著升高,神经功能评分减少,Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);与SAH组相比,梓醇组神经元损伤明显减轻,细胞死亡较少,SAH分级、脑组织含水量、EB渗出量、TUNEL阳性细胞数显著减少,凋亡率、Bax显著降低,神经功能评分、Bcl-2表达升高,LC3-Ⅱ、p-ERK阳性表达及Beclin-1、LC3-Ⅱ、Raf、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2表达进一步升高(P<0.05);Raf-MEK-ERK通路抑制剂U0126可逆转梓醇对脑组织损伤的改善作用(P<0.05)。[结论]梓醇可能通过激活Raf-MEK-ERK信号通路,促进神经细胞自噬,改善SAH大鼠脑损伤。 展开更多

关键词 梓醇 蛛网膜下腔出血 脑组织损伤 Raf-mek-erk信号通路

下载PDF 职称材料

胰腺癌细胞解离中occludin和MEK/ERK信号通路的作用 被引量：2

17

作者 周磊 谭晓冬 +1 位作者 王巍 戴显伟 《外科理论与实践》 2010年第2期153-159,共7页

目的:明确occludin及MEK/ERK信号转导通路参与胰腺癌细胞解离的调节机制。方法:以免疫荧光法检测人及仓鼠胰腺癌细胞高转移株(Aspc-1、PC-1.0)和低转移株(Capan-2、PC-1)中occludin蛋白的表达变化,分析其与MEK/ERK信号转导通路的关系及... 目的:明确occludin及MEK/ERK信号转导通路参与胰腺癌细胞解离的调节机制。方法:以免疫荧光法检测人及仓鼠胰腺癌细胞高转移株(Aspc-1、PC-1.0)和低转移株(Capan-2、PC-1)中occludin蛋白的表达变化,分析其与MEK/ERK信号转导通路的关系及相应细胞的形态学变化。结果:MEK抑制剂U0126可明显诱导细胞间连接处的occludin表达,并抑制仓鼠胰腺癌高转移株细胞中磷酸化MEK和ERK的表达,在光镜下可观察到高转移株细胞聚集成团,伪足消失。细胞解离因子(dissociation factor,DF)破坏occludin在细胞连接处的表达,同时诱导仓鼠胰腺癌低转移株细胞中磷酸化MEK和ERK的表达,光镜下可观察到低转移株细胞呈单个细胞、解离方式生长。而先经DF处理后,再加入U0126培养的低转移株细胞中,occludin表达较前恢复,磷酸化MEK和ERK的表达减少,光镜下观察到低转移株细胞从解离状态重新恢复为岛样细胞克隆方式生长。结论:MEK/ERK信号转导通路可能通过影响occludin的细胞内定位与表达,调控胰腺癌细胞的解离状态。 展开更多

关键词 胰腺癌 细胞解离 OCCLUDIN mek/erk信号转导通路

下载PDF 职称材料

维生素K3通过调控Ras信号通路抑制前列腺癌细胞增殖 被引量：2

18

作者 颜廷芒 董凯 +2 位作者 周文豪 刘海涛 荆翌峰 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第21期4001-4006,共6页

目的:研究维生素K3对前列腺癌细胞增殖的影响及其机制。方法:CCK-8检测维生素K3对前列腺癌细胞系增殖的影响;应用si RNA干扰Siah2表达之后,CCK-8检测维生素K3对前列腺癌细胞系增殖的影响;Western Blot检测维生素K3对前列腺癌细胞Siah2和... 目的:研究维生素K3对前列腺癌细胞增殖的影响及其机制。方法:CCK-8检测维生素K3对前列腺癌细胞系增殖的影响;应用si RNA干扰Siah2表达之后,CCK-8检测维生素K3对前列腺癌细胞系增殖的影响;Western Blot检测维生素K3对前列腺癌细胞Siah2和Spry2表达的影响;免疫共沉淀技术检测维生K3对Siah2介导的Spry2泛素化水平的影响;Western Blot检测维生素K3对Ras信号通路中pERK表达的影响;构建裸鼠皮下前列腺癌模型,研究维生素K3对肿瘤生长的影响。结果:维生素K3抑制前列腺癌细胞系增殖,并且维生素K3浓度越高,对细胞抑制增殖作用越明显。前列腺癌细胞中干扰Siah2表达后,10μM维生素K3对细胞增殖无明显抑制作用即维生素K3对前列腺癌细胞增殖抑制作用依赖Siah2。10μM维生素K3能减弱Siah2对Spry2的泛素化水平使Spry 2表达升高。维生素K3能使前列腺癌细胞中Ras信号通路中的pERK蛋白表达降低。动物实验显示维生素K3治疗12天后,对照组和维生素K3组间肿瘤体积大小具有统计学差异,说明维生素K3能够有效地抑制裸鼠皮下前列腺癌生长。结论:维生素K3通过抑制Siah2泛素连接酶活性,介导其底物Spry2表达升高,进而抑制Ras/Raf/MEK/ERK信号通路起到抑制前列腺细胞增殖作用。 展开更多

关键词 维生素K3 Siah2 Ras/Raf/mek/erk信号通路 前列腺癌

原文传递