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MDV VP22的N1-18是发挥蛋白转导功能必需的序列 被引量:6
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作者 陈鸿军 秦爱建 +2 位作者 宋翠萍 张晨飞 邓绪芳 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期91-97,共7页
血清Ⅰ型马立克氏病病毒(MDV-1)CVI988/Rispens弱毒株的VP22蛋白缺失201TKSERT206。为了进一步证实该缺失对MDV-1VP22蛋白转导功能和效率的影响,本研究通过将不同缺失型的VP22与EGFP相融合,转染COS-1细胞,通过间接免疫荧光方法,检测VP2... 血清Ⅰ型马立克氏病病毒(MDV-1)CVI988/Rispens弱毒株的VP22蛋白缺失201TKSERT206。为了进一步证实该缺失对MDV-1VP22蛋白转导功能和效率的影响,本研究通过将不同缺失型的VP22与EGFP相融合,转染COS-1细胞,通过间接免疫荧光方法,检测VP22的蛋白转导现象。结果发现,EGFP-VP22具有微管结合、核膜结合、核酸结合、蛋白转导等特性;CVI988VP22与GA株VP22的转导效率相当,且只有完整长度的VP22具有明显的转导功能,其中,N端1~18aa对VP22的核定位及其蛋白转导功能的发挥意义很大。这一发现为利用MDV-1VP22携带其他目的蛋白转导,增强目的蛋白免疫原性及其治疗性功能具有重要的指导价值。 展开更多
关键词 mdv-1 衣被蛋白 VP22 蛋白转导功能
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马立克氏病病毒Ⅰ型CVI988/Rispens疫苗株UL13激酶结构域分析及其偏嗜密码子片段在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 张晨飞 秦爱建 +4 位作者 邓绪方 苏钰文 薛敏 尹天燕 王平平 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期161-167,共7页
【目的】寻找MDV-1 UL13激酶催化中心,并体外表达UL13,以便研究UL13蛋白激酶的功能。【方法】用PCR方法从CVI988疫苗株基因组中扩增UL13基因,利用GENEART(www.gcua.de)分析UL13在大肠杆菌中表达时密码子的偏嗜性;通过DNAstar抗原性分析... 【目的】寻找MDV-1 UL13激酶催化中心,并体外表达UL13,以便研究UL13蛋白激酶的功能。【方法】用PCR方法从CVI988疫苗株基因组中扩增UL13基因,利用GENEART(www.gcua.de)分析UL13在大肠杆菌中表达时密码子的偏嗜性;通过DNAstar抗原性分析确定UL13的高抗原性片段,进行原核表达,并以切胶免疫方法免疫小鼠制备多抗血清;通过NCBI的protein blast功能及Cn3D 4.1在线软件分析UL13保守结构域。【结果】PCR扩增出UL13基因,序列分析结果表明,UL13的259~400aa、431~513aa两个片段抗原性强,且稀有密码子较少;保守结构域分析发现UL13催化中心主要位于152~297氨基酸残基间,且在激酶SubdomainⅦ的保守甘氨酸残基被丝氨酸替代,SubdomainⅧ的保守非极性脯氨酸残基被极性半胱氨酸残基替换。利用大肠杆菌表达的UL13第259~400aa片段免疫小鼠制备出多抗血清能与真核表达产物反应。【结论】MDV-1UL13催化中心主要位于152~297氨基酸残基间,体外表达的基因产物诱导机体产生了抗UL13激酶的特异性抗体。 展开更多
关键词 mdv-1 CVI988 UL13 序列分析 密码子偏嗜性 表达
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重组人腺病毒表达的MDV-1 VP22蛋白的不同定位模式
3
作者 张晨飞 秦爱建 +5 位作者 陈娟娟 钱琨 杜静 尹天燕 邵红霞 金文杰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期787-790,共4页
目的:研究MDV-1 CVI988 VP22蛋白的转导机制及细胞定位机理,分析该蛋白在表达过程中细胞定位的影响因素。方法:构建表达VP22蛋白的重组人腺病毒,将重组病毒感染的AD-293细胞裂解产物加至正常的MDBK细胞上,通过免疫荧光(IFA)及Western b... 目的:研究MDV-1 CVI988 VP22蛋白的转导机制及细胞定位机理,分析该蛋白在表达过程中细胞定位的影响因素。方法:构建表达VP22蛋白的重组人腺病毒,将重组病毒感染的AD-293细胞裂解产物加至正常的MDBK细胞上,通过免疫荧光(IFA)及Western blot鉴定VP22的蛋白转导功能。观察感染后不同时间VP22在AD-293细胞上的定位,并与瞬时表达的VP22蛋白定位比较。结果:重组人腺病毒表达的VP22在MDBK细胞上能够进入几乎所有的细胞,说明VP22蛋白具有很强的蛋白转导功能。进一步鉴定VP22的细胞定位发现,在重组病毒感染的AD-293细胞中,VP22首先聚集于细胞核周围,随后以特殊的荧光粒子的形式散在于胞质中,而AD-293细胞中瞬时表达的VP22及MDV感染的CEF中VP22均均匀分布于细胞核。结论:重组人腺病毒表达的VP22蛋白具有很强的蛋白转导功能,不同重组病毒表达的VP22在细胞中的定位模式有所差别。 展开更多
关键词 重组腺病毒 mdv-1 VP22 转导 定位
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免疫鸡羽毛根中火鸡疱疹病毒的分离与鉴定 被引量:2
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作者 张训海 陈溥言 蔡宝祥 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期321-324,共4页
用常规剂量的商用火鸡疱疹病毒(HVT)冻干苗经腹腔免疫1日龄非免疫鸡,于第3周采集羽毛根,分别采取直接法和间接法(即经过滤获取脱细胞的游离物)接种次代鸡胚成纤维细胞(CEF),以进行病毒的分离。结果显示,在免疫后第3... 用常规剂量的商用火鸡疱疹病毒(HVT)冻干苗经腹腔免疫1日龄非免疫鸡,于第3周采集羽毛根,分别采取直接法和间接法(即经过滤获取脱细胞的游离物)接种次代鸡胚成纤维细胞(CEF),以进行病毒的分离。结果显示,在免疫后第3、4、5、6周,2种方法都分离到病毒,第7周仅直接法分离到病毒,而第8周2种方法都没有分离到。根据分离到病毒的细胞病变(CPE)特征,结合地高辛标记的Ⅰ型马立克氏病病毒(MDV-1)核酸探针检测结果,表明HVT免疫鸡羽毛根中含有可脱离细胞的、具有感染性的疫苗株HVT粒子,且其可检出时间具有阶段性。 展开更多
关键词 火鸡 疱疹病毒 细胞病变 核酸探针 分离 鉴定
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鸡胚淋巴细胞对卵内感染亲淋巴性病毒的反应
5
作者 吕殿红 王刚 《预防兽医学进展》 2000年第2期53-55,共3页
关键词 胚胎接种 mdv1 mdv3 IBDV 淋巴器官 体重
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Molecular Comparisons of Marek's disease virus strains of different pathotypes for their gI,gE,pp38 and meq genes
6
作者 CUIZhi-zhong WEIPin +1 位作者 DINGJia-bo ZHUSu-juan 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2004年第1期1-5,共5页
Five to ten serotyqe I Marek’s disease virus (MDV1) strains of different pathotypes were compared for their DNA sequences of gI, gE, pp38 and meq genes. The reference strains were vMDV GA and JM, vvMDV RB1B and Md11(... Five to ten serotyqe I Marek’s disease virus (MDV1) strains of different pathotypes were compared for their DNA sequences of gI, gE, pp38 and meq genes. The reference strains were vMDV GA and JM, vvMDV RB1B and Md11(p16), vv+MDV strains 648A and 584A,vaccine strain CVI988/Rispens; Chinese strains were: v MDV strain N, vvMDV strain G2, vaccine strain 814. Only random aa changes were found in 12 positions within gE of 497 aa among 10 analyzed strains and in 10 positions within gI of 355 aa among 5 strains. There was no relationship found between virus pathotypes and aa changes of both glycoproteins. The aa changes happened in 14 positions within meq of 339 aa among 5 compared strains. But a proline deletion at aa #194 in a proline-rich domain of meq were shared by two vaccine strains CVI988/Rispens and 814, the latter was a non-pathogenic vaccine strain of serotype 1 isolated in 1983 in China. In another hand, vv+MDV strains 648A demonstrated 5 unique aa changes and 4 of them also located in the proline-rich region. The pp38 was very conservative among sequenced 10 strains, there were only two positions at #107 and #109 with aa altered in its 290 aa. All tested MDV1 strains had glutamine at #107, instead, only vaccine CVI988 had arginine at the position and lost its epitope reactive with Mab H19, to which all other tested MDV1 strains were positive. However, CVI988 and vMDV GA shared a Mab T65-recognized epitope when there was glycine at aa#109. It was glutamic acid at aa#109 in all other MDV1 strains which were not reactive with Mab T65. It seems like that there is some relationship between pathotypes and sequences of pp38 and meq, but more strains need to be compared. 展开更多
关键词 家畜病毒学 mdv1 发病机理 分子机理 gⅠ基因 GE基因 PP38基因 MEQ基因
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NEXTBASE MDV1便携式DVD播放器——走遍天下的贴心朋友
7
作者 聆琴 《家庭影院技术》 2003年第4期40-41,共2页
近几年来,数字影音产品发展迅猛,新产品层出不穷,尤其是集高质量数字影音和强大交互功能于一身的DVD,已成为市场上最活跃的消费电子产品。中国目前已经是全球最大的DVD生产基地,普通DVD的研发技术门槛大大降低,竞争异常激烈,市... 近几年来,数字影音产品发展迅猛,新产品层出不穷,尤其是集高质量数字影音和强大交互功能于一身的DVD,已成为市场上最活跃的消费电子产品。中国目前已经是全球最大的DVD生产基地,普通DVD的研发技术门槛大大降低,竞争异常激烈,市场早已充斥着价格战,DVD产品的同质化现象越来越严重,大有VCD时代过渡竞争的烙印,许多DVD厂家把精力更多地放在象时装一样频繁更换的外壳和市场推广上。因此,当笔者第一次看到NEXTBASE的MDV1便携式DVD播放器时,有眼前一亮的新鲜感觉,新颖别致的外形和独特的设计理念引起了笔者极大的兴趣。 展开更多
关键词 DVD播放器 NEXTBASE公司 mdv1 外形设计 功能配置
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与线粒体分裂有关的蛋白质研究进展 被引量:7
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作者 孟紫强 耿红 《生命的化学》 CAS CSCD 2002年第2期118-120,共3页
在活细胞内线粒体处于不断的融合与分裂状态 ,线粒体融合与分裂的动态平衡影响着线粒体的形态和数量 ,本文对近年来与线粒体分裂有关的蛋白质研究进行了综述 :(1)酵母 (S .cerevisae)中的Dnm1蛋白或它的同源蛋白质可能通过缠绕于线粒体... 在活细胞内线粒体处于不断的融合与分裂状态 ,线粒体融合与分裂的动态平衡影响着线粒体的形态和数量 ,本文对近年来与线粒体分裂有关的蛋白质研究进行了综述 :(1)酵母 (S .cerevisae)中的Dnm1蛋白或它的同源蛋白质可能通过缠绕于线粒体的收缩部分而影响线粒体外膜分裂 ;(2 )位于线粒体上的 3种同源蛋白Mdv1/Fis2 /Gag3与Dnm1能短暂结合 ,它们都是线粒体分裂装置的组成部分 ;(3)一个插入线粒体外膜的跨膜蛋白Fis1或Mdv2极有可能是线粒体分裂装置的招募因子 ,并且由它启动分裂过程 ;(4)分布于膜间隙 (IMS)中的Mgm1蛋白并不负责线粒体内膜分裂 。 展开更多
关键词 线粒体 外膜 内膜 分裂方式 Dnm1/Drp1 蛋白质 mdv1/Fis2/Gag3 Fis1/mdv2
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mdv1-miR-M4-5p对MDCC-MSB1细胞增殖和凋亡的影响
9
作者 余祖华 高梦茹 +4 位作者 何雷 魏颖 陈建 陈松彪 丁轲 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3678-3687,共10页
旨在研究马立克病病毒(Marek′s disease virus,MDV)编码的mdv1-miR-M4-5p对MDCC-MSB1细胞增殖和凋亡的影响,将mdv1-miR-M4-5p模拟物、抑制物及其阴性对照转染MDCC-MSB1细胞后48 h,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中mdv1-miR-M4-5... 旨在研究马立克病病毒(Marek′s disease virus,MDV)编码的mdv1-miR-M4-5p对MDCC-MSB1细胞增殖和凋亡的影响,将mdv1-miR-M4-5p模拟物、抑制物及其阴性对照转染MDCC-MSB1细胞后48 h,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中mdv1-miR-M4-5p、TGF-β1、Smad2以及caspase-9、caspase-3、cyt-c、cyclinD1、Bcl-2等增殖和凋亡相关分子的转录;CCK-8检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。结果显示:与对照组相比,mdv1-miR-M4-5p模拟物转染显著上调MDCC-MSB1细胞中mdv1-miR-M4-5p、cyclinD1、Bcl-2的转录水平,下调TGF-β1、Smad2、cyt-c、caspase-9和caspase-3的表达转录,促进细胞的增殖,减少G1期细胞,增加S和G2细胞,降低细胞凋亡率。与对照组相比,mdv1-miR-M4-5p抑制物转染后MDCC-MSB1细胞的增殖、凋亡及其相关分子转录的结果与mdv1-miR-M4-5p模拟物转染后的结果相反。综上,Mdv1-miR-M4-5p可促进MDCC-MSB1细胞增殖,抑制其凋亡,这可能是通过抑制TGF-β1/Smad2信号通路来实现的。 展开更多
关键词 mdv1-miR-M4-5p mdv 增殖 凋亡 TGF-β1/Smad2
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马立克病抗性选育对鸡感染马立克病病毒后外周血淋巴细胞病毒载量的影响 被引量:1
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作者 金元昌 张艳 李玉峰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期685-689,共5页
为研究马立克病(MD)抗性选育对鸡马立克病病毒(MDV1)感染后外周血淋巴细胞病毒载量的影响,利用MDV1攻毒后第4、7、10、14、21、28和35天共7次采集并分离的全部试验鸡的外周血淋巴细胞为材料,采用real-time FQ-PCR方法对这些材料中meq基... 为研究马立克病(MD)抗性选育对鸡马立克病病毒(MDV1)感染后外周血淋巴细胞病毒载量的影响,利用MDV1攻毒后第4、7、10、14、21、28和35天共7次采集并分离的全部试验鸡的外周血淋巴细胞为材料,采用real-time FQ-PCR方法对这些材料中meq基因进行绝对定量分析以确定其病毒载量,用来分析比较MDV1在MD抗性鸡与普通鸡以及HVT疫苗免疫鸡与HVT疫苗未免疫鸡体内的增殖情况。结果显示,普通鸡非免疫攻毒组(B组)的MDV1含量于攻毒后第10(P<0.05)、14(P<0.05)、21(P<0.01)、28(P<0.05)、35(P<0.05)天显著高于MD抗性鸡免疫攻毒组(F组),而其他组间均无显著性差异。结果表明,鸡MD抗性选育结合HVT疫苗接种可显著降低鸡体内的病毒载量,从而降低MDV1感染的危害。 展开更多
关键词 马立克病病毒 外周血淋巴细胞 实时定量PCR 抗性选育
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多功能便携式DVD播放机试用感受
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作者 阳光灿烂 《电脑》 2003年第3期20-20,共1页
关键词 诺贝尔mdv1 Ga接口 电源适配器 多功能便携式DVD播放机
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